Inhibition diminishes cell viability via PKC alpha (PKCa) in thyroid cancer cells

Thyroid carcinoma (TC) is the most common endocrine neoplasia.Its incidence has increased in the last 40 years worldwide. It comprises a group of tumors of different lineage and biological behavior.About half of TC are driven by an acquired activating mutation inthe BRAF oncogene. While targeted therapies have improved outcomes in melanoma patients, most TC patients become resistant orrecur suggesting that new or additive non-cross-reactive therapiesare needed. We have previously shown that PKCa mediates TSHand thyroid hormones proliferative effects in TC. Recent evidenceindicates that together PKCa overexpression and BRAF mutationshould contribute to tumorigenesis and resistance to anticancertherapies. We found that by inhibiting BRAF expression with RNAi inanaplastic TC cells with BRAF mutation, PKCa expression decreases as well, suggesting that the latter is found downstream of BRAF.Furthermore, a decrease in the expression of the cell proliferationmarker PCNA was observed in BRAF-depleted cells by westernblot analysis. Also, TC cells were sensitive to increasing doses ofthe BRAF inhibitor widely used in the clinic vemurafenib/PLX4032in a dose-dependent manner (p<0.0001) by Cell Titer Blue (CTB)assay. To begin to study the combined inhibition of PKC and BRAF,CTB assays were performed with increasing doses of vemurafenibin presence or absence of the PKC inhibitor GF109203X at selective concentrations in follicular TC cells carrying BRAF mutation. Weconfirmed the dose-dependency of vemurafenib and found that thecombination leads to a significant decrease in cell viability (p<0.5).Our results establish that the effective dual PKCa and BRAF blockade can significantly drive tumor proliferation inhibition. The results obtained could provide new therapeutic targets and alternatives tothe treatments currently used for this disease. Despite its increasingincidence and mortality in many cases, TC constitutes a very poorlystudied area in our country.Fil: Campos Haedo, Mateo Nicolas. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Díaz Flaqué, María Celeste. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Díaz Albuja, Johanna Abigail. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Perona, Marina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Gerencia de Área de Aplicaciones de la Tecnología Nuclear. Departamento de Radiobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Debernardi, Maria Mercedes. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Cayrol, Maria Florencia. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Barreiro Arcos, María Laura. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Sterle, Helena Andrea. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Juvenal, Guillermo Juan. Comisión Nacional de Energía Atómica. Gerencia de Área de Aplicaciones de la Tecnología Nuclear. Departamento de Radiobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cremaschi, Graciela Alicia. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Rosemblit, Cinthia. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaLXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología y Reunión Anual de la Sociedad Argentina de FisiologíaArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaSociedad Argentina de FisiologíaSociedad Argentina de Inmunologí

Inhibition of Integrin aVb3 Signaling Improves the Antineoplastic Effect of Bexarotene in Cutaneous T-Cell Lymphoma

Abstract: Bexarotene is a specific retinoid X receptor agonist that has been used for the treatment of cutaneous T-cell lymphoma (CTCL). Because bexarotene causes hypothyroidism, it requires the administration of levothyroxine. However, levothyroxine, in addition to its ubiquitous nuclear receptors, can activate the aVb3 integrin that is overexpressed in CTCL, potentially interfering the antineoplastic effect of bexarotene. We thus investigated the biological effect of levothyroxine in relation to bexarotene treatment. Although in isolated CTCL cells levothyroxine decreased, in an aVb3-dependent manner, the antineoplastic effect of bexarotene, levothyroxine supplementation in preclinical models was necessary to avoid suppression of lymphoma immunity. Accordingly, selective genetic and pharmacologic inhibition of integrin aVb3 improved the antineoplastic effect of bexarotene plus levothyroxine replacement while maintaining lymphoma immunity. Our results provide a mechanistic rationale for clinical testing of integrin aVb3 inhibitors as part of CTCL regimens based on bexarotene administration

Intrinsic and specific vulnerability of groundwater in central Spain: the risk of nitrate pollution

18 páginas, 8 figuras y 10 tablas.[EN]The intrinsic vulnerability of groundwater in the Comunidad de Madrid (central Spain) was evaluated using the DRASTIC and GOD indexes. Groundwater vulnerability to nitrate pollution was also assessed using the composite DRASTIC (CD) and nitrate vulnerability (NV) indexes. The utility of these methods was tested by analyzing the spatial distribution of nitrate concentrations in the different aquifers located in the study area: the Tertiary Detrital Aquifer, the Moor Limestone Aquifer, the Cretaceous Limestone Aquifer and the Quaternary Aquifer. Vulnerability maps based on these four indexes showed very similar results, identifying the Quaternary Aquifer and the lower sub-unit of the Moor Limestone Aquifer as deposits subjected to a high risk of nitrate pollution due to intensive agriculture. As far as the spatial distribution of groundwater nitrate concentrations is concerned, the NV index showed the greatest statistical significance (p < 0.01). This new type of multiplicative model offers greater accuracy in estimations of specific vulnerability with respect to the real impact of each type of land use. The results of this study provide a basis on which to guide the designation of nitrate vulnerable zones in the Comunidad de Madrid, in line with European Union Directive 91/676/EEC.[ES] Se evaluó la vulnerabilidad intrínseca de las aguas subterráneas en la Comunidad de Madrid (España central) usando los índices DRASTIC y GOD. La vulnerabilidad de las aguas subterráneas a la contaminación por nitratos fue también evaluada usando el DRASTIC compuesto (CD) y el índice de vulnerabilidad de nitratos (NV). Se testeó la utilidad de estos métodos mediante el análisis de la distribución espacial de las concentraciones de nitrato en diferentes acuíferos situados en el área de estudio: el acuífero detrítico del Terciario, el acuífero de las calizas del Páramo el acuífero de la calizas del Cretácico y el acuífero Cuaternario. Los mapas de vulnerabilidad basados en estos cuatro índices mostraron valores muy similares, identificándose al acuífero cuaternario y a la subunidad inferior de las calizas del Páramo como los depósitos sometidos a un alto riesgo a la contaminación de nitratos debido a la agricultura intensiva. En cuanto a la distribución espacial de las concentraciones de nitrato en las aguas subterráneas, el índice NV mostró la mayor significación estadística (p < 0.01). Este nuevo tipo de modelo multiplicativo ofrece una mayor precisión en estimaciones de la vulnerabilidad específica con respecto al impacto real de cada tipo de uso de la tierra. Los resultados de este estudio ofrecen una base sobre la que se guía la designación de Zonas Vulnerables de Nitratos en la Comunidad de Madrid, en línea con la Directiva 91/676/EEC de la Unión Europea.[PO] A vulnerabilidade intrínseca das águas subterrâneas na Comunidade de Madrid (centro de Espanha) foi avaliada utilizando os índices DRASTIC e GOD. A vulnerabilidade das águas subterrâneas à poluição por nitratos também foi avaliada utilizando os índices composite DRASTIC (CD) e nitrate vulnerability (NV). Aferiu-se a utilidade destes métodos através da análise da distribuição espacial das concentrações de nitratos nos diferentes aquíferos localizados na área de estudo: o Aquífero Detrítico Terciário, o Aquífero Calcário Mouro, o Aquífero Calcário Cretácico e o Aquífero Quaternário. Os mapas de vulnerabilidade baseados nos quatro índices apresentaram resultados muito semelhantes, e identificaram o Aquífero Quaternário e a sub-unidade inferior do Aquífero Calcário Mouro como depósitos sujeitos a um elevado risco de poluição por nitratos, devido à agricultura intensiva. No que diz respeito à distribuição espacial das concentrações de nitratos nas águas subterrâneas, o índice NV apresentou a maior significância estatística (p  < 0.01). Este novo tipo de modelo multiplicativo oferece maior precisão nas estimativas da vulnerabilidade específica quanto ao verdadeiro impacte de cada tipo de uso do solo. Os resultados deste estudo fornecem uma base para orientar a designação de Zonas Vulneráveis aos Nitratos na Comunidade de Madrid, em conformidade com a Directiva 91/676/CEE da União Europeia.[FR] La vulnérabilité intrinsèque de l’aquifère de la Communauté autonome de Madrid (Comunidad, Espagne centrale) a été évaluée en utilisant les indices DRASTIC et GOD. La vulnérabilité de la nappe à la pollution par les nitrates a été également évaluée en utilisant les indices DRASTIC composite (CD) et nitrate vulnerability (NV). L’utilité des ces méthodes a été testée en analysant la distribution spatiale des concentrations en nitrates dans les différents aquifères localisés dans la zone d’étude: l’aquifère du détritique tertiaire, l’aquifère du calcaire de Moor, l’aquifère du calcaire crétacé et l’aquifère quaternaire. Les cartes de vulnérabilité basées sur ces quatre indices montrent des résultats très similaires, désignant l’aquifère quaternaire et la sous-unité inférieure de l’aquifère du calcaire de Moor comme formations sujettes à un risque élevé de pollution nitratée due à une agriculture intensive. En ce qui concerne la distribution des nitrates dans la nappe, l’indice NV montre la meilleure fiabilité statistique (p < 0.01). Ce nouveau type de modèle multiplicatif présente une plus grande précision dans l’estimation de la vulnérabilité spécifique en rapport avec l’impact réel de chaque type d’utilisation du sol. Les résultats de cette étude fournissent une base de délimitation des Zones Vulnérables aux Nitrates dans la Communauté autonome de Madrid, selon la Directive européenne 91/676/EEC.[CH] 用DRASTIC和GOD指标对马德里地区 (西班牙中部) 地下水进行了内在脆弱性评价,并用综合DRASTIC (CD) 和硝酸盐脆弱性(NV)指标评价了地下水对硝酸盐污染的脆弱性。通过分析研究区内不同含水层硝酸盐组分的空间分布检验了这些方法的有效性:第三纪碎屑含水层、摩尔 (Moor) 石灰岩含水层、白垩纪石灰岩含水层和第四纪含水层。基于这四个指标绘制的脆弱性地图显示出非常相似的结果,确定第四纪含水层和摩尔石灰岩含水层的较低部分的沉积层面临着由集约化农业带来的高硝酸盐污染风险。至于地下水硝酸盐含量的空间分布而言,NV指标的统计显著性最强 (p < 0.01)。在评价涉及各种土地利用方式实际影响的特殊脆弱性时,这种新型的乘法模型提供了更高的精确度。本研究为根据欧盟官方91/676/EEC标准在马德里地区划定硝酸盐脆弱性区域提供了依据。This research was funded by the Comunidad de Madrid and the European Social Fund (GR/AMB/0745/2004). The Confederación Hidrográfica del Tajo and Instituto Geológico y Minero provided hydrogeological data relating to piezometric and quality sampling of the groundwater networks in the study area.Peer reviewe