Substratos para armazenar nematóides entomopatogênicos (Rhabditida: Steinernematidae, Heterorhabditidae)

Os nematóides entomopatogênicos apresentam baixa viabilidade em condições de laboratório. Com o objetivo de avaliar substratos para prolongar a sobrevivência dos nematóides entomopatogênicos, suspensões de Heterorhabditis sp. JPM4 e Steinernema carpocapsae All (3.000 JI mL-1) foram adicionadas aos substratos solo, areia fina, areia grossa, espuma, argila expandida, esponja fenólica, ágar, amido de milho, Plantmax® e água. Estes foram colocados em placas de Petri (5 cm) e mantidos a 16 ± 1°C. As avaliações foram feitas após 30, 60, 90, 120, 150 e 180 dias, com três repetições para cada dia. Após 180 dias, para S. carpocapsae All o substrato espuma (57,5%) manteve maior porcentagem de juvenis infectantes (JI) vivos; argila expandida (28,4%), Plantmax® (9,3%) e esponja fenólica (11%) não foram eficientes para manutenção da sobrevivência. Para Heterorhabditis sp. JPM4, espuma (55,6%), areia grossa (53,1%) e areia fina (50,6%) proporcionaram maior sobrevivência dos JI ao final de 180 dias. Ágar (19,3%), esponja fenólica (11,6%) e Plantmax® (10,7%) tiveram índices de sobrevivência inferiores ao da testemunha (29,7%). O uso de substrato adequado pode propiciar maior sobrevivência de JI.The survival of entomopathogenic nematodes under laboratory conditions is low. With the aim of evaluating substrates to extend the survival of entomopathogenic nematodes, suspensions of Heterorhabditis sp. JPM4 and Steinernema carpocapsae All (3,000 IJ mL-1) were added to dirt, fine sand, coarse sand, foam, expanded clay, phenolic foam, agar, corn starch, Plantmax®, and water. The substrates were placed on Petri dishes (5 cm) and kept at 16 ± 1°C. Survival evaluations were made after 30, 60, 90, 120, 150, and 180 days, with three replicates. After 180 d, a greater percentage of S. carpocapsae infective juveniles (IJs) were still alive in the foam treatment (57.5%) as compared to other treatments, while expanded clay (28.4%), Plantmax® (9.3%) and phenolic foam (11%) were not effective in maintaining the survival rate. Foam (55.6%), coarse sand (53.1%), and fine sand (50.6%) provided greater Heterorhabditis sp. JPM4 IJ survival at 180 days. Agar (19.3%), phenolic foam (11.6%), and Plantmax® (10.7%) had lower survival indices than the control (29.7%). The use of an appropriate substrate can provide greater IJ survival

Avaliação de nematoides entomopatogênicos em condições de laboratório e casa-de-vegetação visando ao controle de Spodoptera frugiperda

The increased corn planting grown in the late season crop and the use of a notillage planting system benefits the development of Spodoptera frugiperda, the main pest of corn crop. Thus, this study aimed to select entomopathogenic nematodes based on the mortality of S. frugiperda, and to adjust the nematode concentrations in the laboratory and evaluate the action of these organisms in greenhouse conditions. Seventeen nematode populations were tested at concentrations of 100, 250, and 500 infective juveniles (IJ)/larvae. The obtained data were submitted to the polynomial regression test. In the greenhouse, corn sowing was performed in plastic buckets with soil, corn straw, and water. After 7 days, Steinernema arenarium or Heterorhabditis sp. RSC02, and the larvae were added (40 larvae, one larvae/repetition). The data were submitted to the variance analysis and the Scott-Knott test (P<0.05). In the laboratory, tests with S. arenarium and Heterorhabditis sp. RSC02 caused mortality of 85 and 90%, respectively, being selected for the concentrations test. Concentrations of 150, 200, 250, 300, and 350IJ larvae-1 were tested. At a concentration of 200IJ larvae-1, S. arenarium and Heterorhabditis sp. RSC02 caused 100 and 97.6% mortality in laboratory, respectively, and in the greenhouse caused 77.5 and 87.5% mortality, respectively, when compared to the control (7.5%).O aumento no plantio do milho "safrinha" e o uso do sistema de plantio direto favorecem o desenvolvimento de Spodoptera frugiperda, principal praga da cultura. Dessa forma, os objetivos deste trabalho foram selecionar nematoides entomopatogênicos, de acordo com a mortalidade causada sobre S. frugiperda, adequar as concentrações em laboratório e avaliar a ação desses organismos em condições de casa-de-vegetação. Foram testadas 17 populações de nematoides nas concentrações de 100, 250 e 500 juvenis infectantes (JI) lagarta-1. Os dados obtidos foram submetidos ao teste de regressão polinomial. Em casa-de-vegetação, a semeadura do milho foi realizada em vasos de plástico contendo solo, palhada de milho e água. Após sete dias, foram adicionados Steinernema arenarium ou Heterorhabditis sp. RSC02 e as lagartas (40 lagartas, uma lagarta/repetição). Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e ao teste de médias Scott-Knott (P<0,05). Nos testes de laboratório, S. arenarium e Heterorhabditis sp. RSC02 causaram mortalidade de 85 e 90%, respectivamente, sendo selecionados para o teste de concentrações. Foram testadas as concentrações de 150, 200, 250, 300 e 350JI lagarta-1. Na concentração de 200JI lagarta-1, S. arenarium e Heterorhabditis sp. RSC02 causaram 100 e 97,6% de mortalidade, respectivamente, e em casa-de-vegetação causaram 77,5 e 87,5%, respectivamente, diferindo da testemunha (7,5%)

Effect of biofertilizers and neem oil on the entomopathogenic fungi beauveria bassiana (Bals.) vuill. and metarhizium anisopliae (Metsch.) sorok.

The in vitro fungitoxic effect of three biofertilizers, E.M.-4, Multibion Ô and Supermagro used in organic agriculture and the neem oil (Azadirachta indica A. Juss) on the entomopathogenic fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana was studied. These products were mixed in a medium where the two fungi were inoculated, and germination, vegetative growth and conidiogenesis were assessed. The biofertilizers Supermagro and E.M.- 4 showed to be less toxic for the two fungi whereas MultibionÔ caused major inhibition on M. anisopliae, with reductions in germination (-37.74%), colony diameter (-30.26%) and conidiogenesis (-42.62%). Neem oil promoted a larger negative effect on B. bassiana, inhibiting germination (-45.27%), colony diameter (-36.62%) and conidiogenesis (-84.93%)

Compatibilidade entre Beauveria bassiana e o predador Chrysoperla externa em laboratório

 The objective of this work was to evaluate the effect of the fungus Beauveria bassiana on eggs and larvae of Chrysoperla externa. Eggs with 24 hours and insects on 1st, 2nd and 3rd instar were immersed in fungal suspensions at 1.0x104 to 1.0x108 conidia mL-1. There was no fungal effect on the eggs viability. Third instar larvae were affected by B. bassiana, and the suspensions with 1.0x107 and 1.0x108 conidia mL-1 interfered in the evaluated parameters.O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos do fungo Beauveria bassiana sobre ovos e larvas de Chrysoperla externa. Ovos com até 24 horas de idade e insetos no 1o, 2o e 3o ínstares foram imersos em suspensões fúngicas de 1,0x104 a 1,0x108 conídios mL-1. Não houve efeito do fungo sobre a viabilidade dos ovos. Larvas de terceiro ínstar foram afetadas por B. bassiana, e as suspensões de 1,0x107 e 1,0x108 conídios mL-1 interferiram nos parâmetros avaliados

Efecto de Heterorhabditis sp. y Steinernema carpocapsae aplicados en diferentes períodos de infestación del suelo con larvas de Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae)

The Mediterranean Fruit Fly, (Ceratitis capitata) (Wiedemann) is considered one of the main pests of fruit culture around the world, causing significant losses in this sector.  This insect stays in the soil during a phase of life, where it becomes a target for entomopathogenic nematodes. Therefore, this work aimed to evaluate the effect of  Heterorhabditis sp. RSC01 and Steinernema carpocapsae All, applied alone or combined, and in different periods of soil infestation with larvae of C. capitata. For the first bioassay the treatments were: S. carpocapsae; Heterorhabditis sp.; S. carpocapsae + Heterorhabditis sp. (both applied immediately after the transfer of larvae); S. carpocapsae (applied immediately after the transfer of larvae) + Heterorhabditis sp. (applied 12 hours after the transfer of larvae); and S. carpocapsae (applied 12 hours after the transfer of larvae) + Heterorhabditis sp. (applied immediately after the transfer of larvae). For the second bioassay the treatments were: application of the nematodes, and then the soil infested with larvae; application of the nematode and after 24 hours soil infested with the larvae; soil infested with the larvae and then 24 hours after, application of the nematode. Ten C. capitata larvae were transferred to plastic jars (12 cm × 6 cm) containing 100 g soil, followed by the application of 3 mL of an aqueous suspension containing 125 JI cm-2. In control treatment was applied 3 mL of distilled water. The mortality’s evaluation was performed after five days later and was confirmed by symptom observations and corpse dissections. It was observed that Heterorhabditis sp. and S. carpocapsae were effective in controlling larvae of C. capitata when applied on the soil surface, alone or combined, with mortality rates ranging in 26 and 74%. For the range of application, S. carpocapsae was more efficient when applied immediately after the transfer of larvae to the soil, and 24 hours before to infestation (80 and 90% mortality, respectively). However, Heterorhabditis sp. was more efficient only when applied 24 hours before to infestation of the soil (90% mortality). La mosca del Mediterráneo (Ceratitis capitata) (Wiedemann) es considerada una de las principales plagas de la fruticultura mundial, causando pérdidas significativas en este sector. Este insecto tiene una fase de su vida en el suelo, siendo un blanco  potencial para los nematodos entomopatógenos. Así, los objetivos de este trabajo fueran evaluar la eficiencia de Heterorhabditis sp. RSC01 y Steinernema carpocapsae All, aplicados aislados o combinados, y en diferentes períodos de infestación del suelo con larvas de C. capitata. Para el primero bioensayo los tratamientos fueran: S. carpocapsae; Heterorhabditis sp.; S. carpocapsae + Heterorhabditis sp. (ambos aplicados inmediatamente después de la transferencia de las larvas); S. carpocapsae (aplicado logo después de la transferencia de las larvas) + Heterorhabditis sp. (aplicado 12 horas después de la transferencia de las larvas) y S. carpocapsae (aplicado 12 horas después de la transferencia de las larvas) + Heterorhabditis sp. (aplicado logo después de la transferencia de las larvas). Para el segundo bioensayo los ratamientos fueran: aplicación de nematodos y luego infestación del  suelo con larvas; aplicación de los nematodos, y después de 24 horas, infestación del suelo con larvas; la infestación del suelo con larvas, y 24 horas después aplicación de los nematodos. Se transfirieron Diez larvas de C. capitata a macetas de plástico con 100 g de suelo y se aplicó 3 ml de suspensión con 125 JI cm-2. En el tratamiento control se aplicó 3 ml de agua. La evaluación de la mortalidad se realizó cinco días después y la confirmación se realizó mediante la observación de los síntomas característicos del ataque de nematodos y disección de los cadáveres. Se encontró que Heterorhabditis sp. y S. carpocapsae fueron eficaces en el control de larvas de C. capitata cuando aportados en la superficie del suelo, ya sea aislado o combinado con tasas de mortalidad que oscilaran entre 26 y 74%. Para el intervalo de aplicación, S. carpocapsae fue más eficaz cuando aplicado en el momento de la infestación del suelo y 24 horas antes de la infestación (80 y 90% de mortalidad, respectivamente). Además, Heterorhabditis sp. Presentó más alta eficiencia sólo cuando se aplicó 24 horas antes de la infestación del suelo (90% de mortalidad).A mosca-do-Mediterrâneo (Ceratitis capitata) (Wiedemann) é considerada uma das principais pragas da fruticultura mundial  acarretando perdas significativas nesse setor. Esse inseto passa uma fase de sua vida no solo, sendo um alvo em potencial para nematóides entomopatogênicos. Assim, os objetivos deste trabalho foram avaliar a eficiência de Heterorhabditis sp. RSC01 e Steinernema carpocapsae All, aplicados de forma isolada ou combinada, e em diferentes períodos de infestação do solo com larvas de C. capitata. Para o primeiro bioensaio os tratamentos foram: S. carpocapsae; Heterorhabditis sp.; S. carpocapsae + Heterorhabditis sp. (ambos aplicados logo após a transferência das larvas); S. carpocapsae (aplicado logo após a transferência das larvas) + Heterorhabditis sp. (aplicado 12 horas após a transferência das larvas) e S. carpocapsae (aplicado 12 horas após a transferência  das larvas) + Heterorhabditis sp. (aplicado logo após a transferência das larvas). Para o segundo bioensaio os tratamentos foram: aplicação do nematóide e, em seguida, infestação do solo com as larvas; aplicação do nematóide e, após 24 horas, infestação do solo com as larvas; infestação do solo com as larvas e, 24 horas após, aplicação do nematóide. Foram transferidas dez larvas de C. capitata para potes plásticos contendo 100 g de solo e aplicados 3 mL de suspensão com 125 JI cm-2. No tratamento controle foram aplicados 3 mL de água. A avaliação da mortalidade foi realizada após cinco dias e a confirmação foi feita através da observação dos sintomas característicos do ataque de nematóides e da dissecação dos cadáveres. Verificou-se que Heterorhabditis sp. e S. carpocapsae foram eficientes no controle de larvas de C. capitata quando aplicados na superfície do solo, de forma isolada ou combinada, com mortalidade variando entre 26 e 74%. Em relação ao intervalo de aplicação, S. carpocapsae foi mais eficiente quando aplicado no momento da infestação do solo e 24 horas antes da infestação (80 e 90% de mortalidade, respectivamente). Por outro lado, Heterorhabditis sp. apresentou maior eficiência somente quando aplicado 24 horas antes da infestação do solo  (90% de mortalidade)

Patogenicidade de fungos entomopatogênicos a três espécies de ácaros em cafeeiro

Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) and Oligonychus ilicis (McGregor, 1917) (Acari: Tenuipalpidae, Tetranychidae) are considered the main pest mites of coffee plants (Coffea spp.), causing damages such as leaf fall and reduction of the photosynthetic foliar area. Among their main natural enemies, the entomopathogenic fungi and predatory mites have great potential for biological control. However, the entomopathogenic fungi can, occasionally, also infect the predatory mites. The objective of this work was to evaluate the pathogenicity of entomopathogenic fungi to the pest mites B. phoenicis and O. ilicis and to the predatory mite Iphiseiodes zuluagai Denmark & Muma, 1972 (Acari: Phytoseiidae). The experiments were carried out in a laboratory, using four strains of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. and one of the Lecanicillium sp. The mites were exposed to the fungi by spraying the pathogen in a Potter tower. For the B. phoenicis mite, the Lecanicillium sp. UFLA 70 strain caused 100% mortality in three days of exposure. For the O. ilicis species, the most effective treatments were UFLA 13 (B. bassiana) and UFLA 70 (Lecanicillium sp.) strains, which caused 70% of mortality. Most of the tested fungi strains were not pathogenic to the predator I. zuluagai, causing low mortality. Of all the fungi tested in this experiment, the most effective for B. phoenicis and O. ilicis was UFLA 70 of Lecanicillium sp., which caused high mortality of these pests, but did not cause a high mortality rate of the predatory mite I. zuluagai.Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) e Oligonychus ilicis (McGregor, 1917) (Acari: Tenuipalpidae, Tetranychidae) são considerados os principais ácaros-pragas do cafeeiro (Coffea spp.), pois causam danos, como a desfolha e a redução de área foliar de fotossíntese. Dentre os inimigos naturais associados, os fungos entomopatogênicos e os ácaros predadores têm grande potencial para serem utilizados no controle biológico de ácaros-praga; entretanto, os fungos podem ocasionalmente também infectar ácaros predadores. Objetivou-se com este trabalho avaliar a patogenicidade de fungos entomopatogênicos aos ácaros-praga B. phoenicis e O. ilicis e sobre o ácaro-predador Iphiseiodes zuluagai Denmark &amp; Muma, 1972 (Acari: Phytoseiidae). Os bioensaios foram realizados em laboratório, utilizando-se quatro isolados do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. e um de Lecanicillium sp., expondo os ácaros aos fungos mediante sua pulverização em torre de Potter. Para o ácaro B. phoenicis, o isolado UFLA 70 de Lecanicillium sp. promoveu 100% de mortalidade em três dias de exposição. Para a espécie O. ilicis, os tratamentos mais efetivos foram os isolados UFLA 13 (B. bassiana) e UFLA 70 (Lecanicillium sp.), os quais promoveram uma mortalidade de 70%. A maioria dos isolados não foi patogênica ao ácaro predador I. zuluagai, considerando que causou baixa mortalidade a ele. Dos fungos testados neste experimento, o isolado mais efetivo para B. phoenicis e O. ilicis foi UFLA 70 de Lecanicillium sp., que promoveu alta mortalidade dessas pragas, além de não causar elevada mortalidade ao caro predador I. zuluagai

Movement of Heterorhabditis amazonensis and Steinernema arenarium in search of corn fall armyworm larvae in artificial conditions

Spodoptera frugiperda (Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) is considered to be the main pest of maize crops in Brazil. Entomopathogenic nematodes (EPN) may be used to control this pest and exhibit different, unique abilities to search for their hosts. The movement of EPN in relation to S. frugiperda was evaluated. To test for horizontal movement, a styrofoam enclosure filled with sand was divided into segments, nematodes were placed at the entrance to the enclosure and a larva was placed at the end of each division. The same approach was used to evaluate vertical movement; however, PVC pipes were used in this case. In general, the mortality was inversely proportional to the initial distance between host and nematodes. In the vertical displacement test, both nematodes were able to kill the larvae up to a distance of 25 cm. Therefore, the infective juveniles of H. amazonensis and S. arenarium can search out, infect and kill larvae of S. frugiperda at distances of up to 60 cm and 25 cm of horizontal and vertical displacement, respectively