(A)cerca de Azamor: estruturas militares ao manuelino

Dissertação de mestrado integrado em Arquitectura (área Cultura Arquitectónica, ramo História da Arquitectura)Azamor foi um ponto estratégico para a expansão do Reino de Portugal entre os séculos XV e XVI. O seu estudo permite reconhecer domínios políticos, relações sociais e económicas, assim como possibilita a caracterização das formas de habitar, guerrear, construir, lidar com o urbanismo, com a arquitectura e com o quotidiano das comunidades da época no Além-mar. O intervalo temporal de ocupação portuguesa na vila (1513-1542, sob reinado de D. Manuel I), cruza etapas conturbadas e de grandes mudanças na história europeia, de alterações ao gosto e necessidades arquitectónicas pelo desenvolvimento de novas políticas régias, tecnologias bélicas e filosofias do renascimento. Diversos estudos eram desenvolvidos no campo da arquitectura militar, acompanhando o aperfeiçoamento das armas de fogo. A noção de calibre, a generalização dos projécteis fundidos e a descoberta das capacidades da pólvora exigiam reformas profundas nos sistemas fortificados, na óptica da utilização/defesa do armamento pirobalístico. Crescia a teorização e tratadística que circulava pela Europa, ainda que sobre a forma de ensaio, em cópias e apontamentos. Realçamos os estudos do italiano Francesco di Giorgio Martini como aquele que mais possa ter influenciado as arquitecturas dos irmãos Diogo e Francisco de Arruda – mestres da corte manuelina, responsáveis pelo traçado e construção de dispositivos militares em Azamor. Enquadrando-se num tempo de transição, as arquitecturas da cerca de Azamor exigiram ser estudadas segundo a complexidade fundida de diversas disciplinas (arquitectura militar, urbanismo,etc.) em plena transformação e redescoberta. Através de modelos planimétricos e tridimensionais de produção original, o trabalho elabora avaliações e desenhos experimentais daquilo que poderá ter sido o projecto pensado pelos mestres Arruda. À construção de uma fortificação manuelina, agrega-se toda uma retórica de combinações geométricas e numéricas, cálculo de distâncias entre estruturas e o poder/alcance de fogo da época.Azamor was a strategic stage for the expansion of the Portuguese Kingdom between the centuries XV and XVI. Studying it allows to recognize control politics, social and economic relations, as well the possibility characterization forms of lifestyle, war, build, how to labour with urbanism, with architecture and with daily of the communities from the oversea time. The time of Portuguese occupation in the village (1513-1542, beneath reign of D. Manuel I), crosses concerned stages and large changes in European history, of taste changes and architectural needs by the development of new policies regal, warlike technologies and renaissance philosophies. Several studies were developed on the field of military architecture, following the improvement of fire weapons. The notion of gauge, the generalization of melted projectiles and the discovery of the capacities of the gunpowder demanded extreme reforms in the fortified systems, in the optical of use/defense to study and calculate the range of armament. The theorization and treatise that circulated from Europe grew, although on the rehearsal form, in copies and notes. We enhance the italian’s Francesco di Giorgio Martini studies as one that might have more influenced the siblings' Diogo and Francisco de Arruda, manueline architecture masters, responsible for the plan and construction of military devices in Azamor. Being framed in a time of transition the military architectures of Azamor demanded to be studied according to the melted complexity of several disciplines (military architecture, urbanization, etc.) in entire transformation and rediscovery. Through planimetries and tridimentinal models by original production the work elaborates experimental valuactions and drawings of what may have been the project purposed from the Arruda masters. To the construction of a manueline fortification, one aggregates rhetorical geometries and numerical combinations, distance calculation between structures and the epoch power/attainment from fire

Nanosistema de entrega de fármacos para tratamento de infeções por HPV

Sequências de oligonucleótidos de DNA e RNA ricas em guaninas podem associar-se inter ou intramolecularmente para formar estruturas de quatro cadeias que se designam G-quadruplex (G4). Vários oligodesoxinucleótidos de G4 têm sido alvo de estudo como potenciais agentes diagnóstico e terapêuticos funcionando como aptameros, pois têm interação específica com proteínas alvo que podem encontrar-se à superfície das células. Entre estes alvos está a nucleolina (NCL), proteína multifuncional sobrexpressa à superfície das células cancerosas, sendo por isso um alvo para o desenvolvimento estratégias para o diagnóstico e terapia do cancro. Entre os diversos aptameros G4 destaca-se o AS1411, que é um aptamero que se liga à NCL e inibe o crescimento de células cancerosas sem afetar as células normais, tendo sido alvo de ensaios clínicos humanos de fases 1 e 2. O seu comportamento seletivo tem sido de particular interesse nos últimos anos para a entrega de agentes terapêuticos ou de imagem em células cancerosas; pelo que a procura de novas estratégias com vista a melhoria das propriedades deste aptamero G4 é um foco de estudo crescente. As modificações químicas no G4 AS1411 e a formação dos conjugados com ligandos de G4, constituem uma estratégia promissora para explorar o seu potencial terapêutico e constituem a base para a formação e otimização de nanosistemas conjugados aptamero-ligando. Neste trabalho são reportados ensaios biofísicos e in vitro de derivados de fenantrolina e derivados de laranja de acridina usados para estabilizar um derivado do AS1411, designado AT11-L0. Também é proposta a síntese de novos ligandos derivados de fenantrolina. Relativamente aos ensaios biofísicos, a espectroscopia de discroísmo circular (CD) confirmou a existência de uma estrutura G4 paralela para o AT11-L0 em tampão 65 mM KCl + 20 mM K2HPO4/KH2PO4. As experiências de CD-melting demonstraram que os ligandos que provocaram maior estabilização térmica da estrutura do G4 AT11-L0 foram os derivados de laranja de acridina C8-NH2 e o C8, com ?Tm = 26,6 ºC e 23,9 ºC, respetivamente a 4 equivalentes molares. As titulações de fluorescência indicaram valores de KD entre 10-6 - 10-7 (M-1) para os ligandos derivados de laranja de acridina e de fenantrolina, indicativos de ligandos de G4 com afinidade média a elevada. Sendo que, os ligandos com maior afinidade para o AT11-L0 foram o derivado de laranja de acridina C8-NH2 (KD = 3,2×10-7 (M-1)) e o derivado de fenantrolina [32]phen2N4 (KD = 2,7×10-7 (M-1)). Já os ensaios in vitro foram levados a cabo em células HeLa vs NHDF. Foram realizados ensaios de citotoxicidade (MTT) para determinar o IC50 dos ligandos C8-NH2, C8, C5, C3 e [16]phenN2 e posteriormente para avaliar a citotoxicidade dos conjugados AT11-L0-C8, AT11-L0-C8-NH2, AT11-L0-C5, AT11-L0-C3. Os ligandos demonstraram ser citotóxicos para ambas as linhas celulares, com valores de IC50 entre 0,15 µM e 3,51 µM. Os nanosistemas conjugados aptamero-ligando demonstraram ser citotóxicos e seletivos para células HeLa. Foram ainda levados a cabo estudo de colocalização em células HeLa com o conjugado AT11-L0 - C8, através de microscopia de fluorescência confocal. Verificou-se localização preferencial dos ligandos no nucléolo das células HeLa, a internalização do aptamero AT11-L0, bem como a formação do conjugado aptamero-ligando e a sua internalização nas células. No geral, estes resultados demonstraram ser promissores para o desenvolvimento de futuros nanosistemas envolvendo aptameros G4 derivados do AS1411, conjugados com ligandos de G4 derivados de laranja de acridina e de fenantrolina.Guanine-rich DNA and RNA sequences may associate intermolecularly or intramolecularly to form four-chain structures, designated G-quadruplex (G4). Several oligodeoxynucleotides with this intrinsic capacity have been studied as potential diagnostic and therapeutic agents working as aptamers, since they have specific interaction with target proteins that may be expressed on the surface of cells. Among these targets there is nucleolin (NCL), a multifunctional protein that overexpresses the surface of cancer cells and it is a target for the development of strategies for cancer diagnosis and therapy. Among all the G4 aptamers there is AS1411, which is an anti-NCL aptamer that inhibits the growth of cancer cells without affecting normal cells and it was reached human clinical trials phases 1 and 2. Its tumour-selective behavior has been of interest in recent years for delivery of imaging or therapeutic agents in cancer cells; therefore, the search for new strategies to improve this G4 aptamer properties is a focus of growing study. The chemical modifications in G4 AS1411 and its conjugation with G4 ligands constitute a promising strategy to exploit its therapeutic potential and constitute the basis for aptamer-ligand conjugated nanosystems formulation and optimization. In this work biophysical and in vitro studies of phenanthroline derivatives and orange acridine derivatives used to stabilize an AS1411 derivative, designated AT11-L0, are reported. The synthesis of new ligands derived from phenanthrolines is also proposed. In biophysical assays, circular dichroism spectroscopy (CD) confirmed the existence of a G4 parallel structure to AT11-L0 in 65 mM KCl + 20 mM K2HPO4 / KH2PO4 buffer. CD-melting experiments demonstrated that the ligands that caused the greatest thermal stabilization of the structure of G4 AT11-L0 were the acridine orange derivatives C8-NH2 and C8, with ?Tm = 26.6 ° C and 23.9 ° C, respectively in presence of 4 molar equivalents. Fluorescence titrations indicated KD values between 10-6 - 10-7 (M-1) for both acridine orange and phenanthroline derivatives, which is indicative of medium to high affinity G4 ligands. The ligands with the highest affinity for AT11-L0 were the acridine orange derivative C8-NH2 (KD = 3.2 × 10-7 (M-1)) and the phenanthroline derivative [32]phen2N4 (KD = 2.7 × 10-7 (M-1)). In vitro assays were performed on HeLa vs NHDF cells. Cytotoxicity assays (MTT) were performed to determine the IC50 of C8-NH2, C8, C5, C3 and [16]phenN2 ligands and thereafter to evaluate the cytotoxicity of the conjugates AT11-L0 - C8, AT11-L0 - C8-NH2, AT11-L0 - C5, AT11-L0 - C3. Ligands were shown to be cytotoxic to both cell lines, with IC50 values between 0.15 µM and 3.51 µM. Aptamer-ligand conjugated nanosystems have been shown to be cytotoxic and selective for HeLa cells. A colocalization study in HeLa cells with the AT11-L0 - C8 conjugate was carried out by confocal fluorescence microscopy. Preferred localization of the ligand in the HeLa cell nucleolus, the internalization of the AT11-L0 aptamer, as well as the formation of the aptamer-ligand conjugate and its internalization into the cells were evidenced. Overall, these results have been shown to be promising for the development of future nanosystems involving G4 aptamers derived from AS1411, conjugated to G4 ligands which are acridine orange and phenanthroline derivatives

Relatório de Estágio

O presente relatório resulta da formação teórica e prática desenvolvida ao longo da Prática Educativa Supervisionada, para obtenção do grau de mestre em Educação Pré-Escolar e Ensino do 1º Ciclo de Ensino Básico. De facto, esse período foi essencial para a construção do perfil profissional docente, com base na Metodologia de Investigação-Ação, seguindo o processo cíclico de observação, planificação, ação e avaliação, numa perspetiva constante de melhoria da prática, de modo a responder eficazmente às dificuldades e desafios encontrados. Uma posição reflexiva e colaborativa com todos os intervenientes educativos, incluindo a família, esteve presente ao longo deste tempo, seguindo o paradigma socioconstrutivista, tendo em conta que a criança é ativa na construção dos seus conhecimentos, em contacto com o mundo, sendo essencial a exploração de diversos recursos, tanto em sala como no exterior. Neste sentido, o presente documento pretende evidenciar o desenvolvimento, tanto a nível pessoal como profissional, no decorrer da prática pedagógica, consagrando as experiências vivenciadas, essenciais à construção da identidade profissional.This report is the result of theoretical and practical training developed throughout Supervised Educational Practice, to obtain a master's degree in Pre-School Education and Teaching in the 1st Cycle of Basic Education. In fact, this period was essential for the construction of the professional teaching profile, based on the Research-Action Methodology, following the cyclical process of observation, planning, action and evaluation, in a constant perspective of improving practice, in order to respond effectively to the difficulties and challenges encountered. A reflective and collaborative position with all educational actors, including the family, was present throughout this time, following the socio-constructivist paradigm, taking into account that the child is active in the construction of his knowledge, in contact with the world, being essential the exploration of various resources, both inside and outside the room. In this sense, this document intends to highlight the development, both at a personal and professional level, during the pedagogical practice, consecrating the lived experiences, essential to the construction of professional identity

Mascate, cidade ou território: para uma interpretação da sua defesa ao tempo português

De todas as fortalezas que marcaram a presença portuguesa no Médio Oriente, Mascate (1507-1650) destaca-se como um dos conjuntos de maior escala e relevância, desenvolvido graças à sua posição estratégica no panorama do Estado da Índia e devido às suas excelentes condições portuárias. Circunscrita pela praia e abrigada por uma cortina de picos montanhosos, a implantação da cidade de Mascate não requereu grande esforço defensivo até à chegada dos portugueses. Durante os anos 80 do século XVI, construíram-se duas poderosas fortificações – São João e Almirante, cujo desenho aparecia alternativa e plasticamente adaptado à topografia acidentada do local. Já em Seiscentos, a coroa portuguesa sentiu necessidade de dotar a cidade de um traçado amuralhado, acompanhado de fosso e pontuado por baluartes, que ainda hoje se pode ler, mesmo que parcialmente adulterado pelo crescimento urbano do final do século XX. Cruzando leituras cartográficas e relatos coevos com levantamentos actuais, interpretação iconográfica e análise morfológica, este artigo visa compreender a complementaridade e diálogo que as diversas estruturas militares foram articulando neste ponto da costa omanita em prol de uma visão macro-territorial de defesa de porto e cidade.Among all of the fortresses that are the legacy of Portuguese presence in the Middle East, Muscat (1507‑1650) is one of the biggest and most significant, due to its excellent harbouring conditions and strategic location within the Portuguese State of India. Edged by the beach and sheltered by a curtain of high peaks, only when the Portuguese arrived did the city require heavy defensive measures. During the 1580s, two powerful fortified strongholds – São João and Almirante – were erected, their layout apparently adapted to the challenging topography of the site. Later, in the seventeenth century, the crown felt the need to surround the city with walls punctuated by bastions and a moat. These structures are still discernible today, albeit partially changed by the late-twentieth century urban growth. Crossing cartographical readings with coeval reports and current surveys, combined with iconographic interpretation and morphological analysis, this paper seeks to understand the dialogue and complementarity established between all of the military structures along this stretch of the Omani coast, with a view to attaining a macro-territorial perspective of the defences of the harbour and the city

Triatoma jatai sp. nov. in the state of Tocantins, Brazil (Hemiptera: Reduviidae: Triatominae)

Triatoma jatai sp. nov. is the first new species of triatomine to be described in the state of Tocantins, in the northern region of Brazil. It was caught on rock outcrops in the wild environment and, more recently, invading homes. While T. jatai sp. nov. is morphologically similar to Triatoma costalimai, it is distinguished by its general colouring, differences in the blotches on the connexivum, wing size in females and external structures of the male genitalia. The type series has been deposited in the Entomological Collection and Herman Lent Collection, Oswaldo Cruz Institute-Oswaldo Cruz Foundation, Rio de Janeiro, Brazil.Fil: Monte Gonçalves, Teresa Cristina. Ministerio de Salud de Brasil. Fundacion Oswaldo Cruz; Brasil;Fil: Teves Neves, Simone. Ministerio de Salud de Brasil. Fundacion Oswaldo Cruz; Brasil;Fil: Santos Mallet, Jacenir. Ministerio de Salud de Brasil. Fundacion Oswaldo Cruz; Brasil;Fil: Carbajal de la Fuente, Ana Laura. Consejo Nacional de Invest. Científ.y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Ecología, Genética y Evolución de Bs. As; Argentina;Fil: Macedo Lopes, Catarina. Ministerio de Salud de Brasil. Fundacion Oswaldo Cruz; Brasil