Mecanismos de procesamiento y presentación de antígeno en el sistema inmune

El sistema inmune muestra una gran versatilidad para reconocer y responder a una gran cantidad de macromoléculas extrañas o antígenos (Ag), eliminándolos y evitando a la vez reaccionar con constituyentes propios (1). Esto se realiza por la colaboración de linfocitos B (LB) y de linfocitos T (LT) que expresan un conjunto diferente de receptores. Aunque el receptor del LB (Inmunoglobulina) y el del LT (TCR) son similares en algunos aspectos y son codificados por secuencias de la misma familia de genes (2), difieren en la manera como reconocen el Ag. Mientras los LB reaccionan con el Ag en forma nativa, los LT son incapaces de discriminar entre la forma nativa y la denaturada (3)

Inducción de la diferenciación en células eritroleucémicas humanas y murinas: Síntesis de espectrina

The differentiation of human (K562) and murine (Friend) erythroleukemic cells was studied by stimulation with hemin and DMSO respectively. After the second day of stimulation, hemin iduces the production of hemoglobin up to 18% in K562 cells. In Friend cells, DMSO produces a clear increase in hemoglobin synthesis after the fifth day of stimulation when about 30% of the cells differentiate. Both cellular lines showed an increase in the synthesis of a protein with an electrophoretic mobility similar to the erythrocytic B-spectrin. The amount of this protein increased 5 times in the murine cells and 2.5 times in the human cells during induction. The synthesis of a protein with electrophoretic mobility similar to that of a-spectrin was increased in induce K562 cells. Nevertheless, none of these proteins reacted with a polyspecific rabbit antiserum against human B-spectrin.Se estudió la diferenciación de las células eritroleucémicas humanas (k562) y murinas (Friend) estimuladas con hemina y DMSO respectivamente. Después del segundo día de estimulación, la hemina incrementa la producción de hemoglobina hasta el 18% en las células K562. En las células Friend, El DMSO produce un aumento en la síntesis de hemoglobina solamente después del quinto día de estimulación; cerca del 30% de las células se diferencian en estas condiciones. Ambas líneas celulares mostraron un incremento en las síntesis de una proteína con movilidad electroforética similar a la p-espectrina del eritrocito. El aumento de esta proteína fue de 5 veces en las células murinas y de 2.5 en las células humanas. Las células K562 incrementaron también la síntesis de una proteína con movilidad electroforética semejante a la aespectrina. Sin embargo, ninguna de estas proteínas reaccionó por inmunotransferencia con un antisuero poliespecífico contra p-espectrina humana producida en conejo

Estructura primaria de la cadena ζ en el mono del nuevo mundo aotus nancymaae

Se determinó la respiración del suelo (RS) en una comunidad sucesional de pastizal de Holcus lanatus y Anthoxanthum odoratum en la franja altoandina de la cuenca del río Pamplonita, Norte de Santander, Colombia. Las medias mensuales de la RS fueron unimodales de día y de noche; la anual diurna fue de 118,44 mg CO2 m-2 h-1; y la nocturna, de 140,57 mg CO2 m-2 h-1. La diferencia entre estos dos valores se atribuyó a un incremento del brillo solar y a una disminución del recorrido del viento entre septiembre y diciembre de 2006 que condujo a un aumento de la tasa de evaporación. La RS nocturna se correlacionó con la humedad relativa y la temperatura máxima del aire y la diurna con el recorrido del viento. La RS acumulada (diurna y nocturna) mostró una tendencia lineal con respecto al tiempo. La producción anual diurna de carbono, con base en la RS acumulada anual, se estimó entre 32,67 y 40,73 y la nocturna entre 35,65 y 43,02 g de C m-2

Phenotypic and Functional Alterations of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in an In Vitro Leukemia-Induced Microenvironment

An understanding of the cell interactions occurring in the leukemic microenvironment and their functional consequences for the different cell players has therapeutic relevance. By co-culturing mesenchymal stem cells (MSC) with the REH acute lymphocytic leukemia (ALL) cell line, we have established an in vitro leukemic niche for the functional evaluation of hematopoietic stem/progenitor cells (HSPC, CD34+ cells). We showed that the normal homeostatic control exerted by the MSC over the HSPC is considerably lost in this leukemic microenvironment: HSPC increased their proliferation rate and adhesion to MSC. The adhesion molecules CD54 and CD44 were consequently upregulated in HSPC from the leukemic niche. Consequently, with this adhesive phenotype, HSPC showed less Stromal derived factor-1 (SDF-1)-directed migration. Interestingly, multipotency was severely affected with an important reduction in the absolute count and the percentage of primitive progenitor colonies. It was possible to simulate most of these HSPC alterations by incubation of MSC with a REH-conditioned medium, suggesting that REH soluble factors and their effect on MSC are important for the observed changes. Of note, these HSPC alterations were reproduced when primary leukemic cells from an ALL type B (ALL-B) patient were used to set up the leukemic niche. These results suggest that a general response is induced in the leukemic niche to the detriment of HSPC function and in favor of leukemic cell support. This in vitro leukemic niche could be a valuable tool for the understanding of the molecular events responsible for HSPC functional failure and a useful scenario for therapeutic evaluation

ESTRUCTURA PRIMARIA DE LA CADENA ζ EN EL MONO DEL NUEVO MUNDO AOTUS NANCYMAAE

Se determinó la respiración del suelo (RS) en una comunidad sucesional de pastizal de Holcus lanatus y Anthoxanthum odoratum en la franja altoandina de la cuenca del río Pamplonita, Norte de Santander, Colombia. Las medias mensuales de la RS fueron unimodales de día y de noche; la anual diurna fue de 118,44 mg CO2 m-2 h-1; y la nocturna, de 140,57 mg CO2 m-2 h-1. La diferencia entre estos dos valores se atribuyó a un incremento del brillo solar y a una disminución del recorrido del viento entre septiembre y diciembre de 2006 que condujo a un aumento de la tasa de evaporación. La RS nocturna se correlacionó con la humedad relativa y la temperatura máxima del aire y la diurna con el recorrido del viento. La RS acumulada (diurna y nocturna) mostró una tendencia lineal con respecto al tiempo. La producción anual diurna de carbono, con base en la RS acumulada anual, se estimó entre 32,67 y 40,73 y la nocturna entre 35,65 y 43,02 g de C m-2

Caracterización de la cadena CD3 épsilon en el primate del nuevo mundo Aotus nancymaae

Introduction. The T-cell receptor (TCR)-associated complex, CD3 (d, g, e) and z-chains are essential transmembrane proteins for signal transduction during T cell activation and immune response, as well as during thymocyte development.Objective. This work established the CD3ε-chain primary structure for the New World owl monkey Aotus nancymaae.Materials and methods. Total RNA was isolated from peripheral blood mononuclear cells; CD3ε molecule was amplified, cloned and sequenced.Results. The CD3ε amino acid sequence was deduced for the owl monkey Aotus nancymaae.It has an identity for nucleotide and amino acid sequences with the human counterpart of 84% and 76%, respectively. As described in other species, the Aotus CD3-e molecule is very variable in the extracellular region and greatly conserved in the intracellular domain. Even though high variability occurs in the CD3ε-extracellular domain, the subregions involved in ectodomain folding are conserved.Conclusions. The primary structure suggested that the Aotus protein has a functional role similar to that of humans, and that the initial T-cell activation steps are also similar. However, the great variation observed in CD3ε-extracellular region in humans in contrast to the Aotus (especially in areas that are surface-exposed) indicated that some monoclonal antibodies against the human CD3 complex will not recognize these Aotus determinants.Introducción. El complejo asociado al receptor de las células T está constituido por las moléculas CD3 (δ, γ, ε) y las cadenas ζ, todas proteínas transmembrana esenciales para la transducción de señales durante la activación del linfocito y la respuesta inmune, así como durante el desarrollo de los timocitos.Objetivo. En este trabajo se buscaba determinar la estructura primaria de la cadena CD3ε, en el mono del nuevo mundo, Aotus nancymaae.Materiales y métodos. A partir del ARN total obtenido de células mononucleares de sangre periférica, se amplificó la molécula de CD3ε, luego se clonó en un vector y, finalmente, se secuenció.Resultados. Se presenta la secuencia deducida de aminoácidos de la cadena CD3ε de A. nancymaae. Se estableció una identidad de 84% y de 76% en la secuencia nucleotídica y la de aminoácidos, respectivamente, con su contraparte humana. La molécula de Aotus muestra bastante variabilidad en la región extracelular y bastante conservación en la intracelular.Están conservadas subregiones del ectodominio que son importantes para el plegamiento de la molécula, así como para la asociación con las otras cadenas del complejo.Conclusiones. La estructura primaria determinada aquí sugiere que la proteína de Aotus tiene una funcionalidad similar y que los pasos iniciales de activación de la célula T se suceden como en los humanos; por otra parte, la gran variabilidad encontrada en el ectodominio, permite explicar por qué algunos anticuerpos monoclonales dirigidos contra el complejo CD3 de humano no reconocen estas estructuras en el Aotus

In Vitro and In Vivo Modeling of Normal and Leukemic Bone Marrow Niches: Cellular Senescence Contribution to Leukemia Induction and Progression

Cellular senescence is recognized as a dynamic process in which cells evolve and adapt in a context dependent manner; consequently, senescent cells can exert both beneficial and deleterious effects on their surroundings. Specifically, senescent mesenchymal stromal cells (MSC) in the bone marrow (BM) have been linked to the generation of a supporting microenvironment that enhances malignant cell survival. However, the study of MSC’s senescence role in leukemia development has been straitened not only by the availability of suitable models that faithfully reflect the structural complexity and biological diversity of the events triggered in the BM, but also by the lack of a universal, standardized method to measure senescence. Despite these constraints, two- and three dimensional in vitro models have been continuously improved in terms of cell culture techniques, support materials and analysis methods; in addition, research on animal models tends to focus on the development of techniques that allow tracking leukemic and senescent cells in the living organism, as well as to modify the available mice strains to generate individuals that mimic human BM characteristics. Here, we present the main advances in leukemic niche modeling, discussing advantages and limitations of the different systems, focusing on the contribution of senescent MSC to leukemia progression

ESTRUCTURA PRIMARIA DE LA CADENA Z EN EL MONO DEL NUEVO MUNDO AOTUS NANCYMAAE

La cadena z es una proteína transmembranal que se encuentra en los linfocitos T, uno de los tipos de células más importantes en el sistema inmune adaptativo, haciendo parte de un complejo multimérico que se ubica en la superficie de la célula y que se encarga, por un lado, del reconocimiento antigénico y por otro, de la transmisión de señales durante la activación de la misma. Esta proteína es una de las que primero se fosforila luego de la estimulación a través del receptor y se sabe que es esencial en los primeros eventos de señalización. Dobles mutantes de esta molécula muestran una respuesta adaptativa inadecuada; así mismo, se ha visto que su expresión está alterada en cáncer y en algunas enfermedades auto-inmunes. La fosforilación en residuos de tirosina que se encuentran en los motivos de activación de residuos de tirosina de los receptores inmunes (ITAMs), de los cuales hay tres en la región citoplasmática, ha demostrado ser uno de los eventos principales durante la activación. En este reporte se presenta la caracterización de la estructura primaria de la cadena z en los monos del nuevo mundo Aotus nancymaae; la secuencia de aminoácidos se dedujo a partir de la secuencia nucleotídica de su cADN. Las moléculas de Aotus presentaron una identidad del 95.5 y del 95.7% con la molécula de humano en las secuencias de nucleótidos y de aminoácidos, respectivamente. Una comparación de la proteína por regiones, mostró una identidad del 100% en la región extracelular y la conservación de residuos y regiones importantes en el resto de la molécula; esto incluye aminoácidos polares en la región transmembranal y los ITAMs en la región citoplasmática. Los resultados sugieren que la proteína de Aotus es plenamente funcional y que los procesos de activación de los linfocitos T se suceden de manera similar a lo descrito en humanos. El resultado mostrado aquí soporta las evidencias previas en el sentido de que las estructuras moleculares involucradas en la respuesta inmune adaptativa se hallan conservadas

Inducción de la diferenciación en células eritroleucémicas humanas y murinas: Síntesis de espectrina

Se estudió la diferenciación de las células eritroleucémicas humanas (k562) y murinas (Friend) estimuladas con hemina y DMSO respectivamente. Después del segundo día de estimulación, la hemina incrementa la producción de hemoglobina hasta el 18% en las células K562. En las células Friend, El DMSO produce un aumento en la síntesis de hemoglobina solamente después del quinto día de estimulación; cerca del 30% de las células se diferencian en estas condiciones. Ambas líneas celulares mostraron un incremento en las síntesis de una proteína con movilidad electroforética similar a la p-espectrina del eritrocito. El aumento de esta proteína fue de 5 veces en las células murinas y de 2.5 en las células humanas. Las células K562 incrementaron también la síntesis de una proteína con movilidad electroforética semejante a la aespectrina. Sin embargo, ninguna de estas proteínas reaccionó por inmunotransferencia con un antisuero poliespecífico contra p-espectrina humana producida en conejo

Inmunoregulación mediada por Calcitriol

The classical role of calcitriol (1a.,25- dihidroxivitamin D3) on calcium homeostasis is rather well known. Recent findings, of the calcitriol receptor on monocytes, activated lymphocytes and other cell Iines, and the ectopical and localized hormone production by macrophages, suggest that this hormone is playing a new and important role in the modulation of immunological responses. These data support the concept that this hormone, first considered to be an immunosuppressor, could activate, as well as suppress, the immune function, depending on the Iymphocyte activation mechanisms and the immunological microenvironment. The c1inicalinformation available and the in vivo and in vitro experimental evidence, support the concept of an immunoregulatory role for calcitriol. Hence the hormone should be considered a therapeutical immunemodulalor