Fas ligand and Anti-human DR5 monoclonal antibody induce tumor cell lines apoptosis

目的探讨FasL、Anti-DR5mAb对肿瘤细胞Hela、BGC823、MCF-7、L342、H9101、D6的杀伤作用及机制。方法采用RT-PCR、MTT比色法、电泳、DNA倍体分析、Westernblot等方法。结果H9101、Hela细胞株DR5mRNA水平有表达,D6细胞无表达;H9101、L342细胞株FasmRNA水平有表达,D6细胞无表达。H9101、L342细胞株对FasL、Anti-DR5mAb敏感并呈剂量依赖性;MCF-7、BGC823细胞株对FasL敏感,对Anti-DR5mAb相对敏感。Hela对FasL相对敏感,对Anti-DR5mAb敏感;D6对两种凋亡诱导剂耐受。结论FasL、Anti-DR5mAb能不同程度地诱导肿瘤细胞凋亡,其机制与Fas、DR5、Caspase-8、Bcl-2的表达有关。 【英文摘要】 Objective:To study the cytotoxic effects on tumor cell lines Hela,BGC823,MCF-7,L342,H9101,D6 induced by Fas ligand and anti-human DR5 monoclonal antibodies(Anti-DR5 mAb) and the underlying mechanism.Methods:Fas/DR5 mRNA were detected by RT-PCR. Cytotoxicity exerted by FasL/Anti-DR5 mAb on tumor cell lines was measured by MTT colorimetry and the induced apoptosis was determined by agarose gel electrophoresis.Results:The expression of DR5 on BGC823 and Hela cells were higher and DR5 didn’t express in D6. The ...厦门大学科研启动基金(No.Z03103)资

死亡受体5胞外区域的重组、表达及活性鉴定

目的构建死亡受体5(deathreceptor5,DR5)胞外区域(eDR5)的表达载体,表达纯化重组蛋白并鉴定其生物特性。方法通过重叠PCR获得DR5胞外段编码序列,构建pET-22b(+)/DR5表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni2+柱亲和纯化,SDS-PAGE、直接ELISA鉴定纯化产物的纯度和特异性,用MTT法检测eDR5蛋白阻断DR5单克隆抗体FMU1.5和TRAIL诱导人胶质瘤细胞株U343(高表达DR5)、U373(低表达DR5)细胞凋亡的作用。结果获得了DR5胞外段编码序列,目的蛋白在上清及包涵体中都有表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化的重组蛋白纯度达95%以上,蛋白产量达9mg/ml。ELISA结果表明所纯化蛋白为eDR5。eDR5蛋白可部分阻断FMU1.5和TRAIL诱导人胶质瘤细胞株U343细胞凋亡的作用,其阻断率与DR5表达相关。结论死亡受体5胞外段基因的成功重组、表达及纯化,为进一步的功能研究奠定了基础

Double-arm four-wheel polling robot mechanism

本发明涉及一种移动机器人，具体地说是一种双臂四轮式巡检机器人机构，包括箱体及结构相同的前、后手臂机构，前、后手臂机构分别安装在箱体上，每个手臂机构上均包括行走机构、翻转机构、俯仰机构、夹紧机构及支撑臂，支撑臂的一端与箱体相连，另一端铰接有俯仰机构，俯仰机构的两端分别设有前、后翻转机构，可由水平状态翻转至垂直状态的前、后行走机构分别连接于前、后翻转机构的输出端，前、后行走机构及前、后翻转机构与俯仰机构连动；在前、后行走机构的正下方设有安装在支撑臂上、可上下移动夹紧地线的夹紧机构。本发明机器人机构具有安全保护性好，爬行越障能力强，工作空间大，应用范围广等优点