AHPN衍生物的合成及其与RARγ的结合活性研究

目的本实验以6-{3’-(1-金刚烷基)-4’-羟基苯基}-2-萘甲酸(AHPN)母核为结构基础,设计、合成一系列AHPN衍生物,并对这些衍生物做初步的活性筛选,期望找到活性显著的衍生物。方法以对溴苯酚和1-金刚烷醇为原料经取代、缩合、氧化、还原等反应合成AHPN衍生物,经过1H-NMR、13C-NMR、HR-MS表征,并利用Biacore技术检测衍生物与蛋白质之间的结合能力。结果衍生物7c、6c、6e、6h显示出了显著优于先导化合物AHPN与视黄酸核受体γ(RARγ)的结合能力,亚磷酸二甲酯基与氮杂环的引入提高了该类化合物的活性。结论该类AHPN衍生物与RARγ结合能力显著,有进一步研究的价值。扬州市邗江区科技计划项目资助;;福建省基金项目资助(2014Y0044);;国家海洋局第三海洋研究所基本科研业务费专项资金资助项目(海三科2016044

氯仿至全氯代稠环芳烃的液相电弧合成

以石墨电极在惰性气氛中放电,已成功地合成了C_（60）等碳原子簇。Grosser等人将此反应在氰气与氯气氛中进行,获得了一系列“棒状分子”与全氯代芳烃。我们又将这样的放电反应进一步扩展至溶液体系,将产生原子团簇的物理方法与传统的化学合成方法结合起来。最近,我们分析和研究了在液态的氯仿中放电的产物,在其中先后分离出六氯代苯（Ⅰ）、全

Bone Proteomic Analysis About Chinese Medicine Action On Rat Ovariectomy Model of Osteoporosis.

目的:用蛋白质组学的方法对绝经后骨质疏松症和中药作用机理进行研究,有利于临床防治该疾病。方法:建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型,设立中药治疗组及假手术对照组,6周后骨质疏松症模型成功,行骨形态学检查,提取骨组织蛋白质样品,双向电泳分离,得到各组骨组织总蛋白质分子解剖图谱,用图像分析软件,分析各组间差异蛋白质点,MADITOF/MS质谱分析,结合蛋白质生物信息库(Matrix science Ltd database),对各蛋白质初步鉴定。结论:鉴定了3个差异蛋白,分别为P1硫氧还蛋白过氧化酶1(Thioredoxin peroxidase 1),P2为阻凝蛋白轻链肽2(Myosin light polypeptide 2),P3为泛素化酶E2-17KD(ubiquitin-conjugating enzyme E2-17kD)。初步认为这三种蛋白质在绝经后骨质疏松症的发病及中药治疗过程中发挥着重要调控作用。Objective:To study the mechanism about osteoporosis of OVX(ovariectomy) and Chinese Medicine action on osteoporosis in proteomics,it is of benefit to prevent and cure this disease.Methods:Bilateal OVX in rats was performed as osteoporosis model.Rat was randomly divided into three groups:control group,osteoporosis model group and Chinese Medicine therapy group.The pathology of bone was examined after 6 weeks.In the present proteomic study,we characterized the protential effects of OVX and Chinese Medicine on protein expression in rat bones.Using two-dimensional gel electrophoresis,mass spectrometry,and Matrix science Ltd database,we elementarily identified three variational proteins.Conclusions:Three proteins were identified as proteins similar to thioredoxin peroxidase 1,Myosin light polypeptide 2 and ubiquitin-conjugating enzyme E2-17kD.These proteins have been demonstrated to be postmenopausal proteins.These results can provide valuable experimental evidences for the research for the molecular mechanism of osteoporosis which was response to OVX and Chinese Medicine in bone.国家自然科学基金项目(基金号:30400606); 广东省自然科学基金项目(基金号:04010036);; 广东省科技厅项目(基金号:粤科社字2004,139号);; 广州中医药大学创新基金项目(基金号:K004044

Bone Proteomic Analysis About Chinese Medicine Action on Rat Glucocorticoid-induced Model of Osteonecrsis.

目的:用蛋白质组学的研究方法进行激素性骨坏死的病理和中药作用机理的研究,有利于临床治激素性骨坏死。方法:按照常用激素性骨坏死的造模方法,建立大鼠坏死模型,并设立中药治疗组及空白对照组,经过6周处理后经骨形态学检查,确定骨坏死造模成功,处死动物取股骨和肱骨,提取骨组织蛋白质样品,双向电泳分离,得到各组骨组织总蛋白质分子解剖图谱,用图像分析软件,找到各组间差异蛋白质点,进一步行胶内酶切,M AD ITOF/M S质谱分析,得到各差异点的蛋白质肽指纹图谱,结合蛋白质生物信息库(M atrix sc ience L td database),对各蛋白质进行初步鉴定。结论:初步鉴定了3个差异蛋白,分别为阻凝蛋白重链ⅡB、磷脂谷胱甘肽过氧分酶及泛素化酶E 2(MW:17 kd),初步认为这三种蛋白质在激素性骨坏死的发病及中药治疗过程中发挥着重要调控作用。Objective:To study the mechanism about glucocorticoid-induced osteonecrosis and Chinese Medicine action on osteonecrosis in proteomics,it is beneficial to prevention and cure this disease.Methods:Rat was randomly divided into three groups:cortrol group,osteonecrosis model group and Chinese Medicine therapy group.In the present proteomic study ,we characterized the potential effects of glucocorticoids and Chinese Medicine on protein expression in rat bone.Using two-dimensional gel electrophoresis,mass spectrometry,and Matrix science Ltd database,we elementarily identified three variational proteins.Conclusion:Three proteins were identified as proteins similar to Myosin heavy chain ⅡB,Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase and ubiquitin-conjugating enzyme E2-17kD.These proteins have been documented to be glucocorticoid-relted proteins.These results can provide valuable experimental evidences for the research of the molecular mechanism of osteonecrosis response to glucocorticoids and Chinese Medicine in bone.获得国家自然科学基金资助(30273631,3010244);; 广东省自然科学基金(020778);; 广东省教育厅基金(Z02011

多氯代甲烷在液相电弧中的聚合反应

将氯仿或四氯化碳在液相中以高压电弧放电,得到多种聚合产物。通过对反应产物的分离与分析,发现它们主要是全氯代有机化合物(包括烷烃、烯烃与芳烃)及球烯。由此可以肯定所有反应物在电弧的作用下首先生成二氯卡宾,然后进一步聚合成各种产物。值得注意的是,反应生成的全氯代苊烯、苯并苊烯、碗烯、“半球烯”等均为C_(60)的全氯代碎片,是生成C_(60)的中间产物。其中苊烯或苯并苊烯的生成在体系中引入了五元环,是生成C_(60)的一个关键步骤。据此提出了反应的详细历程,由此可能揭示出C_(60)等球烯的生成过程与机理

庚型肝炎病毒基因在大肠杆菌中表达的初步研究

利用原核表达载体 pRSET或 (和 )pGEX在大肠杆菌内表达了覆盖庚型肝炎病毒 (HGV)C NS3和NS5区的多段基因。CE1、E2、NS3、NS5及NS3 NS5嵌合基因等的 8段基因均有高效表达 ,各重组蛋白产量与菌体总蛋白之比在 10 %～ 35 %之间。对以上重组蛋白进行免疫学筛选 ,证实其中 7个重组蛋白均具免疫学活性 ,在一定程度上确定了重组HGV抗原表位的分布 ,为HGV的血清学和免疫学诊断试剂的研究奠定了坚实基

中国HTLV-Ⅰ env基因的克隆及Ⅰ+Ⅱ型嵌合基因的原核表达与抗原活性检测

为尽快研制出国产HTLV抗体诊断试剂 ,首先从福建HTLV流行区 1名HTLV感染者外周血细胞中克隆出HTLV Ⅰ的全长膜基因 (env) ,继而结合文献报道、PSA软件的亲疏水性分析和EPI软件的B细胞表位分析数据 ,选择了gp46中段开始延伸至 gp2 1N端 2 12个氨基酸 (aa185～aa396 )的基因 ,并在 3′端通过 (GlySer) 2 与人工合成的HTLV Ⅱ型的型特异性表位区基因嵌合 ,插入原核表达载体 pRSET ,在 E .coli中得到了高效表达 ,目的蛋白产量约占菌体总蛋白的 30 %。通过Triton X10 0洗涤 ,低浓度尿素逐步变性处理 ,8mol/L尿素溶解后纯度在 75 %左右 ,经电泳洗脱纯化 ,最终纯度可达 95 %左右 ,纯蛋白得率约 40 %。经Westernblotting检测 ,该蛋白对 4份HTLV Ⅰ型和 2份HTLV Ⅱ型血清均有较强反应 ,而对 4份阴性血清无反应 ,从而有可能用于研制HTLV抗体诊断试剂盒

应用噬菌体随机肽库技术筛选戊型肝炎病毒中和表位模拟肽

以识别戊型肝炎病毒 (HEV)构象依赖性中和表位的单克隆抗体 8C11、8H3作为固相筛选分子 ,对噬菌体随机 7肽库进行 4轮筛选后 ,随机挑取单克隆噬菌体进行测序。合成优势 7肽序列基因 ,将其插入HBcAgAA78 83位置之中 ,进行原核表达 ,所获重组蛋白经蛋白印迹实验证实可与相应单抗结合 ,电镜下可见重组蛋白能形成与HBcAg相似的类病毒颗粒。化学合成单抗 8H3筛选出的优势 7肽 ,所获 7肽经生物传感器结合实验证实与单抗8H3结合。这些结果提示用噬菌体 7肽库可以筛选出部分模拟构象性表位的短肽 ,为亚单位疫苗的研制提供了新的思路

益气化痰方对抑郁模型大鼠行为学的影响

目的:观察比较中药复方益气化痰方不同剂量配比对抑郁模型大鼠行为学的影响。方法:雄性大鼠随机分为正常组、模型组、益气化痰Ⅰ组、益气化痰Ⅱ组,以孤养加慢性轻度不可预见性应激方法建立大鼠抑郁症模型,采用Open-Field法、1%蔗糖水消耗实验及体重变化观察抑郁模型大鼠的行为学变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠糖水消耗量明显减低,水平得分、垂直得分、修饰次数和大便颗粒数均明显下降,且体重增长缓慢,有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,益气化痰Ⅰ组、益气化痰Ⅱ组均能够不同程度增加糖水消耗量、垂直得分、大便颗粒、修饰次数和体重,较模型组有显著性差异(P<0.05);且益气化痰Ⅰ组改善作用更明显。结论:益气化痰方能有效的改善抑郁模型大鼠的行为学变化;其中补气药作用明显优于化痰药