THE SENSITIVITY OF DEVELOPED ELISA TEST SYSTEM FOR AFLATOXIN B1 DETECTION COMPARED TO CHROMATOGRAPHIC METHODS

Розроблено тест-систему для виявлення афлатоксину В1 методом ІФА. Відпрацьована методика синтезу імуноферментного кон’югату афлотоксин-ЛФ і підібрано стабілізуючі розчини для його зберігання та створення імуноферментної тест-системи. Підібрано стабілізуючий розчин для зберігання кон’югату та розчин на основі трісового буфера, який найкраще справлявся з подоланням неспецифічних взаємодій антитіл з матеріалом планшету і зменшував кількість хибних результатів при постановці аналізу.Для встановлення чутливості розробленої ІФА тест-системи готували серію розведень стандарту афлатоксину В1 в молоці з концентраціями 0, 1, 5, 10, 20, 40,  80, 160, 320, 640 ppb. Зразки тестували методом ІФА та за допомогою ВЕРХ. Визначено, що чутливість виявлення афлатоксину В1 в розробленій тест-системі ІФА (ELISA) складає 4-40 ppb, а у ВЕРХ – 1-320 ppb. Доведено, що хроматографічні методи (тонкошарова хроматографія та ВЕРХ) менш специфічні порівняно з імуноферментним аналізом. Отримавши основні компоненти тест-системи і оптимізувавши умови проведення аналізу показали, що розроблена тест-система легко відтворювана, має високу чутливість та специфічність.Разработана тест-система для опредеения афлатоксина В1 методом ИФА. Отработанная методика синтеза иммуноферментного конъюгата афлотоксин-ЩФ и подобраны стабилизирующие растворы для его хранения для создания иммуноферментной тест-системы. Подобран стабилизирующий раствор для хранения конъюгата и раствор на основе трисового буфера, который лучше справлялся с преодолением неспецифических взаимодействий антител с материалом планшета и уменьшал количество ложных результатов при постановке анализа.Для определения чувствительности разработанной ИФА тест-системы готовили серию разведений стандарта афлатоксина В1 в молоке с концентрациями 0, 1, 5, 10, 20, 40, 80, 160, 320, 640 ppb. Образцы тестировали методом ИФА и с помощью ВЭЖХ. Определено, что чувствительность обнаружения афлатоксина В1 в разработаной тест-системе ИФА (ELISA) составляет 4-40 ppb, а в ВЭЖХ – 1-320 ppb. Доказано, что хроматографические методы (тонкослойной хроматографии и ВЭЖХ) менее специфичны по сравнению с иммуноферментным анализом. Получив основные компоненты тест-системы и оптимизировав условия проведения анализа показано, что разработанная тест-система легко воспроизводима, имеет высокую чувствительность и специфичность.The test system was developed for the detection of aflatoxin B1 by ELISA. The methodology for synthesis of immune-enzyme aflatoxin-alkaline phosphatase conjugates was completed and selected stabilizing solutions for the storage and creating ELISA test system. The stabilizing solution was selected for storing conjugate and trises buffer solution that better cope with overcoming nonspecific interactions of antibodies with the material of plate and reduces amount of false positives in the formulation of analysis. For determining the sensitivity of developed ELISA test systems was prepared the dilutions series of aflatoxin B1 standards in milk at the concentrations 0, 1, 5, 10, 20, 40, 80, 160, 320, 640 ppb. The samples were analized by ELISA and HPLC. Determined that the sensitivity of detection of aflatoxin B1 at the developed of ELISA test system is 4-40 ppb, and HPLC - 1-320 ppb. Was proved that the chromatographic techniques (thin layer chromatography and HPLC) compared with the ELISA less specific. After receiving the basic components of the test system and optimized of the analysis conditions were showed that the developed test system can be easily reproducible and has a high sensitivity and specificity

Аналіз лікарських призначень пацієнтам з виразковою хворобою дванадцятипалої кишки в умовах стаціонару

Aim. To analyze medical prescriptions for patients with duodenal ulcer disease in hospital setting, to determine the compliance of the treatment with the current treatment protocols. Materials and methods. We used 102 case histories, medical prescriptions of the Gastroenterology Department of the Clinical Regional Hospital named after M.I. Pirogov, Unified Clinical Protocol of the primary and specialized medical care “Peptic ulcer of the stomach and duodenum in adults and children”, the State Formulary of Medicines of Ukraine, the nomenclature of drugs for the treatment of duodenal ulcer, the official online resource tabletki.ua. Statistical, analytical and comparative, systematic, logical, graphic and mathematical-statistical methods were applied. Results and discussion. As a result of the study conducted, an analysis of drug prescriptions for patients with duodenal ulcer was carried out at the premises of the Gastroenterology Department of the Clinical Regional Hospital named after M. I. Pirogov. Over a period of 1 year and 3 months, 102 patients with the main diagnosis of duodenal ulcer were treated. According to the data obtained from the histories of diseases, men (94 %) aged 30-40 years were most often ill. The average duration of bed days was 5 days. The most common concomitant diseases were pancreatitis, GERD (non-erosive, endoscopically positive), hepatitis, duodenal bile reflux, Oddi sphincter dysfunction (pancreatic type). Two groups of drugs were prescribed according to the ATC classification for pathogenetic and symptomatic treatment: group A – drugs affecting the digestive system and metabolism (71.43 %) and group J – antimicrobial drugs for systemic use (28.57 %). Among the producing countries, foreign-made drugs prevailed – 62.4 %. During the study period, doctors prescribed 63 active substances by INN and 109 drugs by TN. In accordance with the Unified Clinical Protocol, the number of INN drugs was 18, 39 drugs by TN, and the State Formulary included drugs of 48 INN and 80 TN. During the study period, 24 drugs by TN for the pathogenetic treatment (eradication therapy) and 18 drugs by TN for the symptomatic treatment were prescribed. The prescription of drugs for the pathogenetic and symptomatic treatment was scientifically substantiated and included in the current normative documentation for the provision of patients with duodenal ulcer. When conducting the eradication therapy the leading drugs were Omeprazole (66 prescriptions), De-nol (55 prescriptions), Ezonexa (29 prescriptions), Controlok (26 prescriptions), Pilobact Neo (24 prescriptions). To prevent dysbiosis, such drugs as Enterol (8 prescriptions), Enterogermina forte (7 prescriptions) were most often prescribed. To relieve the symptoms of duodenal ulcer, Mebsyn Retard (24 prescriptions), Trimspa (19 prescriptions), Neospastil (17 prescriptions) were applied. Conclusions. Therefore, the medical care of patients in hospital setting is expedient and corresponds to the current Treatment Protocols.Мета: аналіз лікарських призначень пацієнтам з виразковою хворобою дванадцятипалої кишки (ВХДК) в умовах стаціонару, визначення відповідності лікування чинним Протоколам лікування. Матеріали та методи: 102 історії хвороби, листи лікарських призначень, гастроентерологічне відділення Клінічної обласної лікарні імені М. І. Пирогова, Уніфікований клінічний протокол первинної та спеціалізованої медичної допомоги «Пептична виразка шлунку та дванадцятипалої кишки у дорослих і дітей», Державний формуляр лікарських засобів України, номенклатура лікарських засобів (ЛЗ) для лікування ВХДК; статистичний, аналітико-порівняльний, системний, логічний, графічний і математико-статистичні методи. Результати дослідження. У результаті проведеного дослідження був проведений аналіз лікарських призначень хворим з ВХДК на базі гастроентерологічного відділення Клінічної обласної лікарні імені М. І. Пирогова. За період 1 рік 3 місяці було проліковано 102 пацієнти з основним діагнозом ВХДК. За отриманими даними з історій хвороб, найчастіше хворіли чоловіки (94 %) віком 30-40 років. Середня тривалість перебування в стаціонарі становила 5 днів. Найчастішими супутніми захворюваннями є панкреатит, гастроезофагеальна рефлюксна хвороба (ГЕРХ) (неерозивна, ендоскопічно позитивна), гепатит, дуоденальний рефлюкс жовчі, дисфункція сфінктера Одді (панкреатичний тип). Для патогенетичного та симптоматичного лікування були призначені 2 групи ЛЗ за АТХ-класифікацією: група А – ЛЗ, що впливають на травну систему та обмін речовин (71,43 %) та група J – Протимікробні лікарські засоби для системного використання (28,57 %). З-поміж країн-виробників переважали препарати іноземного виробництва – 62,4 %. За досліджуваний період лікарями було призначено 63 діючі речовини за міжнародною непатентованою назвою (МНН) та 109 ЛЗ за торговою назвою (ТН). Відповідно до Уніфікованого клінічного протоколу кількість МНН складає 18, за ТН – 39 ЛЗ, до Державного формуляру увійшли 48 МНН – 80 ТН. За досліджуваний період було призначено 24 ЛЗ за ТН для патогенетичного (ерадикаційна терапія) та 18 ЛЗ за ТН для симптоматичного лікування. Призначення ЛЗ для патогенетичного та симптоматичного лікування науково обґрунтоване і входить до чинної нормативної документації щодо забезпечення хворих з ВХДК. Для проведення ерадикаційної терапії препаратами-лідерами були: Омепразол (66 призначень), Де-нол (55 призначень), Езонекса (29 призначень), Контролок (26 призначень), Пілобакт Нео (24 призначень). Для запобігання дисбіозу найчастіше призначались Ентерол (8 призначень), Ентерожерміна форте (7 призначень); для полегшення симптомів ВХДК – Мебсин ретард (24 призначення), Тримспа (19 призначень), Неоспастил (17 призначень). Висновки. Отже, фармацевтичне забезпечення в умовах стаціонару є доцільним та відповідає чинним Протоколам лікування

Clinical Experience of Luminescent Diagnostics of Precancerous Diseases and Cervical Cancer

The article summarizes the experience of using luminescent diagnostics with the use of ytterbium porphyrin complexes in gynecology and oncology. A pharmaceutical composition based on the Yb complex of 2,4-dimethoxyhematoporphyrin IX was used as the luminescent markers within the infrared range. The determination of luminescence characteristics (luminescence intensity) was carried out using a laserfiber fluorimeter in the range of 900-1100 nm. A new method for diagnosis of cervical disease has been proposed. The method of luminescent diagnostics allows to conduct a survey of a large number of patients in a short time. The method of luminescent diagnostics using the ytterbium complexes of porphyrins is not invasive. The method can be used as a screening. Differences between normal and pathologically altered cervical tissue have been identified and differences between pathological changes in the cervix HSIL (CIN II, CIN III) and cervical cancer are reliable. Keywords: Cervical cancer, squamous cell carcinoma, diagnosis of cervical cancer, squamous intraepithelial lesions of high grade – HSIL, luminescent diagnostics, luminescing in the near infrared (NIR) spectral region, porphyrins, ytterbium complexes of porphyrins

Vortex-line liquid phases: Longitudinal superconductivity in the lattice London model

We study the vortex-line lattice and liquid phases of a clean type-II superconductor by means of Monte Carlo simulations of the lattice London model. Motivated by a recent controversy regarding the presence, within this model, of a vortex-liquid regime with longitudinal superconducting coherence over long length scales, we directly compare two different ways to calculate the longitudinal coherence. For an isotropic superconductor, we interpret our results in terms of a temperature regime within the liquid phase in which longitudinal superconducting coherence extends over length scales larger than the system thickness studied. We note that this regime disappears in the moderately anisotropic case due to a proliferation, close to the flux-line lattice melting temperature, of vortex loops between the layers.Comment: 8 pages, Revtex, with eps figures. To appear in Phys. Rev.

LOW PROFILE SLOT ANTENNA INTEGRATED WITH SOLAR PANEL

The integration of solar panels with antennas allows you to achieve communication in remote areas to provide the capabilities of the Internet of things, monitoring of vital signs of the body. The paper deals with the integration of a low-profile corrugated antenna into a solar panel design

МОРФОМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПЕЧЕНИ КРЫС ВИСТАР С МОДЕЛЬЮ АЛИМЕНТАРНОГО ОЖИРЕНИЯ

Experimental alimentary obesity leads to significant structural changes in the liver of rats. Structural changes in the parenchymal cells are accompanied by functional strain in the capillary-connective tissue structures, and by disorders in the blood circulation and lymph drainage in the liver.Экспериментальное алиментарное ожирение приводит к значительным структурным изменениям в печени крыс. Структурные изменения в паренхиматозных клетках сопровождаются функциональным напряжением капилляросоединительнотканных структур, нарушением кровообращения и лимфотока в печени

Influence of VEGF deprivation upon vascular formation by endothelium in the presence of macrophages

Development of angiogenesis depends on the functional state of endothelial cells, as well as on the balanced secretion of cytokines, growth factors and chemokines by endothelial cells and cells of microenvironment. Macrophages represent an essential component of the microenvironment and take part in the formation of blood vessels both due to the production of cytokines and due to contact interactions with endothelial cells. VEGF is among the most important cytokines that control angiogenesis at all its stages. Currently, the role of VEGF in the intercellular interactions of endothelial cells and macrophages is not well described. The aim of our study was to investigate the effect of VEGF deprivation using monoclonal antibodies on angiogenesis under conditions of co-cultivation of endothelium and macrophages. Materials and methods: monoclonal antibodies to VEGF-A were used for VEGF deprivation in monoculture of endothelial cells and in co-culture of endothelial cells with macrophages. The IL-1β, IL-6 and TNFα cytokines were used as inducers. When VEGF-A was removed from the medium, endothelial cells show plasticity and form longer vessels, they modify the expression of VEGF receptors. Macrophages regulate endothelial cell activity through the secretion of cytokines, including VEGF, and through contact interactions with endothelial cells. THP-1 cells increase the sensitivity of endothelial cells to VEGF by stimulating the VEGFR1 and VEGFR3 expression, this effect is VEGF-A-independent. The IL-1β, IL-6, TNFa cytokines independently stimulate non-branching angiogenesis, increasing the length of the vessels. At the same time, IL-ip increases the VEGFR1 expression on the surface of endothelial cells. In contrast, IL-6 and TNFα decrease it, thereby regulating the sensitivity of endothelial cells to VEGF. The effects of these cytokines are not dependent on VEGF-A. The IL-1β, IL-6, TNFα cytokines promote acquisition of anti-angiogenic properties by THP-1 cells that is independent on VEGF-A, as well as on expression of its receptors by endothelial cells. Thus, VEGF is an important, but not the sole factor controlling angiogenesis. Under conditions of VEGF-A deficiency, either endothelial cells or microenvironment cells are able to compensate for its functional load due to the production of other growth factors

Common variable immunodeficiency disorder: a clinical case

Primary immunodeficiency is a rare congenital pathology associated with failure of immune system, manifested by disturbances of its functions. These defects lead to increased susceptibility of patients to various infectious agents, as well as the development of autoimmune, malignant and other diseases. Primary immunodeficiency is classified as a rare disease, which was previously associated with a poor prognosis with a high risk of mortality in childhood. To date, the emergence of highly effective treatment methods has changed the course and prognosis of these diseases. Clinicians of various specialties increasingly meet with this pathology in everyday practice, including adult age cohorts. In this regard, early diagnosis of primary immunodeficiency in adults becomes relevant, being associated with choosing optimal therapy, prevention of severe internal organ damage, determination of management strategy for the patient, as well as the need to identify inherited disorders and provide information to the patient’s family. Delayed verification of the diagnosis may cause disability of the patient and development of irreversible, often fatal complications. This article presents our own clinical case with a newly diagnosed clinical condition: Common variable immunodeficiency disorder (CVID), the most common form of primary immunodeficiency in adults. The symptoms of common variable immunodeficiency disorder appear in these patients in adulthood, but a high-quality collected history of the disease will allow you to trace symptoms in the patients even since early childhood. There is a common gap for several years between the onset of the disease and clinical diagnosis, since erroneous diagnosis is often made due to non-specific clinical symptoms that resemble other, more frequent diseases. The prognosis of patients with CVID depends on several factors: frequency of infections, structural disorders in the lungs, the occurrence of autoimmune diseases and the success of infection prevention. Thus, a variety of clinical forms of primary immunodeficiency, lack of awareness of doctors about this pathology, complexity of immunological examination in the general medical network lead to the fact that CVID is not diagnosed for long terms, and patients do not receive the necessary pathogenetic therapy. There is a need for drawing attention of doctors of various disciplines to the fact that the recurrent inflammatory processes of various localization, which are difficult to respond to adequate traditional therapy, may be caused by changes in the immune system, including congenital, genetically determined immunodeficiency

НОВЫЕ ТЕХНОЛОГИИ ВОССТАНОВЛЕНИЯ И ЗАЩИТЫ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО ОБОРУДОВАНИЯ КОМПОЗИТНЫМИ МАТЕРИАЛАМИ

The analysis of possible variants of reconstruction of the power equipment is fulfilled and the conclusion concerning the prospects of such work with the use of composite materials is reached. The data on the technical characteristics of composite repair materials for various purposes are presented, the results of repairs of power equipment, in particular the technology for the recovery of the boarding surfaces of the diffuser rings and protection of the pumps D1250 casings are provided. The technology of the recovery pneumatic cylinder, hydraulic cylinder rod, as well as the unique technology of restoration of working surfaces of the impeller vanes of transfer pump, that had been destroyed by corrosion in conjunction with the cavitation processes and were considered as not restorable is described. The restored impeller was in operation during a year and only thereafter it was removed for restoration. Another composite material discussed in the article – diagum – makes it possible to perform a series of repairs associated with restoration of the rubber-covered surfaces of pump casings as well as with restoration of various surfaces of the conveyor belts. Taking the excellent adhesive properties of this composite into account, restoration of worn stainless steel sieve screens to remove abrasive material was fulfilled with the aid of it. The restoration was accomplished via the use of the conveyor belt which application time had expired, that was glued to a metal sieve with diagum. The use of the composites is economically justified, because the application of them in repairs reduces, firstly, terms of restoration work and, secondly, the price of repairs. Third, equipment that was damaged beyond repair is being commissioned by the use of the mentioned composites. Проведен анализ возможных вариантов восстановления энергетического оборудования и сделан вывод о перспективности выполнения таких работ с помощью композитных материалов. Изложены сведения о технических характеристиках композитных ремонтных материалов различного назначения, приведены результаты ремонтов энергетического оборудования, в частности отработана технология восстановления посадочных поверхностей под диффузорными кольцами и защиты корпусов насосов Д1250. Описана технология восстановления пневмоцилиндра, штока гидроцилиндра, а также уникальная технология восстановления рабочих поверхностей лопаток колеса перекачивающего насоса, которые были полностью сведены коррозией в совокупности с кавитационными процессами и восстановлению традиционными способами не подлежали. Восстановленное колесо отработало один год, и лишь после этого было снято на повторное восстановление. Еще один композитный материал из рассмотренных в статье – диагум – позволил выполнить целую серию ремонтных работ, связанных как с восстановлением обрезиненных поверхностей корпусов насосов, так и с ремонтом различного вида поверхностей транспортерных лент. Учитывая отличные адгезионные свойства данного композита, с его помощью выполнено восстановление изношенных нержавеющих сит грохотов для отсева абразивного материала. Это восстановление выполняли за счет использования отслужившей свой срок транспортерной ленты, которую приклеивали к металлическому ситу с помощью диагума. Применение композитов экономически оправдано, поскольку благодаря им сроки восстановительных работ сокращаются, снижается себестоимость ремонтов и вводится в строй оборудование, которое восстановлению не подлежало