New mitogenome and nuclear evidence on the phylogeny and taxonomy of the highly zoonotic tapeworm Echinococcus granulosus sensu stricto

Cystic echinococcosis, a zoonotic disease caused by Echinococcus granulosus sensu lato (s.l.), is a significant global public health concern. Echinococcus granulosus s. l. is currently divided into numerous genotypes (G1-G8 and G10) of which G1-G3 are the most frequently implicated genotypes in human infections. Although it has been suggested that G1-G3 could be regarded as a distinct species E. granulosus sensu stricto (s. s.), the evidence to support this is inconclusive. Most importantly, data from nuclear DNA that provide means to investigate the exchange of genetic material between G1-G3 is lacking as none of the published nuclear DNA studies have explicitly included G2 or G3. Moreover, the commonly used relatively short mtDNA sequences, including the complete coxl gene, have not allowed unequivocal differentiation of genotypes G1-G3. Therefore, significantly longer mtDNA sequences are required to distinguish these genotypes with confidence. The main aim of this study was to evaluate the phylogenetic relations and taxonomy of genotypes G1-G3 using sequences of nearly complete mitogenomes (11,443 bp) and three nuclear loci (2984 bp). A total of 23 G1-G3 samples were analysed, originating from 5 intermediate host species in 10 countries. The mtDNA data demonstrate that genotypes G1 and G3 are distinct mitochondrial genotypes (separated by 37 mutations), whereas G2 is not a separate genotype or even a monophyletic cluster, but belongs to G3. Nuclear data revealed no genetic separation of G1 and G3, suggesting that these genotypes form a single species due to ongoing gene flow. We conclude that: (a) in the taxonomic sense, genotypes G1 and G3 can be treated as a single species E. granulosus s. s.; (b) genotypes G1 and G3 should be regarded as distinct genotypes only in the context of mitochondrial data; (c) we recommend excluding G2 from the genotype list. (C) 2017 Elsevier B.V. All rights reserved.Peer reviewe

ARTÍCULO ORIGINAL Seasonal fluctuations in prevalence of dog intestinal parasites in public squares of Mar del Plata city, Argentina and its risk for humans

ABSTRACT The aim of this work is to analyze whether there is a seasonal prevalence of parasites in dog feces from public squares in Mar del Plata city, Argentina, and to evaluate the climatic conditions that promote the development of parasites and allow the transmission to people. The study was performed in 21 squares from June 2001 to May 2002. Samples were processed by the Willis technique. Differences in prevalence of parasites were examined for significance by the Chisquare test. Climatic data were obtained from the Library of the National Meteorological Service of Argentina. Total parasitic prevalence was higher in winter than in summer. The prevalence of Ancylostoma spp. was higher in the summer-autumn period. For Toxocara canis, the prevalence was higher in winter whereas for Trichuris vulpis, it was higher in winter, spring and summer. This work shows high prevalence of total parasites throughout the year. For Ancylostoma spp., summer and autumn might be the seasons with higher sanitary risk. On the other hand, T. canis could present the higher risk to people in winter and, T. vulpis, would be transmitted throughout the whole year. The seasonal variation in prevalence of dog parasites results in continuous exposure to people visiting the squares, not only Mar del Plata residents but also tourists from other regions of Argentina and the world, with at least one species of parasite with sanitary risk. Key words: dog, environmental contamination, intestinal parasites, seasonal prevalence, Argentina RESUMEN Estacionalidad en la prevalencia de parásitos intestinales caninos en plazas públicas de Mar del Plata, Argentina, y su riesgo para la salud humana. El objetivo de este trabajo es analizar la variación estacional de la prevalencia de los parásitos presentes en las heces caninas halladas en plazas públicas de la ciudad de Mar del Plata y evaluar aquellas condiciones climáticas que promueven su desarrollo y permiten su transmisión a la gente. El estudio se realizó en 21 plazas desde junio de 2001 hasta mayo de 2002. Las muestras fueron procesadas con la técnica de Willis. Se utilizó el test de χ 2 para comparar la prevalencia de los diferentes parásitos. Los datos climáticos fueron obtenidos en la biblioteca del Servicio Meteorológico Nacional. La prevalencia total de parásitos fue considerablemente más alta en invierno que en verano. Ancylostoma spp. fue la especie prevalente en el período otoño-verano. La incidencia de Toxocara canis fue más alta en invierno que en el resto de las estaciones, y la de Trichuris vulpis fue alta en invierno, primavera y verano. Este trabajo muestra alta prevalencia de parásitos totales a lo largo de todo el año en las plazas públicas de Mar del Plata. Para Ancylostoma spp. verano y otoño podrían ser las estaciones con riesgo sanitario más alto para la gente. Por otra parte, T. canis podría presentar mayor riesgo para la gente en invierno y T. vulpis sería transmitido durante todo el año. La variación estacional en la prevalencia de los distintos parásitos caninos, con al menos una especie con riesgo sanitario, hace que la exposición para la gente que visita las plazas sea continua e involucre no sólo a la gente que vive en Mar del Plata sino también turistas de otras regiones de Argentina y el mundo

Echinococcus granulosus: biological comparison of cattle isolates from endemic regions of Argentina and Spain Echinococcus granulosus: comparación biológica de aislados de bovinos de regiones endémicas de Argentina y España

In the present study we have compared cattle isolates of Echinococcus granulosus from Argentina and Spain. The aim was to compare and determine if there exist phenotypic and genetic differences within E. granulosus cattle isolates between an endemic area of Spain (where the disease is mainly restricted to a sheep-dog cycle) and an endemic area of Argentina (where cattle are the most abundant intermediate hosts). The Spanish samples were previously identified as G1 genotype. The Argentinean samples were also identified as G1, but some variants were found for the cytochrome c oxidase-1 (CO1) and NADH dehydrogenase-1 (ND1) mitochondrial genes. When comparing the cyst features and the morphology of the larval rostellar hooks in both regions, some differences were found. The morphometric analyses of the larval rostellar hooks showed the existence of two distinct clearly separated groups (one corresponding to the Argentinean samples and the other to the Spanish ones). In conclusion, there are some genetic and phenotypic differences within E. granulosus cattle isolates from Argentina and Spain. Probably these differences, more important from an epidemiological point of view, are related to different steps in the disease control in both countries. Further studies involving other epidemiological, morphometric and molecular data, including other types of livestock, would contribute to clarify and expand the present work.<br>El objetivo del presente trabajo fue determinar si existen diferencias fenotípicas y genéticas entre los aislados de Echinococcus granulosus de origen bovino provenientes de dos regiones geográficas donde la hidatidosis es endémica, una de España (donde predomina el ciclo perro-oveja) y una de Argentina (donde el bovino es el hospedador intermediario más importante). Las muestras españolas fueron previamente identificadas como pertenecientes al genotipo G1. Las muestras argentinas también correspondían al genotipo G1, pero entre ellas se registraron algunas microvariantes de los genes mitocondriales citocromo c oxidasa-1 (CO1) y NADH deshidrogenasa- 1 (ND1). La comparación de las características de los quistes y de la morfología de los ganchos rostelares del metacestode mostró ciertas diferencias. En conclusión, existen algunas diferencias genéticas y fenotípicas entre los aislados de E. granulosus de Argentina y España. Probablemente estas diferencias, más importantes desde el punto de vista epidemiológico, podrían estar relacionadas con diferentes etapas en los programas de control de la enfermedad en los dos países. Estudios adicionales que involucren datos epidemiológicos, morfométricos y moleculares provenientes de otros tipos de ganado contribuirán a clarificar y ampliar la información aportada por este trabajo

Echinococcus granulosus genotype G1 dominated in cattle and sheep during 2003–2006 in Buenos Aires province, an endemic area for cystic echinococcosis in Argentina

Cystic echinococcosis (hydatidosis) is a severe and widespread disease, caused by the larval stage of the tapeworm Echinococcus granulosus; it affects large numbers of humans and farm animals annually, causing serious health and economic problems. Molecular studies have identified large genetic variation within the E. granulosus complex, with various hosts displaying different susceptibility to different genotypes. For the effective management of the disease, one of the most pressing tasks is to combine epidemiological and genetic data to better understand the role of different hosts and genotypes in the transmission of the parasite. The aim of the present study was to describe the epidemiology of cystic echinococcosis in cattle and sheep, and to characterise the genotypes of E. granulosus present in these farm animals. The study was carried out in the Pampa region of Argentina, with a particular focus on Buenos Aires province, where cystic echinococcosis represents an important human and veterinary health problem. Among 513 cattle and 792 sheep, 11.9% and 4.0%, respectively, were infected with E. granulosus. Genetic characterisation of 42 isolates from cattle and 34 isolates from sheep was carried out by sequencing mitochondrial cox1 and nad1 genes. The vast majority of isolates were identified as genotype G1, except for a single sheep isolate determined as genotype G2, and a single cattle isolate that corresponded to genotype G5. Genotype G1 has previously been found to be the most infectious genotype to humans. As G1 was also the genotype principally responsible for cystic echinococcosis in Buenos Aires province, these results have important implications for developing effective disease control programmes to improve human and animal healthcare in this region.Fil: Andresiuk, Maria Vanesa. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Gordo, Francisco Ponce. Universidad de Barcelona. Facultad de Farmacia; EspañaFil: Saarma, Merilin. University Of Tartu.; EstoniaFil: Elissondo, María Celina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Taraborelli, Ana. Frigorífico Anselmo. Buenos Aires; ArgentinaFil: Casalongue, Claudia. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Denegri, Guillermo Maria. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Saarma, Urmas. University Of Tartu.; Estoni

Hidatidosis pediátrica en el sudeste de la provincia de Buenos Aires, Argentina

Fil: Dopchiz, M. C. Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Fil: Elissondo, M. C. Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Fil: Andresiuk, M. V. Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Fil: Maiorini, E. Hospital Interzonal Especializado Materno Infantil Dr. Victorio Tetamanti. Servicio de Infectología, Mar del Plata; Argentina.Fil: Gutierrez, Ariana M. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Parasitología; Argentina.Fil: Muzulin, Patricia M. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Parasitología; Argentina.Fil: Rosenzvit, M. C. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Parasitología; Argentina.Fil: Lavallen, C. M. Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Fil: Denegri, G.Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Hydatidosis is a zoonosis produced by the metacestode Echinococcus spp. The aims of this research are: to contribute to the knowledge of pediatric hydatidosis in the south-east of Buenos Aires province, to study its evolution from 1993 to 2002 at the Regional Maternity and Pediatric Hospital “Dr. Victorio Tetamanti”, to determine the strains involved and to discuss the importance of the disease. The clinical records of diagnosed and/or operated patients were reviewed with regard to the hydatid disease. The strain was determined by using PCRs with Eg1 121a/122a primers. Forty-four cases were analyzed. Fifty nine point one per cent of the patients were boys. The mean age was 8 SD=3.8 years. Sixty one point four per cent had urban residence. Ultrasonography was used in 61% of the cases. The hepatic location was most frequently seen and the liver/lung ratio was 1.25. Ninety point nine per cent of patients received surgical treatment. Albendazole was used in 52% of cases. The average hospitalization time was 11 days. The Gl/G2 strain group was determined. This report is the first one of its kind in the studied region. The permanence of hydatidosis in the region depends on the natural transmission of the parasite in the absence of control and prevention measures. The health authorities should implement strategies of prevention and control in the study area. (ES) Los objetivos de este trabajo fueron: contribuir al conocimiento de la hidatidosis pediátrica en el sudeste de la provincia de Buenos Aires, estudiar su evolución desde 1993 hasta 2002, establecer la o las cepas involucradas y discutir la importancia de la enfermedad. Para ello se revisaron las historias clínicas de los pacientes pediátricos con diagnóstico de hidatidosis asistidos en el Hospital Interzonal Especializado Materno Infantil “Dr. Victorio Tetamanti” durante ese período. Se analizaron 44 casos, el 59,1% de ellos correspondió a varones. La media de edad fue de 8 años (SD=3,8 años) y el 61,4% de los niños afectados eran de residencia urbana. Se empleó ultrasonografía como método diagnóstico en el 61% de los casos. La localización hepática fue la más frecuente y la relación hígado/pulmón fue 1,25. El 90,9% recibió tratamiento quirúrgico. Se utilizó albendazol en el 52% de los pacientes. El tiempo de hospitalización tuvo una mediana de 11 días. Las cepas se determinaron mediante PCR con los cebadores Eg1 121a/122a. Se determinó la presencia de cepas del grupo G1/G2, dato informado por primera vez en humanos para la región de estudio. Se concluyó que la permanencia de la enfermedad en la región depende de la transmisión natural del parásito en ausencia de medidas de control y prevención. Por consiguiente, las autoridades de salud deberían implementar estrategias de prevención y control en dicha zona

In vitro and in vivo effects of flubendazole on Echinococcus granulosus metacestodes

The aim of the present work was to determine the efficacy of flubendazole (FLBZ) against E. granulosus metacestodes by using in vitro and in vivo models. Groups of 50 microcysts developed in vitro and groups of 10 peritoneal cysts were obtained from Balb C mice with experimental secondary infections of 8 months. The cysts were placed in Leighton tubes containing 10 ml of culture medium. FLBZ was added to the medium resulting in final concentrations of 5 and 1 µg/ml for mycrocysts treatment, and 10, 5 and 1 µg/ml for murine cysts treatment. In vivo treatment was performed on 20 mice that developed an experimental secondary hydatid disease over a period of 11 months. FLBZ was given (1.5 mg/kg) by the oral route, once a day for 50 days. A loss of turgidity was detected in all in vitro drug treated cysts, irrespective of the drug concentration or parasite origin. Inspection of treated cysts by scanning electron microscopy (SEM) revealed that the germinal layer lost it characteristic multicelular structure. These results were confirmed on the ultrastructural level by transmission electron microscopy (TEM), treated metacestodes had undergone considerable degenerative changes after the in vitro treatment. The results obtained after the in vivo treatment with FLBZ showed no significant difference between the control and treated groups related to the weight of cyst masses. However, the ultrastructural study at TEM of cysts that developed in mice from the treated group revealed alterations in the germinal layer with the presence of numerous vacuoles. With regard to the ultrastructural study at SEM, only cellular debris of the germinal layer could be seen. In conclusion, the data obtained clearly demonstrate that in vitro and in vivo treatment with FLBZ is effective against E. granulosus metacestodes.Fil: Elissondo, María Celina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biología. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; ArgentinaFil: Ceballos, Laura. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dopchiz, Marcela Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biología. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; ArgentinaFil: Andresiuk, Maria Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biología. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; ArgentinaFil: Alvarez, Luis Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatología; ArgentinaFil: Sánchez Bruni, S.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatología; ArgentinaFil: Lanusse, Carlos Edmundo. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Denegri, Guillermo Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biología. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentin

Hidatidosis pediátrica en el sudeste de la provincia de Buenos Aires, Argentina

Fil: Dopchiz, M. C. Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Fil: Elissondo, M. C. Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Fil: Andresiuk, M. V. Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Fil: Maiorini, E. Hospital Interzonal Especializado Materno Infantil Dr. Victorio Tetamanti. Servicio de Infectología, Mar del Plata; Argentina.Fil: Gutierrez, Ariana M. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Parasitología; Argentina.Fil: Muzulin, Patricia M. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Parasitología; Argentina.Fil: Rosenzvit, M. C. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Parasitología; Argentina.Fil: Lavallen, C. M. Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Fil: Denegri, G.Universidad Nacional de Mar del Plata. Laboratorio de Zoonosis Parasitarias; Argentina.Hydatidosis is a zoonosis produced by the metacestode Echinococcus spp. The aims of this research are: to contribute to the knowledge of pediatric hydatidosis in the south-east of Buenos Aires province, to study its evolution from 1993 to 2002 at the Regional Maternity and Pediatric Hospital “Dr. Victorio Tetamanti”, to determine the strains involved and to discuss the importance of the disease. The clinical records of diagnosed and/or operated patients were reviewed with regard to the hydatid disease. The strain was determined by using PCRs with Eg1 121a/122a primers. Forty-four cases were analyzed. Fifty nine point one per cent of the patients were boys. The mean age was 8 SD=3.8 years. Sixty one point four per cent had urban residence. Ultrasonography was used in 61% of the cases. The hepatic location was most frequently seen and the liver/lung ratio was 1.25. Ninety point nine per cent of patients received surgical treatment. Albendazole was used in 52% of cases. The average hospitalization time was 11 days. The Gl/G2 strain group was determined. This report is the first one of its kind in the studied region. The permanence of hydatidosis in the region depends on the natural transmission of the parasite in the absence of control and prevention measures. The health authorities should implement strategies of prevention and control in the study area. (ES) Los objetivos de este trabajo fueron: contribuir al conocimiento de la hidatidosis pediátrica en el sudeste de la provincia de Buenos Aires, estudiar su evolución desde 1993 hasta 2002, establecer la o las cepas involucradas y discutir la importancia de la enfermedad. Para ello se revisaron las historias clínicas de los pacientes pediátricos con diagnóstico de hidatidosis asistidos en el Hospital Interzonal Especializado Materno Infantil “Dr. Victorio Tetamanti” durante ese período. Se analizaron 44 casos, el 59,1% de ellos correspondió a varones. La media de edad fue de 8 años (SD=3,8 años) y el 61,4% de los niños afectados eran de residencia urbana. Se empleó ultrasonografía como método diagnóstico en el 61% de los casos. La localización hepática fue la más frecuente y la relación hígado/pulmón fue 1,25. El 90,9% recibió tratamiento quirúrgico. Se utilizó albendazol en el 52% de los pacientes. El tiempo de hospitalización tuvo una mediana de 11 días. Las cepas se determinaron mediante PCR con los cebadores Eg1 121a/122a. Se determinó la presencia de cepas del grupo G1/G2, dato informado por primera vez en humanos para la región de estudio. Se concluyó que la permanencia de la enfermedad en la región depende de la transmisión natural del parásito en ausencia de medidas de control y prevención. Por consiguiente, las autoridades de salud deberían implementar estrategias de prevención y control en dicha zona