Bases bioquímicas de la muerte celular inducida por fumonisina B1 en plantas

Tesis (Doctor en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2017Fusarium verticillioides es un fitopatógeno que frecuentemente infecta al maíz y causa patologías severas como el vuelco y las podredumbres de espiga y granos, ocasionando pérdidas millonarias en la producción agrícola. La micotoxina fumonisina B1 (FB1) puede ser sintetizada por el hongo luego de la invasión de la planta. Además, puede ser absorbida por las raíces desde suelos contaminados, distribuyéndose en ambos casos a los tejidos distales de las plántulas. El objetivo de este trabajo fue profundizar el conocimiento sobre los mecanismos de toxicidad de FB1 en maíz, para conocer su participación en la patogénesis de las infecciones por F. verticillioides. El riego con FB1 (1 y 20 ppm) a los 2, 4 y 6 días post-siembra (dps) alteró los patrones de muerte celular de plántulas de maíz de híbridos susceptible (HS) y resistente (HR) a la infección por F. verticillioides, cultivadas en macetas hasta los 21 dps. La toxina indujo estrés oxidativo en forma dosis-dependiente, aunque los resultados sugieren que el HR detoxificaría más eficientemente las especies reactivas de oxígeno (ERO). Por otra parte, la incubación con FB1 (0 – 200 ppm, 1 hora) inhibió la germinación de granos de polen de ambos híbridos, sin afectar la viabilidad. Sin embargo, en el HR la inhibición fue completa a menores concentraciones de FB1, indicando que la toxicidad sobre la reproducción del maíz dependería de su genotipo. Utilizando un modelo experimental con plántulas cultivadas en hidroponia se identificaron dos fases de la toxicidad aguda de FB1 en relación a la muerte celular, inhibición a las 6 horas post-tratamiento (hpt) con la toxina, y luego la inducción de la muerte a las 24 hpt. Estudios adicionales permitieron concluir que la muerte celular en ambos híbridos estuvo mediada por las ERO. El análisis de las fitohormonas ácido salicílico (AS) y ácido jasmónico (AJ) reveló que en el HR la muerte celular a las 24 hpt se produciría por un mecanismo dependiente de AS e independiente de AJ; mientras que en HS la muerte sería producida por una vía mediada por AJ, pero independiente de AS. Los resultados de este trabajo muestran que FB1 es un factor que puede contribuir a la patogénesis de las infecciones del maíz por F. verticillioides, induciendo muerte celular como consecuencia del estrés oxidativo, por mecanismos mediados por AS y AJ. Desde otro enfoque, la FB1 que contamina los suelos puede debilitar a las plantas de maíz aumentando su susceptibilidad a patógenos. Además, independientemente de la fuente de FB1 (infección o absorción desde el suelo), la micotoxina alteraría la reproducción de maíz inhibiendo la germinación de los granos de polen, sin descartar otros posibles mecanismos.Otaiza González, Santiago Nicolás. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Theumer, Martin Gustavo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Goldraij, Ariel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.Nuñez Montoya, Susana Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Ciencias Farmacéuticas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; Argentina.Rubinstein, Héctor Ramon. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Cavaglieri, Lilia Renee. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales; Argentina

The aflatoxin B1-fumonisin B1 toxicity in BRL-3A hepatocytes is associated to induction of cytochrome P450 activity and arachidonic acid metabolism

Human oral exposure to aflatoxin B1 (AFB1) and fumonisin B1 (FB1) is associated with increased hepatocellular carcinoma. Although evidence suggested interactive AFB1–FB1 hepatotoxicity, the underlying mechanisms remain mostly unidentified. This work was aimed at evaluating the possible AFB1–FB1 interplay to induce genetic and cell cycle toxicities in BRL-3A rat hepatocytes, reactive oxygen species (ROS) involvement, and the AFB1 metabolizing pathways cytochrome P450 (CYP) and arachidonic acid (ArAc) metabolism as ROS contributors. Flow cytometry of stained BRL-3A hepatocytes was used to study the cell cycle (propidium iodide), ROS intracellular production (DCFH-DA, HE, DAF-2 DA), and phospholipase A activity (staining with bis-BODIPY FL C11-PC). The CYP1A activity was assessed by the 7-ethoxyresorufin-O-deethylase (EROD) assay. Despite a 48-h exposure to FB1 (30 μM) not being genotoxic, the AFB1 (20 μM)-induced micronucleus frequency was overcome by the AFB1–FB1 mixture (MIX), presumably showing toxin interaction. The mycotoxins blocked G1/S-phase, but only MIX caused cell death. Overall, the oxidative stress led these alterations as the pretreatment with N-acetyl-l-cysteine reduced such toxic effects. While AFB1 had a major input to the MIX pro-oxidant activity, with CYP and ArAc metabolism being ROS contributors, these pathways were not involved in the FB1-elicited weak oxidative stress. The MIX-induced micronucleus frequency in N-acetyl-l-cysteine pretreated cells was greater than that caused by AFB1 without antioxidants, suggesting enhanced AFB1 direct genotoxicity probably owing to the higher CYP activity and ArAc metabolism found in MIX. The metabolic pathways modulation by AFB1–FB1 mixtures could raise its hepatocarcinogenic properties.Fil: Mary, Verónica Sofía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Arias, Silvina Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Otaiza González, Santiago Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Velez, Pilar Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Rubinstein, Héctor Ramón. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Theumer, Martín Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin

Where does the peanut smut pathogen, Thecaphora frezii, fit in the spectrum of smut diseases?

Smut fungi, such as Ustilago maydis, have been studied extensively as a model for plant-pathogenic basidiomycetes. However, little attention has been paid to smut diseases of agronomic importance that are caused by species of the genus Thecaphora, probably due to their more localized distribution. Peanut smut incited by Thecaphora frezii has been reported only in South America, and Argentina is the only country where this disease has been noted in commercial peanut production. In this work, important advances in deciphering T. frezii specific biology/pathobiology in relation to potato (T. solani), wheat (U. tritici), and barley (U. nuda) smuts are presented. We summarize the state of knowledge of fungal effectors, functionally characterized to date in U. maydis and most recently in T. thlaspeos, as well as the potential to be present in other Thecaphora species involved in dicot-host interactions like T. frezii-peanut. We also discuss applicability and limitations of currently available methods for identification of smut fungi in different situations and management strategies to reduce their impact on agri-food quality. We conclude by describing some of the challenges in elucidating T. frezii strategies that allow it to infect the host and tolerate or evade plant immune defense mechanisms, and assessing other aspects related to pest control and their implications for human health.Fil: Arias, Silvina Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. University of Iowa; Estados UnidosFil: Mary, Verónica Sofía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Velez, Pilar Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Rodriguez, María G.. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Otaiza González, Santiago Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Theumer, Martín Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentin

Chilling tolerance of Micro-Tom fruit involves changes in the primary metabolite levels and in the stress response

Prevention of post-harvest fruit losses is important to increase food availability. In the case of tomato, postharvest storage at low temperature and the subsequent handling and distribution of fruit is limited by chilling injury, a physiological disorder that causes failure to normally ripen and increased decay disease. Micro-Tom fruit, a dwarf tomato variety, is relatively tolerant to cold storage (4 °C for 4 weeks). To understand the tolerance mechanism of Micro-Tom fruit at the molecular level, its transcriptome and metabolome were evaluated before, after chilling storage, and shortly after transferring the fruit to ambient temperature to focus on the critical early events accounting chilling tolerance. Changes in gene expression and metabolic profiles indicate metabolic adaptation (fermentation, amino acid mobilization and photosynthesis recovery after cold storage) and induction of defense mechanisms (biotic and abiotic stress, and redox metabolism) that can be related with Micro-Tom tolerance to postharvest chilling injury. The current research extends the understanding of the mechanisms involved in chilling tolerance and provides tools for developing new technologies and varieties.Fil: Gonzalez, Carla. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Zanor, María Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Re, Martin Damian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Otaiza González, Santiago Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Asis, Ramón. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Valle, Estela Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Boggio, Silvana Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; Argentin

Toxin distribution and sphingoid base imbalances in Fusarium verticillioides-infected and fumonisin B1-watered maize seedlings

Fusarium verticillioides is a major maize pathogen and there are susceptible and resistant cultivars to this fungal infection. Recent studies suggest that its main mycotoxin fumonisin B1 (FB1) may be involved in phytopathogenicity, but the underlying mechanisms are mostly still unknown. This work was aimed at assessing whether FB1 disseminates inside the plants, as well as identifying possible correlations between the maize resistant/susceptible phenotype and the unbalances of the FB1-structurally-related sphingoid base sphinganine (Sa) and phytosphingosine (Pso) due to toxin accumulation. Resistant (RH) and susceptible hybrid (SH) maize seedlings grown from seeds inoculated with a FB1-producer F. verticillioides and from uninoculated ones irrigated with FB1 (20 ppm), were harvested at 7, 14 and 21 days after planting (dap), and the FB1, Sa and Pso levels were quantified in roots and aerial parts. The toxin was detected in roots and aerial parts for inoculated and FB1-irrigated plants of both hybrids.However, FB1 levels were overall higher in SH seedlings regardless of the treatment (infection or watering). Sa levels increased substantially in RH lines, peaking at 54-fold in infected roots at 14 dap. In contrast, the main change observed in SH seedlings was an increase of Pso in infected roots at 7 dap. Here, it was found that FB1 disseminates inside seedlings in the absence of FB1-producer fungal infections, perhaps indicating this might condition the fungus?plant interaction before the first contact. Furthermore, the results strongly suggest the existence of at least two ceramide synthase isoforms in maize with different substrate specificities, whose differential expression after FB1 exposure could be closely related to the susceptibility/resistance to F. verticillioides.Fil: Arias, Silvina Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Mary, Verónica Sofía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Otaiza González, Santiago Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Wunderlin, Daniel Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos Córdoba; ArgentinaFil: Rubinstein, Héctor Ramón. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Theumer, Martín Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin

The innards of the cell: studies of water dipolar relaxation using the ACDAN fluorescent probe

This article reviews the use of the 6-acetyl-2-(dimethylamino)naphthalene (ACDAN) fluorophore to study dipolar relaxation in cells, tissues, and biomimetic systems. As the most hydrophilic member of the 6-acyl-2-(dimethylamino)naphthalene series, ACDAN markedly partitions to aqueous environments. In contrast to 6-lauroyl-2-(dimethylamino)naphthalene (LAURDAN), the hydrophobic and best-known member of the series used to explore relaxation phenomena in biological (or biomimetic) membranes, ACDAN allows mapping of spatial and temporal water dipolar relaxation in cytosolic and intra-organelle environments of the cell. This is also true for the 6-propionyl-2-(dimethylamino)naphthalene (PRODAN) derivative which, unlike LAURDAN, partitions to both hydrophobic and aqueous environments. We will (i) summarize the mechanism which underlies the solvatochromic properties of the DAN probes, (ii) expound on the importance of water relaxation to understand the intracellular environment, (iii) discuss technical aspects of the use of ACDAN in eukaryotic cells and some specialized structures, including liquid condensates arising from processes leading to liquid immiscibility and, (iv) present some novel studies in plant cells and tissues which demonstrate the kinds of information that can be uncovered using this approach to study dipolar relaxation in living systems.Fil: Otaiza González, Santiago Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Estudios Agropecuarios. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Estudios Agropecuarios.; ArgentinaFil: Cabadas, Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; ArgentinaFil: Robert, Germán. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Departamento de Botánica. Laboratorio de Fisiología Vegetal; Argentina. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Estudios Agropecuarios. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Estudios Agropecuarios.; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Fisiología y Recursos Genéticos Vegetales; ArgentinaFil: Stock, Roberto P.. No especifíca;Fil: Malacrida, Leonel. Universidad de la República; UruguayFil: Lascano, Hernan Ramiro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Departamento de Botánica. Laboratorio de Fisiología Vegetal; Argentina. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Estudios Agropecuarios. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Estudios Agropecuarios.; ArgentinaFil: Bagatolli, Luis Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentin

Transcriptional regulation of tocopherol biosynthesis in tomato

Tocopherols, compounds with vitamin E (VTE) activity, are potent lipid-soluble antioxidants synthesized only by photosynthetic organisms. Their biosynthesis requires the condensation of phytyl-diphosphate and homogentisate, derived from the methylerythritol phosphate (MEP) and shikimate pathways (SK), respectively. These metabolic pathways are central in plant chloroplast metabolism and are involved in the biosynthesis of important molecules such as chlorophyll, carotenoids, aromatic amino-acids and prenylquinones. In the last decade, few studies have provided insights into the regulation of VTE biosynthesis and its accumulation. However, the pathway regulatory mechanism/s at mRNA level remains unclear. We have recently identified a collection of tomato genes involved in tocopherol biosynthesis. In this work, by a dedicated qPCR array platform, the transcript levels of 47 genes, including paralogs, were determined in leaves and across fruit development. Expression data were analyzed for correlation with tocopherol profiles by coregulation network and neural clustering approaches. The results showed that tocopherol biosynthesis is controlled both temporally and spatially however total tocopherol content remains constant. These analyses exposed 18 key genes from MEP, SK, phytol recycling and VTE-core pathways highly associated with VTE content in leaves and fruits. Moreover, genomic analyses of promoter regions suggested that the expression of the tocopherol-core pathway genes is trancriptionally coregulated with specific genes of the upstream pathways. Whilst the transcriptional profiles of the precursor pathway genes would suggest an increase in VTE content across fruit development, the data indicate that in the M82 cultivar phytyl diphosphate supply limits tocopherol biosynthesis in later fruit stages. This is in part due to the decreasing transcript levels of geranylgeranyl reductase (GGDR) which restricts the isoprenoid precursor availability. As a proof of concept, by analyzing a collection of Andean landrace tomato genotypes, the role of the pinpointed genes in determining fruit tocopherol content was confirmed. The results uncovered a finely tuned regulation able to shift the precursor pathways controlling substrate influx for VTE biosynthesis and overcoming endogenous competition for intermediates. The whole set of data allowed to propose that 1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate synthase and GGDR encoding genes, which determine phytyl-diphosphate availability, together with enzyme encoding genes involved in chlorophyll-derived phytol metabolism appear as the most plausible targets to be engineered aiming to improve tomato fruit nutritional value.Fil: Quadrana, Leandro Daniel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Almeida de Souza, Juliana Beatriz. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Otaiza González, Santiago Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Duffy, Tomás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: da Silva, Junia V. Corrêa. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: de Godoy, Fabiana. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Asis, Ramón. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Bermudez Salazar, Luisa Fernanda. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Fernie, Alisdair R.. Institut Max Planck fur Molekulare Physiologie; AlemaniaFil: Carrari, Fernando Oscar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Rossi, Maria Magdalena. Universidade de Sao Paulo; Brasi