Enzimas do metabolismo da sacarose em cultura celular de Bauhinia forficata; Curcuma zedoaria e Phaseolus vulgaris

O objetivo deste trabalho foi estudar as enzimas do metabolismo da sacarose em culturas de célula em suspensão de Bauhinia forficata Link, Curcuma zedoaria Roscoe e Phaseolus vulgaris L. A via da invertase foi identificada nas três espécies estudadas. A via da sacarose sintase também foi responsável pelo metabolismo da sacarose em células de Curcuma zedoaria e Phaseolus vulgaris. Foram encontradas atividades maiores que 300 nmol min-1 mg-1 de proteína das enzimas invertase ácida e alcalina, UDPglicose pirofosforilase e fosfoglicomutase no extrato celular das três espécies de plantas. A sacarose sintase mostrou atividade baixa nas células de Bauhinia forficata. À medida que a concentração de sacarose no meio de cultura diminuiu, a atividade da sacarose sintase aumentou em células de Curcuma zedoaria e Phaseolus vulgaris. Ao final do período de cultura, quando os carboidratos se tornaram limitantes, as atividades das enzimas glicolíticas reduziram-se gradualmente.The objective of this work was to study the activity of sucrose metabolizing enzymes in extracts of cell suspension cultures of Bauhinia forficata Link, Curcuma zedoaria Roscoe and Phaseolus vulgaris L. Invertase pathway was identified in the three studied species. Sucrose synthase pathway was also responsible for sucrose metabolism in Curcuma zedoaria and Phaseolus vulgaris cells. Activity values higher than 300 nmol min-1 mg-1 of protein were found for acid and neutral invertases, UDPglucose pyrophosphorylase and phosphoglucomutase in the cell extract of the three plant species. Sucrose synthase showed low activity in Bauhinia forficata cells. As sucrose concentration in the culture medium decreased, sucrose synthase activity increased in C. zedoaria and P. vulgaris cells. The glycolytic enzymes activity gradually reduced at the end of the culture period, when carbohydrate was limited

Tratamento de matrizes de cravo (Dianthus caryophyllus L., Caryophyllaceae) com nitrogênio e calogênese in vitro

Indução de calogênese eficiente e multiplicação celular rápida são pré-requisitos fundamentais em biotecnologia de plantas. Sucesso na calogênese é dependente dos componentes do meio de cultura e da qualidade dos explantes. Neste trabalho é relatada a influência do tratamento de matrizes de Dianthus caryophyllus L. com nitrogênio na indução de calogênese in vitro. Mudas de cravo cultivadas em vasos contendo areia foram tratadas com soluções nutritivas contendo 5 níveis de nitrogênio. Explantes folha, entrenós e nó foram coletados aos 30, 45 e 60 dias após início dos tratamentos e inoculados em meio de cultura contendo os sais básicos e vitaminas de Murashige & Skoog (1962), suplementado com 1 g L-1 de caseína hidrolizada, 2 mimol L-1 de cinetina e 3 mimol L-1 de 2,4-D para indução da calogênese. Ao longo dos 60 dias de tratamento com as soluções nutritivas, as matrizes de cravo não apresentaram sintomas visíveis de deficiência ou de excesso do nutriente nitrogênio. O tratamento com nitrogênio afetou a calogênese avaliada em massa de matéria fresca e seca. A produção da massa de matéria fresca de calos foi proporcional ao tratamento com nitrogênio até concentração de 267 mg L-1 para explantes folha por durante 30 dias. Tratamentos mais prolongados (45 e 60 dias) afetaram negativamente a calogênese e foram inversamente proporcionais a concentração de nitrogênio na solução nutritiva.Efficient calogenesis induction and rapid cell multiplication are fundamental requirements in plant biotechnology. The success of calogenesis is dependent on the growth medium components and the quality of explants. This work is referred to the influence of Dianthus caryophyllus L. nitrogen treatment on calogenesis induction in vitro. Carnation cuts rooted in sand pots were treated with nutrient solutions containing 5 nitrogen levels. Leaves, internodes and node explants were collected and inoculated on callus induction culture media containing Murashige & Skoog (1962) salts and vitamins, supplemented with 1 g L-1 hidrolysed casein, 2 mumol L-1 kinetin and 3 mumol L-1 2,4-D. No plant deficiency and toxicity symptoms were apparent on the treated plants during the 60 day treatment. The nitrogen treatment affected calogenesis in relation to calli fresh and dry weights. Callus fresh weigth yield was proportional to nitrogen concentration up to 267 mg L-1 for leaf explant during 30 days. Longer treatments (45 and 60 days) affected calogenesis negatively which were inversely proportional to the nitrogen concentration of the nutrient solution

Micropropagação e calogênese de Curcuma zedoaria Roscoe

Curcuma zedoaria Roscoe (zedoary) is a medicinal properties-bearing Zingiberaceae from which rhizomes are commercially exploited. The objective of this work was to establish an in vitro protocol for micropropagation and callogenesis of Curcuma zedoaria Roscoe as alternative to improve plant production, turning economically feasible the exploitation of its secondary metabolites which present medicinal properties. Micropropagation by using shoot apexes produced by rhizome and from in vitro plants were carried out on Murashige & Skoog medium supplemented with 2.0 mg L-1 benzyl amino purine and 30 g L-1 sucrose. Plantlets were satisfactorily acclimated to greenhouse conditions by using plastic cover for at least 10 days. Treatment with endomycorrhiza at the ex vitro transferring time was beneficial to acclimatization, improving plant growth and development. Callus induction and growth were obtained by inoculating root segments on Murashige & Skoog medium supplemented with 1.0 mg L-1 naphtalene acetic acid and incubation in the dark at 25 ± 2ºC. Cell suspension cultures were established on liquid medium of same chemical composition and same culture conditions and a growth curve was obtained.Curcuma zedoaria Roscoe (zedoaria) é uma Zingiberaceae com propriedades medicinais, da qual o rizoma é explorado comercialmente. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo in vitro para a micropropagação e calogênese de Curcuma zedoaria Roscoe, como alternativa para melhorar a obtenção de plantas, tornando economicamente possível a exploração de seus compostos secundários que apresentam propriedades medicinais. A micropropagação usando ápices caulinares produzidos por rizoma ou por plantas cultivadas in vitro foi obtida em meio de cultura contendo os sais básicos de Murashige & Skoog suplementado com 2.0 mg L-1 de benzil amino purina e 30 g L-1 de sacarose. As plântulas obtidas foram aclimatadas em casa de vegetação utilizando-se cobertura plástica por no mínimo 10 dias. O tratamento das plântulas com endomicorrizas, no momento de transferência das plantas para casa de vegetação, foi benéfico para o processo de aclimatização, melhorando o crescimento e desenvolvimento das plantas. Calos foram obtidos pela inoculação de segmentos de raízes em meio de cultura contendo os sais básicos de Murashige & Skoog suplementado com 1.0 mg L-1 de ácido naftaleno acético e mantidos no escuro. Culturas de células em suspensão foram estabelecidas em meio líquido de mesma composição e sob as mesmas condições de cultivo e uma curva de crescimento foi estabelecida para a espécie

Brazilian consortium for the study on renal diseases associated with COVID-19 : a multicentric effort to understand SARS-CoV-2-related nephropathy

Kidney involvement appears to be frequent in coronavirus disease 2019 (COVID-19). Despite this, information concerning renal involvement in COVID-19 is still scarce. Several mechanisms appear to be involved in the complex relationship between the virus and the kidney. Also, different morphological patterns have been described in the kidneys of patients with COVID-19. For some authors, however, this association may be just a coincidence. To investigate this issue, we propose assessing renal morphology associated with COVID-19 at the renal pathology reference center of federal university hospitals in Brazil. Data will come from a consortium involving 17 federal university hospitals belonging to Empresa Brasileira de Serviços Hospitalares (EBSERH) network, as well as some state hospitals and an autopsy center. All biopsies will be sent to the referral center for renal pathology of the EBSERH network. The data will include patients who had coronavirus disease, both alive and deceased, with or without pre-existing kidney disease. Kidney biopsies will be analyzed by light, fluorescence, and electron microscopy. Furthermore, immunohistochemical (IHC) staining for various inflammatory cells (i.e., cells expressing CD3, CD20, CD4, CD8, CD138, CD68, and CD57) as well as angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) will be performed on paraffinized tissue sections. In addition to ultrastructural assays, in situ hybridization (ISH), IHC and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) will be used to detect Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus (SARS-CoV-2) in renal tissue. For the patients diagnosed with Collapsing Glomerulopathy, peripheral blood will be collected for apolipoprotein L-1 (APOL1) genotyping. For patients with thrombotic microangiopathy, thrombospondin type 1 motif, member 13 (ADAMTS13), antiphospholipid, and complement panel will be performed. The setting of this study is Brazil, which is second behind the United States in highest confirmed cases and deaths. With this complete approach, we hope to help define the spectrum and impact, whether immediate or long-term, of kidney injury caused by SARS-CoV-2

Sucrose metabolizing enzymes in cell suspension cultures of Bauhinia forficata, Curcuma zedoaria and Phaseolus vulgaris Enzimas do metabolismo da sacarose em cultura celular de Bauhinia forficata, Curcuma zedoaria e Phaseolus vulgaris

The objective of this work was to study the activity of sucrose metabolizing enzymes in extracts of cell suspension cultures of Bauhinia forficata Link, Curcuma zedoaria Roscoe and Phaseolus vulgaris L. Invertase pathway was identified in the three studied species. Sucrose synthase pathway was also responsible for sucrose metabolism in Curcuma zedoaria and Phaseolus vulgaris cells. Activity values higher than 300 nmol min-1 mg-1 of protein were found for acid and neutral invertases, UDPglucose pyrophosphorylase and phosphoglucomutase in the cell extract of the three plant species. Sucrose synthase showed low activity in Bauhinia forficata cells. As sucrose concentration in the culture medium decreased, sucrose synthase activity increased in C. zedoaria and P. vulgaris cells. The glycolytic enzymes activity gradually reduced at the end of the culture period, when carbohydrate was limited.<br>O objetivo deste trabalho foi estudar as enzimas do metabolismo da sacarose em culturas de célula em suspensão de Bauhinia forficata Link, Curcuma zedoaria Roscoe e Phaseolus vulgaris L. A via da invertase foi identificada nas três espécies estudadas. A via da sacarose sintase também foi responsável pelo metabolismo da sacarose em células de Curcuma zedoaria e Phaseolus vulgaris. Foram encontradas atividades maiores que 300 nmol min-1 mg-1 de proteína das enzimas invertase ácida e alcalina, UDPglicose pirofosforilase e fosfoglicomutase no extrato celular das três espécies de plantas. A sacarose sintase mostrou atividade baixa nas células de Bauhinia forficata. À medida que a concentração de sacarose no meio de cultura diminuiu, a atividade da sacarose sintase aumentou em células de Curcuma zedoaria e Phaseolus vulgaris. Ao final do período de cultura, quando os carboidratos se tornaram limitantes, as atividades das enzimas glicolíticas reduziram-se gradualmente

Micropropagation and callogenesis of Curcuma zedoaria Roscoe

Curcuma zedoaria Roscoe (zedoary) is a medicinal properties-bearing Zingiberaceae from which rhizomes are commercially exploited. The objective of this work was to establish an in vitro protocol for micropropagation and callogenesis of Curcuma zedoaria Roscoe as alternative to improve plant production, turning economically feasible the exploitation of its secondary metabolites which present medicinal properties. Micropropagation by using shoot apexes produced by rhizome and from in vitro plants were carried out on Murashige & Skoog medium supplemented with 2.0 mg L-1 benzyl amino purine and 30 g L-1 sucrose. Plantlets were satisfactorily acclimated to greenhouse conditions by using plastic cover for at least 10 days. Treatment with endomycorrhiza at the ex vitro transferring time was beneficial to acclimatization, improving plant growth and development. Callus induction and growth were obtained by inoculating root segments on Murashige & Skoog medium supplemented with 1.0 mg L-1 naphtalene acetic acid and incubation in the dark at 25 &plusmn; 2ºC. Cell suspension cultures were established on liquid medium of same chemical composition and same culture conditions and a growth curve was obtained.Curcuma zedoaria Roscoe (zedoaria) é uma Zingiberaceae com propriedades medicinais, da qual o rizoma é explorado comercialmente. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo in vitro para a micropropagação e calogênese de Curcuma zedoaria Roscoe, como alternativa para melhorar a obtenção de plantas, tornando economicamente possível a exploração de seus compostos secundários que apresentam propriedades medicinais. A micropropagação usando ápices caulinares produzidos por rizoma ou por plantas cultivadas in vitro foi obtida em meio de cultura contendo os sais básicos de Murashige & Skoog suplementado com 2.0 mg L-1 de benzil amino purina e 30 g L-1 de sacarose. As plântulas obtidas foram aclimatadas em casa de vegetação utilizando-se cobertura plástica por no mínimo 10 dias. O tratamento das plântulas com endomicorrizas, no momento de transferência das plantas para casa de vegetação, foi benéfico para o processo de aclimatização, melhorando o crescimento e desenvolvimento das plantas. Calos foram obtidos pela inoculação de segmentos de raízes em meio de cultura contendo os sais básicos de Murashige & Skoog suplementado com 1.0 mg L-1 de ácido naftaleno acético e mantidos no escuro. Culturas de células em suspensão foram estabelecidas em meio líquido de mesma composição e sob as mesmas condições de cultivo e uma curva de crescimento foi estabelecida para a espécie