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    Caracterización morfométrica y seminal de reproductores de Clarias gariepinus en épocas pre-reproductiva y reproductiva

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    Background: Artificial breeding of Clarias gariepinus entails sacrificing the male, which is necessary to know the semen’s physical features and variations for preservation during the pre-breeding stage, and its utilization for the breeding stage. To characterize the morphometric changes and seminal quality of Clarias gariepinus during the pre-breeding (PRS) and breeding (BS) stages. Methods: A number of 42 breeding males were evaluated in the two stages, using weight (LW) (kg), length (LT) (cm), gonadal weight (GW), and seminal vesicles (SVW) (g), condition factor (CF), gonadosomatic index (GSI), and seminal-somatic vesicles index (S-SVI). Samples from testicle’s semen (TS) and seminal plasma/testicle’s semen (SP-TS) were collected. Their color, testicle seminal volume (TSV), and seminal plasma volume (SPV) (ml), motility, sperm activation time (SAT) (sec), sperm concentration (SC) (x109 sptz/ml), and spermatocrits (SPCTO) (5), were evaluated. An analysis of variance of the variables was conducted, considering the time as the variation source, along with a Pearson correlation analysis. Results: The LW, GW, and SGI increased significantly (P<0.05) during the BS). The TSV and SPV were lower in the PBS, with a higher SC. The creamy semen showed high SC (21.14 ± 2.90 x 109 sptz/ml) and SPCTO (19.50 ± 1.24 %), whose correlation was moderate (r=0.58, P<0.001). Conclusions: The breeding males with low SGI and aqueous semen should be rejected due to their low cellular density. SC can be predicted through the spermatocrit, so that high-quality semen can be available during the PBS through conservation. Keywords: Clarias gariepinus, seminal features, stage, morphometry (Source: MeSH)Antecedentes: La reproducción artificial en Clarias gariepinus implica sacrificar el macho; se precisa conocer las características físicas del semen y sus variaciones, para su conservación en época pre-reproductiva y su aprovechamiento en la campaña de reproducción. Objetivo: Caracterizar los cambios morfométricos y la calidad seminal en Clarias gariepinus durante las épocas pre-reproductiva (EPR) y reproductiva (ER). Métodos: Se evaluaron 42 reproductores machos, en ambas épocas, mediante los indicadores peso (PV) (kg), largo (LT) (cm), peso gonadal (PG) y de vesículas seminales (PVS) (g), factor de condición (FC), índices gonadosomático (IGS) y vesículas seminales-somático (IVS-S). Se colectaron muestras de semen testicular (ST) y semen testicular-plasma seminal (ST-PS), con evaluación del color, consistencia, volumen seminal testicular (VST) y del plasma seminal (VPS) (ml), motilidad (%), tiempo de activación espermática (TAE) (sg), concentración espermática (CE) (x109 sptz/ml) y espermatocrito (SPCTO) (%). Se realizó un análisis de varianza de dichas variables considerando la época como fuente de variación y un análisis de correlación de Pearson. Resultados: Se incrementaron significativamente (P<0,05) el PV, PG e IGS en ER. El VST y VPS fueron inferiores en EPR, con mayor CE. El semen cremoso mostró elevadas CE (21,14 ± 2,90 x 109 sptz/ml) y SPCTO (19,50 ± 1,24 %); cuya correlación fue moderada (r=0,58, P<0,001). Conclusiones: Se deben descartar los reproductores machos con bajo IGS y semen acuoso, por su baja densidad celular. Es posible predecir la CE a través del espermatocrito y disponer de semen de buena calidad en EPR para su conservación. Palabras clave: Clarias gariepinus, características seminales, época, Morfometría (Fuente: MeSH) &nbsp

    Caracterización morfométrica y seminal de reproductores de Clarias gariepinus en épocas pre-reproductiva y reproductiva

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    Antecedentes: La reproducción artificial en Clarias gariepinus implica sacrificar el macho; se precisa conocer las características físicas del semen y sus variaciones, para su conservación en época pre-reproductiva y su aprovechamiento en la campaña de reproducción. Objetivo: Caracterizar los cambios morfométricos y la calidad seminal en Clarias gariepinus durante las épocas pre-reproductiva (EPR) y reproductiva (ER). Métodos: Se evaluaron 42 reproductores machos, en ambas épocas, mediante los indicadores peso (PV) (kg), largo (LT) (cm), peso gonadal (PG) y de vesículas seminales (PVS) (g), factor de condición (FC), índices gonadosomático (IGS) y vesículas seminales-somático (IVS-S). Se colectaron muestras de semen testicular (ST) y semen testicular-plasma seminal (ST-PS), con evaluación del color, consistencia, volumen seminal testicular (VST) y del plasma seminal (VPS) (ml), motilidad (%), tiempo de activación espermática (TAE) (sg), concentración espermática (CE) (x109 sptz/ml) y espermatocrito (SPCTO) (%). Se realizó un análisis de varianza de dichas variables considerando la época como fuente de variación y un análisis de correlación de Pearson. Resultados: Se incrementaron significativamente (P<0,05) el PV, PG e IGS en ER. El VST y VPS fueron inferiores en EPR, con mayor CE. El semen cremoso mostró elevadas CE (21,14 ± 2,90 x 109 sptz/ml) y SPCTO (19,50 ± 1,24 %); cuya correlación fue moderada (r=0,58, P<0,001). Conclusiones: Se deben descartar los reproductores machos con bajo IGS y semen acuoso, por su baja densidad celular. Es posible predecir la CE a través del espermatocrito y disponer de semen de buena calidad en EPR para su conservación

    Variación estacional de las características seminales del bagre rayado Pseudoplatystoma metaense (Telostei, pimelodidae)

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    Objective. To determine the quality variation, the ionic content and the osmolality in Pseudoplatystoma metaense seminal plasma during the reproductive period. Materials and methods. Sexually mature males were used during a reproductive season (march to august). The spermiation was induced with Carp Pituitary Extract (4 mg/kg). Volume (mL), masal motility (%), activation time (sc), spermatocrit (%), sperm concentration (106 sptz/ìL) and viability (%) were evaluated. Also, motility (%) and individual speed through a Computer-Assisted Semen Analysis (CASA) were determined. The Osmolarity (mOsm/kg), the ions (Na+, Cl+, K+ and Mg2+) and the glucose concentration were determined in seminal plasma obtained by centrifugation at 14.000 g. The ions and glucose concentration were established through a reflectance system. Results. Sperm showed masal motility greater than 90%, with the lowest rapid linear progressive motility in the month of april (34.9±9.0%) and general levels of spermatozoa inmotile less than 10%. The seminal plasma showed an osmolarity of 259.3±3.5 mOsm/kg, with an average concentration of glucose and ions Na+, Cl+, K+ and Mg2+ of 142.7±2.8, 118±2.2, 4.8±0.4 and 0.33±0.0 mmol/L, respectively, during the reproductive season. Conclusions. The semen quality of bagre rayado presented no changes during the breeding season, and showed a high quality for the process of fertilization.Objetivo. Determinar la variacion de la calidad, el contenido ionico y la osmolaridad del plasma seminal de Pseudoplatystoma metaense durante la estacion reproductiva. Materiales y metodos. Se utilizaron machos sexualmente maduros durante un periodo reproductivo (marzo a agosto). La espermiacion fue inducida con Extracto de Hipofisis de Carpa (4 mg/kg). Se evaluo el volumen (mL), movilidad masal (%), tiempo de activacion (sg), espermatocrito (%); concentracion espermatica (106 sptz/�ÊL) y viabilidad (%). Tambien fue determinada la movilidad (%) y velocidad individual por medio de un Sistema de Analisis Espermatico Asistido por Computador (CASA). La osmolaridad (mOsm/Kg) y la concentracion de iones (Na+, Cl+, K+ y Mg2+) y glucosa fue determinada en plasma seminal obtenido por centrifugacion del semen a 14.000 g. La concentracion de iones y glucosa fue establecida a traves de un sistema de reflectancia. Resultados. El semen de Pseudoplatystoma metaense presento una movilidad masal mayor al 90%, con el menor valor de movilidad progresiva lineal rapida para el mes de abril (34.9�}9.0%) y en general valores de espermatozoides inmoviles menores al 10%. El plasma seminal mostro una osmolaridad de 259.3�} 3.5 mOsm/Kg, con una concentracion promedio de glucosa e iones Na+, Cl+, K+ y Mg2+ de 142.7�}2.8, 118�}2.2, 4.8�}0.4 y 0.33�}0.0 mmol/L, respectivamente, durante la epoca reproductiva. Conclusiones. La calidad seminal de bagre rayado no presento variaciones en la estacion reproductiva mostrando una alta calidad para los procesos de fecundacion

    Variación estacional de las características seminales del bagre rayado Pseudoplatystoma metaense (Telostei, pimelodidae)

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    Objetivo. Determinar la variación de la calidad, el contenido iónico y la osmolaridad del plasma seminal de Pseudoplatystoma metaense durante la estación reproductiva. Materiales y métodos. Se utilizaron machos sexualmente maduros durante un periodo reproductivo (marzo a agosto). La espermiación fue inducida con Extracto de Hipófisis de Carpa (4 mg/kg). Se evaluó el volumen (mL), movilidad masal (%), tiempo de activación (sg), espermatocrito (%); concentración espermática (106 sptz/µL) y viabilidad (%). También fue determinada la movilidad (%) y velocidad individual por medio de un Sistema de Análisis Espermático Asistido por Computador (CASA). La osmolaridad (mOsm/Kg) y la concentración de iones (Na+, Cl+, K+ y Mg2+) y glucosa fue determinada en plasma seminal obtenido por centrifugación del semen a 14.000 g. La concentración de iones y glucosa fue establecida a través de un sistema de reflectancia. Resultados. El semen de Pseudoplatystoma metaense presentó una movilidad masal mayor al 90%, con el menor valor de movilidad progresiva lineal rápida para el mes de abril (34.9±9.0%) y en general valores de espermatozoides inmóviles menores al 10%. El plasma seminal mostró una osmolaridad de 259.3± 3.5 mOsm/Kg, con una concentración promedio de glucosa e iones Na+, Cl+, K+ y Mg2+ de 142.7±2.8, 118±2.2, 4.8±0.4 y 0.33±0.0 mmol/L, respectivamente, durante la época reproductiva. Conclusiones. La calidad seminal de bagre rayado no presentó variaciones en la estación reproductiva mostrando una alta calidad para los procesos de fecundación

    Produção e qualidade do sêmen da piava Megaleporinus obtusidens: efeito do harmônio liberador de gonadotropina e da solução ativadora

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    Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2017.A piava Megaleporinus obtusidens faz parte de um grupo seleto de espécies nativas da América do Sul utilizadas na aquicultura cujo conhecimento sobre o cultivo ainda é muito fragmentado. Os aspectos básicos de sua reprodução são conhecidos, no entanto o sucesso na propagação artificial nem sempre é alcançado. Considerando os diversos fatores que influenciam a reprodução de peixes migradores em cativeiro, a presente tese avaliou a produção e a qualidade do sêmen de animais induzidos com um análogo do hormônio liberador das gonadotropinas (gonadorelina) e o efeito da osmolalidade e da composição da solução ativadora sobre a motilidade espermática. No primeiro estudo, o sêmen de peixes induzidos com dose única de gonadorelina (20, 40, 60, 80 e 100 µg kg-1 de peixe) foi avaliado quanto ao volume produzido, à concentração espermática, à presença de anormalidades morfológicas, à integridade de membrana e aos parâmetros de motilidade, em comparação ao protocolo comumente utilizado na reprodução desta espécie que utiliza o extrato pituitário de carpa (EPC; 4,0 mg kg-1 de peixe). Com os resultados obtidos foi possível substituir o EPC por gonadorelina na indução à espermiação de Megaleporinus obtusidens utilizando uma dose mínima efetiva de 60 µg kg-1, sem que tenham sido observadas alterações no volume e na qualidade do sêmen. No segundo estudo, o movimento espermático foi avaliado em diferentes osmolalidades (25, 85, 145, 205, 265 e 325 mOsm kg-1) e soluções ativadoras (frutose, NaCl e KCl). A osmolalidade foi o principal gatilho para o início do movimento espermático de Megaleporinus obtusidens e em osmolalidade intermediária (145 mOsm kg-1), independentemente da composição da solução, a duração da motilidade foi prolongada (>50 s) e a taxa de motilidade se manteve em patamares elevados (60?70 %) na maior parte do tempo pós-ativação. As variações ao longo do tempo pós-ativação na velocidade curvilinear e na linearidade foram semelhantes entre NaCl e frutose enquanto o KCl se destacou por alterar o comportamento dos espermatozoides, produzindo velocidade curvilinear superior, baixa velocidade retilínea e uma trajetória de deslocamento predominantemente circular.Abstract : Megaleporinus obtusidens belongs to a select group of South American native species used in aquaculture whose knowledge about cultivation is still very fragmented. Basic aspects of its reproduction are known, however success in artificial propagation is not always guaranteed. Regarding the different factors that influence the reproduction of Brazilian migratory fish in captivity, the current study evaluated the production and quality of semen of gonadorelin-treated fish, and the effect of osmolality and composition of the activating solution on sperm motility. In the first experiment, in order to identify a suitable substitute to the protocol commonly used in the reproduction of this species, that uses carp pituitary (CPE; 4.0 mg kg-1 BW), the effect of gonadorelin (20, 40, 60, 80 and 100 µg kg-1 BW) on the total volume of expressible semen, sperm concentration, membrane integrity, presence of morphological abnormalities, and sperm motility of M. obtusidens was investigated. The results showed that a single-dose of gonadorelin of 60 µg kg-1 was effective in increasing the volume of semen produced by M. obtusidens, indicating that it may be used as a substitute for CPE, since it has a similar effect on semen quality. In the second experiment, sperm motility of M. obtusidens was evaluated in different osmolality (25, 85, 145, 205, 265, and 325 mOsm kg-1) and activating solutions (fructose, NaCl, and KCl). Sperm motility was triggered by decreasing osmolality. At intermediate osmolality (145 mOsm kg-1) all activating solutions extended the duration of motility (>50 s), and maintained the motility rate at levels of 60?70% most of the time. Variations over the post-activation time between NaCl and fructose were similar for curvilinear velocity and linearity, while KCl was notable for altering spermatozoa swimming pattern, producing high curvilinear velocity, low straight-line velocity, and a predominantly circular swimming path

    Sperm Quality and Cryopreservation in Teleost: Effect of Seminal Plasma Component and Climate Change

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    [ES] La selección de gametos de alta calidad es un requisito indispensable a tener en cuenta en los programas de reproduccion asistida. El desarrollo de herramientas biotecnológicas como la criopreservación de gametos, juega un papel importante en la producción acuicola y en la formación de bancos de germoplasma, que contribuiran luego en la mejora genética de las poblaciónes de peces, principalmente aquellas en peligro y que pudieran estar más afectadas ante futuros cambios climáticos. En la primera fase de esta tesis realizada en la Unesp, se trabajó con una especie neotropical de elevada importancia económica para la region Suramericana. La segunda fase realizada en la UPV se trabajó con la Anguila europea (Anguilla anguilla), una especie clasificada en la Lista Roja de la (UICN) como especie "en peligro crítico de extinción". En la primera fase se buscó caracterizar la composición bioquímica del plasma y las características seminales de la especie para evaluar las posibles relaciones entre estos parámetros. El plasma seminal estuvo principalmente compuesto por iones de sodio (Na+) y dentro de los componentes orgánicos sobresalieron las proteínas totales y la glucosa. A través del análisis de componentes principales (PCA) se observó que la motilidad tenía una fuerte correlación positiva con el tiempo de motilidad, la concentración de espermatozoides y las proteínas totales. Estos análisis sirvieron de base para la creación de una solución diluyente utilizada posteriormente en la sustancia crioprotectora. Luego se determinó la influencia del plasma seminal como constituyente de la solución crioprotectora en la criopreservación de semen de P. reticulatum. Se utilizaron tres tratamientos: glucosa 5% + metanol 10% (T1), a este crioprotector se le agregó 30% de plasma seminal natural (T2) y 30% de plasma seminal artificial en base a los resultados de los componentes bioquímicos del plasma determinados para la especie en el experimento anterior (T3). Se evaluaron parámetros de motilidad espermática, capacidad fecundante del semen criopreservado, así como fragmentación del ADN. El tratamiento T1 resultó con los mejores valores de motilidad seguido del T2, y la capacidad fertilizante de estos dos tratamientos fue similar al control, sin embargo, el tratamiento T2 mostró menos daño en el ADN. Mediante el PCA se demostró que T1 tenía una mejor relación positiva con la fertilidad y la motilidad total y progresiva. Finalmente, evaluamos las estructuras de las subpoblaciones espermáticas en cada uno de los tratamientos utilizados. Mediante análisis multivariado en dos etapas, fue posible determinar tres subpoblaciones espermáticas en el semen crioconservado de la especie, SP1 (rápido-lineal), SP2 (rápido-no lineal) y SP3 (lento-lineal). T1 presentó el mayor porcentaje de SP1, siendo confirmado por la efectividad en la protección de las células de este tratamiento en el proceso de criopreservación de la especie. En la segunda fase que se está llevó a cabo en la UPV, el objetivo general fue determinar el efecto de la temperatura y el pH del agua de mar sobre la motilidad de los espermatozoides en la Anguila europea. Se determinó que el bajo pH del agua de mar (6.5-7.4) disminuyó la motilidad de los espermatozoides de anguila en comparación con el control (pH= 8.2). Cuando estudiamos el efecto combinado del pH del plasma seminal artificial y el pH de ASW (7.8 y 8.2), no encontramos diferencias estadísticas en la motilidad y cinética de los espermatozoides en relación con el pH del plasma seminal artificial, pero sí el pH del agua de mar. Se encontraron valores más altos de motilidad total (MOT), FA(rápidos) y ME (médios) con un pH de 8.2 que con un pH de 7.8. En contraste, la temperatura del agua de mar no afectó los parámetros de motilidad de los espermatozoides o la longevidad de los espermatozoides en el contexto del cambio climático.[CA] La selecció de gàmetes d'alta qualitat és un requisit indispensable a tenir en compte en els programes de reproducció assistida. El desenvolupament d'eines biotecnològiques com la criopreservació de gàmetes, juga un paper important en la producció aqüicola i en la formació de bancs de germoplasma, que contribuiran després a la millora genètica de les població de peixos, principalment aquelles en perill i que poguessin estar més afectades davant de futurs canvis climàtics. A la primera fase d'aquesta tesi realitzada a la Unesp, es va treballar amb una espècie neotropical d'elevada importància econòmica per a la regió sud-americana. La segona fase realitzada a la UPV es va treballar amb l'Anguilla europea (Anguilla anguilla), una espècie classificada a la Llista Vermella de la (UICN) com a espècie "en perill crític d'extinció". A la primera fase es va buscar caracteritzar la composició bioquímica del plasma i les característiques seminals de l'espècie per avaluar les possibles relacions entre aquests paràmetres. El plasma seminal va estar principalment compost per ions de sodi (Na+) i dins dels components orgànics van sobresortir les proteïnes totals i la glucosa. A través de l'anàlisi de components principals (PCA), es va observar que la motilitat tenia una forta correlació positiva amb el temps de motilitat, la concentració d'espermatozoides i les proteïnes totals. Aquestes anàlisis van servir de base per a la creació d'una solució diluent utilitzada posteriorment a la substància crioprotectora. Després es va determinar la influència del plasma seminal com a constituent de la solució crioprotectora en la criopreservació de semen de P. reticulatum. Es van utilitzar tres tractaments: glucosa 5% + metanol 10% (T1), a aquest crioprotector se li va afegir 30% de plasma seminal natural (T2) i 30% de plasma seminal artificial sobre la base dels resultats dels components bioquímics del plasma determinats per a l'espècie a l'experiment anterior (T3). S'avaluaren paràmetres de motilitat espermàtica, capacitat fecundant del semen criopreservat, així com fragmentació de l'ADN. El tractament T1 va resultar amb els millors valors de motilitat seguit del T2, i la capacitat fertilitzant d'aquests dos tractaments va ser similar al control, però el tractament T2 va mostrar menys mal a l'ADN. Mitjançant el PCA es va demostrar que T1 tenia una millor relació positiva amb la fertilitat i la motilitat total i progressiva. Finalment, avaluem les estructures de les subpoblacions espermàtiques a cadascun dels tractaments utilitzats. Mitjançant anàlisi multivariada en dues etapes, va ser possible determinar tres subpoblacions espermàtiques en el semen crioconservat de l'espècie, SP1 (ràpid-lineal), SP2 (ràpid-no lineal) i SP3 (lent-lineal). T1 va presentar el percentatge més gran de SP1, i va ser confirmat per l'efectivitat en la protecció de les cèl·lules d'aquest tractament en el procés de criopreservació de l'espècie. A la segona fase que es va dur a terme a la UPV, l'objectiu general va ser determinar l'efecte de la temperatura i el pH de l'aigua de mar sobre la motilitat dels espermatozoides a l'Anguila europea. Es va determinar que el pH baix de l'aigua de mar (6.5-7.4) va disminuir la motilitat dels espermatozoides d'anguila en comparació del control (pH= 8.2). Quan estudiem l'efecte combinat del pH del plasma seminal artificial i el pH d'ASW (7.8 i 8.2), no trobem diferències estadístiques en la motilitat i la cinètica dels espermatozoides en relació amb el pH del plasma seminal artificial, però sí el pH de l'aigua de mar. Es van trobar valors més alts de motilitat total (MOT), FA(ràpids) i ME (metges) amb un pH de 8.2 que amb un pH de 7.8. En contrast, la temperatura de l'aigua de mar no va afectar els paràmetres de motilitat dels espermatozous o la longevitat dels espermatozous en el context del canvi climàtic.[EN] The selection of high-quality gametes is an essential requirement to take into account in assisted reproduction programs. The development of biotechnological tools such as cryopreservation of gametes plays an important role in aquaculture production and in the formation of germplasm banks, which will later contribute to the genetic improvement of fish populations, mainly those in danger and that could be more affected by future climate changes. In the first phase of this thesis carried out at Unesp, we worked with a neotropical species of high economic importance for the South American region. The second phase carried out at the UPV worked with the European Eel (Anguilla anguilla), a species classified on the (IUCN) Red List as a "critically endangered" species. In the first phase, we sought to characterize the biochemical composition of the plasma and the seminal characteristics of the species to evaluate the possible relationships between these parameters. The seminal plasma was mainly composed of sodium ions (Na+) and within the organic components, total proteins and glucose stood out. Through principal component analysis (PCA) it was observed that motility had a strong positive correlation with motility time, sperm concentration and total proteins. These analyzes served as the basis for the creation of a diluent solution later used in the cryoprotective substance. Then the influence of seminal plasma as a constituent of the cryoprotectant solution in the cryopreservation of P. reticulatum semen was determined. Three treatments were used: 5% glucose + 10% methanol (T1), 30% natural seminal plasma (T2) and 30% artificial seminal plasma were added to this cryoprotectant based on the results of the determined biochemical components of the plasma. for the species in the previous experiment (T3). Parameters of sperm motility, fertilizing capacity of cryopreserved semen, as well as DNA fragmentation were evaluated. Treatment T1 resulted with the best motility values followed by T2, and the fertilizing capacity of these two treatments was similar to the control, however, treatment T2 showed less DNA damage. Using PCA, it was shown that T1 had a better positive relationship with fertility and total and progressive motility. Finally, we evaluated the structures of the sperm subpopulations in each of the treatments used. Through two-stage multivariate analysis, it was possible to determine three sperm subpopulations in the cryopreserved semen of the species, SP1 (fast-linear), SP2 (fast-nonlinear) and SP3 (slow-linear). T1 presented the highest percentage of SP1, being confirmed by the effectiveness in protecting the cells of this treatment in the cryopreservation process of the species. In the second phase that is being carried out at the UPV, the general objective was to determine the effect of temperature and pH of seawater on sperm motility in the European Eel. It was determined that the low pH of seawater (6.5-7.4) decreased the motility of eel sperm compared to the control (pH= 8.2). When we studied the combined effect of the pH of the artificial seminal plasma and the pH of ASW (7.8 and 8.2), we did not find statistical differences in the motility and kinetics of the sperm in relation to the pH of the artificial seminal plasma, but we did find the pH of the water of sea Higher values of total motility (MOT), FA (fast) and ME (medium) were found at a pH of 8.2 than at a pH of 7.8. In contrast, seawater temperature did not affect sperm motility parameters or sperm longevity in the context of climate change.I also thank the Coordination for the Improvement of Higher Education Personnel (CAPES/PROEX) (N° 88887.302629/2018-00), National Council for Scientific, Technological Development CNPq (N° 200452/2022-3) and the Brazilian fostering agencies Foundation for Research Support of the State of Sao Paulo FAPESP (N° 2020/15020-0), for its financial support in Brazil. In Spain, the ThinkInAzul programme, supported by the Spanish Ministry of Science and Innovation (MCIN) with funding from the European Union NextGenerationEU (PRTR-C17.I1) and the Generalitat Valenciana (THINKINAZUL/2021/012) to SEASPERM, which has made it possible the preparation of this work. To the AUIP (Ibero-American Postgraduate University Association) for the Academic Mobility scholarship between Institutions Associated with the AUIP 2022Padilla Sánchez, M. (2023). Sperm Quality and Cryopreservation in Teleost: Effect of Seminal Plasma Component and Climate Change [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/20154
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