Research and Application of Software Project Requirement Management Technology for Specialized Companies

随着信息技术的飞速发展，软件产品的规模也越来越庞大，目前国内许多软件企业已将软件作为工程，积极将软件项目管理引入开发活动之中，然而，许多中小型软件企业由于受到资金、人才力量、开发人员素质、工期、技术难度、用户协作等因素的限制，很难采用现有的商用项目管理软件指导软件开发，如何利用现有资源制定适合自身的软件项目管理模式就显得尤为重要。 软件需求管理是软件项目管理中一项十分重要的工作，调查显示因需求变更原因导致项目失败的软件项目比率约占45%，因此，管理好需求工作将对软件项目能否最终实现产生至关重要的影响。本文首先对软件项目管理目前的理论研究状况进行了分析，提出运用多种观点、理论、标准和软件开发模...Due to the difficulties such as, lack of funds, workload underestimated, talent shortage, developers’ quality and technical issues, it is difficult for the small and medium software companies to adopt existing commercial management software to manage software project development. How to make good use of existing resources to develop its own software project management model is particularly importa...学位：工程硕士院系专业：软件学院_工程硕士(软件工程)学号：X200723007

红色荧光蛋白在毕赤酵母中的高效表达

报道了红色荧光蛋白(DsRFP)在毕赤酵母中的高水平表达.利用PCR技术从YEpFLAG- 1 -DsRFP扩增出DsRFP编码序列,克隆到毕赤酵母胞内表达载体pPIC3. 5K构建重组表达载体pPIC3. 5K- DsRFP,电击转化进毕赤酵母,G418 RDB平板双重筛选后获得重组转化子,经MM/MD平板培养与PCR鉴定,重组子全部为HIS+MUT+表型.重组菌株诱导表达48h后获得了高效表达,摇瓶中表达水平达到细胞内总蛋白的12%,表达量达到1. 8g/L.经硫酸铵分级沉淀,DEAE- 5PW阴离子交换柱层析与S- HyperD阳离子交换柱层析后获得电泳纯蛋白.说明我们建立的毕赤酵母表达应用平台具有高效表达外源蛋白的能力

戊型肝炎病毒衣壳蛋白中和表位间的构象诱导

重组蛋白NE2包含了戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白(pORF2)的aa394～606片段。在NE2上已鉴定出了2个HEV中和表位,并获得了3个识别中和表位的单克隆抗体(MAb)8C11、13D8和8H3。这3个MAb间的交叉阻断ELISA实验发现,8C11和13D8可以彼此完全阻断,8H3对8C11和13D8均不能阻断,而8C11非但不能阻断8H3,反而显著增强了8H3与抗原的结合。用生物传感器进行的抗体与抗原结合的动力学分析也证实了这一现象。这些结果提示,在NE2上8H3表位区域受到抗原上某些结构的掩盖,而8C11与NE2的结合引起了抗原空间结构的改变,导致了掩盖8H3表位的结构的去除和8H3表位的充分暴露。免疫捕获RT PCR发现,8C11同样可以显著增强8H3对天然HEV病毒的捕获能力,提示这种结合诱导的衣壳蛋白空间构象改变在天然HEV病毒颗粒上同样存在

SARS冠状病毒核衣壳(N)蛋白不同区域的原核表达

利用大肠杆菌表达系统对SARS冠状病毒的核衣壳(N)蛋白全长及N末端或/和C末端缺失突变体进行了表达,共表达了39个重组蛋白,表达量在15%～30%之间。分别利用电洗脱或金属鳌合介质纯化重组蛋白,用蛋白印迹实验检测纯化蛋白对SARS病人恢复期血清的反应性,结果发现全长N蛋白活性最好,其余的末端缺失蛋白均无法达到同一活性水平。由此说明N蛋白的完整性对于其优势表位的充分暴露是必要的

大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒ORF2片段的聚合现象研究

在大肠杆菌中表达了戊型肝炎病毒 (HEV)ORF2的a .a .394～a .a .6 0 4片段 ,得到的重组蛋白NE2在SDS PAGE中主要以可被尿素解聚的二聚体形式存在 ,二聚体对病人血清的反应性明显强于单体 ;质谱分析表明NE2可形成从二聚体到至少六聚体的多种聚体 ;动态光散射测定表明平均分子半径约 4nm ,相当于四聚体 ,但分散度较大 ,提示为多种大小不一的聚合体的混合物。这些证据表明NE2蛋白可形成以同源二聚体为基本单位的多种聚合体形式 ,其中以二聚体间的结合最为紧密 ,并且以二聚体为基础可进一步装配出多种更高级结构 ,从而具有作为HEV疫苗及诊断试剂抗原的良好前景

颗粒化重组戊型肝炎病毒衣壳蛋白及其抗原性与免疫原性

过去的研究发现大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒 (HEV)衣壳蛋白ORF2的aa3 94_60 6片段NE2可以形成同源多聚体 ,并具有良好的免疫保护性 ,但纯化后的免疫原性较弱。这里表达了 3个NE2蛋白的N端延伸突变体 ,发现对应于ORF2aa3 68_60 6的重组蛋白HEV 2 3 9在体外可以形成颗粒性抗原。HEV 2 3 9抗原颗粒与戊肝患者血清反应性良好 ,对中和性单克隆抗体 8C11的反应性与NE2抗原相当 ,而对另一中和性单克隆抗体 8H3的反应性较NE2抗原有显著提高 ,表明HEV 2 3 9抗原颗粒具有比NE2更好的抗原性。纯化后的HEV 2 3 9抗原颗粒直径约为 15～3 0nm。铝佐剂吸附的HEV 2 3 9免疫Balb c小鼠的半数有效剂量 (ED5 0 )在 0 0 8～ 0 2 5μg之间 ,而同样以铝佐剂吸附的NE2抗原 60 μg剂量免疫的抗体阳转率仅 2 5% ,表明HEV 2 3 9抗原颗粒具有更好的免疫原

集美大学2002级福建籍新生肝炎感染现状

目的　了解集美大学 2 0 0 2级福建籍新生甲、乙、戊 3型肝炎感染情况。方法　采用血清流行病学调查方法。结果　学生中抗HAV -IgG ,HBsAg和抗HEV -IgG阳性率分别为 77.0 8% ,1 5 .2 3 % ,1 7.1 5 % ,地区差异明显 ;HAV ,HEV无性别差异 ,而HBV以男性为高 ;农村HAV和HBV感染率均高于城镇 ,而HEV感染率无城乡差别。结论　应该加强对本地区大学生的甲、乙肝预防 ,急需研究出一种有效的戊肝疫

传染性非典型肺炎病毒核蛋白的表达与活性检测

用PCR方法,人工合成传染性非典型肺炎病毒(SARS-CoV)核蛋白(N)全编码基因,并构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达。结果重组N蛋白表达产量占菌体总蛋白的40％以上,主要以可溶形式存在。用SARS患者急性期血清进行蛋白印迹检测,表明可溶形式和包含体形式均有明显活性。包含体形式的重组蛋白经纯化后纯度可达90％以上,活性与纯化前相当,可作为SARS抗体诊断试剂盒的抗原原料

戊型肝炎病毒衣壳蛋白同源二聚体的相互作用结构域

为了探讨戊型肝炎病毒衣壳蛋白同源二聚体形成的关键区域和相互作用结构域 ,以及二聚体形成与主要天然中和表位的形成之间的关系 ,通过末端缺失、定点突变技术研究戊型肝炎病毒 (HEV)ORF2的aa394_aa6 0 6片段NE2的聚合现象 ,发现其C端的aa5 97_aa6 0 2 (AVAVLA)疏水区是该片段同源聚合的核心区域 ,提高该区域氨基酸的亲水性将妨碍聚合现象的发生 ;半胱氨酸化学交联实验表明NE2形成同源二聚体时 ,aa5 97在空间位置上相接近 ,处于可生成化学键的距离 ,提示所处区域为疏水聚合的作用结构域 ;通过Blast程序估算核心区域的天然突变率 ,发现其疏水性高度保守 ;N端缺失实验表明 ,至少 6 5个氨基酸既不影响同源聚合也不直接参与主要的天然中和表位的形成 ,但可协助中和表位构象的形成 ,而这种协助作用可被ORF2的末端肽段所代替。aa5 97_aa6 0 2 (AVAVLA)疏水区为戊肝病毒衣壳组装的第一步骤的核心区域 ,并与重要的天然中和表位的形成直接相关 ,从而为戊肝病毒疫苗的研究提供更详细的信息

Research of Perceived Travel Risk and Consumer's Purchase Intention of Short-term Accident Insurance

近年来，随着经济的快速发展和人们生活水平的不断提高，选择外出旅游作为休闲放松方式的居民不断增加。旅游业的发展一定程度上催生并推动了旅游保险市场。但总体来看，旅游保险的普及率相对于旅游业的发展速度，仍表现出滞后的趋势。本研究以旅游短期意外险为基础，探讨面对旅游风险时，消费者对短期意外险的购买意愿，并尝试通过消费者的卷入度和对旅游短期意外险的价值感知，来分析消费者对旅游保险有一定程度的接受度但购买率仍不高的原因。研究结果表明： （1）消费者感知到的旅游风险与其对旅游保险的价值感知和购买意愿显著相关，消费者感知到的旅游风险越高，对旅游保险的价值感知更高，同时也对旅游保险有更强的购买意愿，其中感知旅游保险价值中介了感知旅游风险对旅游保险购买意愿的影响。 （2）根据上述结果，将短期意外险价值感知分维度的中介效应概括如下：旅游保险的情感价值中介了身体风险、设施风险和服务风险对消费者购买意愿的影响，旅游保险的质量价值中介了身体风险、设施风险、服务风险对消费者购买意愿的影响，旅游保险的价值价值中介了社会风险对消费者购买意愿的影响。旅游保险价值感知四个维度中，社会价值的中介作用不显著。</p