Isolation of fetal liver oval cells in physiologic conditions form their natural niche

El hígado se caracteriza por poseer una notable capacidad de proliferar y autorregenerarse. En la situación de daño hepático leve o moderado la regeneración es llevada a cabo por los hepatocitos. Sin embargo, cuando el daño hepático es demasiado extenso y el número de hepatocitos maduros residuales no es suficiente como para producir la regeneración o cuando su proliferación está inhibida, la regeneración hepática depende de la activación de células troncales hepáticas, que dan origen a las células ovales. La población de células troncales hepáticas es escasa en el hígado normal y se considera que apenas supera el 1% del total de células en el hígado fetal. Por esta razón es necesario aislarlas y enriquecerlas para su estudio. Se han desarrollado con este fin modelos de daño hepático que permiten aislar células ovales luego de la inducción de daño hepático masivo. En este trabajo presentamos una metodología simple que permite aislar células ovales a partir de hígado fetal de rata sin previa inducción de daño hepático. El uso del antígeno específico de células ovales 2 (OC2) y antígeno específico de células ovales 3 (OC3) como marcadores moleculares permitió la caracterización altamente específica de esta población celular. Por otra parte, el cultivo in vitro en presencia de HGF condujo a un sustancial enriquecimiento de la población de células ovales.The liver is characterized by a remarkable ability to proliferate and self-renew. In the situation of mild or moderate liver damage, hepatocytes carry out regeneration. Nevertheless, when liver damage is far too much extensive and the number of residual mature hepatocytes is not enough to accomplish regeneration, or likewise when mature hepatocyte proliferation is inhibited, hepatic regeneration depends on the activation of liver stem cells that give rise to oval cells. The population of liver stem cells is scant in normal liver. It is considered that in fetal liver this population is just over 1% of the cells. For this reason, it is necessary to isolate and enrich them for their study. With this goal several models of hepatic damage that permit the isolation of oval cells af ter the induction of massive hepatic injure have been developed. Here we present a simple methodology that allows the isolation of oval cells from rat fetal liver without prior induction of liver damage. The use of oval cell 2 (OC2) and oval cell 3 (OC3) antigens as molecular markers allowed the highly precise characterization of this cell population. Furthermore, the in vitro culture in presence of HGF yielded a substantial enrichment of the oval cell population.Fil: Torres Fuenzalida, Jose Hugo. Hospital Italiano. Instituto de Ciencias Básicas y Medicina Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Castronuovo, Cynthia Celeste. Hospital Italiano. Instituto de Ciencias Básicas y Medicina Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Hidalgo, Alejandra. Hospital Italiano. Instituto de Ciencias Básicas y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Parada, Luis Antonio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Salta. Instituto de Patología Experimental. Universidad Nacional de Salta. Facultad de Ciencias de la Salud. Instituto de Patología Experimental; ArgentinaFil: Lorenti, Alicia. Hospital Italiano. Instituto de Ciencias Básicas y Medicina Experimental; Argentin

Functional blockade of α5β1 integrin induces scattering and genomic landscape remodeling of hepatic progenitor cells

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Cell scattering is a physiological process executed by stem and progenitor cells during embryonic liver development and postnatal organ regeneration. Here, we investigated the genomic events occurring during this process induced by functional blockade of α₅β₁integrin in liver progenitor cells.</p> <p>Results</p> <p>Cells treated with a specific antibody against α₅β₁integrin exhibited cell spreading and scattering, over-expression of liver stem/progenitor cell markers and activation of the ERK1/2 and p38 MAPKs signaling cascades, in a similar manner to the process triggered by HGF/SF1 stimulation. Gene expression profiling revealed marked transcriptional changes of genes involved in cell adhesion and migration, as well as genes encoding chromatin remodeling factors. These responses were accompanied by conspicuous spatial reorganization of centromeres, while integrin genes conserved their spatial positioning in the interphase nucleus.</p> <p>Conclusion</p> <p>Collectively, our results demonstrate that α₅β₁integrin functional blockade induces cell migration of hepatic progenitor cells, and that this involves a dramatic remodeling of the nuclear landscape.</p

Gulls as carriers of antimicrobial resistance genes in different biogeographical areas of South America

The aim of this communication was to establish if Enterobacterales associated with gulls in Argentina harbored antimicrobial resistance (AMR) genes. We analyzed cloacal swabs in two contrasting areas: Ensenada, Buenos Aires province (26 Larus dominicanus and 22 Chroicocephalus maculipennis) and Puerto Madryn, Chubut province (20 L. dominicanus). In Ensenada, blaCTX-M and mcr-1 genes, were isolated from both gull species, whereas in the Puerto Madryn, only blaCTX-M gene was found. We report for the first time C. maculipennis as carrier of AMR. The finding of AMR in wildlife constitutes a useful tool in evaluating the anthropogenic impact on environmental health.Fil: Lorenti, Eliana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores; ArgentinaFil: Moredo, Fabiana Alicia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Microbiología; ArgentinaFil: Origlia, Javier Anibal. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Patología de Aves y Pilíferos; ArgentinaFil: Diaz, Julia Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores; ArgentinaFil: Cremonte, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Centro Nacional Patagónico. Instituto de Biología de Organismos Marinos; ArgentinaFil: Giacoboni, Gabriela Isabel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Microbiología; Argentin

Estudio de clases de Dengue: DCSA y DG en pacientes ingresados en el hospital de Infectología de Guayaquil / Types of Dengue study: DCSA and DG in patients that were admitted to the Infectious Diseases Hospital in Guayaquil

El Dengue se había presentado con una sintomatología específica, pero últimamente se ha observado una clínica diferente en Dengue con signos de alarma y Dengue grave. El objetivo fue caracterizar clínicamente los casos mencionados entre el 27 de abril al 28 de junio de 2014, ingresados en el Hospital de Infectología de Guayaquil. Mediante un estudio observacional descriptivo, se recabó información a través del SIVE, historias clínicas, formulario 008 y resultados de laboratorio efectuados al ingreso. Los resultados evidencian que el 51% de los pacientes acuden entre el cuarto y sexto día de iniciado su cuadro clínico; presentando la sintomatología: fiebre acompañada de dolor abdominal, artralgias, cefaleas y mialgias. Observándose en los exámenes de laboratorio hemoconcentración y plaquetopenia, concordando con la definición de casos de DCSA y DG. La hipótesis no pudo ser corroborada ya que se observa en las personas adultas la sintomatología clínica definida en la bibliografía médica como el Manual “Guía y manejo de Dengue en las Américas”, por lo que se recomienda capacitación continuahospitalaria sobre el manejo de casos. AbstractDengue in Ecuador was presented with specific symptoms, but lately there has been a different clinic situation on Dengue with alarming signs and severe Dengue. The aim for this research was to clinically characterize these cases from 27 April to 28 June 2014, admitted to the Infectious Diseases Hospital in Guayaquil. Through a descriptive, observational study, the information studied was collected throughout the SIVE, medical records, form 008 and laboratory results performed on admission. The results show that 51% of patients go for medical attention between the fourth and sixth day after starting their clinical situation; presenting the following symptoms: fever accompanied by abdominal pain, joint pain, headache and myalgia. Laboratory tests show hemo-concentration and thrombocytopenia, which coincides with the cases definition for DCSA and DG. The hypothesis could not be confirmed since it is observed in adults clinical symptoms that is defined in the medical literature as the "Guide and treatment of Dengue in the Americas", that is why it is recommended continuous hospital training about case treatment

Cultivo de células de piel humana sobre un soporte polimérico artificial y un soporte acelular derivado de vejiga porcina

La ingeniería de tejidos aplicada a lesiones de la piel propone constantemente métodos innovadores con el propósito de mejorar la calidad de vida de las personas con estas patologías. El objetivo de este estudio fue cultivar fibroblastos y queratinocitos humanos sobre soportes artificiales poliméricos termosensibles y membranas acelulares derivadas de vejiga porcina. Se establecieron cultivos primarios y subcultivos y, subsecuentemente, se obtuvieron epidermis diferenciadas y estratificadas a partir de queratinocitos que crecieron en cocultivo con una capa alimentadora (feeder layer) de fibroblastos dérmicos humanos. Mediante microscopía óptica, se efectuaron observaciones relacionadas con el crecimiento y la diferenciación de ambos tipos celulares. Se encontró que las células epiteliales cultivadas sobre soportes termosensibles produjeron láminas epidérmicas bastante semejantes a una epidermis natural, mientras que la membrana acelular derivada de vejiga porcina resultó menos exitosa para el desarrollo de queratinocitos

Cultivo de células de piel humana sobre un soporte polimérico artificial y un soporte acelular derivado de vejiga porcina

Innovative methods are constantly proposed by tissue engineering in order to improve the quality of life of people affected by skin injuries. The aim of this study was the in vitro culture of human fibroblasts and keratinocytes on both artificial polymeric thermosensitive and porcine-urinary-bladder-derived acellular scaffolds. Primary cultures and subcultures were established and, subsequently, differentiated and stratified epidermises were obtained from keratinocytes co-cultured with a human dermal fibroblast feeder layer. Observations on both structure and differentiation of keratinocytes and fibroblasts were performed by optical microscopy. It was observed that epithelial cells cultivated on thermosensitive scaffolds were able to produce epidermal sheets similar to normal epidermis, whereas keratinocyte development was less successful on the porcine-urinary-bladder-derived acellular membrane. La ingeniería de tejidos aplicada a lesiones de la piel propone constantemente métodos innovadores con el propósito de mejorar la calidad de vida de las personas con estas patologías. El objetivo de este estudio fue cultivar fibroblastos y queratinocitos humanos sobre soportes artificiales poliméricos termosensibles y membranas acelulares derivadas de vejiga porcina. Se establecieron cultivos primarios y subcultivos y, subsecuentemente, se obtuvieron epidermis diferenciadas y estratificadas a partir de queratinocitos que crecieron en cocultivo con una capa alimentadora (feeder layer) de fibroblastos dérmicos humanos. Mediante microscopía óptica, se efectuaron observaciones relacionadas con el crecimiento y la diferenciación de ambos tipos celulares. Se encontró que las células epiteliales cultivadas sobre soportes termosensibles produjeron láminas epidérmicas bastante semejantes a una epidermis natural, mientras que la membrana acelular derivada de vejiga porcina resultó menos exitosa para el desarrollo de queratinocitos.

Gulls as carriers of antimicrobial resistance genes in different biogeographical areas of South America

The aim of this communication was to establish if Enterobacterales associated with gulls in Argentina harbored antimicrobial resistance (AMR) genes. We analyzed cloacal swabs in two contrasting areas: Ensenada, Buenos Aires province (26 Larus dominicanus and 22 Chroicocephalus maculipennis) and Puerto Madryn, Chubut province (20 L. dominicanus). In Ensenada, bla CTX-M and mcr-1 genes, were isolated from both gull species, whereas in the Puerto Madryn, only bla CTX-M gene was found. We report for the first time C. maculipennis as carrier of AMR. The finding of AMR in wildlife constitutes a useful tool in evaluating the anthropogenic impact on environmental health.Centro de Estudios Parasitológicos y de VectoresFacultad de Ciencias Veterinaria

Cultivo de condrocitos sobre una matriz acelular derivada de membrana amniocoriónica

BackgroundHyaline cartilage has only a very restricted capability of regeneration in the adult. The incidence of chondral lesions at the knee is high, especially those of Grade II/III (Outerbridge). Therapies combining cells and biological scaffolds are promising biological approaches for the treatment of cartilage defects. The aim of this study is to analyze the characteristics of in vitro culture of human chondrocytes on decellularized amniochorionic membrane (ACM).MethodsBetween December 2010 and December 2011, 16 samples of cartilage from a living donor were processed, but only 7 of them were analyzed. Chondrocytes were grown and amplified on plastic and on ACM. The following analyses were carried out with those cells: interactions between cells and ACM; ACM capacity as a matrix for cells; and behavior of cells cultured on ACM.ResultsIn vitro chondrocytes exhibited phenotypic changes in the presence of ACM. The cells were able to adhere and remain on the spongy region of the membrane. Electron microscopy of cultured ACM showed cells, well preserved organelles, endoplasmic reticulum and desmosomes junctions.ConclusionsThe feasibility of culturing chondrocytes on ACM was shown in this work. The cells were able to adhere, remain and differentiate on this membrane during the study period.IntroducciónEl tejido cartilaginoso articular presenta escasa capacidad regenerativa.Existe alta incidencia de lesiones condrales en rodilla, especialmente de Grado II/III (Outerbridge). El uso combinado de células autólogas cultivadas con membranas biológicas, es una posibilidad terapéutica. El objetivo del presente trabajo es analizar las características del desarrollo in vitro de condrocitos humanos sobre membrana amniocoriónica acelular (MAC).Material y métodosEntre diciembre 2010 y diciembre 2011 se procesaron 16 muestras de cartílago de donante vivo, de las cuales fueron analizadas7. Los condrocitos fueron cultivados y amplificados sobre plástico, a partir de lo cual se realizaron los siguientes análisis: interacción entre células y MAC, capacidad de la MAC como matriz para las células, y comportamiento de las células cultivadas sobre la MAC.ResultadosLos condrocitos in vitro mostraron cambios fenotípicos en presencia de MAC. Las células fueron capaces de adherirse y permanecer en la región esponjosa de la membrana. La microscopía electrónica de las MAC cultivadas mostró presencia de células, organelas celulares bien conservadas, retículo endoplásmico y uniones tipo desmosomas.ConclusionesEste trabajo muestra la factibilidad de cultivar condrocitos sobre MAC. Las células fueron capaces de adherirse, permanecer y diferenciarse sobre la membrana durante el tiempo de estudio