Library of norcoclaurine synthases and their immobilization for biocatalytic transformations

Norcoclaurine synthases (NCS), catalyzing a Pictet-Spengler reaction in plants as one of the first enzymes in the biosynthetic benzylisoquinoline pathway, were investigated for biocatalytic transformations. The library of norcoclaurine synthases available was extended by two novel NCSs from Argemone mexicana (AmNCS1, AmNCS2) and one new NCS from Corydalis saxicola (CsNCS); furthermore, it was shown that the NCS from Papaver bracteatum (PbNCS) is a highly productive catalyst leading to the isoquinoline product with up to >99% e.e. Under certain conditions lyophilized whole E. coli cells containing the various overexpressed NCS turned out to be suitable catalysts. The reaction using dopamine as substrate bears several challenges such as the spontaneous non-stereoselective background reaction and side reactions. The PbNCS enzyme was successfully immobilized on various carriers whereby EziG3 proved to be the best suited for biotransformations. Dopamine showed limited stability in solution resulting in the coating of the catalyst over time, which could be solved by the addition of ascorbic acid (e.g. 1 mg/ml) as antioxidant

Resveratrol Inhibits Key Steps of Steroid Metabolism in a Human Estrogen-Receptor Positive Breast Cancer Model: Impact on Cellular Proliferation

The role of resveratrol (RES) in preventing breast cancer is controversial, as low concentrations may stimulate the proliferation of estrogen-receptor alpha positive (ERα+) breast cancer cells. As metabolism is the key factor in altering cellular estrogens, thereby influencing breast tumor growth, we investigated the effects of RES on the formation of estrogen metabolites, namely 4-androstene-3,17-dione (AD), dehydroepiandrosterone (DHEA), dehydroepiandrosterone-3-O-sulfate (DHEA-S), estrone (E1), estrone-3-sulfate (E1-S), 17β-estradiol (E2), 17β-estradiol-3-O-(β-D-glucuronide) (E2-G), 17β-estradiol-3-O-sulfate (E2-S), 16α-hydroxy-17β-estradiol (estriol, E3), and testosterone (T) in ERα- MDA-MB-231 and ERα+ MCF-7 cells. Incubation of both of the cell lines with the hormone precursors DHEA and E1 revealed that sulfation and glucuronidation were preferred metabolic pathways for DHEA, E1 and E2 in MCF-7 cells, compared with in MDA-MB-231 cells, as the Vmax values were significantly higher (DHEA-S: 2873.0 ± 327.4 fmol/106 cells/h, E1-S: 30.4 ± 2.5 fmol/106 cells/h, E2-S: 24.7 ± 4.9 fmol/106 cells/h, E2-G: 7.29 ± 1.36 fmol/106 cells/h). RES therefore significantly inhibited DHEA-S, E1-S, E2-S and E2-G formation in MCF-7, but not in MDA-MB-231 cells (Kis: E2-S, 0.73 ± 0.07 μM < E1-S, 0.94 ± 0.03 μM < E2-G, 7.92 ± 0.24 μM < DHEA-S, 13.2 ± 0.2 μM). Suppression of these metabolites subsequently revealed twofold higher levels of active E2, concomitant with an almost twofold increase in MCF-7 cell proliferation, which was the most pronounced upon the addition of 5 μM RES. As the content of RES in food is relatively low, an increased risk of breast cancer progression in women is likely to only be observed following the continuous consumption of high-dose RES supplements. Further long-term human studies simultaneously monitoring free estrogens and their conjugates are therefore highly warranted to evaluate the efficacy and safety of RES supplementation, particularly in patients diagnosed with ERα+ breast cancer

Systematische Offenheit als politischer Begriff

Was versteht man unter „systematischer Offenheit“? Den Versuch, die Vielfalt  philosophischer Ansätze auf eine gemeinsame Basis zu stellen? Das Wechselspiel aus Information und Performation, von Wissenschaft und Kunst, Philosophie und Poesie? Die Bereitschaft, sich für alle möglichen Themen aufgeschlossen zu zeigen bei gleichzeitiger Beanspruchung formaler Stringenz bzw. Kohärenz in der Behandlung und Bearbeitung der Themen? Ein Katalog an Kriterien zur redaktionellen Zusammenarbeit an dieser..

Estrogen metabolism in gynecological cancer cells: impacts of dietary supplements and drug resistance

Östrogene spielen eine zentrale Rolle in der menschlichen Physiologie; dennoch ist wenig über die Wechselwirkung von Nahrungsergänzungsmitteln oder verschiedenen Krankheitszuständen mit deren Metabolismus bekannt. Änderungen in der Stoffwechselaktivität könnten die aktiven Wirkkonzentrationen der Hormone erhöhen, und somit verschiedenste Krankheiten, insbesondere hormonsensitive Tumore, in der Entstehung und Progression beeinflussen. Das Ziel der vorliegenden Arbeit war daher, erstmals die Wechselwirkung ausgewählter Naturstoffe, welche typischerweise zur Linderung von Wechselbeschwerden eingesetzt werden, mit dem Östrogenstoffwechsel in humanen Brustkrebszelllinien (mit und ohne Östrogenrezeptorexpression) zu untersuchen. Hierfür wurde zunächst eine neue Analysemethode entwickelt, die auf Flüssigchromatographie und hochauflösender Massenspektrometrie basiert und nach internationalen Richtlinien auch validiert wurde. Die hohe Empfindlichkeit und Selektivität dieser Analytik ermöglicht, dass die zehn wichtigsten Steroide des Östrogenstoffwechsels (inklusive der Vorstufen, der aktiven Hormone und der entsprechenden Metaboliten) gleichzeitig quantifiziert werden können. Die Behandlung der Krebszellen mit den Sojaisoflavonen Genistein und Daidzein, beziehungsweise mit Resveratrol (einem Polyphenol aus Weintrauben), zeigte bereits bei äußerst geringen Konzentrationen im (sub‐)mikromolaren Bereich eine starke Hemmung der Sulfatierung und Glukuronidierung von Östrogenen, wodurch wiederum die Spiegel unkonjugierter Steroidhormone, vor allem die des hochpotenten 17β‐Östradiols, signifikant anstiegen. Diese Erhöhung führte weiters zu einer Stimulation des Zellwachstums von Östrogenrezeptor-exprimierenden Zellen, was die dringende Notwendigkeit weiterer Untersuchungen an Frauen unterstreicht; die Anwendungssicherheit von Nahrungsergänzungsmitteln bei Brustkrebspatientinnen könnte so besser evaluiert werden. Im Gegensatz zu diesen Beobachtungen konnte keine Veränderung der Östrogenkonzentrationen festgestellt werden, wenn die gleichen Brustkrebszelllinien mit Traubensilberkerzenextrakt, einem weiteren oft verwendeten pflanzlichen Präparat gegen Wechselbeschwerden, inkubiert wurden. Der Extrakt bewirkte außerdem keinen Wachstumsanstieg, sondern sogar einer Wachstumshemmung der Krebszellen, was darauf hindeutet, dass die Anwendung von Traubensilberkerzenpräparaten bei Brustkrebspatientinnen weitgehend ungefährlich sein dürfte. Der Extrakt, beziehungsweise dessen Hauptbestandteil Actein, zeigte weiters eine ausgeprägte Hemmung der Sulfatierung von Dehydroepiandrosteron (DHEA) durch die Sulfotransferase 2A1, was zu erhöhten Spiegeln von unkonjugiertem DHEA und in weiterer Folge zu einem Anstieg der Androgene Androstendion und Testosteron führte. Dieser Androgenanstieg könnte als Erklärung für die klinisch erwiesene Wirkung von Traubensilberkerzenextrakt gegen menopausale Symptome, insbesondere Hitzewallungen, dienen. Das letzte Kapitel der vorliegenden Dissertation zeigte weiters, dass der Metabolismus von Östrogenen auch als Resistenzmarker für Ovarialkarzinome dienen könnte. Hierfür wurden die Konzentrationen der Östrogene und deren Metaboliten in zwei Carboplatin‐sensitiven und vier ‐resistenten Ovarialkarzinomzelllinien bestimmt. Dabei wurde eine signifikante Hemmung des Östrogenmetabolismus ausschließlich in resistenten Zellen beobachtet; ein Effekt, der durch die Behandlung mit dem monoklonalen anti‐Interleukin‐6‐Rezeptor Antikörper Tocilizumab aufgehoben werden konnte. Klinische Studien, die die Blut‐ und/oder Gewebskonzentrationen konjugierter und unkonjugierter Steroidhormone vor und während der Einnahme von Nahrungsergänzungsmitteln oder im Verlauf verschiedener Krankheitszustände überwachen, sind folglich dringend nötig, um die in dieser Arbeit in vitro beobachteten Zusammenhänge auch mit Patientendaten zu belegen.Estrogens play a pivotal role in human physiology; however, little is known regarding the interaction of dietary supplements or different disease states with their endogenous metabolism. Altered metabolism may affect the levels of active hormone concentrations and consequently drive the development or progression of various diseases, particularly hormone‐sensitive gynecological cancers. To the best of my knowledge, the present thesis therefore investigated for the first time the interactions of selected natural dietary supplements used for the treatment of menopausal disorders with the endogenous metabolism of estrogens in human estrogen receptor α‐negative (ERα‐) and ‐positive (ERα+) breast cancer cells, using a newly established and validated liquid chromatography high‐resolution mass spectrometry method. Due to the high sensitivity and selectivity of this assay, even small changes in the metabolism of the ten major human estrogen precursors, active estrogens and their respective conjugated biotransformation products could be detected simultaneously. Incubation of cells with the soy isoflavones genistein and daidzein or resveratrol, a polyphenol found in grapes, revealed a strong inhibition of steroid glucuronidation and sulfation at low micromolar or even submicromolar concentrations, with a concomitant increase in the levels of unconjugated steroid hormones, especially the most potent estrogen 17β‐estradiol (E2). This increase of E2 levels caused a stimulation of ERα+ breast cancer cell proliferation in vitro, highlighting the need for further human investigations to assess the safety of botanical applications in patients with breast cancer. By contrast, treatment of the same breast cancer cells with black cohosh extract and its major constituent actein, another plant‐derived supplement for menopausal disorders, revealed no changes in the conjugation of estrogens, which is in line with the observed lack of additional cancer cell proliferation. Indeed, a minor inhibition of ERα‐ and ERα+ breast cancer cell growth was found, thereby suggesting that the use of black cohosh supplements by women diagnosed with breast cancer appears to be safe. However, a selective inhibition of dehydroepiandrosterone sulfation via the sulfotransferase 2A1 was identified, which led to a strongly induced formation of the unconjugated androgens 4‐androstene‐3,17‐dione and testosterone, possibly explaining the clinically proven effect of black cohosh against climacteric vasomotor symptoms, especially hot flashes. The last part of this thesis further demonstrated that targeted estrogen metabolomics can also be used as a marker to determine cancer resistance against platinum‐based drugs, which is a major obstacle in the treatment of ovarian cancer. Using two carboplatin‐sensitive and four carboplatin‐resistant high‐grade serous ovarian cancer cell lines, a significant inhibition of steroid metabolism was observed in carboplatin‐resistant cells, which was reversible by treatment with the monoclonal anti‐interleukin‐6‐receptor antibody tocilizumab. Future studies monitoring the levels of conjugated and unconjugated steroids in the absence and presence of dietary supplements or in different disease states are highly warranted to further prove the importance of steroid metabolomics in patients

Wenn die Erde brennt – Ein Erlebnisbericht

Am Mittwoch, dem 16.11.2022, sollte es also doch noch so weit kommen. Nach monatelanger Vorbereitung, organisatorischer Aufstellung und inhaltlicher Ausrichtung wurde der Hörsaal C1 am Campus der Universität Wien von einer Gruppe um den Zustand der Welt besorgter und sich um ihre eigene Zukunft ängstigender Student:innen besetzt. Doch wer sind diese studentischen Unibesetzer:innen und was wollen sie? Woher kommen sie? Und wohin gehen sie wieder? – Auf der Suche nach Antworten durch einen Erle..

Motive in Mixed Martial Arts

Mixed Martial Arts (MMA) ist eine junge vollkontakt Kampfsportart, welche erst seit etwa 25 Jahren besteht. Zwei Merkmale sind besonders wert hervorgehoben zu werden. Zum einen ist MMA gekennzeichnet durch den Kampf auf allen drei Ebenen, diese sind: 1.) der Standkampf, 2.) das Werfen und 3.) der Bodenkampf. Zum anderen ist das offene System der Sportart eine Besonderheit, so ist jeder Kämpfer/ jede Kämpferin dazu eingeladen aus verschiedenen Kampfkünsten die Techniken zu trainieren und zu perfektionieren, welche für den eigenen Stil am passendsten empfunden werden. Ziel dieser Forschungsarbeit war es, herauszufinden wieso Menschen MMA trainieren. Die Forschungsfrage lautete: Was bewegt Menschen in Österreich die Sportart Mixed Martial Arts auszuüben. Zusätzlich wurde untersucht wie die Personen auf MMA aufmerksam geworden sind. Eine Literaturrecherche erhob den aktuellen Stand der Forschung und bildete die Grundlage für die empirische Untersuchung der Fragestellung. Ein Onlinefragebogen wurde von 149 in Österreich trainierenden MMA Sportlern und Sportlerinnen ausgefüllt. Die jüngsten Teilnehmer und Teilnehmerinnen waren 14 Jahre alt und die älteste Person 65 Jahre alt. 85,2% der ausfüllenden Personen waren Männer und 14,8% Frauen. Der Fragebogen basierte auf dem BMZI, ein, zur Motiverhebung, bereits getestetes und bestätigtes Forschungsinstrument. Eine Erweiterung und Überprüfung auf MMA Sportler und Sportlerinnen wurde vorgenommen. Es zeigte sich, dass die meisten Personen über Freunde und Bekannte auf den Sport stießen (48,3%), sowie über Angebote von Sportvereinen (44,3%). Nur 2,8% fanden über die Schule und 1,3% über die Universität zum MMA. Die Auswertung über den Mittelwert von zehn Motivgruppen ergab, dass Flow, Fitness/Gesundheit und Ästhetik/Freude am höchsten bewertet wurden. In erster Linie trainieren Sportler und Sportlerinnen somit in Österreich MMA, um in der Aktivität aufzugehen, fit zu sein und aus Freude an der Bewegung.Mixed Martial Arts (MMA) is a young full-contact martial art which exists around 25 years. Two characteristics seem especially worth mentioning. Firstly, MMA takes place in the three areas where fights can possibly happen, these are: 1.) stand up fighting, 2.) throwing and 3.) the ground fight. Secondly, the sport’s open system is unique; every fighter is encouraged to develop their own style of fighting by accumulating techniques from various martial arts which they personally regard as efficient. The aim of this research was to answer what drives people to train MMA. The research question reads as follows: What motivates people in Austria to train Mixed Martial Arts. In addition, it was examined how they first encountered MMA. A literature review of primary and secondary sources revealed the current state of research on motives in MMA. This served as basis for the empirical investigation. 149 people who train MMA in Austria filled out an online questionnaire; the youngest two participants were 14 years old, the eldest 65. 85,2% of the subjects were male and 14,8% were female. The questionnaire was based on the BMZI, a valid and reliable instrument to examine motives in sports. Furthermore, the questionnaire has been tested and augmented in order to fit MMA athletes. It was shown that most people had their first contact with MMA through friends and colleagues (48,3%) as well as offers by sport clubs. Only 2,8% were introduced to MMA through schools and 1,3% through Universities. The analysis of ten motive groups’ means revealed that flow, fitness/health and esthetics/fun must be regarded as the most important motives. Therefore, feeling truly alive by means of the exercise, getting and staying fit and enjoying the movement are the main reasons why people in Austria train Mixed Martial Arts

Medientraining und Personen-PR : Selbstvermarktung am Beispiel österreichischer Medientrainer

Carina PoschnerKlagenfurt, Alpen-Adria-Univ., Dipl.-Arb., 2013(VLID)241264

Kuin hiipuva hiillos tummentuu, op47, nro 2

Myös Gramophone G.C.-83592, 283249.Soitinnus: lauluääni, piano.Äänitetty: [syyskuu 1905, Helsinki].1 teos

Illan kuutamossa, op58, nro 1

Soitinnus: lauluääni, piano.Äänitetty: [syyskuu tai lokakuu 1909, Helsinki].1 teos