Modelo farmacocinético populacional do tacrolimo em pacientes transplantados de medula óssea em um hospital universitário de Porto Alegre

Introdução: A área de transplantes é um campo de elevada criticidade que envolve procedimentos delicados. O sucesso de qualquer transplante está na capacidade de controlar a resposta imunológica, o que possibilita a adaptação do enxerto. A manutenção de fármacos imunossupressores em níveis desejados não é uma tarefa fácil, pois existem diferentes fatores que afetam suas concentrações séricas. O tacrolimo é um dos imunossupressores mais utilizados nos transplantes. Possui estreita janela terapêutica e grande variabilidade intraindividual e interindividual, particularmente no período pós-transplante. Justificativa: Devido à importância deste imunossupressor nos transplantes e a sua grande variabilidade farmacocinética, este trabalho busca desenvolver um modelo farmacocinético populacional do tacrolimo em pacientes transplantados de medula óssea, tendo em vista que ainda possuem poucos estudos nessa população. Objetivo: Desenvolver um modelo farmacocinético populacional do tacrolimo em pacientes transplantados de medula óssea, buscando identificar fatores que contribuem para sua variabilidade. Metodologia: Para a revisão sistemática, foram relizadas buscas nas principais bases de dados. Para a criação do modelo populacional, foi realizada a coleta retrospectiva dos níveis séricos pós-primeira dose do tacrolimo. As informações sociodemográficas e laboratoriais foram coletas dos prontuários. Os dados foram analisados com base na abordagem farmacocinética populacional nos softwares NONMEM (versão 7.4) e PsN versão 4.9.0, com o método de estimativa condicional de primeira ordem com interações (FOCE-I). O modelo foi selecionado a partir do valor mínimo da função objetiva (OFV) e avaliado por meio da validação interna e externa, bem como calculado o erro de predição. Resultados: A criação e a validação do modelo farmacocinético populacional do tacrolimo demonstraram uma significante associação entre os parâmetros farmacocinéticos, idade e hematócrito sobre o CL. O modelo para individualização da terapia será disponibilizado para a equipe assistencial e auxiliará no monitoramento terapêutico realizado pelo farmacêutico clínico e permitirá um melhor controle e individualização dos regimes de tratamento, com ajustes de doses mais precisos, visando otimizar o tratamento e evitar toxicidades que impactem na sobrevida e na qualidade de vida do paciente pós-transplante de medula óssea.Introduction: The transplant area is a highly critical field that involves delicate procedures. The success of any transplant lies in the ability to control the immune response, which enables graft adaptation. Maintaining immunosuppressive drugs at desired levels is not an easy task, there are different factors that affect their serum concentrations. Tacrolimus is one of the most used immunosuppressant in transplants. It has a narrow therapeutic window and great intra-individual and inter-individual variability, particularly in the post-transplant period. Justification: Due to the importance of this immunosuppressant in transplants and its great pharmacokinetic variability, this work seeks to develop a population pharmacokinetic model of tacrolimus in bone marrow transplant patients, since there are still few studies in this population. Objective: To develop a population pharmacokinetic model of tacrolimus in patients after bone marrow transplantation, seeking to identify factors that contribute to its variability. Methodology: For the systematic review, searches were carried out in the main databases. To create the population model, a retrospective collection of serum levels after the first dose of tacrolimus was carried out. Sociodemographic and laboratory information were collected from the medical record. Data were analyzed based on the population pharmacokinetic approach using NONMEM (version 7.4) and PsN version 4.9.0 software, with the first-order conditional estimation method with interaction (FOCE-I). The model was selected from the minimum value of the objective function (OFV) and evaluated through internal and external validation, as well as calculating the prediction error. Results: The creation and validation of the tacrolimus population pharmacokinetic model demonstrated a significant association between age and hematocrit on CL parameters. The model for the individualization of therapy will be made available to the clinical team and will assist in the therapeutic monitoring carried out by the clinical pharmacist and will allow for better control and individualization of treatment regimens, with more precise dose adjustments, aiming to optimize the treatment and avoid toxicities that impact on the survival and quality of life of post-transplant patients

Avaliação in vitro da atividade antiproliferativa de compostos isolados de espécies de Hypericum nativas do sul do Brasil

Devido ao grande avanço na descoberta de novos fármacos a partir de compostos naturais, tornou-se interessante avaliar o potencial antiproliferativo de moléculas isoladas de extratos de plantas. Este trabalho prioriza o estudo da atividade antitumoral de benzofenonas (carifenona A e carifenona B) e floroglucionóis (japonicina A e uliginosina B), isolados das espécies nativas do sul do Brasil, Hypericum carinatum e Hypericum myrianthum, respectivamente, bem como a associação destes com quimioterápicos utilizados na clínica. Os experimentos propostos foram realizados em modelos in vitro, utilizando diferentes tipos de linhagens tumorais humanas comercialmente disponíveis. Foi avaliado o efeito de diferentes doses destes compostos através de experimentos de viabilidade e sobrevivência celular, análise morfométrica nuclear (NMA) e citometria de fluxo. Na análise estatística foi utilizada a variância de uma via (ANOVA) seguida de teste post-hoc (Tukey). Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média (SEM), sendo valores de P menores do que 0,05 considerados significativos. Verificamos que nas linhagens de adenocarcinoma de ovário e colorretal e de glioblastoma (OVCAR-3, HT-29 e U-251) ocorreu uma diminuição significativa na viabilidade celular quando tratadas com a dose de 100μg/mL tanto de carifenona A como de carifenona B, enquanto os compostos japonicina A (50μg/mL) e uliginosina B (20μg/mL) só foram ativos na linhagem OVCAR-3. Dentre as associações com quimioterápicos, a única que apresentou efeito sinérgico foi a combinação de japonicina A e paclitaxel na linhagem OVCAR-3. A partir deste momento selecionamos a japoncina A para dar continuidade aos estudos. Este composto foi avaliado frente a outros tipos de linhagens tumorais, sendo ativa somente em células de adenocarcinoma de ovário e próstata (OVCAR-3 e PC-3). Na linhagem PC-3, a análise do ciclo celular demonstrou decréscimo da fase G1 e indução ao arraste da fase G2, assim como, através da técnica de NMA, foi verificado um aumento de células apoptóticas, quando as células foram tratadas com japonicina A. Estudos moleculares devem ser realizados para melhor entendimento do mecanismo de ação da japonicina A, composto que pode servir de modelo para o desenho de fármacos mais específicos para este tipo de neoplasia.Due to the great progress in the discovery of new drugs from natural compounds, it has become interesting to evaluate the antiproliferative activity of molecules isolated from plant extracts. This work emphasizes the study of antitumor activity of benzophenones (cariphenone A and cariphenone B) and phloroglucionols (japonicin A and uliginosin B), isolated from Hypericum species native to southern Brazil, H. carinatum and H. myrianthum, respectively, as well as their association with chemotherapeutic drugs used in the clinic. The proposed experiments were performed in vitro using commercially available cell lines. The effect of different doses of these compounds were evaluated via cell viability and survival assay, nuclear morphometric analysis (NMA) and flow cytometry. One way analysis of variance (ANOVA) followed by post hoc tests (Tukey) were utilized for statistical analysis. Results were expressed as mean ± standard error of the mean (SEM), and P values less than 0.05 were considered significant. We found that in ovarian, colorectal (adenocarcinoma) and glioblastoma cell lines (OVCAR-3, HT-29 and U-251) a significant decrease in cell viability occurred when these were treated with a dose of 100μg/mL of cariphenone A and B, while compounds japonicin A (50μg/mL) and uliginosin B (20μg/mL) were active only in OVCAR- 3. Among the associations with chemotherapeutic agents, only japonicin A presented a synergistic effect with paclitaxel in the OVCAR-3 cell line. We then selected japonicin A for evaluation against other cell lines, but its effects were only observed in ovary and prostate adenocarcinoma cell lines (OVCAR-3 e PC-3). In PC-3, the cell cycle revealed a decreased in the G1 phase and induction of G2 arrest, the NMA showed an increase in apoptotic cells when cells were treated with japonicin A. More studies should be conducted to better understand the mechanisms of action of japonicin A, since this compound may serve as pharmacophore model for the design of more specific drugs to treat this tumor type

Avaliação in vitro da atividade antiproliferativa de benzofenonas isoladas de hypericum carinatum griseb.

O câncer é uma das principais patologias que atinge o ser humano. Nas últimas décadas as descobertas de maior impacto nesta área tiveram origem na investigação de compostos de origem natural que forneceram um número significativo de substâncias que chegaram a etapa de ensaio clínico. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antiproliferativa de duas benzofenonas (carifenona A e carifenona B) isoladas de Hypericum carinatum Griseb., planta nativa do sul do Brasil cujo do extrato hexânico demonstrou ser citotóxico para as linhagens de câncer colorretal, HT-29; pulmão, H-460 e glioblastoma, U- 373, sendo relatada atividade antitumoral para esta classe de compostos. O isolamento das carifenonas foi realizado a partir de extratos obtidos por fluido supercrítico (2,5 g) submetidos à coluna cromatográfica eluida com hexano /acetato de etila em concentrações crescentes de polaridade e purificados em placa de sílica gel G60254 tendo seu perfil cromatográfico obtido por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Placas de 96 poços contendo células e meio de cultura foram tratadas com diferentes concentrações da carifenona A e B ressuspendidas em dimetil sulfóxido (DMSO) e com a associação destes compostos ao quimioterápico irinotecano para verificação de possível efeito sinérgico. Após o período de 48h foi analisada a viabilidade celular pelo método de (3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil brometo de tetrazolina (MTT). As leituras foram realizadas em espectrofotômetro (Spectra MAX 190) utilizando-se 50μL de DMSO como solvente, no comprimento de onda de 492nm. A significância estatística dos resultados foi determinada por análise de variância One-Way (ANOVA), seguida pelo teste de Tukey, utilizando o software para cálculos estatísticos SPSS (Statistical Package for the Social Sciences) 12.0®. Valores de P < 0,05 foram considerados estatisticamente significantes. Os resultados demonstraram que as carifenonas diminuem a viabilidade em três das quatro linhagens testadas, na dose de 100μg/mL e possuem um interessante efeito na linhagem celular HT- 29, quando combinados com o quimioterápico irinotecano

Avaliação in vitro da atividade antiproliferativa de compostos isolados de espécies de Hypericum nativas do sul do Brasil

Devido ao grande avanço na descoberta de novos fármacos a partir de compostos naturais, tornou-se interessante avaliar o potencial antiproliferativo de moléculas isoladas de extratos de plantas. Este trabalho prioriza o estudo da atividade antitumoral de benzofenonas (carifenona A e carifenona B) e floroglucionóis (japonicina A e uliginosina B), isolados das espécies nativas do sul do Brasil, Hypericum carinatum e Hypericum myrianthum, respectivamente, bem como a associação destes com quimioterápicos utilizados na clínica. Os experimentos propostos foram realizados em modelos in vitro, utilizando diferentes tipos de linhagens tumorais humanas comercialmente disponíveis. Foi avaliado o efeito de diferentes doses destes compostos através de experimentos de viabilidade e sobrevivência celular, análise morfométrica nuclear (NMA) e citometria de fluxo. Na análise estatística foi utilizada a variância de uma via (ANOVA) seguida de teste post-hoc (Tukey). Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média (SEM), sendo valores de P menores do que 0,05 considerados significativos. Verificamos que nas linhagens de adenocarcinoma de ovário e colorretal e de glioblastoma (OVCAR-3, HT-29 e U-251) ocorreu uma diminuição significativa na viabilidade celular quando tratadas com a dose de 100μg/mL tanto de carifenona A como de carifenona B, enquanto os compostos japonicina A (50μg/mL) e uliginosina B (20μg/mL) só foram ativos na linhagem OVCAR-3. Dentre as associações com quimioterápicos, a única que apresentou efeito sinérgico foi a combinação de japonicina A e paclitaxel na linhagem OVCAR-3. A partir deste momento selecionamos a japoncina A para dar continuidade aos estudos. Este composto foi avaliado frente a outros tipos de linhagens tumorais, sendo ativa somente em células de adenocarcinoma de ovário e próstata (OVCAR-3 e PC-3). Na linhagem PC-3, a análise do ciclo celular demonstrou decréscimo da fase G1 e indução ao arraste da fase G2, assim como, através da técnica de NMA, foi verificado um aumento de células apoptóticas, quando as células foram tratadas com japonicina A. Estudos moleculares devem ser realizados para melhor entendimento do mecanismo de ação da japonicina A, composto que pode servir de modelo para o desenho de fármacos mais específicos para este tipo de neoplasia.Due to the great progress in the discovery of new drugs from natural compounds, it has become interesting to evaluate the antiproliferative activity of molecules isolated from plant extracts. This work emphasizes the study of antitumor activity of benzophenones (cariphenone A and cariphenone B) and phloroglucionols (japonicin A and uliginosin B), isolated from Hypericum species native to southern Brazil, H. carinatum and H. myrianthum, respectively, as well as their association with chemotherapeutic drugs used in the clinic. The proposed experiments were performed in vitro using commercially available cell lines. The effect of different doses of these compounds were evaluated via cell viability and survival assay, nuclear morphometric analysis (NMA) and flow cytometry. One way analysis of variance (ANOVA) followed by post hoc tests (Tukey) were utilized for statistical analysis. Results were expressed as mean ± standard error of the mean (SEM), and P values less than 0.05 were considered significant. We found that in ovarian, colorectal (adenocarcinoma) and glioblastoma cell lines (OVCAR-3, HT-29 and U-251) a significant decrease in cell viability occurred when these were treated with a dose of 100μg/mL of cariphenone A and B, while compounds japonicin A (50μg/mL) and uliginosin B (20μg/mL) were active only in OVCAR- 3. Among the associations with chemotherapeutic agents, only japonicin A presented a synergistic effect with paclitaxel in the OVCAR-3 cell line. We then selected japonicin A for evaluation against other cell lines, but its effects were only observed in ovary and prostate adenocarcinoma cell lines (OVCAR-3 e PC-3). In PC-3, the cell cycle revealed a decreased in the G1 phase and induction of G2 arrest, the NMA showed an increase in apoptotic cells when cells were treated with japonicin A. More studies should be conducted to better understand the mechanisms of action of japonicin A, since this compound may serve as pharmacophore model for the design of more specific drugs to treat this tumor type