Interleukin-21 induces the differentiation of human umbilical cord blood CD34-lineage- cells into pseudomature lytic NK cells

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Umbilical cord blood (UCB) is enriched with transplantable CD34⁺cells. In addition to CD34-expressing haematopoietic stem cells (HSC), human UCB contains a rare population of CD34^-lineage^-cells endowed with the ability to differentiate along the T/NK pathway in response to interleukin (IL)-15 and a stromal cell support. IL-21 is a crucial regulator of NK cell function, whose influence on IL-15-induced differentiation of CD34^-lineage^-cells has not been investigated previously. The present study was designed and conducted to address whether IL-21 might replace the stromal cell requirements and foster the IL-15-induced NK differentiation of human UCB CD34^-lineage^-cells.</p> <p>Results</p> <p>CD34^-lineage^-cells were maintained in liquid culture with Flt3-L and SCF, with the addition of IL-15 and IL-21, either alone or in combination. Cultures were established in the absence of feeder cells or serum supplementation. Cytokine-treated cells were used to evaluate cell surface phenotype, expression of molecular determinants of lymphoid/NK cell differentiation, secretion of IFN-γ, GM-CSF, TNF-α and CCL3/MIP-1α, and cytolytic activity against NK-sensitive tumour cell targets. CD34^-lineage^-cells proliferated vigorously in response to IL-15 and IL-21 but not to IL-21 alone, and up-regulated phosphorylated Stat1 and Stat3 proteins. CD34^-lineage^-cells expanded by IL-21 in combination with IL-15 acquired lymphoid morphology and killer-cell immunoglobulin-like receptor (KIR)^-CD56⁺CD16^-/+phenotype, consistent with pseudo-mature NK cells. IL-21/IL-15-differentiated cells expressed high levels of mRNA for Bcl-2, GATA-3 and Id2, a master switch required for NK-cell development, and harboured un-rearranged TCRγ genes. From a functional standpoint, IL-21/IL-15-treated cells secreted copious amounts of IFN-γ, GM-CSF and CCL3/MIP-1α, and expressed cell surface CD107a upon contact with NK-sensitive tumour targets, a measure of exocytosis of NK secretory granules.</p> <p>Conclusion</p> <p>This study underpins a novel role for IL-21 in the differentiation of pseudo-mature lytic NK cells in a synergistic context with IL-15, and identifies a potential strategy to expand functional NK cells for immunotherapy.</p

Effects of pegylated G-CSF on immune cell number and function in patients with gynecological malignancies

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Pegylated granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF; pegfilgrastim) is a longer-acting form of G-CSF, whose effects on dendritic cell (DC) and regulatory T cell (Treg) mobilization, and on the <it>in vivo </it>and ex vivo release of immune modulating cytokines remain unexplored.</p> <p>Methods</p> <p>Twelve patients with gynecological cancers received carboplatin/paclitaxel chemotherapy and single-dose pegfilgrastim as prophylaxis of febrile neutropenia. Peripheral blood was collected prior to pegfilgrastim administration (day 0) and on days +7, +11 and +21, to quantify immunoregulatory cytokines and to assess type 1 DC (DC1), type 2 DC (DC2) and Treg cell mobilization. <it>In vitro</it>-differentiated, monocyte-derived DC were used to investigate endocytic activity, expression of DC maturation antigens and ability to activate allogeneic T-cell proliferation.</p> <p>Results</p> <p>Pegfilgrastim increased the frequency of circulating DC1 and DC2 precursors. In contrast, CD4⁺FoxP3⁺<it>bona fide </it>Treg cells were unchanged compared with baseline. Serum levels of hepatocyte growth factor and interleukin (IL)-12p40, but not transforming growth factor-β1 or immune suppressive kynurenines, significantly increased after pegfilgrastim administration. Interestingly, pegfilgrastim fostered <it>in vitro</it> monocytic<it/> secretion of IL-12p40 and IL-12p70 when compared with unconjugated G-CSF. Finally, DC populations differentiated <it>in vitro </it>after clinical provision of pegfilgrastim were phenotypically mature, possessed low endocytic activity, and incited a robust T-cell proliferative response.</p> <p>Conclusions</p> <p>Pegfilgrastim induced significant changes in immune cell number and function. The enhancement of monocytic IL-12 secretion portends favorable implications for pegfilgrastim administration to patients with cancer, a clinical context where the induction of immune deviation would be highly undesirable.</p

iALMA Cryofacility Dry Run Report

The iALMA Cryofacility consist of a 2x1 squared meters surface chamber that will permit to test the ALMA band 2+3 cartridge at operational conditions. The Cryofacility is setup at the CryoWaves Lab at INAF/IASF-Bologna

The link between thyroid autoimmunity (antithyroid peroxidase autoantibodies) with anxiety and mood disorders in the community: a field of interest for public health in the future

BACKGROUND: To evaluate the association between mood and anxiety disorders and thyroid autoimmunity in a community sample. Methods: A community based sample of 222 subjects was examined. Psychiatric diagnoses were formulated using the International Composite Diagnostic Interview Simplified (CIDIS), according to DSM-IV criteria. All subjects underwent a complete thyroid evaluation including physical examination, thyroid echography and measure of serum free T4 (FT4), free T3 (FT3), thyroid-stimulating hormone (TSH) and anti-thyroid peroxidase autoantibodies (anti-TPO). RESULTS: 16.6% of the overall sample had an anti-TPO value above the normal cut-off. Subjects with at least one diagnosis of anxiety disorders (OR = 4.2, C.L. 95% 1.9–38.8) or mood disorders (OR = 2.9, Cl 95% 1.4–6.6, P < 0.011) were positive for serum anti-TPO more frequently than subjects without mood or anxiety disorders. A statistically significant association with anti-TPO+ was found in Anxiety Disorder Not Otherwise Specified (OR = 4.0, CL 95% 1.1–15.5), in Major Depressive Episode (OR = 2.7, CL 95% 1.1–6.7) and Depressive Disorder Not Otherwise Specified (OR = 4.4, S CL 95% 1–19.3). CONCLUSIONS: The study seems to suggest that individuals in the community with thyroid autoimmunity may be at high risk for mood and anxiety disorders. The psychiatric disorders and the autoimmune reaction seem to be rooted in a same (and not easy correctable) aberrancy in the immuno-endocrine system. Should our results be confirmed, the findings may be of great interest for future preventive and case finding projects

Thymoglobulin, interferon-γ and interleukin-2 efficiently expand cytokine-induced killer (CIK) cells in clinical-grade cultures

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Cytokine-induced killer (CIK) cells are typically differentiated <it>in vitro </it>with interferon (IFN)-γ and αCD3 monoclonal antibodies (mAb), followed by the repeated provision of interleukin (IL)-2. It is presently unknown whether thymoglobulin (TG), a preparation of polyclonal rabbit γ immunoglobulins directed against human thymocytes, can improve the generation efficiency of CIK cells compared with αCD3 mAb in a clinical-grade culture protocol.</p> <p>Methods</p> <p>Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from 10 healthy donors and 4 patients with solid cancer were primed with IFN-γ on day 0 and low (50 ng/ml), intermediate (250 ng/ml) and high (500 ng/ml) concentrations of either αCD3 mAb or TG on day 1, and were fed with IL-2 every 3 days for 21 days. Aliquots of cells were harvested weekly to monitor the expression of representative members of the killer-like immunoglobulin receptor (KIR), NK inhibitory receptor, NK activating receptor and NK triggering receptor families. We also quantified the frequency of <it>bona fide </it>regulatory T cells (Treg), a T-cell subset implicated in the down-regulation of anti-tumor immunity, and tested the <it>in vitro </it>cytotoxic activity of CIK cells against NK-sensitive, chronic myeloid leukaemia K562 cells.</p> <p>Results</p> <p>CIK cells expanded more vigorously in cultures supplemented with intermediate and high concentrations of TG compared with 50 ng/ml αCD3 mAb. TG-driven CIK cells expressed a constellation of NK activating/inhibitory receptors, such as CD158a and CD158b, NKp46, NKG2D and NKG2A/CD94, released high quantities of IL-12p40 and efficiently lysed K562 target cells. Of interest, the frequency of Treg cells was lower at any time-point compared with PBMC cultures nurtured with αCD3 mAb. Cancer patient-derived CIK cells were also expanded after priming with TG, but they expressed lower levels of the NKp46 triggering receptor and NKG2D activating receptor, thus manifesting a reduced ability to lyse K562 cells.</p> <p>Conclusions</p> <p>TG fosters the generation of functional CIK cells with no concomitant expansion of tumor-suppressive Treg cells. The culture conditions described herein should be applicable to cancer-bearing individuals, although the differentiation of fully functional CIK cells may be hindered in patients with advanced malignancies.</p

Secondo Protocollo di Implementazione Misure per il contrasto e il contenimento della diffusione del virus Sars-CoV-2

Questo documento è da intendersi come protocollo di implementazione delle attività nel corso della attuale fase dell’emergenza pandemica e, con lo “Addendum al Documento di Valutazione dei Rischi dedicato al rischio biologico derivante da Sars-CoV-2, protocollo di sicurezza anti contagio, misure di prevenzione e protezione, formazione e informazione”, le Linee guida operative per i lavoratori e le lavoratrici dello “Istituto Nazionale di Astrofisica” Misure per il contrasto e il contenimento della diffusione del virus Sars-CoV-2 e il Protocollo di implementazione MAB (Musei Archivi Biblioteche) dell’INAF, Misure per il contrasto e il contenimento della diffusione del virus Sars-CoV-2, dei quali costituisce parte integrante, contiene misure per il contrasto e il contenimento della diffusione del virus Sars-CoV-2 per ogni Struttura di Ricerca INAF - Istituto Nazionale di Astrofisica e per la sede della Amministrazione Centrale, e sostituisce integralmente il “Protocollo di Implementazione Fase 2, Misure per il contrasto e il contenimento della diffusione del virus Sars-CoV-2” adottato con nota Circolare del Direttore Generale del 15 maggio 2020, numero 2482. Le disposizioni contenute nel Decreto del Presidente del Consiglio dei Ministri del 5 Agosto 2020 non si concretano in una totale “ripresa” delle attività di ricerca, ma semplicemente in un “ampliamento”, peraltro assai limitato e condizionato, delle stesse. È quindi necessario, in questa “Fase”, adottare misure che consentano, ove possibile, di svolgere le attività lavorative nella massima sicurezza. Pertanto, il Direttore Generale, d'intesa con il Presidente, il Direttore Scientifico e il Collegio dei Direttori di Struttura, ha avviato un processo volto a definire le azioni propedeutiche all’aggiornamento del “processo di implementazione” delle attività di ricerca e di laboratorio che potranno essere svolte in questa nuova “Fase”, nella consapevolezza che le stesse non devono arrecare alcun nocumento alla salute dei dipendenti dell'Ente e non devono, in alcun modo, favorire, direttamente o indirettamente, una recrudescenza della pandemia in atto, salvaguardando il bene supremo della salute pubblica, costituzionalmente tutelato, e che facciano, quindi, prevalere l'interesse generale sulle logiche puramente individualistiche (Circolare 2 maggio 2020, n. 2083, Allegato 9). Il presente documento tiene conto delle indicazioni contenute nei vari aggiornamenti dei provvedimenti Governativi e delle raccomandazioni delle Autorità Sanitarie Nazionali ed Internazionali, individua e definisce, per tutte le Strutture di Ricerca, le misure di sicurezza che dovranno essere adottate e i dispositivi da utilizzare, suscettibili di ulteriori e/o diverse implementazioni a livello locale, in ragione delle diverse peculiarità delle singole Strutture della specificità dei luoghi, delle esigenze logistiche, delle misure organizzative adottate e di eventuali aggiornamenti delle disposizioni normative. Resta inteso che in base all’evoluzione dello scenario epidemiologico, e nell’ottica della tutela della pubblica sicurezza, le misure indicate potranno essere rimodulate, anche in senso più restrittivo, e dovranno essere immediatamente applicate eventuali, future e più restrittive disposizioni governative Regionali e/o locali. Il Direttore Generale, il Direttore Scientifico e i Direttori di Struttura, ciascuno nell'ambito delle rispettive competenze, individuano idonee procedure di controllo dell'applicazione delle predette misure di sicurezza, con la collaborazione di RSPP, RLS e Medico Competente. I contenuti del documento saranno aggiornati ad ogni variazione della valutazione del rischio e delle misure di contrasto alla diffusione del Sars-CoV-19 da parte degli organi competenti. Ogni sede integra con eventuali indicazioni del Responsabile della Prevenzione e Protezione, del Medico Competente, del Rappresentante dei Lavoratori per la Sicurezza, anche in relazione all’ambiente specifico

Addendum al Documento Valutazione dei Rischi dedicato al rischio biologico derivante da Sars-CoV-2, protocollo di sicurezza anti-contagio misure di prevenzione e protezione formazione e informazione

Documento da allegare al Documento di Valutazione dei Rischi di ogni Struttura di Ricerca INAF - Istituto Nazionale di Astrofisica. Documento approvato con nota Circolare del 15 maggio 2020, numero 2482

Protocollo per l’aggiornamento delle Misure per il contrasto e il contenimento della diffusione del virus SARS-CoV-2/Covid-19 nelle Strutture di Ricerca e nella Sede della Amministrazione Centrale dello Istituto Nazionale di Astrofisica.

Il documento è da intendersi come protocollo per l’aggiornamento delle misure di contrasto alla diffusione dell’epidemia da Covid-19, anche in considerazione dell’emanazione dei nuovi provvedimenti adottati dal Governo e dal Ministero della Salute, di circolari e “comunicazioni” di Ministeri e Autorità competenti, e della legislazione vigente in materia di contrasto alla diffusione dell’epidemia da Covid-19, e contiene linee guida per la revisione e l’aggiornamento dei “Protocolli di sicurezza” adottati a livello locale dalle Strutture di Ricerca e dalla sede della Amministrazione Centrale, tenuto conto della situazione epidemiologica e della necessità di conservare misure efficaci per prevenire e ridurre il rischio di contagio. Il documento tiene conto delle nuove disposizioni normative e, in particolare, del “Protocollo condiviso di aggiornamento delle misure per il contrasto e il contenimento della diffusione del virus SARS-CoV-2/COVID-19 negli ambienti di lavoro”, siglato il 30 giugno 2022 e ha l’obiettivo di fornire indicazioni operative e linee guida aggiornate per garantire l’efficacia delle misure precauzionali di contenimento adottate per contrastare l’epidemia da Covid-19, applicando tutte le misure necessarie allo svolgimento delle attività lavorative nella massima sicurezza, tenendo in particolare conto gli aspetti che riguardano il benessere del personale nell’accezione più ampia del termine. Il documento richiama, inoltre, la necessità di promuovere e favorire, in ogni sistema di prevenzione di qualunque rischio, un ambiente di lavoro sereno, in cui i rapporti interpersonali siano improntati alla correttezza, al reciproco rispetto della libertà e dignità della persona in quanto diritti inviolabili di tutto il personale che a qualsiasi titolo lavora e opera all'interno dell'Istituto, delle lavoratrici e dei lavoratori chiamati ad applicare, a garantire il rispetto del presente documento e di chi ha lavorato per la sua stesura. Atteggiamenti offensivi, molesti, violenti e lesivi della dignità e della professionalità dell’individuo sul luogo di lavoro, oltre a costituire fattori di rischio lavorativo, sono stigmatizzati dai “Codici” adottati dall’Ente

The high-frequency upgrade of the Sardinia Radio Telescope

We present the status of the Sardinia Radio Telescope (SRT) and its forthcoming update planned in the next few years. The post-process scenario of the upgraded infrastructure will allow the national and international scientific community to use the SRT for the study of the Universe at high radio frequencies (up to 116 GHz), both in single dish and in interferometric mode. A telescope like SRT, operating at high frequencies, represents a unique resource for the scientific community. The telescope will be ideal for mapping quickly and with relatively high angular resolution extended radio emissions characterized by low surface brightness. It will also be essential for spectroscopic and polarimetric studies of both Galactic and extragalactic radio sources. With the use of the interferometric technique, SRT and the other Italian antennas (Medicina and Noto) will operate within the national and international radiotelescope network, allowing astronomers to obtain images of radio sources at very high angular resolution

Status of the High-Frequency Upgrade of the Sardinia Radio Telescope

The Sardinia Radio Telescope is going through a major upgrade aimed at observing the universe at up to 116 GHz. A budget of 18.700.000 E has been awarded to the Italian National Institute of Astrophysics to acquire new state-of-the-art receivers, back-end, and high-performance computing, to develop a sophisticated metrology system and to upgrade the infrastructure and laboratories. This contribution draws the status of the whole project at eight months from the end of the funding scheme planned for August 2022