Differential permissivity of human cerebrovascular endothelial cells to enterovirus infection and specificities of enterovirus 71 in crossing an in vitro model of human blood brain barrier

Human cerebral microvascular endothelial cells (hCMEC/D3 cell line) form a steady polarized barrier when cultured in vitro on a permeable membrane. Their susceptibility to enterovirus (EV) strains was analysed to investigate how these viruses may cross the blood-brain barrier. A sample of 88 virus strains was selected on phylogenetic features among 44 epidemiologically relevant types of the four EV species A-D. The EV-A71 genome was replicated at substantial rates while the infectious virus was released at extremely low but sustained rates at both barrier sides for at least 4 days. EV-A71 antigens were detected in a limited number of cells. The properties of the endothelial barrier (structure and permeability) remained intact throughout infection. The chronic EV-A71 infection was in sharp contrast with the productive infection of cytolytic EVs (e.g. echoviruses 6 and 30). The hCMEC/D3 barriers infected with the latter EVs exhibited elevated proportions of apoptotic and necrotic cells, which resulted in major injuries to the endothelial barriers with dramatic increase of paracellular permeability and virus crossing to the abluminal side. The following intracellular rearrangements were also seen: early destruction of the actin cytoskeleton, remodelling of intracellular membranes, and reorganization of the mitochondrion network in a small cluster near the perinuclear space

Herpèsvirus Humain de type 6 (HHV-6) (étude du suivi virologique des patients immunodéprimés au CHU de Clermont-Ferrand)

L'herpèsvirus de type 6 (HHV-6) a été découvert en 1986 par Salahuddin et al. C'est un bétaherpèsvirus proche de la structure du Cytomégalovirus Humain. L'HHV-6 est très largement répandu dans la population générale puisque sa prévalence dépasse 90% chez l'adulte. La primo-infection qui survient le plus souvent dans la petite enfance est asymptomatique dans la majorité des cas ou à l'origine de la roséole. Néanmoins, au décours d'une immunosuppression (greffe...), la réactivation d'HHV-6 peut conduire à des infections opportunistes graves. La PCR quantitative en temps réel est actuellement la méthode diagnostique de référence. Le traitement est réservé aux complications graves (pneumopathies, encéphalites...) chez des personnes immunodéprimées en raison d'une forte toxicité (surtout rénale) des 3 molécules utilisées : ganciclovir, foscarnet et cidofovir. Nous avons réalisé une étude concernant les demandes d'examens d'HHV-6 (PCR) au laboratoire de virologie du CHU de Clermont-Ferrand. Sur la période du 01/01/2009 au 30/06/2010, le laboratoire a reçu 421 prélèvements sanguins réalisés chez 110 patients. Dans 80% des cas, ces demandes provenaient du service d'hématologie clinique et correspondaient aux examens réalisés dans le cadre du suivi de patients ayant bénéficiés d'une greffe (allogreffe dans 80% des cas) dans un contexte de leucémies ou de lymphomes. Au total, 53% des patients étaient âgés de 50 à 70 ans avec une prédominance du sexe masculin (58%). La médiane du nombre de prélèvements par patient était de 8 [1-39 prélèvements]. Parmi les 248 prélèvements sanguins effectués chez 62 patients, 179 (soit 72%) échantillons présentaient une PCR HHV-6 positive. Cependant, l'interprétation des charges virales HHV-6 est délicate, étant donné qu'il est important de déterminer si la positivité est liée à une infection active, latente ou encore à une intégration chromosomique de l'HHV-6. Seuls des seuils définis de quantification voire la recherche d'ARNm du virus peuvent répondre à cette problématique.CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocLYON1-BU Santé (693882101) / SudocSudocFranceF

Virus de la grippe à l'ère des pandémies

La grippe est une infection respiratoire aiguë très contagieuse souvent considérée comme bénigne alors qu'elle est responsable d'un nombre élevé de décès. De nombreux réseaux de surveillance de la grippe ont été mis en place au niveau international et national. Cette surveillance a permis de mettre en évidence le virus aviaire A(H5N1) en 1997 et de suivre sa propagation à travers le monde. Ce virus, responsable d'une épizootie, n'a pas actuellement la capacité de transmission interhumaine, cependant, un plan de lutte contre la pandémie grippale a été mis en place en 2004 afin de faire face à une éventuelle pandémie due à ce virus. En mars 2009, un nouveau sous-type de virus grippal A(H1N1) est apparu au Mexique et s'est propagé très rapidement. Le 11 juin 2009, l'OMS a annoncé le passage au niveau 6 de pandémie déclarée. Ce nouveau virus se caractérise par une contagiosité très importante et touche plus particulièrement les populations jeunes. En France, le plan de pandémie grippale a été mis en place en mai 2009 et évolue en fonction du temps. Le pharmacien d'officine a un rôle d'information auprès du public dans le rappel des règles d'hygiène et de prévention, et il est impliqué dans la dispensation des antiviraux, la délivrance des masques et des solutés hydro-alcoolique.CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocLYON1-BU Santé (693882101) / SudocSudocFranceF

Diagnostic rapide des infections neuro-méningées à entérovirus (mise au point d'une technique de RT-PCR en temps réel)

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PRISE EN CHARGE THERAPEUTIQUE DE LA BRONCHIOLITE A VIRUS RESPIRATOIRE SYNCYTIAL EN PEDIATRIE DURANT L'HIVER 1999-2000 A CLERMONT-FERRAND

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Vaccination contre le virus de la dengue (un futur proche ?)

La dengue est une arbovirose transmise par les moustiques Aedes (Aedes aegypti et Aedes albopictus). Cette maladie représente un problème majeur de santé publique dans les régions tropicales et subtropicales du monde. Aujourd'hui, plus de 2,5 milliards d'individus sont exposés à la dengue et plus de 70% d'entre eux résident dans les régions du Sud-Est de l'Asie, du Pacifique et des Amériques. Chaque année, entre 50 et 100 millions de personnes sont touchées par la maladie et cette infection conduirait aux décès de 20 000 à 25 000 individus, principalement des enfants. Il existe 4 stéréotypes génétiquement et antigéniquement distincts, DEN-1, DEN-2, DEN-3 et DEN-4. L'infection par ce virus n'induit pas d'immunité croisée. Après une première infection par l'un des quatre sérotypes, la personne développe une immunité durable contre ce sérotype uniquement. Un individu peut donc développer jusqu'à quatre épisodes de dengue au cours de sa vie. La plupart des infections virales se traduisent par une fièvre appelée la fièvre dengue ("dengue fever") et entre 2 et 4% des individus infectés vont développer une dengue hémorragique ("dengue hemorrhagic fever") qui s'avère fatale dans 10% des cas du fait de la survenue d'un symdrome de choc ("dengue choc syndrom"). A ce jour, il n'existe aucun traitement antiviral spécifique, la prise en charge est donc centrée sur la surveillance et un traitement symptomatique. Ces dernières années, le développement de vaccins s'est accéléré. Bien qu'aucun ne soit encore commercialisé, de nombreux candidats sont en cours de développement dont trois sont évalués dans des études cliniques de phase II ou de phase III.CLERMONT FD-BCIU-Santé (631132104) / SudocLYON1-BU Santé (693882101) / SudocSudocFranceF

Apport de matériaux de nidification et tempérament des truies : incidence sur le comportement maternel et la survie des porcelets

National audienceL’enrichissement de la loge de maternité par la mise à disposition d’un matériau manipulable avant la mise-bas, est une voie d’amélioration du bien-être des truies en permettant l’expression d’un comportement de nidification. Une étude a été conduite sur 32 truies de race Large-White Landrace, logées individuellement dans une case de maternité de type « liberté », à savoir libre à l’entrée, bloquées en salle de contention juste avant la mise-bas puis libérées à 7 jour postpartum jusqu’au sevrage. La case était équipée d’une toile de jute avant la mise-bas (lot Jute, toile retirée à la fin de la mise-bas) ou sans apport (lot Témoin). Pour évaluer leur tempérament, les truies étaient soumises à des tests de réactivité (objet nouveau, présence humaine, soins aux jeunes par humain) avant et/ou après la mise-bas, et observées en vidéo en phase peripartum ou de visu lors de séquences de couchage à leur libération. L’analyse a porté sur l’effet de l’apport de matériau manipulable et du tempérament des animaux sur le comportement maternel à la parturition ou en phase de lactation. Notre étude a montré une utilisation de la toile comme matériau de nidification, mais sans aucun effet sur le comportement maternel à la parturition ou en phase de lactation (P>0,10). L’analyse des réponses lors des tests de réactivité avant la mise-bas (néophobie, homme ; ACP- CAH)) a décrit deux groupes de truies se différenciant par leur néophobie vis-à-vis d’un objet nouveau (élevé ou faible). Ce trait du tempérament n’a pas eu d’effet sur le comportement maternel. Par contre, l’apport de la toile de jute diminue le nombre d’écrasements chez les truies les moins néophobes mais l’augmente dans le cas de truies les plus néophobes. Cette étude souligne l’importance des caractéristiques individuelles des truies (expérience, tempérament) et de l’environnement prénatal sur le développement du comportement maternel et ses conséquences économiques associées à la survie des porcelets. La distribution de matériaux de nidification dans les élevages de production reste à préciser pour son application fonctionnelle

Molecular Evidence of Persistent Echovirus 13 Meningoencephalitis in a Patient with Relapsed Lymphoma after an Outbreak of Meningitis in 2000

Enteroviral meningoencephalitis was diagnosed in a patient with an immunodeficiency syndrome acquired after treatment with rituximab for a relapsed primary B-cell lymphoma. A second meningoencephalitic episode was diagnosed 6 months later and was successfully treated with a combination of immunoglobulins and pleconaril. The infection was persistent since the enterovirus genome was detected in five sequential specimens of cerebrospinal fluid collected over 9 months. An echovirus 13 isolate was isolated in the first three samples. The viral sequence encoding the VP1 capsid protein of the three isolates was determined and was compared with that of four control viruses. The virus isolates recovered from the patient shared >99% nucleotide sequence similarity with one another. In a phylogenetic tree, they were directly related to a control virus obtained from a patient hospitalized in 2000 during an outbreak of enterovirus meningitis. The epidemiological origin of a chronic echovirus infection in a patient with immune deficiency suggests that the echovirus had been continuously circulating in the general population after the outbreak that had revealed its emergence

Virucidal Efficacy of Glutaraldehyde against Enteroviruses Is Related to the Location of Lysine Residues in Exposed Structures of the VP1 Capsid Protein

Glutaraldehyde (GTA) is a potent virucidal disinfectant whose exact mode of action against enteroviruses is not understood. Earlier reports showed that GTA reacts preferentially with the VP1 capsid protein of echovirus 25 and poliovirus 1 and that GTA has affinity for exposed lysine residues on proteins. To investigate further the inactivation of enteroviruses by GTA, seven strains were selected on the basis of differences in their overall number and the positions of lysine residues in the amino acid sequences of the VP1 polypeptide. Inactivation kinetics experiments were performed with 0.10% GTA. The viruses grouped into three clusters and exhibited significantly different levels of sensitivity to GTA. The results were analyzed in the light of current knowledge of the three-dimensional structure of enteroviruses and the viral life cycle. The differences observed in sensitivity to GTA were related to the number of lysine residues and their locations in the VP1 protein. The overall findings suggest that the BC and DE loops, which cluster at the fivefold axis of symmetry and are the most exposed on the outer surface of the virions, are primary reactive sites for GTA

Evaluation of real-time RT-PCR Rhino&EV/Cc r-gene® (bioMérieux) kit versions 1 and 2 for rhinovirus detection

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