52 research outputs found
Mikotoksinogenost kliniÄkih i okoliÅ”nih Aspergillus fumigatus i A. flavus sojeva
Clinical isolates of fifty strains of A. fumigatus and 30 strains of A. flavus from immmunocompromised patients from the hematological unit were analyzed for mycotoxin production and compared with the same number of environmental isolates (from soil, compost, and air). Only 9 (18%) strains of A. fumigatus produced gliotoxin in a mean concentration 2.22 mg mL-1 (range 0.5-5 mg mL-1). Aflatoxin B1 was detected in 7 (23%) isolates (range from 0.02 to 1.2 mg L-1) and aflatoxin G1 in one (3%) of clinical A. flavus isolates (0.12 mg L-1). In the group of environmental isolates, 11 (37%) were positive for aflatoxin B1 production (range from 0.02 to 1.2 mg L-1) and one for aflatoxin G1 (0.02 mg L-1). Bioautoantibiogram ("bioassay in situ") on TLC plates against Bacillus subtilis NCTC 8236 showed that only gliotoxin-producing strains have bactericidal activity of Rf values corresponding to gliotoxin. The secondary-metabolite profiles of clinical and environmental A. fumigatus and A. flavus isolates were homogenous, except for gliotoxin production, which was detected only in the group of clinical isolates of A. fumigatus (18%).Analizirana je mikotoksinogenost pedeset kliniÄkih sojeva vrste A.fumigatus i trideset sojeva vrste A. flavus izoliranih iz imunokompromitiranih ispitanika u hematoloÅ”kom odjelu. Kao usporedba, izoliran je isti broj okoliÅ”nih sojeva iz zemlje, komposta i
zraka. UtvrÄeno je da samo 9 sojeva (18%) vrste A. fumigatus tvori gliotoksin sa srednjom vrijednoÅ”Äu 2,22 mg mLā1 (u rasponu od 0,5 do 5 mg mLā1). Tvorba aflatoksina B1 utvrÄena je u 7 sojeva (23%) (raspon od 0,024 do 1,2 mg Lā1) i u jednog kliniÄkog izolata (3%) A.flavus vrste (0,12 mg Lā1). U skupini okoliÅ”nih sojeva utvrÄena je tvorba aflatoksina B1u 11 sojeva (37%) (u rasponu od 0,024 do 1,2 mg Lā1) i u jednog soja tvorba aflatoksina G1(0,024 mg Lā1). Bioautoantibiogramom na tankoslojnoj kromatografskoj ploÄi s bakterijskom vrstom Bacillus subtilis NCTC 8236 utvrÄeno je da samo gliotoksinogeni sojevi pokazuju baktericidnu aktivnost oko Rf vrijednosti koja odgovara gliotoksinu. Profili sekundarnih metabolita kliniÄkih i okoloÅ”nih sojeva A. funmigatus i A. flavus vrsta su bili homogeni, osim za tvorbu gliotoksina koji je utvrÄen samo u skupini kliniÄkih izolata A. fumigatus sojeva (18%)
Research on medicinal and toxic bioactive substances of native origin in scientific papers of the Pharmaceutical Sciences College members
Opisan je pregled istraživanja iz znanstvenih podruÄja Älanova Kolegija farmaceutskih znanosti AMZH-a o ljekovitim bioloÅ”ki aktivnim tvarima ljekovitog bilja, te o toksiÄnim sekundarnim metabolitima plijesni. Prikazan je spektar antimikrobnosti zaÄinskog bilja i fungicidnosti aromatiÄnog bilja Hrvatske, te terapijski uÄinak eteriÄnog ulja biljke Pelargonia radula kao i imunomodulirajuÄe i antitumorsko djelovanje biljke podlanice Caucalis platycarpos L. Od toksiÄnih metabolita plijesni, osvrt ukazuje na nalaz i rizike kroniÄnih otrovanja ljudi i životinja karcinogenim aflatoksinima, kao i doprinos mikotoksinskoj teoriji o utjecaju okratoksina A kao etioloÅ”kog Äimbenika endemske nefropatije i imunosupresivnosti fumonizina B1. Ujedno je ukazano na 30-godiÅ”nji monitoring estrogenih mikotoksina i trihotecena kao i njihovih producenata u žitaricama i hrani u Hrvatskoj. Spomenuta su istraživanja o utjecaju spora plijesni na razvoj preosjetljivosti, alergije i
aspergiloze pluÄa u ljudi. Istaknut je i nalaz nove vrste plijesni, imenovane Aspergillus pepii (Pepeljnjakov aspergil) koja je uvrÅ”tena u mikoloÅ”ku taksonomiju kao producent sterigmatocistina.An overview of the researches from the scientific areas of Collegium of pharmaceutical sciences members on medicinal biologically active herbal medicinal products and on toxic secondary metabolites of moulds is described. The spectrum of antimicrobiality of herbs (spices) and fungicides of Croatian aromatic herbs, as well as the therapeutic effect of Pelargonia radula essential oil and immunomodulatory and antitumor activity of plant Caucalis platycarpos L. is presented. From the toxic mould metabolites, the review points to the findings and risks of chronic poisoning of humans and animals with carcinogenic aflatoxins, as well as the contribution to mycotoxin theory of the effect of ochratoxin A as an etiological factor of endemic nephropathy and immunosuppressiveness of fumonisins B1. It is also pointed out on 30-year monitoring of estrogenic mycotoxins and trichothecenes as well as their producers in cereals and food in Croatia. Researches on the influence of mould spores on the development of hypersensitivity, allergies and lung aspergillosis in humans has been mentioned. A new species of mould has been accentuate, named Aspergillus pepii (Pepeljnjak\u27s aspergil), which was included in the mycological taxonomy as a producer of sterigmatocystin
Toksikogenost vrsta Fusarium izoliranih s neobranog kukuruza
The objective of this study was to determine the frequencies of distribution and the toxigenic potential of
Fusarium species isolated from non-harvested maize left in field over winter in 1999 (N=56) and 2003
(N=56) in northern Croatia. Zearalenone and trichothecenes (DON, DAS, T-2) were isolated and detected
using multitoxin extraction and TLC method. Modified TLC method was applied to detect fumonisin B1.
Fusarium species were the most frequent fungi found in maize with 78.6 % in 1999 and 85.0 % in 2003.
Among fusaria F. verticillioides was dominant species found in 12.5 % (1999) and 35.7 % (2003) of maize
samples. Other determined fusaria were F. graminearum (8.9 % in 2003), F. poae and F. sporotrichoides
(2.0 % to 3.6 %), F. tricinctum and F. tabacinum (2.0 % in 1999). Production of FB1 was established for all
F. verticillioides (7/7) isolated in 1999 in concentration range from 280 mg L-1 to 918 mg L-1, and for 11
of 20 strains found in 2003 (48 mg L-1 to 400 mg L-1). Three strains also produced zearalenone: one strain
in 1999 produced 3.80 mg L-1 and 2 strains in 2003 produced 20.0 mg L-1 and 70.0 mg L-1. In addition,
four strains of F. graminearum isolated in 2003 produced higher amounts of zearalenone (60.0 mg L-1 to
180.0 mg L-1). T-2 production was found in F. tricinctum (1.55 mg L-1) isolated in 1999.Cilj rada bio je utvrÄivanje uÄestalosti i toksinogenosti Fusarium vrsta izoliranih s neobranog kukuruza koji je prezimio u polju tijekom 1999. (N=56) i 2003. (N=56) na podruÄju sjeverne Hrvatske. Izolacija i detekcija zearalenona (ZEN) i trihotecena (DON, DAS, T-2) provedena je multitoksinskom ekstrakcijom i TLCmetodom. Modificirana ekstrakcija i TLC-metoda iskoriÅ”tena je za odreÄivanje fumonizina B1. Fusarium vrste izolirane su s uÄestaloÅ”Äu 78,6 % iz uzoraka skupljenih u 1999. te 85 % iz uzoraka skupljenih u 2003. MeÄu fuzarijama dominirala je vrsta F. verticillioides s uÄestaloÅ”Äu 12,5 % (1999.) i 35,7 % (2003.) u ukupnom broju uzoraka kukuruza. Ostale identificirane vrste fuzarija bile su F. graminearum (8,9 %; 2003.), F. poae i F. sporotrichoides (2,0 % do 3,6 %), F. tricinctum i F. tabacinum (2,0 %; 1999.). Fumonizinotoksinogenost je dokazana u svih sojeva F. verticillioides (7/7) izoliranih 1999. u rasponu koncentracija od 280 mg L-1 do 918 mg L-1 te u 55 % sojeva izoliranih 2003. (48 mg L-1 do 400 mg L-1). 11 % sojeva su osim FB1 tvorili i ZEN; 3,7 % iz 1999. produciralo je ZEN u koncentraciji 3,80 mg L-1, dok je 7,4 % sojeva iz 2003. tvorilo ZEN u viÅ”im koncentracijama (20,0 mg L-1 i 70,0 mg L-1). Tvorba ZEN utvrÄena je za 4 od 5 izoliranih sojeva F. graminearum (2003.) u neÅ”to viÅ”im koncentracijama (60,0 mg L-1 do 180,0 mg L-1). T-2 toksin producirao je jedini naÄeni soj F. tricinctum (1999.) u koncentraciji 1,55 mg L-1
Utjecaj medija i temperature na tvorbu gliotoksina u sojeva Aspergillus fumigatus
Gliotoxin is a secondary metabolite of the epipolythiodioxopiperazine family with biologically active internal disulfide bridge. It is produced by many fungal species, including Aspergillus fumigatus and A. terreus. A. fumigatus, which produces gliotoxin and more than twenty other secondary metabolites, is the leading cause of invasive aspergillosis. Gliotoxin production in situ influence the development of aspergillosis. This study investigated the in vitro production of gliotoxin in nine A. fumigatus isolates from the upper respiratory tract of immunocompromised patients. The effects of media composition and incubation temperature were studied. Gliotoxin was extracted from biomass and its concentration was semi-quantitatively analysed using thin-layer chromatography. Gliotoxin production was higher in the yeast-extract liquid medium (YES) than in the synthetic Czapek-Dox liquid medium (CZA). Incubation at 37 Ā°C resulted in higher gliotoxin production than at 25 Ā°C, probably because higher temperatures favour expansive growth of the mycelium. Gliotoxin could be detected after three days of incubation at concentrations 4.06 mg mL-1 (in YES at 37 Ā°C) and 1.07 mg mL-1 (in CZA at 25 Ā°C). YES broth as a medium containing 4 % sucrose and 2 % of yeast extract is a very rich substrate for the production of gliotoxin in vitro.Gliotoksin je sekundarni metabolit iz skupine epipolitiodioksipiperazina s bioloÅ”ki aktivnim internim disulfidnim mostom u molekuli, koji tvore razne plijesni i gljivica Candida albicans. Plijesan Aspergillus fumigatus vodeÄi je uzroÄnik invazivnih aspergiloza i takoÄer može tvoriti gliotoksin. Pretpostavlja se da in situ tvorba gliotoksina utjeÄe na patogenezu aspergiloze. U ovom radu ispitali smo in vitro tvorbu gliotoksina u devet sojeva A. fumigatus vrste, izoliranih iz imunokompromitiranih pacijenata. PraÄen je utjecaj medija i temperature inkubacije na tvorbu gliotoksina. Gliotoksin je ekstrahiran iz biomase i koncentracija mu je utvrÄena polukvantitativno tankoslojnom kromatografijom. Tvorba gliotoksina uoÄena je veÄ nakon trodnevne inkubacije u koncentracijama 4,06 mg mL-1 (u bujonu s kvaÅ”Äevim ekstraktom ā YES na 37 Ā°C) i 1,07 mg mL-1 (u sintetskom Czapek-Dox bujonu ā CZA na 25 Ā°C). Tvorba gliotoksina bila je veÄa u YES bujonu, za razliku od sintetskog CZA bujona. ViÅ”a temperatura inkubacije (37 Ā°C) takoÄer utjeÄe na jaÄu tvorbu gliotoksina nego niža temperatura (25 Ā°C). YES bujon s dodatkom 4 % saharoze i 2 % kvaÅ”Äeva ekstrakta vrlo je bogat supstrat za in vitro tvorbu gliotoksina, kao jednog od lipofilnih sekundardnih metabolita plijesni vrste A. fumigatus
ToksiÄni uÄinci Ustilago maydis i fumonizina B1 u Å”takora
Ustilago maydis and FB1 showed neurotoxicity in Fischer rats, which was indicated by hyperactivity, brain hyperaemia and especially by decreased AChE activity. These pathological changes could be related to the alkaloids of U. maydis and disruption of sphingolipid metabolism by FB1 activity. Pathological changes in liver, lungs, uterus and ovaries were more pronounced in the US+FB1 than in the US group, indicating possible synergism. Increased activity of LDH in the serum was observed only in the US+FB1 group, which led to the conclusion that FB1 is responsible for cytotoxic effects. Such activity of FB1 could increase the toxicity of U. maydis and other co-contaminants of fungal origin that can be found in foods and feeds.ToksiÄno djelovanje kukuruzne snijeti Ustilago maydis i moguÄi sinergizam s fumonizinom B1 (FB1) ispitivani su na Å”takorima soja Fischer. ToksiÄni uÄinci su procijenjeni na temelju organoleptiÄkog pregleda organa žrtvovanih životinja i mjerenja biokemijskih parametara u serumu (LDH, ALT, GGT, ChE), te homogenatu tkiva jetre i mozga (AChE, ChE, GGT, ALP). U jednoj pokusnoj skupini (US) životinje su hranjene smjesom biomase i snijeti masenog udjela 70%, dok je druga pokusna skupina (US+FB1) primala smjesu biomase i snijeti masenog udjela 70%, te fumonizina B1 (1 mg po kilogramu hrane) tijekom 17 dana. Kontrolna skupina je hranjena standardnom laboratorijskom hranom. Tijekom pokusa životinje su bile ekscitirane. Masa pokusnih životinja bila je na kraju pokusa neÅ”to veÄa u odnosu na kontrolnu skupinu. UoÄene patoloÅ”ke promjene na jetri, pluÄima, uterusu i ovarijima bile su viÅ”e izražene u skupini US+FB1. SpecifiÄna katalitiÄka aktivnost AChE u homogenatu jetre i mozga bila je znaÄajno smanjena u US skupini (61, odnosno 63%) u odnosu na kontrolu (p < 0,05), Å”to ukazuje na neurotoksiÄno djelovanje snijeti. Osim toga, zabilježena je znaÄajno smanjena aktivnost ovog enzima i ALP u homogenatu jetre US+FB1 skupine (p < 0,05). SpecifiÄna katalitiÄka aktivnost LDH u serumu bila je znaÄajno poveÄana u US+FB1 skupini (165%, odnosno 166%) u odnosu na US i kontrolnu skupinu, Å”to ukazuje da su oÅ”teÄenja staniÄne membrane rezultat djelovanja FB1. NeurotoksiÄni uÄinci u Å”takora soja Fischer vjerojatno su posljedica djelovanja alkaloida U. maydis i poremeÄaja metabolizma sfingolipida uslijed djelovanja FB1
Frequencies of Airborne Moulds in Zagreb
Zbog aerogene uÄestalosti spore plijesni dovode se u vezu s razliÄitim bolestima diÅ”nog sustava i alergijama. Stoga je cilj ovog rada bio utvrÄivanje kvalitativnih i kvantitativnih varijabilnosti uÄestalosti i koncentracija spora plijesni u Zagrebu na tri lokacije: centar grada (C), Farmaceutski botaniÄki vrt āFran KuÅ”anā (BV) i Medvednica (M) tijekom jeseni, zime, proljeÄa i ljeta 2002./03. Tijekom jeseni (do 76,88 CFU/m3) i zime (do 31,46 CFU/m3) zabilježene su niže koncentracije spora plijesni u zraku na sve tri lokacije, ali sa znatno viÅ”om koncentracijom u C i BV u odnosu na M (P<0,001). U proljeÄe i ljeto na sve tri lokacije zabilježene su znatno viÅ”e koncentracije spora plijesni. Tijekom proljeÄa ove su koncentracije bile znatno viÅ”e u C (160,0 CFU/m3) i BV (134,00 CFU/m3) nego na M (90,07 CFU/m3) (P<0,001). S druge strane, ljeti su koncentracije u C (237,5 CFU/m3) bile znatno viÅ”e nego u BV (186,50 CFU/m3) (P<0,01), dok su u C i na M (216,70 CFU/m3) ove vrijednosti bile gotovo jednake. Dokazano je ukupno 29 vrsta plijesni, meÄu kojima su dominirale alergoloÅ”ki važne vrste iz rodova Cladosporium (do 79,5 %) i Alternaria (59,4 %). Spore Penicillium, Fusarium i Aspergillus vrsta takoÄer su konstantno prisutne u zraku (43,0-70,5 %), ali u znatno nižim koncentracijama od kladosporija i alternarija. UÄestalost spora kladosporija i alternarija bila je znatno veÄa tijekom proljeÄa i ljeta na svim lokacijama te su njihove koncentracije bile znatno viÅ”e u C i BV (P<0,05). PoveÄanje ukupne koncentracije spora plijesni u proljeÄe i ljeto, Äemu najviÅ”e pridonose kladosporije i alternarije, može znaÄiti poveÄani alergoloÅ”ki rizik.Airborne fungi are sometimes associated with several respiratory diseases and allergies. This paper describes a study of qualitative and quantitative variations in the occurrence of airborne moulds in Zagreb area on three locations: centre of the city (C), Pharmaceutical Botanical Garden āFran KuÅ”anā (BG) and the mountain Medvednica (M) during autumn, winter, spring and summer 2002-03. Lower concentrations of airborne moulds were found in all three locations in autumn (up to 76.88 CFU/m3) and winter (31.46 CFU/m3), with significantly higher levels in C and BG than in M (P<0.001). In spring and summer, these concentrations were much higher in all sampling sites and were significantly higher in C (160.00 CFU/m3) and BG (134.00 CFU/m3) in spring than in M (90.07 CFU/m3) (P<0.001). In summer, significantly higher concentration was found in C (237.5 CFU/m3) than in BG (186.50 CFU/m3) (P<0.01), while concentrations in C and M (216.70 CFU/m3) were similar. Airspora belonging to 29 fungal genera were identified, and allergologicaly significant moulds, Cladosporium (up to 79.5 %) and Alternaria (up to 59.4 %) dominated in all sampling sites. Penicillium, Fusarium and Aspergillus were also constant fungal entities (43.0-70.5 %), but in much lower concentrations than Cladosporium and Alternaria. Airsporas of Cladosporium and Alternaria were more frequent in spring and summer in all locations, with significantly higher concentrations in C and BG (P<0.05). The risk from allergies increases with higher airspora concentrations in spring and summer due to an increase in Cladosporium and Alternaria
NeurotoksiÄnost fumonizina B1 u Å”aranske mlaÄi (Cyprinus carpio L.)
For years scientists have suspected that the environment plays a role in neurodegenerative diseases such as Alzheimerās disease, Parkinsonās disease, and multiple sclerosis. Mycotoxin fumonisin B1 (FB1) is produced by several Fusarium species, mainly by Fusarium verticilioides, which is one of the most common fungi
associated with corn worldwide. Fumonisins are known to cause equine leukoencephalomalacia, a disease associated with the consumption of corn-bas d feeds contaminated with FB1. Here we have reported chronic experimental toxicosis in one-year-old carp (Cyprinus carpio L.) receiving feed containing 100 mg kg-1
or 10 mg kg-1 of added FB1 for 42 days. We focused on fumonisin toxicity in the fi sh brain. After staining with hemalaun-eosin, histology of the fi sh brain revealed vacuolated, degenerate, or necrotic neural cells, scattered around damaged blood capillaries and in the periventricular area. These fi ndings suggest that
fumonisin, although it is a hydrophilic molecule, permeated the blood-brain barrier of young carp and had a toxic effect on neuronal cells.Odavno je poznato da okoliŔ ima važnu ulogu u razvoju neurodegenerativnih bolesti kao Ŕto su Alzheimerova
i Parkinsonova bolest te multipla skleroza. Mikotoksin fumonizin B1 (FB1) tvori nekoliko vrsta Fusariuma, najÄeÅ”Äe F. verticillioides, koja je najuÄestaliji kontaminant kukuruza. Ovaj mikotoksin odgovoran je za leukoencefalomalaciju konja, mula i magaradi povezanu s konzumacijom kukuruza kontaminiranog s FB1.
U ovom su radu prikazani rezultati kroniÄne eksperimentalne toksikoze mlaÄi Å”arana (Cyprinus carpio L.) koji su u hrani primali 100 mg kg-1 i 10 mg kg-1 FB1 tijekom 42 dana. Nakon bojenja hemalaun-eozinom zabilježene su znaÄajne histopatoloÅ”ke promjene na mozgu životinja ukljuÄujuÄi vakuolizaciju, degeneraciju
i nekrozu neurona, posebice u blizini oÅ”teÄenih krvnih kapilara i u periventrikularnoj regiji. Ova saznanja pokazuju da FB1, kao hidrofi lna molekula, prolazi kroz krvno-moždanu barijeru mladih Å”arana uzrokujuÄi oÅ”teÄenje neurona
- ā¦