巨细胞病毒实验室检测方法研究进展及其用于新生儿筛查的可行性

人巨细胞病毒(HCMV)感染后大多数无明显的临床症状,但可终身潜伏,并在特定条件下被激活而感染。孕期发生的HCMV活动性感染会导致流产、死胎、出生缺陷等,造成严重的经济和社会负担。由于原发性和继发性HCMV感染均可导致新生儿先天性感染,而目前无有效方法可筛查孕期HCMV继发性感染。因此对新生儿进行全面的先天性HCMV筛查,以便及早干预从而减轻先天性HCMV感染后果。文章对HCMV实验室检测的方法作一综述,并且分析其用于新生儿筛查的可行性,以期为新生儿先天性HCMV筛查方法的选择提供依据。国家自然科学基金资助项目(No.81472015,31670927

细胞角蛋白19片段抗原21-1含量化学发光微粒子定量免疫检测方法的建立

目的建立细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragment 21-1,CYFRA21-1,简称CY21-1)含量的化学发光微粒子免疫检测方法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)。方法原核表达制备重组CY21-1(r CY21-1),用其免疫BALB/c小鼠后,收集小鼠脾脏细胞,常规杂交瘤技术与Sp2/0进行融合,制备CY21-1单抗。间接ELISA法筛选可稳定分泌CY21-1抗体的杂交瘤细胞,分别标记微性磁珠(magnetic beads,MB)和吖啶酯(acridinium ester,AE),筛选可特异检测CY21-1的单抗配对,建立CY21-1 CMIA,同时验证方法的线性及灵敏度,并与同类试剂盒进行比较。结果经筛选获得了一组能特异检测CY21-1的单抗配对MB*26B5-3E4*AE,建立的CY21-1 CMIA对检测CY21-1校准品的线性范围为0.1~1 000 ng/m L,R~2=0.992 3,检测灵敏度为0.076 ng/m L。该方法与美国雅培公司生产的Abbott CY21-1 CMIA诊断试剂盒平行检测250份临床血清标本的结果具有良好的相关性(R~2=0.961 6)。结论成功建立了CY21-1 CMIA,且具有良好的线性及灵敏度,为我国肺癌的临床筛查和早期诊断奠定了基础。福建省科技重大专项(2015Y0051,2011YZ0002-1);;厦门市科技计划项目(3502Z20120008

2011年春季华南师范大学石牌校区冷凝水的化学成分特征及其来源

为深入研究广州城区的大气环境质量,于2011年春季在华南师范大学石牌校区采用人工冷凝方法采集了33个冷凝水样品,对其进行pH和阴阳离子分析,以探讨这些冷凝水的化学成分特征.结果表明,石牌校区绝大多数冷凝水样品的pH值分布范围为5.65~7.11(个别样品pH值为5.06),平均值为6.45,显示其已不属于酸雨,这在一定程度上反映出过去10多年特别是广州为迎接2010年亚运会在城市大气环境污染治理方面取得了较好的成效.冷凝水的阴阳离子总浓度(TDS)介于195.96~1267.76&mu;eq&middot;L~(-1)之间,平均为395.46&mu;eq&middot;L~(-1);各离子浓度高低依次为Ca~(2-)、SO_4~(2-)、NH_4~+、Cl~-、Na~+、NO_3~-、Mg~(2+)、K~+、NO_2~-、F~-.石牌校区冷凝水的这种离子浓度分布特征指示,其清洁程度差于香港、广东鹤山、云南丽江、青海瓦里关山等地的大气降水,而优于同期采集的石牌校区大气降水;其污染来源除部分属自然源外,还主要与建筑活动、工业生产、汽车尾气等人类活动等有密切关系.</p

Characterization of monoclonal antibodies specific to NP of avian influenza A virus and development of specific rapid test

目的筛选鉴定禽流感病毒特异性单克隆抗体(单抗)并建立一种适合禽源流感病毒特异性检测的抗原检测方法。方法利用分子进化树分析方法对甲型流感病毒核蛋白(nP)基因进行分类,从禽流感病毒分支和人流感病毒分支上各挑选一个代表性流感病毒株的nP基因进行重组抗原的表达及其单抗的筛选制备,最后应用免疫渗滤技术(A-dOT-ElISA)建立抗原快速检测方法。结果根据分子进化树分析结果确定禽流感H5n1病毒株Hk/212/2003和人流感H1n1病毒株CA/04/2009的nP基因进行原核表达,获得高纯度的禽流感病毒nP重组抗原rnP-Hk/212和人流感病毒nP重组抗原rnP-CA/04;利用上述两种nP抗原制备出抗rnP-Hk/212单抗53株,通过差异筛选获得只对禽流感病毒nP蛋白rnP-Hk/212有特异性反应而不与人流感病毒nP反应的3株单抗(1f2,5d2及25A2);免疫荧光方法证实1f2等3株单抗只特异识别禽流感病毒;利用单抗1f2成功建立一种适于禽流感病毒特异性检测的抗原快速检测方法 AIV-dOT-ElISA,该方法对病毒滴度为0.025~0.1HA TITEr的19个不同亚型的禽流感病毒均能检出,对病毒滴度为5HA TITEr的8个人流感病毒和2个乙型流感病毒的检测均为阴性。结论本研究成功制备出禽流感病毒nP蛋白特异性单抗,并建立了一种仅特异识别禽流感病毒的抗原快速检测方法 AIV-dOT-ElISA,为快速鉴别禽类流感病毒和人类流感病毒感染提供了一种有用的分析检测工具。Avian influenza A virus strain HK/212/2003(H5N1)and human influenza A virus strain California/04/2009(H1N1)were chosen for expression of recombinant NP antigen and preparation of anti-NP monoclonal antibodies(mAbs).Fifty-three anti-NP mAbs were obtained by immunizing BALB/c mouse with recombinant NP antigen of rNP-HK/212.All mAbs were characterized with avian influenza A virus recombinant NP antigen rNP-HK/212 and human influenza A virus recombinant NP antigen rNP-CA/04 in ELISA and divided further into three classes based on their reactivity to the two recombinant NP antigens.Forty-five of the ClassⅠ mAbs reacted both with rNP-HK/212 and rNP-CA/04.Three of the ClassⅡ mAbs reacted only with rNP-HK/212 but not rNP-CA/04,implying that ClassⅡ mAbs might recognize a specific epitope on NP of avian influenza A virus.Five of the ClassⅢ mAbs reacted with both two recombinant NP antigens but had weaker reactivity with rNPHK/212.Then,a rapid test for detection of avian influenza A virus was developed based on an enzyme immune-filtration system,AIV-Dot-ELISA.This test was demonstrated to have reactivity with all nineteen different subtypes of influenza A virus strains at the virus titer of 0.025 to 0.1HA titer,but negative reactivity with eight human influenza A virus strains and two influenza B virus strains even at the virus titer of 5HA titer.Our results will provide a tool to directly differentiate infection by avian influenza A virus from human influenza virus.“重大新药创制”国家科技重大专项(No.2011ZX09102-009-12); 国际科技合作项目(No.2012DFH30020); 国家863项目(No.2012AA02A307)联合资助~

A standardized checklist on meta-analysis reporting in the open science era

荟萃分析(又称元分析)以量化方式综合实证研究结果,是积累整合证据并推进基础与应用研究的重要工具.在开放式科学这种新型研究实践下,荟萃分析是整合开放数据、进行科学推断的重要手段.但荟萃分析的过程繁复、方法多样,其执行上的严谨性对荟萃分析质量影响较大,因此报告的透明性和开放性对其结果的可重复性尤为重要.为了解中文荟萃分析报告规范性的现状,让更多研究者了解荟萃分析报告的规范性与透明性,提升荟萃分析报告的质量,本文以国际学界广泛使用的系统综述和荟萃分析优先报告条目(Preferred Reporting Items for Systematic reviews and Meta-Analyses, PRISMA)以及开放式科学理念为基础,结合基于效应量的荟萃分析报告特点,拟定《开放与可重复荟萃分析的报告清单》(Preferred Reporting Items for Open and Reproducible Metaanalysis, PRIOR-MA),并以心理学中的荟萃分析为例,对近五年国内发表的68篇中文荟萃分析的方法和结果部分进行回顾.基于结果,本文建议荟萃分析报告需要在以下方面进一步加强其开放性与透明性:文献搜索的时间及限制、研究筛选和数据收集过程的细节、文章筛选的流程图、效应量转换的细节、单个研究偏倚状况的评估等.本文为开放式荟萃分析提供了一个较为全面的报告清单(PRIOR-MA),为未来荟萃分析研究提供了参考.</p