Manual de protocolos: herramientas para el estudio y manipulación de Hongos Micorrícicos Arbusculares y Trichoderma

El propósito de este Manual de Protocolos es aportar los fundamentos básicos para promover el entendimiento, reconocimiento, caracterización y cuantificación de la colonización por hongos micorricico arbusculares (HMA) en raíces, así como hongos del género Trichoderma nativos del suelo. En la primera sección se describen los fundamentos básicos a seguir para la colecta de muestras de suelo y la manipulación del material a ser analizado, así como para el aislamiento y multiplicación de HMA y Trichoderma. En la segunda sección se describen las principales técnicas destinadas a cuantificar la colonización por HMA en raíces, así como la presencia de HMA, Trichoderma y microorganismos cultivables en muestras de suelo. También se detalla la cuantificación de la glomalina, una proteína asociada a la actividad HMA. En la tercera sección se describen los lineamientos básicos para estudios experimentales en laboratorio y a campo con HMA y Trichoderma. En la última sección se describen los fundamentos y alcances de algunas técnicas moleculares destinadas a la determinación e identificación de los microorganismos motivo de este Manual. A partir de un compilado de técnicas utilizadas en los principales laboratorios especializados en la temática, nos proponemos brindar las herramientas básicas sobre su reconocimiento y manipulación. La información aportada en este Manual de Protocolos puede facilitar tanto el estudio básico de estos microorganismos, como para potenciales aplicaciones como biofertilizantes. Para finalizar, agradecemos al Ing. Hernán E. Echeverría (INTA-FCA UNMdP) quien realizó la lectura crítica de este Manual y que, con sus comentarios, permitió mejorar la versión final del mismo. A partir de un compilado de técnicas utilizadas en los principales laboratorios especializados en la temática, nos proponemos brindar las herramientas básicas sobre su reconocimiento y manipulación. La información aportada en este Manual de Protocolos puede facilitar tanto el estudio básico de estos microorganismos, como para potenciales aplicaciones como biofertilizantes. Para finalizar, agradecemos al Ing. Hernán E. Echeverría (INTA-FCA UNMdP) quien realizó la lectura crítica de este Manual y que, con sus comentarios, permitió mejorar la versión final del mismo. En la primera sección se describen los fundamentos básicos a seguir para la colecta de muestras de suelo y la manipulación del material a ser analizado, así como para el aislamiento y multiplicación de HMA y Trichoderma. En la segunda sección se describen las principales técnicas destinadas a cuantificar la colonización por HMA en raíces, así como la presencia de HMA, Trichoderma y microorganismos cultivables en muestras de suelo. También se detalla la cuantificación de la glomalina, una proteína asociada a la actividad HMA. En la tercera sección se describen los lineamientos básicos para estudios experimentales en laboratorio y a campo con HMA y Trichoderma. En la última sección se describen los fundamentos y alcances de algunas técnicas moleculares destinadas a la determinación e identificación de los microorganismos motivo de este Manual. A partir de un compilado de técnicas utilizadas en los principales laboratorios especializados en la temática, nos proponemos brindar las herramientas básicas sobre su reconocimiento y manipulación. La información aportada en este Manual de Protocolos puede facilitar tanto el estudio básico de estos microorganismos, como para potenciales aplicaciones como biofertilizantes. Para finalizar, agradecemos al Ing. Hernán E. Echeverría (INTA-FCA UNMdP) quien realizó la lectura crítica de este Manual y que, con sus comentarios, permitió mejorar la versión final del mismo. A partir de un compilado de técnicas utilizadas en los principales laboratorios especializados en la temática, nos proponemos brindar las herramientas básicas sobre su reconocimiento y manipulación. La información aportada en este Manual de Protocolos puede facilitar tanto el estudio básico de estos microorganismos, como para potenciales aplicaciones como biofertilizantes. Para finalizar, agradecemos al Ing. Hernán E. Echeverría (INTA-FCA UNMdP) quien realizó la lectura crítica de este Manual y que, con sus comentarios, permitió mejorar la versión final del mismo.Fil: Covacevich, Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; Argentina. Fundación para Investigaciones Biológicas Aplicadas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Consolo, Verónica Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; Argentina. Fundación para Investigaciones Biológicas Aplicadas; Argentin

Mycosinthetized Ag, CuO and ZnO nanoparticles from a promising Trichoderma harzianum strain and their antifungal potential against important phytopathogens

Fungal green biosynthesis of nanoparticles (NPs) is a promising eco-friendly method for mass-scale production. In the present study Ag, CuO and ZnO nanoparticles were biogenically synthetized using a cell filtrate of a strain of Trichoderma harzianum as a reducer and stabilizer agent. The structure, morphology and physicochemical properties of the NPs were characterized through transmission electron microscopy, dynamic light scattering, wide angle X-ray scattering and thermogravimetric analysis. Since nanotechnology could offer promising applications in agricultural area, we evaluated the ability of the NPs to reduce the growth of important fungal phytopathogens as Alternaria alternata, Pyricularia oryzae and Sclerotinia sclerotiorum. Silver and CuO NPs reduced significantly the mycelial growth of A. alternata and P. oryzae in a dose dependent manner. This is the first report of a multiple extracellular biosynthesis of NPs from T. harzianum and the first time that CuO and ZnO NPs were obtained from this fungus. In addition, we highlighted the rapid production of NPs, as well as, the potential of Ag and CuO for the control of phytopathogens. On the other hand, the three types of NPs could be easily and sustainably produced on a large scale with the chance of having multiple applications in biotechnological processes.Fil: Consolo, Verónica Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; Argentina. Fundación para Investigaciones Biológicas Aplicadas; ArgentinaFil: Torres Nicolini, Andrés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ingeniería. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales; ArgentinaFil: Alvarez, Vera Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ingeniería. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales; Argentin

Native Trichoderma harzianum strains from Argentina produce indole-3 acetic acid and phosphorus solubilization, promote growth and control wilt disease on tomato (Solanum lycopersicum L.)

Trichoderma fungi are considered as suitable biofertilizers, since they could increase the efficiency of the use of nutrients in plants and are used as biocontrol agents against plant pathogen. The aim of this study was to characterize a set of Trichoderma strains isolated from horticultural and near-pristine soils from the Argentine Pampas, and to evaluate their potentiality as a growth promoter and as a biocontroller of Fusarium wilt disease on tomato. Nineteen collected strains, identified as T. brevicompactum, T. gamsii and T. harzianum, were tested for their ability to produce the auxin indole 3-acetic acid (IAA), solubilize phosphate and biocontrol F. oxysporum. Twelve strains reduced growth of pathogenic fungus over 50% and four of them (named FCCT 16, FCCT 58, FCCT 199-2 and FCCT 363-2) exhibited IAA highest production (ranging 13.38–21.14 µg/ml) and were able to solubilize phosphate (ranging 215.80–288.18 µg/ml of calcium phosphate). Tomato plants inoculated with those four strains increased chlorophyll content, shoot length, fresh and dry weight of shoot and roots, and reduced F. oxysporum wilt disease between 10 and 30%. On the basis of our results, we conclude that soils of the Argentine Pampas harbor Trichoderma strains with beneficial dual effects which could be of interest for the development of commercial products.Fil: Bader, Araceli Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; ArgentinaFil: Salerno, Graciela Lidia. Fundación para Investigaciones Biológicas Aplicadas; ArgentinaFil: Covacevich, Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; ArgentinaFil: Consolo, Verónica Fabiana. Fundación para Investigaciones Biológicas Aplicadas; Argentin

Indigenous arbuscular mycorrhiza and Trichoderma from systems with soybean predominance can improve tomato growth

In the last decades, there has been a tendency towards sustainable agriculture. Following this trend, edaphic fungi as Trichoderma and arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) could increase plant growth contributing to diminish agricultural chemical supply. However, little information exists in current research regarding the possible effects of alternative practices to soybean monoculture systems on fungal groups that could contribute to plant health and/or productivity. Thus, our objective was to assess changes in the abundance and diversity of indigenous AMF and Trichoderma from a long-term field experiment located in the Argentinean Pampas, in order to test the effect of alternative practices to soybean monoculture. The fungal ability to promote the growth of crops, such us tomato plant was also tested. Soil samples were collected from a soybean monoculture system (Sb), a system including cover crop (Avena sativa) followed by soybean (CC/Sb) and a system including rotations (rot) of Soybean-Maize-Wheat crops CC/Sb-rot, M-rot and W-rot, respectively. Highest AMF and Trichoderma abundance was found at W-rot and M-rot systems, and highest AMF diversity was found at W-rot and CC systems. Furthermore, highest mycorrhizal colonization was found at CC/Sb and W-rot systems. Inoculated plants with single AMF consortium or with Trichoderma strains showed significant increases in comparison with the control. Dual inoculation increased tomato plant growth as compared to the control, and evidence of synergism was found by increases in shoot and root growth. Our results show that dual inoculation with indigenous AMF and Trichoderma from alternative crop systems to soybean monoculture could play an important role in tomato plant growth. This information could be useful to decrease production costs and environmental impacts.Fil: Commatteo, Jacqueline Giselle. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Agencia de Extensión Rural Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Consolo, Verónica Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; ArgentinaFil: Barbieri, Pablo Andres. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Covacevich, Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; Argentin

Test de PCR para la detección de Septoria tritici en semilla de trigo: eficaz por sobre otras técnicas de rutina l

El hongo Septoria tritici Rob. ex Desm. [teleomorfo Mycosphaerella graminicola (Fuckel) Schroeter] es un importante patógeno del cultivo de trigo que causa la “septoriosis” o mancha de la hoja. A nivel mundial el patógeno produce severas pérdidas en su rendimiento. (entre el 31 y el 54 %). Con la adopción generalizada de la SD y el uso de fertilizantes, el rendimiento productivo es sostenido, aunque en ocasiones se ve fuertemente disminuido por el aumento de la septoriosis. La semilla producida en SD se caracteriza por una mayor incidencia de microorganismos patógenos (Carmona et al. 1990, Krupinsky,1999) resultando sumamente importante contar con test de rápida implementación que garantice la presencia de semillas libre o con bajo nivel de infección por septoriosis. Las plántulas pueden ser infectadas luego de la emergencia y bajo condiciones favorables de temperatura y humedad (Lovell et al. 1997, Hunter et al. 1997). Se ha demostrado que las ascosporas y picnidiosporas, dispersadas por el viento y la lluvia son las fuentes primarias de inóculo de la enfermedad Cordo et al. 2005. Este se transfiere verticalmente a las partes superiores de la planta Lovell et al. 1997. Por otra parte, se ha postulado que los rastrojos de trigo y las semillas podrían ser una importante fuente de transmisión de la enfermedad a través de los continentes (Banke and McDonald, 2005, Cordo et al. 2006). El objetivo de este trabajo fue desarrollar y convalidar un método diagnóstico que permita detectar con gran sensibilidad la presencia de ADN del hongo S. tritici en semillas de trigo y comprobar su eficacia comparando este test con otras técnicas convencionales para el estudio de la sanidad de la semilla

Mating-type distribution and fertility status in Magnaporthe grisea populations from Argentina

Isolates of Magnaporthe grisea causing gray leaf spot on rice were collected in Argentina and analyzed for mating distribution and fertility. One hundred and twenty-five isolates of M. grisea were collected from rice plants between 2000 and 2003. Each isolate was tested for mating type through a polymerase chain reaction based assay. All M. grisea isolates from Argentina belonged to a single mating type, MAT1.1. The fertility status of isolates was determined using controlled crosses in vitro, pairing each isolate with GUY11 and KA9 (MAT1.2 standard hermaphroditic testers). Production of perithecia was scarce among isolates of the blast pathogen since a low percentage of them (7.2%) developed perithecia with only one of the fertile tester (KA9); all crosses failed with the other tester strain. Asci and ascospores were not observed. The presence of only one mating type and the absence of female fertile isolates indicate that sexual reproduction is rare or absent in M. grisea populations associated with rice in Argentina.Centro de Investigaciones en Fitopatologí

Relación genética y perfil de actividad antimicrobiana entre aislamientos de Thielavia sp. A partir de un ejemplar de Peperomia sandersii

Los productos naturales representan la fuente más compleja y diversa de moléculas bioactivas, capaces de ser utilizadas con o sin modificaciones estructurales posteriores, en el tratamiento de enfermedades. Las probabilidades de éxito en la búsqueda de metabolitos bioactivos aumentan si se estudian organismos genética y evolutivamente diversos. Los microorganismos endofíticos, aquellos que residen dentro de los tejidos vegetales sin producir enfermedad detectable, representan un nicho ecológico interesante para ser explorado con ese fin. Previamente el análisis de partes aéreas de un ejemplar sano de Peperomia sandersii C. DC. (Piperaceae) permitió el aislamiento de 26 hongos endofiticos, de los cuales 19 (73 %) fueron identificados como Thielavia sp. mediante la amplificación, secuenciación y comparación con bases de datos de los dominios variables D1 y D2 del ADNr 28S. Los extractos de los hongos endofíticos, crecidos en Agar Papa Dextrosa durante 21 días, fueron evaluados por bioautografía frente a Escherichia coli ATCC 25922 y Staphylococcus aureus ATCC 25923 a 25, 50 y 100 g. Mientras que menos del 10 % de los extractos evaluados resultaron activos frente a E. coli, el 81% (21) de los mismos mostró actividad frente a S. aureus al menos a 100 g, proviniendo el 86 % (18) de extractos de Thielavia sp. Para determinar la variabilidadrelación genética entre los 19 aislamientos de Thielavia sp. se realizó el análisis utilizaronde los marcadores moleculares del tipo ISSR (Inter Simple Sequence Repeats), un tipo de marcador genético que permite obtener los niveles de variación en las regiones microsatélite que se encuentran dispersas en el genoma, particularmente el nuclear. Para ello, para cada aislamiento se realizaron amplificaciones por PCR utilizando 5 cebadores ISSR (IA5, KA5, H, D, GA5). Los perfiles genéticos fueron visualizados en gel de agarosa al 1.5% y analizados segúnevaluó la presencia o ausencia de fragmentos (gel agarosa 1,5 %) amplificados mediante PCR utilizando 5 cebadores ISSR (IA5, KA5, H, D, GA5) y ADN genómico. Se asignó 1 y 0 a la presencia o ausencia de fragmentos respectivamente y los datos fueron analizados con el programa NTSYS-pc Software 2.1. Se construyó una matriz de similitud utilizando el coeficiente de Dice, y se realizó un análisis de clusters y se construyòcción de un dendrograma basado en el método de medias no ponderadas UPGMA (Unweighted Pair Group Method of Averages). Se seleccionaron aquellos cebadores que mostraron patroónes de bandas consistentes, polimórficos y reproducibles. Para los cebadores KA5, GA5 y H se amplificaron en promedio 8 bandas por cebador, con un tamaño de entre 400 y 2200 pb, siendo el 95 % de ellas polimórficas. El análisis de los datos obtenidos permitió definir 15 haplotipos entre los 19 aislamientos, evidenciando la alta variabilidad genética de la población analizada teniendo en cuenta que provienen de un solo ejemplar vegetal. Los aislamientos se agruparon en 6 clusters, con promedio de similitud del 60 % como línea de corte. Mientras que 5 de los 6 clusters incluyeron a los 18 aislamientos que mostraron actividad frente a S. aureus, el cluster conformado por el aislamiento P16, el único inactivo, fue el que presentó menor grado de similitud (25%) con respecto al resto. El análisis de los marcadores ISSR resulta útil como metodología para seleccionar cepas de interés para futuros screenings de bioactividad y la detección de metabolitos activos novedosos.Fil: Barolo, M.. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas.; ArgentinaFil: Castelli, Maria Victoria. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas.; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Consolo, Verónica Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; ArgentinaFil: López, Silvia Noelí. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaXXI Congreso y la XXXIX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de RosarioRosarioArgentinaSociedad de Biología de Rosari

Genetic diversity of Fusarium graminearum sensu lato isolates from wheat associated with Fusarium Head Blight in diverse geographic locations of Argentina

Fusarium Head Blight is an important wheat disease in the Argentine Pampas region, being Fusarium graminearum the predominant pathogen. DNA polymorphism of the isolates was analyzed by IGS-RFLP and ISSR. IGS-RFLP and ISSR profiling were carried out using six endonucleases and eight primers, respectively. IGS-RFLP yielded 41 bands, 30 of which were polymorphic while ISSR produced 87 bands with 47 polymorphic bands. Both markers showed genetic variability among the analyzed isolates; however, IGS-RFLP was more efficient than ISSR, showing a higher polymorphic average (59.91%) than the latter (44.11%). The averages of polymorphic information content (PIC) were 0.211 and 0.129, respectively. Twenty haplotypes were identified by IGS-RFLP and 15 haplotypes by ISSR. Genotype clustering within dendrograms was different for both types of markers. The genetic groups obtained by IGS-RFLP showed a partial association to geographic origin. This is the first report on genetic variability of F. graminearum isolates from wheat in Argentina using IGS-RFLP and ISSR markers. © 2015 Asociación Argentina de Microbiología.Fil: Consolo, Verónica, Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mar del Plata. Instituto de Investigaciones En Biodiversidad y Biotecnología; ArgentinaFil: Ortega, Leonel Maximilano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico la Plata. Centro de Investigación y Desarrollo En Fermentaciones Industriales (i); Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Salerno, Graciela Lidia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mar del Plata. Instituto de Investigaciones En Biodiversidad y Biotecnología; ArgentinaFil: Astoreca, Andrea Luciana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico la Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales (i); Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Alconada Magliano, Teresa Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico la Plata. Centro de Investigación y Desarrollo En Fermentaciones Industriales (i); Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; Argentin

Evidencias de biocontrol, por hongos micorrícicos y Trichoderma nativos, sobre el nematodo del nudo de la raíz Meloidogyne javanica

Meloidogyne es un nematodo fitoparásito responsable de la enfermedad de la agalla de la raíz ocasionando pérdidas de producción de cultivos. La utilización de microorganismos como alternativa al control químico (el cual puede ser de alta toxicidad ambiental) puede ser una estrategia sustentable. En el presente estudio se evaluó el efecto de la inoculación simple o combinada en el tomate con una cepa de Trichoderma (TJ15) y un consorcio de hongos formadores de micorrizas arbusculares (HMA) (ambos considerados promotores de crecimiento vegetal y biocontroladores) en la inhibición del desarrollo de infección ocasionada por M. javanica. La inoculación con un consorcio con HMA nativos de 5 sitios de la Provincia de Buenos Aires ocasionó colonización en las raíces de tomate del 31% y una reducción del 65% en la abundancia de agallas y masas de huevos de M. javanica en las raíces, respectivamente, con respecto al control, y reducción del 46% en la abundancia de larvas en el suelo. La inoculación con TJ15 redujo en 38 y 45% la abundancia de agallas y masas de huevos, respectivamente, mientras que la abundancia de larvas no se diferenció del Control. La inoculación combinada HMA+TJ15 ocasionó colonización micorrícica próxima al 32% y reducción del 43%, 64% y 58% en la abundancia de agallas, masas de huevos y larvas, respectivamente. Se cuantificaron aumentos en las UFC de Trichoderma con respecto al Control del 9, 15 y 20% por la inoculación con HMA, TJ15 y HMA+TJ15, respectivamente. Se destaca además que se observaron huevos rodeados por hifas en los tratamientos inoculados con el patógeno y Trichoderma como biocontrolador. Si bien no se detectaron efectos significativos sobre el crecimiento, nuestros resultados ponen en evidencia el efecto biocontrolador de la inoculación con HMA y Trichoderma de la enfermedad de la raíz de tomate ocasionada por M. javanica.Fil: Burges, Pablo L.. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Mondino, Eduardo Ariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Consolo, Verónica Fabiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; ArgentinaFil: Covacevich, Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaXIV Encuentro Biólog@s En RedMar del PlataArgentinaAsociación Biólogos en Re

Bioformulation of Trichoderma harzianum in solid substrate and effects of its application on pepper plants

Para la implementación de biofertilizantes se pretende que su formulación sea económica, de fácil aplicación y que garantice la eficacia del inóculo. Nuestro objetivo fue seleccionar un sustrato para vehiculizar Trichoderma harzianum Rifai y evaluar su efecto sobre plantas de pimiento (Capsicum annum L.). El desarrollo de biomasa fúngica y esporulación se evaluó sobre 4 soportes orgánicos: arroz, salvado de trigo, turba, salvado de trigo+turba (1:1 v/v), que fueron inoculados separadamente con T. harzianum (1mL 1 x 108 conidios/1.250 cm3; incubados a 25°C). La mezcla de salvado de trigo+turba evidenció la mayor colonización fúngica y esporulación a los 5 días posteriores a la inoculación (DPI). La mejor conservación de la viabilidad de conidios del bioformulado se mantuvo entre 4 y 25ºC durante 15 días, mientras que a 35 y 40ºC la viabilidad se redujo significativamente (80%). La mayor formación de clamidosporas se observó a 4°C (76% a 35 DPI), con una reducción del 40-50% a 25 y 35°C. Cuatro cepas fueron bioformuladas en el soporte salvado de trigo+turba y todas incrementaron el crecimiento vegetal en plántulas de pimiento a 45 DPI. La cepa FCC T 16 incrementó, en más del 100% el desarrollo aéreo y la capacidad fotosintética. Las cepas FCCT 199-2 y FCCT 363-2 favorecieron preferentemente el desarrollo radical. Se sugiere como vehículo promisorio y económico, la formulación de cepas de Trichoderma en el soporte salvado de trigo+turba, cuya actividad y propiedades pueden ser mantenidas mediante la formación de clamidosporas en un rango de temperaturas y tiempo de conservación de uso común entre los productores hortícolas.For the use of biofertilizers for horticultural farmers the formulation has to be economical, of easy application and has to guarantee the efficiency of the inoculum. Our objective was to select a substrate for device Trichoderma harzianum Rifai and evaluate its effect on pepper (Capsicum annum L.) plants. The development of fungal biomass and sporulation was evaluated on 4 organic supports: rice, wheat bran, peat, wheat bran + peat (1:1 v/v), which were separately inoculated with T. harzianum (1 mL 1 x 108 conidia / 1250 cm3 incubated at 25°C). The mixture of bran+peat showed the highest fungal colonization and sporulation 5 days after inoculation (DAI). The best viability preservation of conidia of the bioformulate was maintained between 4ºC and 25ºC during 15 DAI, while at 35ºC and 40ºC the viability was significantly reduced (80%). The highest formation of chlamydospores was determined at 4°C (76% at 35% DAI), with a reduction towards of about 40-50% at 25°C and 35°C. Four strains were bioformulated in the bran+peat support and all increased pepper plant growth at 45 DAI. The FCCT 16 strain increased aerial development and photosynthetic capacity by more than 100%. The strains FCCT 199-2 and FCCT 363-2 favored mainly root development. It is suggested as a promising and economic vehicle, the formulation of strains of Trichoderma in the bran+peat support, whose activity and properties can be maintained through the formation of chlamydospores in a range of temperatures and conservation time commonly used among horticultural farmers.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale