Investigação epidemiológica de patógenos virais associados a manifestações no trato gastrintestinal, em crianças , na Zona da Mata Mineira

-A gastrenterite viral é uma doença comum, que ocorre tanto em países desenvolvidos quanto naqueles em desenvolvimento, sendo que nestes últimos, a doença se mantém como uma das principais causas de mortalidade infantil. Embora os rotavírus sejam os principais agentes envolvidos, merecem destaque também, os adenovírus e os astrovírus. Este trabalho teve como objetivos detectar a presença de rotavírus, adenovírus e astrovírus em casos de gastrenterite infantil; caracterizar as amostras de rotavírus detectadas; avaliar a prevalência e a sazonalidade dessas infecções. Espécimes fecais foram obtidos de crianças de 0 a 5 anos, com quadro de gastrenterite, atendidas em unidades de saúde das redes pública e privada, localizadas em Juiz de Fora, no período de 2005 a 2006. Suspensões fecais a 10% em tampão Tris-HCl-Ca, pH 7,2, clarificadas, foram testadas através de um ensaio imunoenzimático, para a detecção de rotavírus e adenovírus (EIERA). Todas as suspensões, com exceção daquelas positivas para adenovírus, foram submetidas à técnica de extração do RNA viral com tampão isotiocianato de guanidina, associado à sílica. A caracterização eletroforética do RNA das amostras positivas para rotavírus foi realizada através da técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA), enquanto a detecção dos astrovírus foi realizada através da técnica de reação em cadeia da polimerase, precedida de transcrição reversa (RT-PCR). A presença de rotavírus foi pesquisada em 338 espécimes fecais, tendo sido encontradas 61 amostras positivas (18,04%), a maioria delas entre julho e agosto, meses mais frios e secos do ano. A análise eletroforética destas, mostrou a circulação de amostras com perfis característicos de rotavírus do grupo A, todas de perfil longo, em 2005 e, em 2006, perfis longos e curtos, com predominância dos últimos. Os adenovírus foram pesquisados em 316 espécimes, tendo sido detectadas 17 amostras positivas (5,38%) e embora as infecções tenham sido registradas em diferentes meses do ano, em 2006, verificou-se uma maior ocorrência em maio. A maioria das amostras positivas para rotavírus e adenovírus foi encontrada em crianças com até 24 meses de idade. A pesquisa para detecção de astrovírus foi realizada em 90 amostras fecais, tendo sido encontrada uma positiva (1,11%), detectada no mês de setembro de 2005. O presente estudo reforça a importância do envolvimento destes vírus em casos brandos e severos de doença diarréica infantil. Dada a relevância das gastrenterites virais em todo o mundo, a realização de levantamentos epidemiológicos contínuos é importante, pois contribuem para a obtenção de dados, necessários para o desenvolvimento e acompanhamento de medidas de prevenção

Investigação de patógenos virais associados à gastrenterite infantil aguda

A gastrenterite de etiologia viral está associada com altas taxas de morbidade, no mundo, sendo nos países em desenvolvimento, responsável também, por altos índices de mortalidade infantil. Este trabalho objetiva detectar a presença de rotavírus, adenovírus e astrovírus em casos de doença diarréica, acompanhar a dinâmica populacional dos rotavírus e avaliar a prevalência e a sazonalidade dessas infecções. A detecção de rotavírus e adenovírus foi realizada através da técnica de ensaio imunoenzimático (EIE). As amostras de rotavírus foram submetidas à eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) para avaliação dos perfis eletroforéticos e acompanhamento da dinâmica populacional. A detecção de astrovírus foi realizada através da reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). Das 338 amostras fecais testadas para rotavírus, foram detectadas 61 positivas (18,04%). A análise eletroforética mostrou a circulação de amostras com perfis característicos de rotavírus do grupo A, todos longos em 2005 e longos e curtos, com predominância dos últimos, em 2006. Das 316 amostras testadas para a presença de adenovírus e das 131 testadas para astrovírus, foram detectadas 17 (5,38%) e 2 (1,53%), respectivamente. Os resultados demonstram a participação destes vírus em casos de gastrenterite infantil e apontam para a importância da continuidade deste estudo

Detecção e caracterização molecular de norovírus associados a casos de doença diarréica aguda infantil

Noroviruses (NoV) are important etiological agents responsible for outbreaks and sporadic cases of acute diarrhea in individuals of all ages. The viral particles are nonenveloped with and the genome is composed of a positive single-stranded RNA. Norovirus belongs to the Caliciviridae family, Norovirus genus and are classified into five genogroups (GI-V), with GI, GII and GIV being found in human and among them, the NoV GII genotype 4 (GII.4) are the most commonly found worldwide. In Brazil, norovirus surveys are realized mainly in research institutes, carried out in the biggest centers and surroundings. Thus, considering the little knowledge about these viruses and the lack of epidemiological data on this viral infection in the Juiz de Fora city, MG state, it was performed this study, which aimed to detect and characterize the NoV samples, associated with sporadic cases of acute infantile diarrhea, as well as asses the influence of climatic and demographic factors in the occurrence of these infections. Between January 2008 to December 2009, 218 fecal specimens were analyzed for the presence of NoV by conventional RT-PCR, all obtained from children 0-12 years of age, from outpatient (89.45%) and inpatients (10.55%). We detected 20 (9.17%) positive samples and there was a tendency for seasonal infections during the dry season in 2008, a fact which was not repeated in 2009. The biggest number of positive samples were detected in children aged 0 to 24 months and there was no statistically significant correlation between the occurrence of infections and sex. Of the 20 samples detected, 19 were characterized as NoV GII and 1 as NoV GI. The partial genome sequencing and phylogenetic analysis of selected samples revealed the presence of NoV genotypes GII.4 and GII.6, which co-circulated in the two years of study. Samples NoV GII.4 detected in Juiz de Fora, showed greater similarity of nucleotides and aminoacids with those that circulated in the state of Rio de Janeiro during 2006, 2007 and 2008. Phylogenetic analysis of the samples GII.6 NoV, detected in Juiz de Fora, associated with the high similarity of nucleotide and amino acid sequences showed that they were most closely related to the sample GII.6 NoV (GU132461/2007) detected in the state of Rio de Janeiro in 2007. This fact associated with the geographical proximity of both cities, suggesting a possible common lineage between them. This epidemiological survey revealed the presence and circulation of NoV in the infantile population of Juiz de Fora, MG, demonstrating its important role as an etiologic agent of acute diarrhea, also in this community.Os norovírus (NoV) são importantes agentes etiológicos, responsáveis por surtos e casos esporádicos de doença diarréica aguda, que acometem indivíduos de todas as idades. A partícula viral não apresenta envelope e o material genético é constituído por uma molécula de RNA de fita simples, de polaridade positiva. Pertencem à família Caliciviridae, gênero Norovirus e estão classificados em cinco genogrupos (GI–V), sendo que os NoV humanos estão agrupados nos genogrupos I, II e IV e destes, os NoV do genogrupo II e genótipo 4 (GII.4) são os mais comumente encontrados, em todo o mundo. Apesar da associação destes vírus com a doença diarréica aguda estar bem documentada na literatura mundial, no Brasil, os trabalhos são escassos e restritos aos grandes centros e adjacências. Assim, considerando-se o pouco conhecimento sobre os norovírus e a inexistência de dados epidemiológicos na cidade de Juiz de Fora, MG, foi realizado o presente estudo, cujos objetivos foram a detecção e caracterização molecular de amostras de NoV, associadas a casos esporádicos de doença diarréica aguda infantil, bem como a avaliação da influência de fatores climáticos e demográficos na ocorrência destas infecções. De janeiro de 2008 a dezembro de 2009, 218 espécimes fecais foram analisados para a presença de NoV, por RT-PCR convencional, todos obtidos de crianças de 0 a 12 anos de idade, proveniente de atendimentos ambulatoriais (89,45%) e hospitalizados (10,55%). Foram detectadas 20 (9,17%) amostras positivas e observou-se uma tendência de sazonalidade das infecções no período da estação seca, no ano de 2008, fato que não se repetiu em 2009. A maioria das amostras positivas foi detectada em crianças na faixa de 0 a 36 meses e não houve correlação, estatisticamente significante, entre a ocorrência das infecções e o sexo. Das 20 amostras detectadas, 19 foram caracterizadas como NoV GII e 1 como NoV GI. O sequenciamento parcial do genoma e a análise filogenética das amostras selecionadas, revelou a presença de NoV dos genótipos GII.4 e GII.6, que cocircularam nos dois anos do estudo. As amostras NoV GII.4, detectadas em Juiz de Fora, apresentaram maior similaridade de nucleotídeos e de aminoácidos com aquelas que circularam no estado do Rio de Janeiro nos anos de 2006, 2007 e 2008. A análise filogenética das amostras NoV GII.6 detectadas em Juiz de Fora, associada à alta similaridade das sequências de nucleotídeos e aminoácidos, mostrou que estas foram mais proximamente relacionadas com a amostra NoV GII.6 (GU132461/2007), detectada no estado do Rio de Janeiro em 2007, fatos que, aliados à proximidade geográfica de ambas as cidades, sugerem uma possível linhagem comum entre as mesmas. Este levantamento epidemiológico permitiu constatar a presença e circulação de NoV na população infantil de Juiz de Fora, MG, demonstrando sua importante participação como agente etiológico das diarreias agudas, também nesta comunidadeCAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superio

The role of human adenoviruses type 41 in acute diarrheal disease in Minas Gerais after rotavirus vaccination

Abstract Human adenovirus species F (HAdV-F) type 40 and 41 are commonly associated with acute diarrheal disease (ADD) across the world. Despite being the largest state in southeastern Brazil and having the second largest number of inhabitants, there is no information in the State of Minas Gerais regarding the role of HAdV-F in the etiology of ADD. This study was performed to determine the prevalence, to verify the epidemiological aspects of infection, and to characterize the strains of human adenoviruses (HAdV) detected. A total of 377 diarrheal fecal samples were obtained between January 2007 and August 2011 from inpatient and outpatient children of age ranging from 0 to 12 years. All samples were previously tested for rotavirus, norovirus, and astrovirus, and 314 of 377 were negative. The viral DNA was extracted, amplified using the polymerase chain reaction and the HAdV-positive samples were sequenced and phylogenetically analyzed. Statistical analyses were performed using the Chi-square test (p < 0.05), considering two conditions: the total of samples tested (377) and the total of negative samples for the remaining viruses tested (314). The overall prevalence of HAdV was 12.47% (47/377); and in 76.60% (36/47) of the positive samples, this virus was the only infectious agent detected. The phylogenetic analysis of partial sequences of 32 positive samples revealed that they all clustered with the HAdV-F type 41. The statistical analysis showed that there was no correlation between the onset of the HAdV infection and the origin of the samples (inpatients or outpatients) in the two conditions tested: the total of samples tested (p = 0.598) and the total of negative samples for the remaining viruses tested (p = 0.614). There was a significant association in the occurrence of infection in children aged 0&#8211;12 months for the condition 1 (p = 0.030) as well as condition 2 (p = 0.019). The occurrence of infections due to HAdV did not coincide with a pattern of seasonal distribution. These data indicate the significant involvement of HAdV-F type 41 in the etiology of ADD in Minas Gerais, which demonstrates the importance of other viral agents in the development of the disease after the introduction of rotavirus vaccine immunization