O impacto da automação da fenotipagem eritrocitária estendida na rotina de um serviço de hemoterapia

Objetivos. Avaliar o impacto da automação na fenotipagem eritrocitária expandida e o nível de concordância dessa com a metodologia manual em amostras de doadores de sangue atendidos no hemocentro coordenador da Fundação Hemopa no período de janeiro a dezembro de 2019. Material e Métodos. Foram analisadas 2.700 fenotipagens eritrocitárias realizadas por metodologia manual e automatizada através do equipamento IH500 da BioRad®. Os resultados foram testados quanto ao nível de concordância através do teste de Coeficiente Kappa. Resultados. Das amostras fenotipadas 98,6% (2.662/2.700) foram concordantes em ambas as metodologias e apenas 1,4% (38/2700) foram discordantes. Das 38 amostras discordantes 31,6% referiram-se ao fenótipo Lu(b); 15,8% ao fenótipo Lu(a); 13,1% ao fenótipo Fy(b); 7,9% aos fenótipos Le(b), E, c; 5,3% aos fenótipos N, S, s, Kp(a), P1; e 2,6% aos fenótipos M, Jk(a), Jk(b), Fy(a). Conclusões. O nível de concordância entre os dados obtidos através das técnicas de fenotipagem eritrocitária manual e automatizada foi de 98,6%. Já a implantação dessa metodologia teve um impacto positivo com o aumento em 1.649 amostras processadas a mais em relação ao mesmo período do ano anterior.Objective. Evaluate the impact of automation on expanded erythrocyte phenotyping and the level of agreement between it and the manual methodology in samples from blood donors treated at the blood center coordinating the Fundação HEMOPA from january to december 2019. Material and Methods. 2,700 erythrocyte phenotyping performed by manual and automated methodology using BioRad® IH500 equipment was analyzed. The results were tested for the level of agreement using the Kappa Coefficient test. Results. Of the phenotyped samples, 98,6% (2,662 / 2,700) were in agreement in both methodologies and only 1,4% (38/2700) were in disagreement. Of the 38 discordant samples, 31,6% referred to the Lu(b) phenotype; 15,8% to the Lu(a) phenotype; 13,1% to the Fy phenotype (b); 7,9% to Le(b), E, c phenotypes; 5,3% to N, S, s, Kp (a), P1 phenotypes; and 2,6% for phenotypes M, Jk(a), Jk(b), Fy(a). Conclusions. The level of agreement between data obtained through manual and automated erythrocyte phenotyping techniques was 98.6%. The implementation of this methodology had a positive impact, with an increase of 1,649 more processed samples compared to the same period of the previous year

A importância do diagnóstico primário de lesões sugestivas de efeito citopático compatível com HPV em colo uterino – Uma breve revisão / The importance of the primary diagnosis of suggestive lesions of cytopathic effect compatible with HPV in uterine – a short on revision

O câncer do colo uterino (CCU) é a 2ª neoplasia maligna mais comum em mulheres no mundo todo e a segunda causa de morte por câncer nesse público. Essa doença, por sua vez, tem o Papiloma Vírus Humano (HPV) associado a 15% das formas mais graves e invasivas de CCU que, se diagnosticadas em suas formas precoce, poderiam ter sido tratadas e curadas. Esta pesquisa então teve como objetivo fazer uma breve revisão de literatura sobre a importância da identificação primária das lesões citológicas compatíveis com efeito citopático compatível com o HPV em exames de Prevenção de Câncer do Colo Uterino (PCCU). Tratou-se de estudo retrospectivo, descritivo, exploratório com abordagem qualitativa do tipo revisão de literatura realizado através de pesquisa nas bases de dados SciELO (Scientific Electronic Library Online), LILACS (Literatura Latino-americana e do Caribe em Ciências da Saúde) e BVS (Biblioteca Virtual de Saúde), para a obtenção de artigos científicos, teses e dissertações disponíveis publicados na literatura no período de 2007 à 2021. Como bem descrito na literatura existem evidências suficientes da associação entre os subtipos de HPV de alto risco e as lesões pré-neoplásicas e neoplásicas do colo uterino. Diante dessa constatação, em um país de dimensões continentais e realidades sócio-econômicas desiguais, parece evidente a necessidade de que sejam implantadas políticas públicas de promoção e prevenção a saúde da mulher. De modo a proporcionar conhecimento sobre a transmissão, fatores de risco e da importância da realização do exame periódico de prevenção do câncer de colo uterino (PCCU)

Unusual case report of acute evolution hairy cell leukemia in a young adult patient, Amazônia, Brazil

Hairy cell leukemia (HCL) is a rare disease of unknown origin and indolent course, which is detected in a complete blood count associated by pancytopenia and lymphocytes with cytoplasmic projections. This study presents a case report of a 31-year-old male patient, with pallor and no splenomegaly, who was admitted to the Municipal Hospital of Rondon do Pará, Amazônia, on December 31, 2018 to perform laboratory tests due to the worsening of his general condition. The complete blood count revealed: anemia (hemoglobin level of 7.5 g/dL and hematocrit level of 20%), thrombocytopenia (28,200/mm3) and hyperleukocytosis (179,000/mm3) while 88% of lymphocytes presented thin and elongated cytoplasmic projections suggestive of hairy cells. On January 7, 2019, the patient’s condition worsened, resulting in death before the diagnostic confirmation of the immunophenotyping test, which revealed a clonal population of 68.3% of hairy cells that expressed antigens CD19, CD20, CD79b, CD23, IgM, CD200, CD38, FMC-7, CD25 and CD103. It was not possible to determine which factors were decisive to this situation.A Leucemia de Células Pilosas (LCP) é uma doença rara, de origem desconhecida, de curso indolente, e que se apresenta no hemograma associada a pancitopenia e linfócitos com projeções citoplasmáticas. No presente estudo apresentamos o relato de caso de um paciente de 31 anos, masculino, hipocorado, sem esplenomegalia, admitido no Hospital Municipal de Rondon do Pará, Amazônia, no dia 31.12.2018 para a realização de exames laboratoriais em função de rebaixamento do estado geral. O hemograma revelou: anemia (7.5g/dL de hemoglobina e 20% de hematócrito), plaquetopenia (28.200/mm3) e hiperleucocitose (179.000/mm3) as custas de 88% de linfócitos com projeções citoplasmáticas finas e alongadas sugestivas de células pilosas. No dia 07.01.2019 houve piora do quadro do paciente com evolução a óbito antes mesmo da confirmação diagnóstica pelo exame de imunofenotipagem que revelou tratava-se de população clonal de 68,3% de células pilosas com expressão dos antígenos: CD19, CD20, CD79b, CD23, IgM, CD200, CD38, FMC-7, CD25 e CD103. Não tendo sido possível a determinação de quais fatores foram determinantes para esse quadro

Contagem de Reticulócitos e suas Frações Imaturas como Indicador Precoce de Alteração Medular em Trabalhadores de Postos de Combustíveis

Introdução: A exposição ocupacional prolongada a componentes tóxicos da gasolina, como o benzeno, há muito tempo é reconhecida como um importante fator de alterações hematológicas. Objetivo: Avaliar a contagem de reticulócitos e suas frações imaturas (IRF) em amostras de trabalhadores de postos de combustíveis (“frentistas”) atendidos em um laboratório particular de Belém, Pará, no período de janeiro a dezembro de 2021. Método: Foram analisadas 47 amostras de sangue periférico de trabalhadores de postos de combustíveis do sexo masculino (grupo do estudo), independentemente do tempo de atividade laboral, e que realizam exames laboratoriais periódicos em um laboratório particular de Belém, e 47 amostras de clientes, também do sexo masculino, que realizaram hemograma de rotina no mesmo laboratório e não apresentavam doença hematológica prévia (grupo controle). Resultados: No grupo controle, 46/47 (97,9%) das amostras apresentavam média de contagem de reticulócitos de 62.828/mm3 e de IRF relativas de 3/47 (6,4%), já nos trabalhadores do grupo de estudo a média de contagem de reticulócitos foi de 100.628/mm3 e de IRF de 5/47 (10,8%). Destas, 34/47 (72,3%) amostras apresentavam contagem de reticulócitos e de IRF superiores aos valores de referência. Conclusão: Os resultados sugerem que o aumento da contagem de reticulócitos e suas IRF em frentistas de postos de combustíveis podem ser importantes marcadores de risco precoce de intoxicação medular pelo benzeno

Análise dos Critérios Imunofenotípicos por Citometria de Fluxo para Definição das Doenças Linfoproliferativas Crônicas de Células B

Introdução: A citometria de fluxo é uma metodologia importante para o diagnóstico das doenças linfoproliferativas crônicas de células B (DLPCB), contudo, por vezes, o citometrista não encontra subsídios suficientes para a definição exata da entidade patológica envolvida. Objetivo: Analisar os laudos emitidos a pacientes com doenças linfoproliferativas crônicas (DLPC) atendidos em um laboratório particular de Belém-PA, segundo os critérios de classificação estabelecidos pelos estudos de Matutes et al. e Craig e Foon. Método: Estudo retrospectivo com laudos de pacientes que realizaram imunofenotipagem por citometria de fluxo para diagnóstico de DLPCB no período entre setembro de 2015 a dezembro de 2019. Resultados: Depois de aplicados os critérios de Matutes et al. e Craig e Foon para os laudos analisados, observou-se concordância em: 45,24% casos de leucemia linfoide crônica de células B/linfoma linfocítico de pequenas células B; 14,29% casos de linfoma folicular; 4,76% casos de leucemia de células pilosas; e 21,43% de casos definidos como “outras DLPCB não classificáveis por citometria de fluxo”. Entretanto, o teste de hipóteses de Hotelling (p=0,0409) mostrou haver diferença estatística para a definição das DLPCB segundo os critérios aplicados. Conclusão: Os resultados ressaltam que, mesmo sendo a citometria de fluxo importante para a caracterização das DLPCB, por vezes, o citometrista necessita incluir no laudo a categoria “outras doenças linfoproliferativas crônicas de células B não classificadas por citometria de fluxo” para induzir o prescritor a solicitar mais exames complementares

In search of the best use of bags low-volume red blood cells concentrate.

INTRODUÇÃO. A produção de bolsas de sangue total com volume inferior ao esperado é prevista na Portaria de Consolidação no 05/2017, porém, a sua dispensação hoje leva em consideração apenas o teor de hemoglobinas e hematócrito da bolsa. OBJETIVO. Determinar, a partir dos parâmetros técnicos brasileiros existentes, os critérios para o melhor aproveitamento para bolsas de concentrados de hemácias de baixo volume (CHBV) produzidas na Fundação HEMOPA. MATERIAL E MÉTODOS. Foram analisados volume, teor de hemoglobina e hematócrito de 525 bolsas de CHBV provenientes de bolsas duplas sem adição de conservante; triplas convencional com adição de SAG-M (soro fisiológico, adenina, glicose e manitol); triplas top and bottom (TAB) com adição de SAG-M; e quádruplas TAB com filtro “in line” e adição de SAG-M. RESULTADOS. Foi observado que 71,43% (375/525) das bolsas de CHBV, independente do tipo da bolsa, apresentavam-se em conformidade para hematócrito e teor de hemoglobina em relação à legislação. As bolsas duplas e triplas convencionais apresentaram os maiores valores de teor de hemoglobina. Observou-se ainda que as bolsas de sangue total coletadas com volumes entre 350 e 404 ml geraram bolsas de CHBV com os menores índices de descarte. O maior descarte das bolsas de CHBV ocorreu quando o volume final £ 250 mL e hemoglobina £ 16 g/dL. Conclusão. Observou-se que o melhor aproveitamento das bolsas de CHBV ocorreu quando as bolsas de sangue total se encontravam com volumes entre 350 e 404 mL e as bolsas de CHBV apresentavam volume final ≥ 250 mL e hemoglobina ≥ 16g/dL.INTRODUCTION. The production of whole blood bags with a lower volume than expected is approved in the Consolidation Ordinance number 05/2017; however, its dispensation today takes into account only the hemoglobin and hematocrit content of the bag. OBJECTIVE. From the existing Brazilian technical parameters, determine the criteria for the best clinical use for low-volume red cell concentrate (LVRCC) bags produced at the HEMOPA Foundation. MATERIAL AND METHODS. We analyzed volume, hemoglobin content, and hematocrit of 525 LVRCC bags from double bags without addition of preservative; conventional triple bags with the addition of SAG-M (saline, adenine, glucose, and mannitol); triples bags top and bottom (TAB) with the addition of SAG-M, and quadruple bags TAB with “in line” filter and the addition of SAG-M. RESULTS. It was observed that 71.43% (375/525) of bags of LVRCC, regardless of bag type, were in conformance with hematocrit and hemoglobin content concerning Brazilian legislation. With the double and conventional triple bags, they had the highest values of hemoglobin content. It was also observed that the bags of whole blood collected with volumes between 350 and 404 mL generated LVRCC bags with the lowest rate of discard. The greatest discard of LVRCC bags occurred when the final volume ≤ 250 mL and hemoglobin ≤ 16 g/dL. CONCLUSION. It was observed that the best use of LVRCC bags occurred when the whole blood bags were between 350 and 404 mL and the LVRCC bags had a final volume ≥ 250 mL and hemoglobin ≥ 16 g/dL

Ultrastructural distribution of type IV collagen in experimental wounds after treatment with papaine

Study model: Experimental. Objective: Investigate the distribution of type IV collagen fibers by transmission electron microscopy, in experimental wounds treated with papaine solutions. Methodology: Adult male Wistar rats (n = 18) underwent a surgical procedure to remove a square section of skin from the cervical region, and then separated into two groups: Group I (n = 9), without treatment; and Group II (n = 9), treated with papain solutions of 10% (up to the 7th day), 6% (from the 8th to the 14th day) and 4% (from the 15th to the 21st day). All animals were sacrificed at 7, 14 and 21 days, and the injured areas removed, washed in PBS, and fixed in 2.5% glutaraldehyde, 4% freshly prepared formaldehyde in buffered solution containing 60 mM Pipes, 20 mM Hepes, 10 mM ethyleneglycol-bis- (B-aminoethylether) -N, N, N'-tetraacetic acid, 70 mM KCl, and 5 mM MgCl 2 pH 7.2 for 1h; post-fixed in solution containing 1% osmium tethoxide, 0.8% ferrocyanide, and 5 mM calcium chloride; dehydrated in graduated acetone and soaked in Epon® to make thin sections stained with uranyl acetate and lead citrate and examined under a Zeiss LEO EM 906 (TEM) transmission electron microscope. Results: The distribution of type IV collagen fibers from papaine-treated lesions (Group II) at 14 and 21 days was more organized than Group I fibers. Conclusions: Papaine has proven to be an important facilitator for the organization of type IV collagen fibers in experimental wounds.Modelo do estudo: Experimental. Objetivo: Investigar a distribuição de fibras colágeno tipo IV, por microscopia eletrônica de transmissão, em feridas experimentais tratadas com soluções de papaína. Metodologia: Ratos Wistar (n=18), machos, adultos, foram submetidos a procedimento cirúrgico para a retirada de seção quadrada de pele da região cervical, e posteriormente separados em dois grupos: Grupo I (n = 9), sem tratamento; e Grupo II (n = 9), tratado com soluções de papaína a 10% (até o 7º dia), 6% (do 8º ao 14º dia) e 4% (do 15º ao 21º dia). Todos os animais foram sacrificados com 7, 14 e 21 dias, e as áreas lesadas retiradas, lavadas em PBS e fixadas em 2,5% de glutaraldeo, 4% de formaldeio recém preparado, em solução tamponada contendo 60 mM Pipes, 20 mM Hepes, 10 mM etilenoglicol-bis- (B-aminoetiléter) - Ácido N, N, N'-tetraacético, KCl 70 mM e MgCl2 5 mM pH 7,2 por 1h; pós-fixadas em solução contendo tetróxido de ósmio a 1%, ferrocianeto a 0,8% e cloreto de cálcio a 5 mM; desidratados em acetona graduada e embebidos em Epon® para confecção de secções finas, coradas com acetato de uranilo e citrato de chumbo, e examinadas em microscópio electrônico de transmissão Zeiss LEO EM 906 (TEM). Resultados: A distribuição das fibras colágeno tipo IV das lesões tratadas com papaína (Grupo II), com 14 e 21 dias, mostraram-se mais organizadas que as fibras do Grupo I. Conclusões: A papaína mostrou-se um importante facilitador para organização de fibras colágeno tipo IV em feridas experimentais

Avaliação comparativa entre analisadores hematológicos Mindray BC-6800 e URIT 5500, com ênfase na capacidade de detecção de blastos em pacientes portadores de leucemia aguda

Compare the ability of the BC-6800 (Mindray) and URIT 5500 hematological analyzers to signal the presence of blasts in patients with acute leukemia. Thirteen samples of peripheral blood containing myeloid or lymphoid blasts, from a cancer hospital in Belém - Pará, previously immunophenotyped by flow cytometry were analyzed to determine the capacity of the Mindray BC-6800 and URIT 5500 equipment in signaling the presence of these cells in the leukocyte scatter or by emitting flags. To assess the existence of statistical difference between the results of red blood cells, hemoglobin, leukocytes and platelets obtained by the BC 6800 (Mindray) and URIT 5500 equipments, the non-parametric ANOVA test was applied for analysis of variance of the samples, which showed that there was no statistical difference between these analytes. Statistical method was not applied for leukocyte differential counts, as the URIT 5500 equipment did not generate numerical data for the pathological samples. Both devices were able to generate flags and spatial changes from the leukocyte scatter to pathological samples, however, the BC 6800 (Mindray) analyzer was the only one to change the color of the blast population in the leukocyte scatter. BC-6800 (Mindray) and URIT 5500 analyzers showed good ability to signal, through flags and leukocyte scatter, for the presence of myeloid or lymphoid blasts in pathological samples.Comparar a capacidade dos analisadores hematológicos BC-6800 (Mindray) e URIT 5500 em sinalizar a presença de blastos em pacientes portadores de leucemia aguda. Foram analisadas 13 amostras de sangue periférico contendo blastos mielóide ou linfóide, provenientes de um hospital oncológico de Belém – Pará, previamente imunofenotipados por citometria de fluxo para verificar a capacidade dos equipamentos Mindray BC-6800 e URIT 5500 em sinalizar a presença dessas células no scatter leucocitário ou por emissão de flags. Para avaliação da existência de diferença estatística entre os resultados de hemácias, hemoglobina, leucócitos e plaquetas obtidos pelos equipamentos BC 6800 (Mindray) e URIT 5500 foi aplicado o teste não paramétrico ANOVA para análise de variância das amostras, o qual mostrou que não havia diferença estatística entre esses analitos. Não foi aplicado método estatístico para as contagens da diferencial leucocitária, pois o equipamento URIT 5500 não gerou dados numéricos para as amostras patológicas. Os dois equipamentos foram capazes de gerar flags e mudanças espacial do scatter leucocitário para amostras patológicas, contudo, o analisador BC 6800 (Mindray) foi o único a mudar a cor da população de blastos no scatter leucocitário. Os analisadores BC-6800 (Mindray) e URIT 5500 mostraram boa capacidade em sinalizar, através flags e do scatter leucocitário, para a presença de blastos mielóides ou linfóides em amostras patológicas

Case report of hairy cell leukemia

A leucemia de células pilosas (LCP) é um tipo raro de linfoma não Hodgkin de células B. O quadro clínico inclui esplenomegalia, pancitopenia e linfocitose. Estudos de carcinogênese da doença revelam sua associação a agentes químicos agrícolas. O objetivo deste estudo foi o relato de um caso de paciente com LCP, masculino, tratorista, com pancitopenia, lesões de pele, sem esplenomegalia e com marcadores positivos para linfócitos B (CD19, CD20, CD22, CD79b, CD23, Lambda, imunoglobulina M [IgM], CD25 e CD103). Embora a LCP seja uma doença rara, a demora em seu diagnóstico pode levar a sérias complicações e à morte do paciente antes do diagnóstico.ABSTRACT: Hairy cell leukemia (HCL) is a rare type of B-cell non-Hodgkin's lymphoma. The clinical symptoms include splenomegaly, pancytopenia, and lymphocytosis. Studies on its carcinogenesis reveal association with exposure to agricultural chemical agents. The objective of this study was to report the case of a male patient, tractor operator, diagnosed with HCL, pancytopenia, cutaneous lesions, without splenomegaly and positive markers for B-cell lymphocytes (CD19, CD20, CD22, CD79b, CD23, Lambda, immunoglobulin M [IgM], CD25 and CD103). Although HCL is a rare disease, late diagnosis may ultimately lead to severe complications and patient's death

Hematological and serological findings of individuals with suspicion of Dengue fever infection

The increase in the number of more serious forms of dengue fever among cases in the city of Belém, Brazil has astounded local authorities. The objective of this study was to conduct a critical analysis of hematologic and serologic findings of patients with clinical suspicion of dengue seen at a clinical laboratory in Belém in Pará State. This retrospective study involved 210 patients who were referred to the Laboratory of Clinical Pathology Dr. Paulo C. Azevedo in Belém, in the period of February and March of 2007, with requests for a complete blood count and serological test for IgM to confirm the diagnosis of dengue. Of the cases studied, 51/210 (24.3%) presented with thrombocytopenia and 53/210 (25.2%) leukopenia. The serologic test for IgM was positive in 47.1% (99/210) of cases. A statistically significant association (p<0.05) was observed only among patients who presented with thrombocytopenia (33/99) and positive serology for dengue, suggesting that the hematological alterations of leukopenia and thrombocytopenia, frequently associated with this illness, may not be present at the beginning of the infection. It is therefore essential to carry out a serologic test for IgM to confirm a diagnosis of dengue.O aumento das formas mais graves do número de casos de dengue na cidade de Belém tem preocupado as autoridades locais. O objetivo deste estudo foi realizar uma análise crítica dos achados hematológicos e sorológicos de pacientes com suspeita clínica de dengue atendidos em um laboratório de Belém-Pará. Tratou-se de estudo retrospectivo com 210 pacientes encaminhados ao Laboratório de Patologia Clínica Dr. Paulo C. Azevedo, Belém-Pará, no período de fevereiro a março de 2007, com solicitação de hemograma e sorologia para IgM para confirmação de dengue. Dos casos analisados, 51/210 (24,3%) apresentaram plaquetopenia e 53/210 (25,2%) leucopenia. A positividade da pesquisa sorológica para IgM foi de 47,1% (99/210). Foi observada associação estatística (p<0.05) somente entre pacientes que apresentavam plaquetopenia (33/99) e sorologia positiva para dengue, sugerindo que as alterações hematológicas de leucopenia e plaquetopenia, freqüentemente associadas a este agravo, podem não estar presentes no início da infecção, como verificado neste estudo, sendo fundamental, para confirmação do diagnóstico, a realização da sorologia para pesquisa de IgM