Perkinsus sp. infectando três importantes moluscos do estuário do Rio Jaguaribe, Ceará, Brasil

This work investigated the occurrence of Perkinsus sp. in clam Anomalocardia brasiliana, oyster Crassostrea sp. and mussel Mytella falcata from the Jaguaribe River estuary, northeastern Brazil. The collection of clam (N = 300), oysters (N = 300) and mussels (N = 300) were carried out in the estuary of the Jaguaribe River, Ceará, in March and April (rainy season) and October (dry season) in 2017. The mollusks were measured in their major axis, open, and had their tissues submitted to tissue incubation techniques in Ray’s fluid thioglycollate medium (RFTM), histology, real-time polymerase chain reaction (qPCR), PCR and sequencing. The RFTM assays showed Perkinsus sp. infecting the three mollusks investigated. The prevalence of infected clams was 1.33% in both sampling periods, oysters ranged from 2.66 (rainy season) to 8% (dry period), and mussels from 0% (dry period) to 51.33% (rainy season). The intensity of infection was very light to light in clams, very soft to severe in oysters and very soft to moderate in mussels. Histological analyses showed cells of Perkinsus sp. infecting the gills and connective tissue around the digestive gland of some individuals. The qPCR generated amplicons in all positive samples in RFTM, confirming the presence of Perkinsus sp., while the sequencing evidenced high similarity (99%) with the species P. beihaiensis. In conclusion, the results obtained contribute to increasing knowledge about the occurrence of Perkinsus sp. in bivalve mollusks from northeastern Brazil.This work investigated the occurrence of Perkinsus sp. in clam Anomalocardia brasiliana, oyster Crassostrea sp. and mussel Mytella falcata from the Jaguaribe River estuary, northeastern Brazil. The collection of clam (N = 300), oysters (N = 300) and mussels (N = 300) were carried out in the estuary of the Jaguaribe River, Ceará, in March and April (rainy season) and October (dry season) in 2017. The mollusks were measured in their major axis, open, and had their tissues submitted to tissue incubation techniques in Ray’s fluid thioglycollate medium (RFTM), histology, real-time polymerase chain reaction (qPCR), PCR and sequencing. The RFTM assays showed Perkinsus sp. infecting the three mollusks investigated. The prevalence of infected clams was 1.33% in both sampling periods, oysters ranged from 2.66 (rainy season) to 8% (dry period), and mussels from 0% (dry period) to 51.33% (rainy season). The intensity of infection was very light to light in clams, very soft to severe in oysters and very soft to moderate in mussels. Histological analyses showed cells of Perkinsus sp. infecting the gills and connective tissue around the digestive gland of some individuals. The qPCR generated amplicons in all positive samples in RFTM, confirming the presence of Perkinsus sp., while the sequencing evidenced high similarity (99%) with the species P. beihaiensis. In conclusion, the results obtained contribute to increasing knowledge about the occurrence of Perkinsus sp. in bivalve mollusks from northeastern Brazil

Evolutionary genetics of the Farfantepenaeus and Litopenaeus (Crustacea: Decapoda: Penaeidae) from the Brazilian coast

Penaeid shrimp species are an important fisheries and aquaculture resource in tropical and subtropical shallow seas. Along the Brazilian coast the four most exploited, native species are Farfantepenaeus subtilis, F. paulensis, F. brasiliensis and Litopenaeus schmitti. Genetic knowledge on Penaeid species is growing but many basic systematic and population issues remain to be assessed. In the present work, DNA-based molecular tools were used to approach phylogenetic and population genetics questions concerning the Brazilian penaeids. Partial sequences for the 16S rRNA and Cytochrome Oxidase I (COI) mitochondrial genes were obtained from 11 penaeid shrimp species from the Western Atlantic and Eastern Pacific, and from an undescribed morphotype of pink shrimp usually identified as F. subtilis. The phylogeny resulting from the 16S and COI partial sequences showed that American Farfantepenaeus and Litopenaeus from two well-supported monophyletic clades in agreement with the two genera proposed in a recent systematic review of the suborder Dendrobranchiata. Consistent differences observed in the sequences from the F. subtilis morphotype, coupled with previous allozyme data, support the conclusion that this is a previously undescribed species of Farfantepenaeus. The genes of the nuclear ribosomal cluster were also partially or entirely sequenced for 11 species of American Penaeus. Both 18S and 5.8S genes were found to be highly conservative (average p=0.0028 and p=0.0000 respectively), whilst ITS1 sequences show strong evidence of intragenomic variability, in many cases resulting from the presence of microsatellite arrays inside the spacer. Despite that, distance based neighbor-joining trees support the 16S-COI phylogeny, and provide further evidence for the close genetic relationship between F sp and F. subtilis, in contrast to previous allozyme data that suggested a closer relationship between F sp and F. paulensis.</p

Evolutionary genetics of the farfantepenaeus and litopenaeus ( crustacea:decapoda:penaeidae) from the Brazilian coast

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Efeito das soluções de EDTA 17% e ácido cítrico 10% através da agitação manual e ultrassônica na remoção da smear layer: análise em MEV

A instrumentação do canal radicular produz a smear layer que cobre a superfície da parede do canal preparado. A remoção da smear layer tem sido o foco de muitos estudos na tentativa de alcançar o máximo do preparo químico-mecânico. Este estudo ex vivo teve por objetivo avaliar a efetividade de diferentes protocolos de irrigação final na remoção da smear layer e formação de erosão na dentina intraradicular. Trinta e cinco caninos humanos extraídos foram instrumentados e randomicamente divididos em 7 grupos, de acordo com o protocolo de irrigação final usado: G1 (ED3M) e G3 (ED3US), EDTA 17% por 3 minutos com agitação manual e ultrassônica, respectivamente; G2 (CA30M) e G4 (CA30US), ácido cítrico 10% por 30 segundos com agitação manual e ultrassônica, respectivamente; G5 (CA3M) e G6 (CA3US), ácido cítrico 10% por 3 minutos com agitação manual e ultrassônica, respectivamente; e G7 (Na3), NaOCl 5,25% por 3 minutos sem agitação (controle). Em seguida, todos os espécimes foram irrigados com NaOCl 5,25%. Os espécimes foram então esplintados longitudinalmente e observados sob Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV) nos terços cervical, médio e apical. Os dados foram analisados com os testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney. A eficácia do EDTA 17% e ácido cítrico 10%, na remoção da smear layer, foi significativamente maior que o NaOCl 5,25% (controle). Não houve diferença significativa entre os protocolos de irrigação final testados na remoção da smear layer e efeitos erosivos. Entretanto, quando comparado os três terços, dentro de cada grupo, no G1 (ED3M) e G2 (CA30M), houve uma menor limpeza da smear layer e formação de erosão no terço apical. Quando comparado o terço apical entre os grupos, o G4 (CA30US) foi mais efetivo que o G1 (ED3M) (p=0.0004), G2 (CA30M) (p=0.0018) e G3 (ED3US) (p=0.0003) na remoção da smear layer. Concluiu-se que os protocolos usados neste estudo foram similares, tanto na remoção da smear layer quanto nos efeitos erosivosRoot canal instrumentation produces smear layer which covers the surfaces of prepared canal walls. Removal of the smear layer has been the focus of many studies in an effort to achieve the ultimate chemomechanical preparation. The aim of this ex vivo study was to evaluate the effectiveness of different final irrigation protocols in smear layer removal and erosion in intraradicular dentine. Thirty five extracted human canines were instrumented and randomly divided, according to final rinse techniques used, into 7 groups: G1 (ED3M) and G3 (ED3US), 17% EDTA for 3 minutes with manual and ultrasonic agitation, respectively; G2 (CA30M) and G4 (CA30US), 10% citric acid for 30 seconds with manual and ultrasonic agitation, respectively; G5 (CA3M) and G6 (CA3US), 10% citric acid for 3 minutes with manual and ultrasonic agitation, respectively; and G7 (Na3), 5.25% NaOCl for 3 minutes without agitation (control). Next, all specimens were irrigated with 5.25% NaOCl. Specimens were then split lengthwise and observed under Scanning Electron Microscope (SEM) in apical, middle and coronal thirds. Data were analyzed with Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests. The efficacy of 17% EDTA and 10% citric acid in removing smear layer was significantly greater than 5.25% NaOCl (control). There were no significant differences among final irrigation tested protocols in removing the smear layer and erosive effects. However, when compared the three thirds, inside of each group, in G1 (ED3M) and G2 (CA30M), least smear layer removal and erosion formation was showed in the apical third. When compared the apical thirds, group 4 (CA30US) was more effective than G1 (ED3M) (p=0.0004), G2 (CA30M) (p=0.0018) and G3 (ED3US) (p=0.0003) in smear layer removal. In conclusion, the protocols used in this study were similar in the smear layer removal as well as in erosive effects73f

Estudo preliminar na indução reprodutiva da curimatã comum Curimatã comum (Prochilodus cearaensis steindachner, 1911)

The species of migratory fish are characterized by displacement along the rivers in rainy periods to perform their reproduction, seasonally allocated. The females of curimatã common (Prochiloduscearaensis), one of these migratory species, present a perfect synchronism between their physiological conditions and the environment, which enables the ovarian development and the final maturation of the ova. In this moment, they are prepared to carry out the ovulation and spawning. However, while in backwater, the mechanism of reproduction is only triggered by anartificial induction, with the employment of pituitary extracts and specific pituitary hormones. Ovulation was  inducted in five females with pituitary extract, using a pituitary per kilogram of body weight in two successive doses: the first having 10% of total concentration and the second 90% of the remaining twelve hours after, it was observed two females spawning. After the ovultation induction, three females did not spawn, and, after being sacrificed, they had ovaries in regression phase, which is a reproductive dysfunction observed during the holding in captivity. The knowledge and understanding of the failures causes observed in reproduction are essential for a profitable intensive exploitation of curimatã common, that presents a great economic regional potential and, if correctly grown, can offer protein of high biological value and nutrition to the consumer.As espécies de peixes migradores caracterizam-se por deslocamento ao longo dos rios nos períodos chuvosos para realizar sua reprodução, de forma sazonalizada. As fêmeas de curimatã comum (Prochiloduscearaensis), uma dessas espécies reofílicas, apresentam um sincronismo perfeito entre suas condições fisiológicas e as do ambiente, o que possibilita o desenvolvimento ovariano e a maturação final dos óvulos. Nesse momento, elas se tornam preparadas para realizar a ovulação e a desova. Contudo, em água parada, o mecanismo de reprodução só é desencadeado através da indução artificial com o emprego de extratos hipofisários e hormônios específicos. Induziu-se a ovulação em cinco fêmeas com extrato hipofisário, utilizando uma hipófise por quilo de peso em duas doses sucessivas: a primeira tendo 10% da concentração total e a segunda os 90% restantes doze horas após, observou-se a desova em duas fêmeas. Após a indução da ovulação, três fêmeas não desovaram e, ao serem sacrificadas, apresentavam ovários em fase de regressão, uma disfunção reprodutiva observada durante a exploração em cativeiro. O conhecimento e o entendimento das causas responsáveis dessas falhas observadas na reprodução são essenciais para uma exploração intensiva rentável da curimatã comum, cuja espécie apresenta um grande potencial econômico regional e, ao ser cultivada adequadamente, pode proporcionar proteína de alto valor biológico e nutricional ao consumidor

Possibilidades da exploração comercial de peixes reofílicos em cativeiro: Uma Revisão

The majority of fish species reared in captivity presents some form of reproductive dysfunction. In females may appear failures of final maturation of the ova, ovulation and the spawning; while in males occurs a decrease in the production of milt and in its quality. These dysfunctions appear due to the modification of the natural conditions of reproduction of the fish in captivity, originated from the lack of external stimuli needed for induction the pituitary to release of gonadotropins. In overcoming these disturbances have been used the hormones of reproduction for over fifty years, initially as pituitary extracts to stimulate the reproductive processes of spermiation, ovulation induction and spawning. More recently the hormones derived from fish and mammals, such as the carp, salmon and chorionic gonadotropin, and employment of new methods, with the factors releasers of gonadotropins (GnRH), which induce the release of gonadotropin own pituitary decreasing the markest failures in creations in captivity. The development of synthetic agonists of GnRH (GnRHa), highly powerful, consist of the new generations of therapies to hormonal manipulation, creating new possibilities with the use of hormones for the control of reproductive processes in aquaculture. The products developed more recently incorporate the GnRHa in polymeric system release long, with the effects of the hormone extending by extensive periods that last for days and even weeks. These systems eliminate the need for multiple treatments, in addition to induce the development of germ cells and the synchronization of multiple spawns. These different forms of GnRH recently found and their better knowledge certainly will be widely used in therapy for spawning. New strategies must be developed to enable a improve achievement of spawning, possibly with research to correct levels of GnRH rolling stock.A maioria das espécies de peixes criadaem cativeiro apresenta alguma forma de disfunção reprodutiva. Nas fêmeas podem aparecer falhas de maturação final dos óvulos, da ovulação e da desova; enquanto nos machos ocorre uma diminuição na produção do sêmen e na sua qualidade. Essas disfunções surgem em função da modificação das condições naturais de reprodução dos peixes em cativeiro, oriundas da falta dos estímulos externos necessários à indução da pituitária para liberação de gonadotrofinas. Na superação desses distúrbios são utilizados os hormônios da reprodução há mais de cinquenta anos, inicialmente como extratos hipofisários, para estimular os processos reprodutivos da espermiogênese, indução da ovulação e desova. Mais recentemente os hormônios derivados de peixes e de mamíferos, como as da carpa, salmão e coriônica humana, e o emprego de novos métodos, com os fatores liberadores de gonadotrofinas (GnRH), que induzem a liberação da própria gonadotrofina da pituitária diminuindo as falhas observas nas criações em cativeiro. O desenvolvimento de agonistas sintéticos de GnRH (GnRHa), altamente potentes, constituem as novas gerações das terapias de manipulação hormonal, criando novas possibilidades com o uso de hormônios para o controle dos processos reprodutivos na aquicultura. Os produtos desenvolvidos mais recentemente incorporam o GnRHa em sistema polimérico de liberação longa, com os efeitos do hormônio se estendendo por períodos amplos que duram dias e até semanas. Esses sistemas eliminam a necessidade de múltiplos tratamentos, além de induzirem o desenvolvimento das células germinativas e a sincronização de desovas múltiplas. As diferentes formas de GnRH encontradas recentemente e seu melhor conhecimento certamente serão amplamente utilizados na terapia da desova. Novas estratégias devem ser desenvolvidas para possibilitar uma melhorar obtenção da desova, possivelmente com pesquisas que venham corrigir os níveis de GnRH circulante

Sexual Definition: is there a pattern in the sexuality of fish? A Revision.

The fish are found in the most diverse aquatic habitats, ranging from high altitudes the depressions far below sea level, which reflects a wide range of existing species. This condition is due to diversity genomics be enriched by the fusion of the gametes in the training of individuals and in sex determination. Of genetic recombinations, during the processes of cell division and reproductive strategies, which result in a broad adaptive plasticity, both biological and ecological. All this becomes possible through the playback, where also if there is a great diversity of forms, even if there is a pattern of sexual development as well defined as male or female in the majority of species, constituting the gonochorists, and a small fraction formed by types of reproductive unisexual sessile and hermaphrodites. The explanation of this diversity has as a basis the property of retaining the dual sexual potentiality of primordial germ cells, found in different stages in gonadogenesis, and by their ability to differentiate during the reproductive life, a biological base kept by teleosts, constituting all plasticity. For this reason, it was possible to observe species that show great stability and other very labile to change the sex throughout their life. These different forms of reproduction has its origin in the great variety of mechanisms responsible for both sex determination as to formation of patterns of sexual differentiation, which include a genetic basis, with monogenic and polygenic systems, and the influence of different environmental factors, mainly temperature and social interactions. Although the mechanisms of sex determination and differentiation are conserved in mammals and birds, in fish seem to be very unstable. This suggests that, in evolutionary terms, an accumulation of evidence of participatory process in favor of a unification of strategies that emphasize the genetic factors and the environment. In particular, it seems that the environmental factors govern the force responsible for sexual development and by developments in all levels, with the selection and genetic drift having been responsible for establishing a standard capable of characterizing the current sexual determination. Thus, the proposal would be: in what way or in what level these factors contribute to driving the evolutionary process, independent of any context and in a way wholly holistic.Os peixes são encontrados nos mais variados habitats aquáticos, indo desde grandes altitudes às depressões muito abaixo do nível do mar, o que reflete uma grande amplitude de espécies existentes. Essa condição deve-se à diversidade genômica ser enriquecida pela fusão dos gametas na formação dos indivíduos e na determinação do sexo. Das recombinações genéticas, durante os processos de divisão celular e estratégias reprodutivas, resultam numa ampla plasticidade adaptativa, tanto biológica como ecológica. Tudo isto torna-se possível através da reprodução, onde também se observa uma grande diversidade de formas, mesmo existindo um padrão de desenvolvimento sexual bem definido como macho ou fêmea na maioria das espécies, constituindo os gonocoristas, e uma pequena fração formada pelos tipos reprodutivos de unissexuais e de hermafroditas. A explicação dessa diversidade tem como base a propriedade de retenção da dupla potencialidade sexual das células germinativas primordiais, encontradas em diferentes estágios na gonadogênese, e por sua capacidade de rediferenciação durante a vida reprodutiva, uma base biológica conservada pelos teleósteos, constituindo toda plasticidade. Por isso, observam-se espécies que apresentam grande estabilidade e outras muito lábeis para mudar o sexo ao longo da sua vida. Essas diferentes formas de reprodução tem origem na grande variedade de mecanismos responsáveis tanto pela determinação do sexo como de formação dos padrões de diferenciação sexual, que incluem uma base genética, com sistemas monogênico e poligênico, e a influência de diferentes fatores ambientais, principalmente temperatura e interações sociais. Apesar dos mecanismos de determinação e diferenciação sexual serem conservados em mamíferos e aves, nos peixes parecem ser muito instável. Isto sugere, em termos evolutivos, um acúmulo de evidências participativas do processo em favor de uma unificação das estratégias que enfatizam os fatores genéticos e os ambientais. Em particular, parece que os fatores de ambiente dirigem a força responsável pelo desenvolvimento sexual e pela evolução em todos os níveis, com a seleção e a deriva genética tendo sido responsáveis por estabelecer um padrão capaz de caracterizar a determinação sexual atual. Assim, a proposta seria: qual a maneira ou em que nível estes fatores contribuem para dirigir o processo evolutivo, independente de qualquer contexto e na forma inteiramente holística