The epidermal ‘excretory’ syncytial plates in species of Temnocephala (Platyhelminthes, Temnocephalida): Proposal of a new methodology

The epidermis of temnocephalids is formed by a mosaic of syncytial plates as revealed by electron microscopy and/or 5% silver nitrate impregnation. The variable form and size have been observed but the value of the epidermal ‘excretory’ syncytial plates (EPs) in the identification of Temnocephala species never were proper discuss. Ten species of Temnocephala were studied using images taken with a scanning electron microscope (SEM), describing a morphometry method to allow the comparison, thus, evaluating the EPs as a specific character in the identification of species of Temnocephala. The measurements (length of the anterior and posterior portions of the plate relative to the excretory pore, width of the internal and external limits, length of the portion exceeding the tentacles, total width, and total length) were obtained using AxioVision® Zeiss LWE 4.7.2 (AVZ) software. The EPs of the species tested were different revealing unique characteristics thus allowing their use as specific characters within Temnocephala. There was a pattern for each host group (Mollusca, Crustacea, Insecta, and Chelonia); the exceptions were the crustacean species and one insect species. The intra-specific variation study in Temnocephala trapeziformis demonstrated that this character varied minimally within the species. The SEM images and the AVZ software measurements were positive for the characterization of species of Temnocephala. The cirrus remained the most important specific character within Temnocephala. The traditional morphometric method was sufficient to demonstrate several specific EP characteristics, but new EPs should always be clearly described and illustrated following the now proposed methodology for Temnocephala species identification.(As placas epidérmicas sinciciais ‘excretoras’ em espécies de Temnocephala (Platyhelminthes, Temnocephalida): Proposta de uma nova metodologia.) A epiderme dos representantes da ordem Temnocephalida é formada por um mosaico de placas epidérmicas sinciciais evidenciado através da microscopia eletrônica e da impregnação com nitrato de prata 5%. A variação de forma e tamanho do par de sincícios pós-tentaculares, ou ‘placas excretoras’ (PEs), entre as espécies já foram observados, mas o valor das PEs na identificação de espécies de Temnocephala nunca foi adequadamente discutido. Dez espécies de Temnocephala foram analisadas através de imagens obtidas em microscopia eletrônica de varredura (MEV), descrevendo um método morfométrico que permite a comparação, e avaliação, das PEs como carácter específico. As medidas (comprimento da porção anterior e posterior, largura do limite interno e externo, comprimento da porção da placa acima do limite dos tentáculos, comprimento e largura totais) foram obtidas no programa AxioVision Zeiss LE 4.7.2 (AVZ). As PEs das espécies estudadas diferiram entre si e possuem características únicas que fazem delas bons caracteres diagnósticos específicos. Possuem um padrão por grupo hospedeiro; as exceções são as espécies epibiontes em crustáceos e uma espécie epibionte em insetos. O estudo da variação intraespecífica de Temnocephala trapeziformis mostrou que este caráter tem pouca variação dentro de uma mesma espécie. A visualização das PEs em MEV e as medidas obtidas através do programa AVZ produziram bons resultados na caracterização das espécies. O estudo morfométrico tradicional foi suficiente para evidenciar as características específicas das PEs. Estas devem ser claramente descritas e ilustradas, seguindo a metodologia agora proposta, para permitir a utilização deste caráter diagnóstico na identificação das espécies de Temnocephala

DESCRIÇÃO COMPLEMENTAR DO SISTEMA REPRODUTOR FEMININO DE TEMNOCEPHALA CYANOGLANDULA AMATO, AMATO & DAUDT (PLATYHELMINTHES, TEMNOCEPHALIDA)

Temnocephala cyanoglandula Amato, Amato & Daudt, 2003 foi descrita como epibionte de Aegla serrana Buckup & Rossi, 1977 utilizando as técnicas propostas até o momento da publicação, por essa razão não continha a descrição do sistema reprodutor feminino. A descrição complementar do sistema reprodutor feminino foi feita baseada em espécimes corados com carmin acético/ fast-green e da visualização dos órgãos femininos em contraste diferencial de interferência com prismas de Nomarski (DIC). A validade taxonômica de T. cyanoglandula, questionada pelas semelhanças entre os cirros desta espécie com Temnocephala axenos Monticelli, 1899 e Temnocephala bresslaui Pérez-González, 1949 (sinonimizada como T. axenos), foi subsequentemente confirmada. O cirro de T. cyanoglandula é muito maior em comprimento do que T. axenos e, apesar da semelhança do cirro com T. bresslaui, a última apresenta as estruturas femininas muito longas e é, provavelmente, uma espécie válida. Os órgãos reprodutores femininos de T. cyanoglandula e Temnocephala mertoni Volonterio, 2007 são semelhantes, no entanto possuem cirros de tamanho e formato diferentes

UNA NUEVA ESPECIE DE TEMNOCEPHALA (PLATYHELMINTHES, TEMNOCEPHALIDA) ECTOSIMBIONTE SOBRE INMATUDOS DE KEMPNYIA RETICULATA (KLAPÁLEK) (INSECTA, PLECOPTERA) DE BRASIL

Temnocefalídeos foram encontrados sobre imaturos de Kempnyia reticulata (Klapálek, 1916) coletados no Córrego Bonito, em uma seção de primeira ordem (19°58'28,4”S, 40°31'54,4”W), na Estação Biológica de Santa Lúcia (EBSL), Santa Teresa, Espírito Santo, Brasil. Vinte e nove imaturos foram examinados, cinco (17.24%) estavam positivos para espécimes de Temnocephala Blanchard, 1849. Juvenis e adultos foram encontrados sobre a cabeça, o mesonoto e as pernas médias de seus hospedeiros. Ovos foram encontrados em grande número sobre as brânquias intratorácicas. Os caracteres mais distintivos de Temnocephala stoneflyi n. sp foram o cirro e o par de sincícios pós-tentaculares, ou placas excretoras (PEs). A comparação da anatomia geral e, em particular, da morfologia do cirro e das PEs com Temnocephala curvicirri Amato & Amato, 2005 epibionte sobre heterópteros aquáticos e Temnocephala caddisflyi Amato, Amato & Seixas, 2011 epibionte sobre tricópteros, mostrou que, embora sejam de mesmo tipo e natureza, estes caracteres não são iguais, diferindo principalmente em tamanho e morfologia do cirro, que possui um tamanho intermediário entre as três espécies, e PEs menores e de formato diferente. Os locais de postura dos ovos diferem e esta é a terceira espécie com o sistema reprodutor caracterizado como 'complexo'

NUEVA ESPECIE DE TEMNOCEPHALA BLANCHARD (PLATYHELMINTHES, TEMNOCEPHALIDA) ECTOSIMBIONTE EN DILOCARCINUS SEPTEMDENTATUS (DECAPODA, TRICHODACTYLIDAE) DE LA AMAZONÍA BRASILERA

Temnocephala longivaginata sp. n., an ectosymbiont on Dilocarcinus septemdentatus (Herbst, 1783), is described from crabs in the State of Pará, Brazilian Amazonia. Fifty crabs were collected from the Rio Peixe-Boi, Municipality of Peixe-Boi. Dilocarcinus septemdentatus is the type host of Temnocephala microdactyla Monticelli, 1903, a species with a precarious original description, but redescribed on two other occasions from different hosts: Sylviocarcinus australis Magalhães & Türkay, 1996 and Dilocarcinus pagei Stimpson, 1861. The new species is most similar to Temnocephala pignalberiae Dioni, 1967, but differs by having the following characters: 1. cirrus with a circle of sclerites in the distal portion of the introvert, followed by a smooth portion (without spines or ridges); 2. proximal, inner portion of the introvert with longitudinal ridges; 3. vesicula 'intermedia' long, replacing the seminal receptacles; 4. vagina long, with a widening of its distal portion, near the asymmetrical vaginal sphincter; and 5. small and 'shoe sole' shaped dorsolateral 'excretory' syncytial epidermal plates. Prior to the present study, all species of Temnocephala were shown to have the cirrus' introvert either smooth or with spines. Ridges in the inner wall of the introvert and a circle of sclerites are here recorded for the first time in Temnocephalidae.Temnocephala longivaginata sp. n. ectosimbionte en Dilocarcinus septemdentatus (Herbst, 1783), es descrita del Estado de Pará, Amazonia brasilera. Cincuenta cangrejos fueron colectados en Rio Peixe- Boi, Municipio de Peixe-Boi. Dilocarcinus septemdentatus es el hospedero-tipo de Temnocephala microdactyla Monticelli, 1903, especie con una descripción original pobre, pero que fue re-descrita en otras dos ocasiones en diferentes hospederos: Sylviocarcinus australis Magalhães & Türkay, 1996 y Dilocarcinus pagei Stimpson, 1861. La nueva especie es más parecida con Temnocephala pignalberiae Dioni, 1967, de quien se diferencia por los siguientes caracteres: 1. cirro con un círculo de escleritos en la porción distal del introverto, seguida por una porción lisa (sin espinas o cristas); 2. porción proximal interna del introverto con cristas longitudinales; 3. vesicula 'intermedia' larga, sustituyendo los receptáculos seminales; 4. vagina larga, con una extensión en la porción distal, próximo al esfínter vaginal asimétrico; y 5. placas dorsolaterales, sincitiales 'excretoras' pequeñas y en forma de 'suela de zapato'. Hasta el momento, todas las especies de Temnocephala tienen el introverto del cirro liso o con espinas. Cristas en la pared interna del introverto y un círculo de escleritos son registrados por primera vez en Temnocephalidae

UMA NOVA ESPÉCIE DE TEMNOCEPHALA(PLATYHELMINTHES, TEMNOCEPHALIDA) ECTOSIMBIONTE SOBRE NERITINA ZEBRA (MOLLUSCA, NERITIDAE) DAAMAZÔNIA BRASILEIRA

Temnocephala euryhalina sp. n., ectosimbionte de moluscos da espécie Neritina zebra (Bruguière, 1792) é descrita do Estado do Pará, Amazônia Brasileira. Representantes da família Neritidae Lamarck, 1809, geralmente eurialinos, são adaptados aos habitats que apresentam um certo grau de salinidade. Até o momento, todas as espécies de Temnocephala epibiontes em moluscos foram descritas/registradas em hospedeiros da família Ampullariidae Gray, 1824, estritamente dulciaquícola como todos os hospedeiros conhecidos das espécies de Temnocephala. Vinte e um moluscos foram coletados no Rio Tocantins, Município de Cametá. A nova espécie é diferente de todas as espécies descritas sobre moluscos até o momento, e possui os seguintes caracteres: 1. tamanho corporal diminuto; 2. cirro simples e curto, diferente dos cirros das espécies epibiontes de moluscos que, salvo variações específicas, apresentam o formato de pincel, onde o limite entre o shaft e o introvert é bem marcado e o último apresenta uma inflação; 3. sistema reprodutor feminino simples e inconspícuo; 4. vagina pouco muscular e sem diferenciação entre as porções proximal e distal; 5. vesícula intermedia pequena, substituindo os receptáculos seminais; e 6. esfíncter vaginal único e simétrico. Ovos de temnocefalídeos não foram encontrados dentro ou fora da concha dos hospedeiros, assim como sobre os opérculos. Este é o primeiro registro de uma espécie de Temnocephala epibionte em moluscos neritídeos e o primeiro registro sobre um hospedeiro de hábito eurialino

CISTACANTOS DE GIGANTORHYNCHUS ECHINODISCUS (ACANTHOCEPHALA, GIGANTORHYNCHIDAE), EN TERMITAS NEOTROPICALES (ISOPTERA, TERMITIDAE)

Specimens of Labiotermes emersoni (Araujo, 1954) and Orthognathotermes heberi Raw & Egler, 1985, were collected at Parque Nacional da Serra da Canastra, State of Minas Gerais, Brazil. Soldiers of the two species were suspected to carry larval acanthocephalan parasites due to different sizes and shape of their heads and because some specimens had a conspicuous, cylindrical, whitish 'body' in the hemocoel, around the digestive tract in the abdomen. The termites showed shape alteration and light pigmentation dystrophy of the heads induced by the larval acanthocephalans. These alterations were documented photographically and the cystacanths described. The encysted juveniles removed from the hemocoel of infected soldier termites and processed accordingly, were determined as Gigantorhynchus echinodiscus (Diesing, 1851). The proboscis had the typical cylindrical shape and the characteristic two distal circles of large hooks (6+12), covered with small, almost rootless spines, and a very short neck. This is the first record from Brazil of any species of termites infected with acanthocephalans of the genus Gigantorhynchus Hamann, 1892 and the first record of G. echinodiscus cystacanths infecting the intermediate host.Los especímenes de Labiotermes emersoni (Araujo, 1954) y Orthognathotermes heberi Raw & Egler, 1985, se colectaron en el Parque Nacional de Serra da Canastra, Estado de Minas Gerais, Brasil. Se sospechaba que soldados de las dos especies eran portadores de larvas de acantocéfalos parásitos debido a diferentes tamaños y formas de la cabeza, además de un “cuerpo” blanquecino, cilíndrico visible en el hemocele de algunos ejemplares, alrededor del tubo digestivo en el abdomen. Los termitas mostraron alteración de forma y leve distrofia de pigmentación en sus cabezas inducidas por los acantocéfalos larvales. Estas alteraciones se documentaron fotográficamente y se describen los cistacantos. Las formas juveniles enquistadas retiradas del hemocele de soldados infectados se identificaron como Gigantorhynchus echinodiscus (Diesing, 1851). Los probóscides tenían la típica forma cilíndrica y los característicos dos círculos distales de grandes ganchos (6+12), cubiertos de pequenas espinas, casi sin raíces y un cuello muy corto. Este es el primer registro de dos especies de termitas infectadas por acantocéfalos del género Gigantorhynchus Hamann, 1892 y el primero registro de cistacantos de G. echinodiscus infectando el hospedero intermediário

PRIMER REGISTRO DE TEMNOCEPHALA PEREIRAI (PLATYHELMINTHES, TEMNOCEPHALIDA) SOBRE TRACHEMYS DORBIGNI (EMYDIDAE) EN EL SUR DE BRASIL – ESTUDIO MORFOLÓGICO COMPLETO

Specimens and eggs of Temnocephala pereirai Volonterio, 2010 found on Trachemys dorbigni (Duméril & Bibron, 1835), were reported for the first time extending the known geographical distribution of T. pereirai from Uruguay to southern Brazil. Sixteen turtles were collected from a dam at 'Centro Agropecuário da Palma', Universidade Federal de Pelotas (UFPel), Municipality of Capão do Leão, State of Rio Grande do Sul, Brazil. The helminthes were fixed according to our standard protocols. Juvenile and adult temnocephalans were translucent and without the red-eye pigmentation. The worms were living in the inner corners of the plastron, near the legs, together with the eggs, and in the center of the plastron. Eggs were elongated, thick-shelled, with a small and subpolar filament. The most distinctive features of this species were: 1. cirrus's introvert proximal portion with spines from top to mid-level, followed by a smooth region, extending to the introvert proximal limit; 2. vagina with strong muscular walls and a single, symmetrical sphincter; 3. vesicula intermedia unusually long; 4. small dorsolateral 'excretory' syncytial epidermal plates larger in the anterior portion; and 5. excretory pore in the anterior portion of the plate, near the internal limit. The specimens in the present work had larger body length and base diameter of the shaft than the Uruguayan specimens. Keywords: freshwater turtles - NeotropicEspecimenes de Temnocephala pereirai Volonterio, 2010 ectosimbiontes en Trachemys dorbigni (Duméril & Bibron, 1835) se describen del Municipio de Capão do Leão, Estado de Rio Grande do Sul, Brasil. Este registro permite la extensión de la distribución geográfica conocida de T. pereirai desde Uruguay hacia el sur de Brasil. Dieciséis tortugas se recogieron en una represa del 'Centro Agropecuário da Palma', Universidade Federal de Pelotas (UFPel), Municipio de Capão do Leão, Estado de Rio Grande do Sul, Brasil. La totalidad de la muestra se fijó de acuerdo a nuestros protocolos. Temnocéfalos juveniles y adultos eran translúcidos y la pigmentación de ojos rojos estaba ausente. Se localizan en las esquinas internas del plastrón, cerca de las patas, junto con los huevos, y en el centro del plastrón. Los huevos eran alargados con cáscara espesa y con un pequeño filamento desplazado hacia un lado. Las características más distintivas de esta especie fueron las siguientes: 1. cirro con la porción proximal del introverto con espinas desde la extremidad distal hasta la mitad, seguido por una región desnuda, que se extiende hasta el límite proximal del introverto; 2. vagina con fuertes paredes musculares y esfínter vaginal simétrico; 3. vesícula intermedia inusualmente larga; 4. placas dorsolaterales, sincitiales 'excretoras' pequeñas, más anchas en su parte anterior; y 5. poro excretor en la porción anterior de la placa, cerca del límite interno. Los especímenes del presente trabajo tenían una mayor longitud del cuerpo y diámetro de la base del 'shaft' en comparación con los especímenes uruguayos