PSMA 표적 세포치료 및 세포추적을 위한 세포막공학 연구

학위논문(석사) -- 서울대학교대학원 : 융합과학기술대학원 응용바이오공학과, 2023. 2. 김상은.세포치료제는 줄기세포 또는 면역세포 등 세포를 기반으로 하는 치료법이다. 특히, 면역조절세포치료제는 수지상세포(dendritic cell), 자연 살해 세포(natural killer cell), T 세포 등의 면역세포를 이용하여 면역반응을 활성화시켜 질병 치료에 사용되는 의약품이다. 면역조절세포치료제 중 최근 임상적으로 활발히 연구가 진행되고 있는 CAR-T는 키메릭 항원 수용체(chimeric antigen receptors, CARs)를 발현하는 유전자를 T 세포에 도입하여 발현하는 개념으로, 현재 국외에서도 승인이 기대되는 신기술 분야이다. 그러나 이러한 CAR-T 치료법 역시 충분한 표적화가 이루어지지 않을 경우 on-target/off-tumor effect의 부작용으로 인한 한계점도 가지고 있다. 이러한 표적능의 한계와 부작용을 극복하기 위해 이중특이성(bispecific) CAR-T를 개발하거나 CAR의 성능과 효능을 향상시키기 위한 노력이 이루어지고 있다. 이러한 CAR-T 세포와 같은 면역세포치료의 문제점을 극복하기 위해서는 면역세포와 종양세포 간의 상호작용(cell-cell interaction)이 중요하며, 특히 이는 세포 표면의 리간드와 수용체 간의 결합이 중요하게 작용한다. 예로, CAR-T에 이용되고 있는 CD20, CD22, HER2 등이 종양세포의 표적화에 이용되고 있다. 이러한 두 세포들 간의 결합이 강화되면 보다 효과적인 항암치료를 기대할 수 있다. 최근 당대사공학(metabolic glycoengineering)을 사용하여 세포 표면에서 당구조물의 발현을 조절한 다음, 생물직교 화학(bioorthogonal click chemistry)를 사용하여 인공적인 표적 리간드와 같은 구조를 결합하는 방법이 제시되고 있다. 당대사공학은 인공 당과 당단백질 합성과정을 이용하여 세포 표면에 화학적 표지가 가능한 수용체를 도입할 수 있는 기술이다. Azide 반응기는 N-azifoacetyl-mannosamine(Ac4ManNAz) 등의 기질을 이용하여 화학적 표지를 위해 세포 표면에 형성될 수 있다. 이후 생물직교 화학반응으로 결합이 가능한 다양한 구조물을 쉽고 빠르게 시험관 내 또는 생체내에서 결합할 수 있는 장점이 있다. 본 학위 논문의 목표는 당대사공학 및 클릭 반응을 이용하여 면역세포치료제에서 전립선특이막항원(prostate specific membrane antigen, PSMA)에 대한 표적화 능력을 높이고 PET 영상을 이용하여 세포추적을 시각화하는 것이다. THP-1 세포를 다양한 농도(0, 5, 10, 20, 50, 100 μM)의 Ac4ManNAz와 함께 24 시간 동안 처리하여 세포 표면에 반응성 작용기를 발현시켰다. 당대사조작된 세포를 DBCO-bearing fluorophore (ADIBO-Cy5.5)를 이용하여 1 시간 동안 다양한 농도조건(0, 5, 10, 20, 50, 100 μM)에서 처리하여 염색하였다. 이를 공초점 형광 현미경 및 유세포 분석법을 이용하여 분석을 진행함으로써 당대사공학 및 클릭 반응을 이용하여 THP-1 세포의 표면에서 생체직교 결합이 일어남을 확인하였다. THP-1 세포의 표면에 PSMA 표적화 리간드를 무장시키기 위해 Ac4ManNAz가 처리된 THP-1 세포에 최종농도 100 μM의 DBCO-PSMA ligand (ADIBO-GUL)를 처리하고 1 시간 배양하였다. 세포 인식에 대한 효과를 평가하기 위해, PSMA 리간드가 무장된 THP-1 세포(작용 세포)와 PSMA 양성 종양세포인 22RV1 세포 또는 PSMA 음성 종양세포인 PC3 세포(표적 세포)를 Effector-to-target 비율 3:1로 공동배양 하였다. 이때 THP-1 세포(작용 세포)와 표적 세포 사이의 상호작용을 공초점 형광 현미경을 이용하여 확인하였고, PSMA 표적구조를 포함하지 않은 THP-1 세포를 음성 대조군으로 이용하였다. [89Zr]Zr(oxinate)4는 음이온 교환 카트리지르 이용하여 oxalate 구조로부터 합성되었다. 합성된 [89Zr]Zr(oxinate)4의 친유성을 확인하기 위해 LogD7.4가 측정되었다. 이후 방사성 표지된 THP-1 세포를 준비하기 위해, ~740 kBq 수준의 [89Zr]Zr(oxinate)4를 이용하여 5×106 개의 세포를 표지하였다. 방사성 표지된 세포는 감마 카운터를 이용하여 세포에 표지된 방사능을 측정하였고, MTS 방법을 이용하여 최대 7일까지의 세포 생존능을 확인하였다. [89Zr]Zr(oxinate)4로 방사성 표지된 PSMA 표적 리간드 무장 THP-1 세포를 정상 마우스의 꼬리 정맥을 통하여 투여한 뒤 2 시간, 1, 4, 6일에 각각 PET 영상이 획득되었다. 세포독성시험에서, THP-1 세포는 Ac4ManNAz 또는 ADIBO-Cy5.5의 최대 처리 농도인 100 μM까지 어떠한 독성도 확인되지 않았다. 공초점 형광 현미경 영상과 유세포 분석법에서, THP-1 세포는 ADIBO-Cy5.5의 처리용량에 비례한 효율적 표지를 확인하였다. 효율적 세포 표면 표지에 대한 최적농도로써 100 μM이 이후 실험에서 사용되었다. 작용 세포와 표적 세포 사이의 결합은 PSMA 음성인 PC3 세포에서 관찰되지 않았다. 22RV1 세포에서도 음성 대조군으로 사용된 THP-1 세포와의 세포 간 결합이 나타나지 않았다. 하지만 PSMA 리간드 무장 THP-1 세포와 22RV1 세포 사이의 세포 간 결합이 확인되었으며, 이는 두 가지 유형의 세포 사이에서 세포 표면의 표적화 리간드에 의한 세포 간 인식이 일어남을 보여준다. [89Zr]Zr(oxinate)4의 LogD7.4 측정값은 1.47 ± 0.02로, 친유성을 확인하였고, 세포 방사성 표지 효율은 54.4 ± 17.8%였다. 단일 세포 당 0.09 ± 0.03 Bq로 표지된 THP-1 세포는 방사성 표지 후 7일까지 방사성 표지가 되지 않은 대조군 THP-1 세포와 비교하여 유의한 세포독성을 나타내지 않아 방사성 표지에 의한 세포 독성은 확인되지 않았다. 마우스에 투여된 THP-1 세포는 가장 먼저 폐에 높은 비율로 축적되었다가, 이후 시간이 지남에 따라 점차 간, 비장 등의 다른 장기로 이동함을 확인하였다. 위 방법을 통하여 PSMA 표적 세포를 준비하기 위해 100 μM의 Ac4ManNAz를 처리하고, PSMA 표적 리간드(ADIBO-GUL)를 이용하여 효율적으로 세포를 무장할 수 있음을 성공적으로 입증하였다. 또한 [89Zr]Zr(oxinate)4를 이용하여 세포에 대한 독성 없이 세포를 방사성 표지 할 수 있음을 확인하였다. 이는 PSMA 리간드 무장 세포 요법이 세포 표적화 능력을 개선하고 PET 영상을 이용하여 세포의 체내 이동을 추적할 수 있음을 제안하였다.Cell therapy is based on cells such as stem cells and immune cells. In particular, immunomodulatory cell therapy treats diseases by activating the immune response using immune cells such as dendritic cells, natural killer cells, and T-cells. Among them, a concept of introducing a gene expressing a chimeric antigen receptor into T cells (CAR-T) has been developed recently for cancer treatment and is expected to be approved internationally. However, these CAR-T-based therapies have some limitations due to side effects of on-target/off-tumor effects when adequate targeting is not achieved. To overcome the limitations and side effects of these targeting capabilities, efforts are being made to develop bispecific CAR-T cells or to improve the performance and efficacy of CARs. Metabolic glycoengineering is a technology that can introduce receptors that can be chemically labeled on the cell surface using artificial sugar and glycoprotein synthesis. Reactive azide groups can be formed on the cell surface for chemical labeling using a substrate such as N-azidoacetyl-mannosamine (Ac4ManNAz). After that, it can easily and quickly combine various structures that be conjugated by bioorthogonal chemical reactions in vitro or in vivo. This study aimed to increase the targeting ability against PSMA in cell therapy using metabolic glycoengineering and click reaction and visualize cell trafficking using PET imaging. THP-1 cells were incubated with Ac4ManNAz at various concentrations (0, 5, 10, 20, 50, and 100 µM) for 24 h to incorporate reactive functional groups on the cell surface. Metabolically glycoengineered cells were stained by DBCO-bearing fluorophore (ADIBO-Cy5.5) for 1 h at different concentrations (0, 5, 10, 20, 50, and 100 µM) and analyzed by confocal fluorescence microscopy and flow cytometric assay. For PSMA ligand attachment to THP-1 cells, Ac4ManNAz treated THP-1 cells were incubated with DBCO-PSMA ligand (ADIBO-GUL) at a final concentration of 100 µM for 1 h. To evaluate the effect on cell recognition, PSMA ligand-armed THP-1 cells (as effectors) were co-cultured with PSMA-positive, 22RV1 cells or PSMA-negative, PC3 cells (as target cells) at a 3:1 effector-to-target cell (E/T) ratio. The interaction between THP-1 and target cells was monitored by confocal fluorescence microscopy. THP-1 cells were used without a PSMA targeting motif as a negative control. [89Zr]Zr(oxinate)4 was prepared from its oxalate form by using an anion exchange sep-pak cartridge. LogD7.4 assay was performed to confirm the lipophilicity of the synthesized [89Zr]Zr(oxinate)4. For preparing the radiolabeled THP-1, the cells were treated at the activity level of ~740 kBq of [89Zr]Zr(oxinate)4/5×106 cells. Radiolabeled cells were analyzed for determination of cell-associated radioactivity by gamma counting and cell viability was measured up to 7 day by MTS assay. PSMA targeting ligand armed THP-1 cells radiolabeled with [89Zr]Zr(oxinate)4 was injected into normal mice through the tail vein. PET images were obtained at 2 hours, 1, 4, and 6 days after injection. In the cytotoxicity assay, THP-1 cells did not present cytotoxicity even when the Ac4ManNAz or ADIBO-Cy5.5 treated concentration was 100 µM. In confocal imaging and flow cytometric assay, ADIBO-Cy5.5 efficiently labeled THP-1 cells in a dose-dependent manner, and the dose of 100 µM was the optimum concentration for the following experiments. Intercellular gluing was not observed in PSMA negative PC3 cells. 22RV1 cells did not show cell-to-cell gluing with non-armed THP-1 cells. However, the clusters of PSMA ligand-armed THP-1 cells and 22RV1 were identified, indicating cell-cell recognition over the cell surface between two types of cells. LogD7.4 of [89Zr]Zr(oxinate)4 was determined as 1.47 ± 0.02. Cell radiolabeling efficiency was 54.5 ± 17.8%. THP-1 labeled with 0.09 ± 0.03 Bq/cell showed no significant cytotoxicity compared to unlabeled THP-1 up to 7 days. Injected THP-1 cells accumulated in the lung and gradually moved to other organs, such as the liver and spleen, over time. Ac4ManNAz treated cells were prepared efficiently and labeled with ADIBO-GUL for preparing the PSMA-targeted cells. [89Zr]Zr(oxinate)4 can be used to label cells without toxicity. The study results suggest that PSMA-ligand armed cell therapy could improve cell targeting efficacy and be monitored by PET imaging.Chapter 1. Introduction 1 1.1. Cell therapy 1 1.2. Bioorthogonal engineering 1 1.3. Cell trafficking by PET 5 1.4. PSMA 7 1.5. Research objectives 9 Chapter 2. A feasibility study of cell membrane engineering for PSMA-targeted cell therapy and trafficking 10 2.1. Background 10 2.2. Experimental 11 2.3. Results and discussion 19 2.4. Summary 33 Chapter 3. Conclusion 34 Appendix 35 References 36 Abstract in Korean 40석

한국 초등학생들의 영어 읽기 능력에 영향을 주는 요인 분석

학위논문 (석사) -- 서울대학교 대학원 : 사범대학 외국어교육과(영어전공), 2021. 2. 소영순.Reading is an important skill that needs to be established in the early stages of learning to read, but many second language learners find it difficult to successfully form its foundations. In order to verify the potential sources of English reading difficulty of Korean-speaking children learning English, the present study conducted a Component-skills analysis to L2 reading comprehension with four major linguistic variables—word decoding, vocabulary, morphosyntax, and listening comprehension. To this end, a total of eighty-seven students in fourth and sixth grades were asked to take both standardized and non-standardized tests specifically designed for elementary school students according to four different language skills. A series of correlation analyses and multiple regression were conducted using SPSS in order to analyze how the students’ performance on each component correlates with their level of reading comprehension. The results showed that the model including word decoding, vocabulary, morphosyntax, and listening comprehension as predictors was suitable for explaining reading comprehension for both fourth grade (R2 = .616) and sixth grade (R2 = .578). While all component skills were correlated with reading comprehension, regression results indicated that the power of predictability among component skills was different by grade. In fourth grade, word decoding was the most powerful predictor of reading comprehension but was no longer salient in sixth grade. On the other hand, vocabulary and listening comprehension, which were not significant in fourth grade, exerted a great contribution to reading comprehension in sixth grade. This result substantiates the previous research that there exists a developmental trajectory in L2 reading comprehension: Once word decoding skills are fully acquired, the impact of other language skills such as vocabulary and listening comprehension to reading is increased in later stages of reading development. Findings from the current study shed light on using the componential approach as a diagnostic tool to evaluate one’s level of L2 reading and apply this knowledge in further educational practices.읽기 능력은 학습 초기에 반드시 확립되어야 할 중요한 언어기능이나, 많은 제 2 언어 학습자들은 기초적인 읽기 능력을 형성하는 데 어려움을 겪는 것으로 알려져 있다. 영어를 배우는 한국 초등학생들의 영어 읽기 어려움에 기여하는 요인을 밝혀내기 위하여, 본 연구는 네 가지 언어 요인—단어 해독 능력, 어휘 지식, 형태통사지식, 듣기이해능력—을 기반으로 제 2 언어 읽기 능력을 분석하였다. 이를 위해 총 87 명의 4, 6 학년 학생들을 모집하였으며, 네 가지 언어기능과 읽기 능력을 측정하는 다섯 가지 표준화시험 및 비표준화시험에 참여하게 하였다. 각 기능에 대한 학생들의 능력이 자신들의 읽기 능력과 어떠한 관계를 갖는지 분석하기 위하여 상관분석과 다중회귀분석을 실시하였다. 그 결과, 네 가지 기능을 예측변인으로 활용하는 모델이 4 학년과 6 학년 읽기 능력의 변인을 설명하는 데 적합한 것으로 나타났다. 모든 독립 변인은 읽기 능력과 상관관계를 갖는 것으로 나타났으나, 회귀분석 결과에서는 각 변인 간 예측력의 크기가 학년에 따라 다른 것으로 나타났다. 4 학년에서는 단어 해독 능력이 읽기 능력을 예측하는 데 가장 큰 설명력을 보였으나, 6 학년에서는 통계적으로 유의미한 설명력을 갖지 못하는 것으로 나타났다. 이와 반대로, 4 학년에서는 유의미한 설명력을 갖지 못했던 어휘 지식과 듣기이해능력이 6 학년에서는 가장 영향력이 높은 예측 변인인 것으로 나타났다. 이와 같은 결과는 제 2 언어 읽기 능력에는 발달 단계가 존재한다는 기존의 선행 연구 결과와 상응한다. 읽기 발달의 초기 단계에서는 단어 해독 능력이 읽기 능력에 큰 영향력을 미치는 데에 반하여, 후기 단계에서는 단어 해독 능력이 능숙해짐에 따라 어휘 능력이나 듣기이해능력과 같은 다른 변인들의 영향력이 높아진다는 것이다. 본 연구는 제 2 언어 읽기 능력을 분석할 때 그 하위 요소를 비교분석하는 접근법이 학습자의 읽기 발달 단계를 진단하는 데 유용하다는 시사점을 이끌어내었다. 읽기 학습 초기에 기초적인 읽기 능력을 확립할 수 있도록 향후 제 2 언어 읽기 지도에 본 분석법을 적극적으로 활용해야 할 것이다.Abstract i Table of Contents iii List of Tables v List of Figures v Chapter 1. Introduction 1 1.1 Background and Purpose of the Study 1 1.2 Research Questions 5 1.3 Organization of the Thesis 6 Chapter 2. Literature Review 7 2.1 Reading Comprehension Studies 7 2.2 Factors Influencing Reading Comprehension 12 2.2.1 Word Decoding 13 2.2.2 Vocabulary 15 2.2.3 Morphosyntax 16 2.2.4 Listening Comprehension 18 2.3 Reading Comprehension Factors by Age/Proficiency 20 Chapter 3. Methodology 26 3.1 Participants 26 3.2 Materials 28 3.2.1 Word Decoding 28 3.2.2 Vocabulary 29 3.2.3 Morphosyntax 31 3.2.4 Listening Comprehension 33 3.2.5 Reading Comprehension 34 3.2.6 Survey 35 3.3 Data Collection 35 3.3.1 Pilot Study 35 3.3.2 Main Study 38 3.4 Data Analysis 39 Chapter 4. Results and Discussion 41 4.1 Results 41 4.1.1 Relations Between Reading Comprehension and its Component Skills 41 4.1.2 The Contribution of Component Skills to Reading Comprehension 44 4.2 Discussion 47 4.2.1 Relations Between Reading Comprehension and its Component Skills 47 4.2.2 The Contribution of Component Skills to Reading Comprehension 48 Chapter 5. Conclusion 55 5.1 Summary of Major Findings 55 5.2 Pedagogical Implications 58 5.3 Limitations and Suggestions for Future Research 61 References 63 Appendices 73 Appendix A: Word Decoding Test: WRF (Word Reading Fluency) Subtest 73 Appendix B: Receptive Vocabulary Test Stimuli 74 Appendix C: Sentence Imitation Task Stimuli 75 Appendix D: An Example Set in Listening Comprehension Test 76 Appendix E: An Example Set in Reading Comprehension Test 77 Appendix F: Survey 79 국 문 초 록 80Maste

Association of opioid receptor gene polymorphisms with drinking severity and impulsivity related to alcohol use disorder in a Korean population

AIMS: Recent evidence suggests that the opioid system is implicated in the pathophysiology of alcohol use disorder (AUD). We aimed to examine the genetic influence of opioid receptors on susceptibility to AUD and its clinical and psychological characteristics including harmful drinking behavior and various aspects of impulsivity in AUD patients. METHODS: Three μ-opioid receptor gene (OPRM1) variants and two κ-opioid receptor gene (OPRK1) variants were examined in 314 male patients with AUD and 324 male controls. We applied the Alcohol Use Disorders Identification Test (AUDIT), Obsessive Compulsive Drinking Scale (OCDS), and Alcohol Dependence Scale. AUD patients also completed the stop-signal task, delay discounting task, balloon analogue risk task, and the Barratt Impulsiveness Scale version 11 (BIS-11). RESULTS: No significant differences in genotype distributions or haplotype frequencies were found between AUD patients and controls. However, OPRK1 SNP rs6473797 was significantly related to the severity of alcohol-related symptoms as measured by AUDIT and OCDS and a haplotype containing rs6473797 was also related to OCDS scores in AUD patients. For other psychological traits, OPRM1 SNP rs495491 was significantly associated with scores on the motor subfactor of the BIS-11. CONCLUSION: Genetic variations in opioid receptors may contribute to symptom severity and impulsivity in AUD patients.ope

Dysfunctional Metacognitive Beliefs in Patients With Obsessive-Compulsive Disorder and Pattern of Their Changes Following a 3-Month Treatment

Introduction: Metacognitions are considered to be crucial factors for the development and maintenance of pathologic anxiety. The present case-control study aimed to examine how metacognitive beliefs are associated with the diagnostic status and subtypes of obsessive-compulsive disorder (OCD). In addition, we examined the pattern of changes in metacognitive beliefs after a 3-month pharmacological treatment in patients with OCD. Methods: A total of 562 cases with OCD and 236 healthy controls were assessed with the Metacognitions Questionnaire (MCQ) and various measures of OC symptom severity. Multivariate analyses of variance (MANOVAs) with covariates were conducted to explore the relationship between subdimensions of metacognitive beliefs and OCD disease status. In addition, for the OCD patients, Pearson's correlation was performed between baseline MCQ subdimensions and Obsessive-Compulsive Inventory-Revised-Korean subscales (OCI-R-K). Finally, in a subset of drug-free OCD patients (n = 144), the MCQ was reassessed after 3 months of treatment and patterns of changes in subdimensions of the MCQ were examined. Results: Patients with OCD scored significantly higher on the four dimensions of the MCQ. There were significant associations between all MCQ subdimensions and OCI-R-K subscales. In the repeated-measure MANOVA, a significant group (non-responders vs. responders)-by-time interaction effect was found only for the negative beliefs about the uncontrollability and danger of worry (NB) subdimension (F = 10.75; η2 = 0.072; p = 0.001). Conclusion: The presence of dysfunctional metacognitive beliefs in OCD subjects and their association with OCD characteristics suggest that dysfunctional metacognitions may play a crucial role in the pathophysiology of OCD. Improvement of metacognitive beliefs in the NB dimension may be a clinically meaningful correlate of good treatment response in the pharmacological treatment of OCD.ope

Status assessment and cause of herbarium database errors

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 농업생명과학대학 산림과학부, 2017. 8. 장진성.표본은 수 백 년 간의 자연사 정보를 축척하고 있으며 생물다양성 연구에 있어 핵심적인 정보를 제공해 왔고 현재는 표본 정보를 디지털화 하여 온라인에서 제공함으로써 그 가치가 제고되고 있다. 국내에서도 2000년대 전후를 시작으로 표본정보의 디지털화와 데이터베이스 관련 사업이 추진되고 있다. 그러나 시스템의 구축이나 자료의 양을 늘리는데 비해 자료의 질에 대한 관심, 즉 자료 정제의 중요성에 대한 인식은 부족하다. 이에 본 연구에서는 국가기관 표본DB와 표본의 관리 현황에 대한 정보를 제공하고, 오류를 점검하며, 오류의 유형 분석을 통해 원인을 파악해 보며 부분적으로나마 오류를 정제할 수 있는 방법을 제시하고자 하였다. 대상은 국립수목원 산림생물표본관(KH)과 국립생물자원관(KB)에 소장된 식물표본과 표본정보로 양 기관에서 목본 17,517 점의 좌표정보를 포함한 식물표본정보(일차종발생정보)를 제공받아 DB형식으로 전환하고 직접 표본관을 방문하여 표본을 동정하였다. 공간적 오류의 경우 좌표 정보의 부재가 문제가 되었다. 분류학적인 오류의 경우 조사대상 전체의 평균 오동정률은 10.4%정도였는데, 오동정이 없는 분류군부터 67.07%로 매우 높은 분류군들이 섞여 있으며 오동정률에 있어 분류군별 경향성을 찾기가 어려웠다. 이는 자료를 사용함에 있어 신뢰도를 크게 떨어뜨리며 자료 사용 자체에 대한 혼란을 야기할 수 있다. 오류의 정제에 있어 공간적인 오류는 지리참조연산을 이용해 정제가 가능하며 분류학적인 오류는 분포지역 비교 및 분포도 작성을 통해 25.6% 정도를 탐지할 수 있었다. DB의 관리 현황 점검에서 국립수목원 물푸레나무속과 수수꽃다리속 DB와 실제 표본을 대조, 비교해본 결과 DB와 실제 표본 사이에 30-38% 정도의 차이가 있었다. DB관리에 있어 핵심은 자료의 데이터베이스화로 표본의 채집부터 디지털화, 오류의 점검, 정제와 예방의 모든 과정은 데이터베이스를 통해 이루어져야 한다.제1장 서 론 1 1. 연구 배경 1 2. 연구 목적 7 제 2장 연 구 사 8 제 3장 재료 및 방법 12 1. 연구 대상 12 2. 연구 방법 14 제 4장 결 과 17 1. 국립수목원(KH) 표본 DB 현황 및 품질 17 1.1. 표본 DB 현황 17 1.2. 표본 DB 품질 20 1.2.1. 명명법적 문제 20 1.2.2. 분류학적 정밀성 20 1.2.3. 공간 정보의 충실도 25 2. 국립수목원(KH)과 국립생물자원관(KB) 표본DB의 공간적 및 분류학적 오류 26 2.1. 공간적 오류 26 2.2. 분류학적 오류 (오동정) 27 2.2.1. 분류학적 오류의 현황과 경향성 27 2.2.2. 분류학적 오류의 유형 33 3. 분포도 작성을 통한 오류의 예측 37 3.1. 분포도와 오류의 탐지 37 3.2. 종별 분포 유형과 예측의 결과 42 제 5장 고 찰 45 1. 표본 자료 데이터베이스화의 의미 45 2. 오류의 유형별 정제 방법에 대한 논의 48 3. 관리 절차 단계별 논의 57 제 6장 결 론 62 인용 문헌 63 Appendix 74 Abstract 94Maste

The Influence of Death Education on Medical Students’ Attitudes towards End‐of‐Life Care: A Preliminary Study

End-of-life care competencies have been perceived as important and essential, so it has been suggested that end-of-life care be studied in undergraduate medical education. However, end-of-life care curriculum has mostly focused on acquisition of knowledge and skills rather than attitudes. Therefore, we aimed to explore whether education about death affects medical students’ attitudes towards care for dying patients and perception of death anxiety, meaning in life, and self-esteem. A total of 15 first- or second-year medical students were surveyed with questionnaires before and after completing a 6-week death education course. Paired data analysis showed that participants’ attitudes towards caring for terminally ill patients and their caregivers improved significantly (t=-2.84, p=0.013) with an effect size of 0.73. In contrast, no significant changes were found in death anxiety, meaning in life, or self-esteem. All participants agreed that formal teaching about death and dying must be encouraged in medical schools. Our results suggest that death education may positively influence attitudes towards end-of-life care. Although replication with larger samples is necessary, this preliminary finding may support the importance of developmentally appropriate end-of-life care education in medical schools.ope

신호위반 무인단속 카메라의 설치 효과 분석

학위논문 (석사)-- 서울대학교 환경대학원 : 환경계획학과(교통학전공), 2016. 8. 이영인.교차로 내 혹은 부근에서 발생하는 교통사고는 차량 피해 외에 심각한 인명피해를 가져올 수 있다. 교차로에서 발생하는 사고의 원인으로는 속도위반과 신호위반이 큰 부분을 차지하고 있다. 이에 교차로의 사고 감소와 인명피해 감소를 목표로 신호위반 무인단속 카메라를 설치하여 운영하고 있다. 본 연구에서는 교차로의 신호위반 무인단속 카메라의 설치 효과를 분석하기 위해 여러 가지 지표를 선정한다. 기존 연구에서 사용하였던 사고건수, 사망률 등의 지표 대신 속도위반 무인단속 카메라의 설치 효과 지표로 사용되는 속도 및 감가속도와 함께 차량의 통행 특성을 반영하는 딜레마존을 지표로 선정한다. 또한, 딜레마존 지표의 경우 기존에 사용하던 산정식이 아닌 조금 더 현실의 통행 특성을 반영 할 수 있도록 딜레마존 시작점과 끝점에 각각 다른 통행 속도를 이용하는 산정식을 적용한다. 자료 조사를 위해서 서울시 내의 신호위반 무인단속 카메라가 설치된 교차로 중 도로선형, 종단구배 등 도로의 기하구조가 조사에 영향을 미칠 수 있는 곳을 제외하고, Landscape View기법 촬영이 용이한 교차로 6개(난곡사거리, 봉천로사거리, 양평동사거리, 문래동사거리, 서울대입구역사거리, 원당초교입구사거리)를 선정하였다. 조사 시간은 각 차량에 대해 선행 차량의 영향이 없어야 하므로 교통량이 적은 새벽시간대로 진행하였다. 속도 지표의 경우 6개의 교차로 모두 미단속지점에 비해 신호위반 무인단속 카메라가 설치된 단속지점에서 더 낮은 값으로 나타났고, 속도의 표준편차 지표는 6개의 교차로 중 4개의 교차로에서 미단속지점에 비해 단속지점이 낮게 나타났다. 단속지점의 전체 차량 통행 속도의 감소와 표준편차가 낮게 나타난 것은 신호위반 무인단속 카메라 설치의 효과가 나타난 것으로 해석된다. 딜레마존 지표는 모든 교차로에 대해 단속지점에서의 딜레마존 길이가 미단속지점에서의 딜레마존 길이보다 짧게 나타났으며, 딜레마존의 위치 또한 정지선에 가깝게 나타났다. 딜레마존의 길이가 감소할수록 교차로를 불안전하게 통과하는 구간이 짧아지는 것이므로 사고 감소의 효과가 있다. 속도 지표, 딜레마존 지표 분석 결과 모두 신호위반 무인단속 카메라의 설치의 효과가 나타나는 것으로 분석되었다.Ⅰ. 서론 1 1. 연구의 배경 및 목적 1 2. 연구의 범위 2 3. 연구의 방법 및 흐름도 2 Ⅱ. 선행 연구의 고찰 4 1. 신호위반 무인단속 카메라 4 1) 신호위반 무인단속 카메라 개요 4 2) 신호위반 검지기능 4 3) 신호위반 단속기능 4 4) 신호위반 무인단속 카메라 효과 분석 관련 연구 5 2. 속도위반 무인단속 카메라 6 3. 딜레마존 7 4. 선행연구의 한계점 및 본 연구와의 차별성 9 Ⅲ. 신호위반 무인단속 카메라 설치 효과 분석 지표 11 1. 속도 지표 11 1) 평균 속도 11 2) 속도 분산 및 표준편차 11 3) 평균 감가속도 12 2. 딜레마존 지표 13 1) 정의 및 가설 설정 13 2) 딜레마존의 시작점 14 3) 딜레마존의 끝점 14 4) 기존 딜레마존 산정식과의 비교 15 Ⅳ. 분석 지표 적용 16 1. 적용 방법 16 1) 자료수집 16 2) 자료 추출 및 적용 22 2. 분석 방법 24 1) 교차로 속도 지표 비교 분석 24 2) 차량 통행 특성 분석 31 3) 기존 딜레마존 산정식과 적용식 비교분석 35 4) 신호위반 무인단속 카메라 유무 지점 비교 분석 40 5) 소결 46 Ⅴ. 결론 48 1. 결론 48 2. 연구의 한계 및 향후과제 50 참고 문헌 51 Abstract 53Maste

도날드 워맥(Donald Reid Womack)의 피리 독주곡 <금강전도> 분석연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 음악대학 음악과, 2018. 2. 김경아.19세기 말의 개화기에 우리나라에 서양음악이 소개되면서 국악에 작곡이라는 개념이 도입된 이후, 현재까지 국악기와 국악 어법을 활용한 외국 작곡가들의 국악창작이 이루어지고 있다. 본 연구는 미국의 작곡가 도날드 워맥의 첫 번째 피리독주곡 (2017)를 연구대상으로 하였으며 본 연구의 결과는 다음과 같다. 첫째, 는 총 122마디로, Intro와 "A"∼"J"의 총 11개 부분으로 이루어져있으며, 각 부분을 나누는 기준은 주음의 이동과 박자 혹은 템포, 음역의 변화이다. 이 부분들은 곡의 템포와 주제에 따라 4개의 단락으로 구분할 수 있다. 둘째, 주제별로 특정 선율형을 활용하였다. 이 곡은 금강산 산행의 과정 및 그에 따른 심리상태를 표현한 것으로 볼 수 있다. 산행 전인 Intro 및 "A"와 산행 후인 "J"에 같은 선율형을 사용하였다. 산행을 시작하는 "B"의 선율형은 산행을 재개하는 "E"-"F'"에 활용하였다. 산행 중간을 표현한 "C"의 선율형을 변형시켜 뒤이어 나오는 휴식 부분인 "D"에서 사용했다. 산행이 고조되는 "G-"H"-"I" 부분에는 산행 초입인 "A" 의 후반부와 산행을 시작하는 "B"의 전반부의 선율형을 활용하였다. 셋째, 악곡의 조표가 아닌 임시표 및 주음과 5음을 통해 음계를 유추할 수 있다. 작곡가는 주음과 5음을 사용하여 음의 배열을 의도하였으며, 음계는 대부분 1-2음과 5-6음이 반음인 프리지안 선법으로 이루어져있다. 넷째, 곡의 긴장과 이완을 조절하는 것은 템포의 변화, 피리 선율의 음역, 도약의 높낮이, 장구 리듬의 변화, 셈여림 등이다. 다섯째, 이 곡에 나타난 전통음악적 요소는 다양한 종류의 농음, 퇴성, 추성 등의 시김새와 전통선율에서 나타나는 꾸밈음이라고 볼 수 있는데, 이는 악기의 특성을 살린 것이라고 볼 수 있다. 또한 한국 전통음악적 요소는 아니지만 악기의 특징으로 인한 요소는 주법을 이용한 포르타멘토, 극적인 셈여림 표현, 평취와 역취를 이용한 다양한 음색의 변화이다. 본 연구를 통해 발견한 내용 중 가장 주목할 만한 점은 작곡가가 전통의 개념을 국악 어법이 아닌 악기 자체에서 찾고 있다는 것이다. 작곡가는 연주자와의 교류와 악기에 대한 깊은 이해를 바탕으로 본 곡에 피리의 핵심적이고 직관적인 표현을 활용하고 있다. 이러한 방식은 포스트모더니즘 사조의 특성을 지닌 현대음악에서 본 곡이 독자성을 갖도록 하는 요소로 볼 수 있다.Ⅰ. 서론 1 1. 문제제기 및 연구목적 1 2. 선행연구 검토 8 3. 연구범위 및 연구방법 12 Ⅱ. 본론 14 1. 작곡가의 음악적 배경 및 작품 개요 14 1) 음악적 배경 및 작품 활동 14 2) 작품 개요 및 악곡 구조 21 2. 분석 26 1) 각 부분의 출현음 및 음계 26 2) Intro : 제1-5마디(5마디) 28 3) "A" : 제6-14마디(9마디) 32 4) "B" : 제15-26마디(12마디) 39 5) "C" : 제27-48마디(22마디) 45 6) "D" : 제49-54마디(6마디) 50 7) "E" : 제55-77마디(23마디) 56 8) "F" : 제78-89마디(12마디) 60 9) "G" : 제90-99마디(10마디) 65 10) "H" : 제100-108마디(9마디) 67 11) "I" : 제109-117마디(9마디) 70 12) "J" : 제118-122마디(5마디) 74 3. 피리 주법 및 시김새 분석 81 1) 포르타멘토 82 2) 농음 87 3) 퇴성 100 4) 추성 101 Ⅲ. 결론 105 참고문헌 107 Abstract 111 작곡가와의 교류 내용 114 악보 130Maste

A Comprehensive Framework and Approaches for Enhancing Mental Health in Medical Students

Research suggests that medical students frequently experience mental health problems such as stress, burnout, and depression, which may, in turn, affect suicidal ideation and behaviors. Since mental health problems profoundly impact academic achievement and professionalism, it is vital to understand factors influencing students’ mental health and identify strategies to provide the necessary support. Some relevant influencing factors range from the personal level, including gender, personality traits, perfectionism, and social support, to the environmental level, including the grading system, educational phases, exposure to patients’ death, mistreatment, and culture of medicine. In this regard, a comprehensive mental health support system that encompasses environmental interventions, as well as personal-level support, is needed. Simultaneously, proactive approaches that address the improvement of self-care and alleviation of systemic burdens are essential, together with the predominant reactive approaches focusing on problems and deficits. Altogether, we proposed a framework for enhancing mental health constructed by four categories (personal-reactive, environmental-reactive, personal-proactive, environmental-proactive) based on the intervention level and goal of support. All four categories have important implications, and one cannot replace the other, but expanding environmental-proactive support will allow more students to learn how to pursue health independently. We expect that this comprehensive framework for enhancing mental health could expand support systems for medical students’ personal and professional development.ope

Social Cognitive Theory and Medical Education: How Social Interactions Can Inform Learning

The structures and processes of medical education have changed little since the publication of Flexner’s report, which stressed the scientific orientation of medical education and the curricular structure of 2 years of formal knowledge education and 2 years of clinical experience. However, the previous perspectives on medical education are facing challenges, and these call for new pedagogy and theories on which to base medical education practice. Considering that social dimensions of learning have been emphasized in practice, perspectives that integrate these aspects are needed. Among the various learning theories, social cognitive theory refers to the theoretical framework which contends that learning occurs within interactions with others and environments. From a social cognitive standpoint, learning through observation is a critical component in human functioning. Indeed, observational learning has particular significance in medical education in that it provides the context for which the importance and meaning of role models can be understood. In addition, as theoretical constructs such as self-efficacy and outcome expectations allow us to establish an effective learning environment, exploring the concepts of the theory could be beneficial to medical education practice. In this context, the present review article aims to provide a glimpse of the fundamental assumptions and theoretical concepts of social cognitive theory and discusses the implications the theory has on teaching and learning. Further, a review of previous studies could help explain how the theory has informed medical education practice. Finally, the author will conclude with the implications and limitations of applying social cognitive theory in medical education.ope