Development of a non-radioactive molecular hybridization probe for detecting Strawberry mottle virus in strawberry

La propagación vegetativa del cultivo de frutilla favorece la transmisión de patógenos sistémicos, como es el caso de los virus, que constituyen uno de los principales factores limitantes. Se han descripto más de 20 virus que infectan esta especie; el Strawberry mottle virus (SMoV) es uno de los más frecuentes y responsable de importantes pérdidas económicas. Debido a la falta de antisuero disponible comercialmente para un diagnóstico serológico, el SMoV es detectado fundamentalmente mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcripción reversa (RT-PCR). En este estudio se desarrolló una sonda de hibridación molecular no radioactiva para su detección. Se sintetizó cDNA con cebadores específicos diseñados a partir de la región 3’ no codificante del genoma viral. El cDNA obtenido fue clonado, marcado y utilizado como sonda. Se evaluaron seis protocolos de extracción de ARN viral a partir de plantas infectadas, de los cuales el método de bromuro de cetiltrimetilamonio modificado (CTAB) fue el más eficiente. Se evaluaron hojas de diferentes estados fenológicos y pecíolos, y fueron las hojas viejas y los pecíolos los que mostraron mayor reacción.The vegetative propagation of strawberries favors transmission of systemicpathogens, such as viruses, which are one of the main yield-limiting factorsfor this crop. More than 20 viruses have been described as infecting thisspecies; one of the most frequent is the Strawberry mottle virus (SMoV), whichis responsible for significant economic losses. SMoV is usually detected byreverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), given that serum isnot available for serological tests. In this study, a non-radioactive molecularprobe was developed for SMoV detection. The cDNA was synthesized byRT-PCR using specific primers designed from the 3?UTR region of the viralgenome. The cloned cDNA segment was labeled and used as a probe. Six RNAextraction protocols were evaluated, and the modified cetyltrimethylammoniumbromide (CTAB) method showed the highest sensitivity level. Leaves at differentphenological stages and petioles were evaluated; the highest reaction wasobserved in old leaves and in petioles.Fil: Asinari, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Patología Vegetal; ArgentinaFil: Cafrune, Eva Encarnacion. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Patología Vegetal; ArgentinaFil: Guzman, F. A.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Patología Vegetal; ArgentinaFil: Conci, Luis Rogelio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Patología Vegetal; ArgentinaFil: Conci, Vilma Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentin

Occurrence and characterization of a severe isolate of Watermelon mosaic virus from Argentina

More than 50 viruses have been reported in cucurbit crops worldwide. In Argentina, cucurbit viruses have been associated with important yield losses. The most prevalent and widespread potyvirus is Watermelon mosaic virus (WMV). WMV was detected in Argentina in all cucurbit species with high incidence. In this study, a WMV isolate (WMV 1 SDE FF) was obtained from a naturally infected squash associated with a severe outbreak on melon and squash crops in an important cucurbit growing area in Santiago del Estero province (Argentina), during a survey conducted in November 2012. The fully sequenced WMV 1 SDE FF genome consists of 10,027 nucleotides and shares 96 % nt identity and 98 % aa identity with the French isolates JF273464.1|C07–014 and EU660581.1|FMF00-LL1 of the WMV molecular group 3. Using the recombination detection program RDP4, two statistically significant recombination events were identified: event 1, an 830-nt long recombinant fragment in the putative P1 coding region, and event 2, a 4071-nt recombinant fragment detected across the HC Pro, P3 and CI coding regions. The putative parental sequences detected for event 1 were the EU660586.1| FBR04–37 (major parent) and JF273468.1|C07–284 (minor parent), both from France. Putative parental sequences for event 2 were JX079685.1| WMV-ShanXi (major parent) and HQ384216.1|Dendrobium (minor parent), from China and USA, respectively. To our knowledge, this is the first complete genome of an Argentine WMV isolate. Our results provide evidence that WMV 1 SDE FF is the causal agent of the strong outbreak reported in melon and squash fields in recent years.Inst. Patología VegetalFil: Perotto, Maria Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Celli, Marcos Giovani. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pozzi, Elizabeth Alicia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Luciani, Cecilia E. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Conci, Vilma Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

First report of Zucchini lethal chlorosis virus in Argentina infecting squash crops

Virus species of the genus Orthotospovirus are among the most economically important plant pathogens in the world because they cause severe crop losses, mainly in ornamental and horticultural crops (Pappu et al. 2009). They are exclusively transmitted by thrips. Several species of Orthotospovirus have been reported infecting cucurbits: watermelon silver mottle virus, zucchini lethal chlorosis virus (ZLCV), watermelon bud necrosis virus, melon yellow spot virus, melon severe mosaic virus, and groundnut ringspot virus (Ciuffo et al. 2017; Spadotti et al. 2014). The symptoms caused by ZLCV infection can include chlorosis and systemic necrosis on leaves, apical upward leaf curl, reduction of leaf blade, and fruit malformation (Giampan et al. 2007). The collection of 90 symptomatic leaves of squash from Salta and Jujuy provinces was carried out during early 2016. For an initial assessment of the presence of ZLCV, a plate trapped antibody enzyme-linked immunosorbent assay (Lommel et al. 1982) with antiserum against ZLCV, kindly provided by Jorge A. M. Rezende from the Universidade de São Paulo, Brazil, was performed. Fifty-four of the 90 samples reacted positively to ZLCV-specific antiserum: 18 and 11 positive plants of Cucurbita maxima var. zapallito redondo del tronco and var. zapallo plomo, respectively, 11 positive plants of C. pepo, 11 positive plants of C. ficifolia var. ?cayote?, and three positive plants of C. moschata. Ultrathin sections of leaf samples of naturally infected plants were examined by transmission electron microscopy, and presumable orthotospovirus particles were observed. To confirm the identity of the virus, a one-step reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) assay was carried out on the RNA extracts from squash plants, using ZLCV-specific primers designed to direct amplification of nucleotides (ZLCV-F, ATCATGCTGTCCAGTCTCCT; and ZLCV-R, CCCACATTTTGCACTTGCGA) of the nucleocapsid gene region. The RT-PCR reaction for ZLCV detection consisted of reverse transcription at 46°C for 30 min, followed by denaturation at 94°C for 3 min, and 35 cycles of denaturation at 94°C for 30 s, annealing at 55°C for 45 s, and extension at 72°C for 45 s. Amplicons of the two ZLCV isolates (MK680830 and MK680831) were Sanger sequenced. The consensus sequences were aligned using clustalW and compared with other ZLCV sequences in the public domain using Mega 7 (Kumar et al. 2016). Alignments of the N gene sequences of these ZLCV isolates displayed nucleotide sequence identity above 94% with other ZLCV isolates available at the GenBank database. In addition, the amino acid sequence demonstrated above 97% identity with equivalent regions of S segment of Brazilian ZLCV isolate from Cucumis sativus and squash. The phylogenetic analysis of the identified sequence of ZLCV and other related sequences from GenBank showed a cluster of Argentine isolates close to ZLCV-DF isolate obtained from C. sativus (KU681011). This is the first report of ZLCV outside of Brazil. Although we have not observed the presence of Frankliniella zucchini in the field, which was identified and described as the vector of ZLCV (Riley et al. 2011), as well as virus distribution being limited to Brazil (Nakahara and Monteiro 1999), it would be important to consider the presumable entry of F. zucchini into Argentina.Fil: Pozzi, Elizabeth Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Cordoba. Estacion Experimental Agropecuaria Marcos Juarez. Agencia de Extension Rural Bell Ville.; ArgentinaFil: Luciani, Cecilia Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola.; ArgentinaFil: Giovani Celli, Marcos Giovani. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola.; ArgentinaFil: Conci, Vilma Cecilia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola.; ArgentinaFil: Perotto, Maria Cecilia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola.; Argentin

First report of Strawberry crinkle virus in Argentina

Strawberry crinkle virus (SCV) is one of the most frequent viruses affecting strawberry worldwide, and responsible for important reductions in yield and fruit quality. Stunted dwarfed plants with distorted leaves were found in Lules (26°55′22″S 65°20′15″W), Tucumán province, Argentina, in 2010, suggesting the virus presence. Total nucleic acids were isolated from leaves of 26 strawberry plants (Fragaria x ananassa cv. Camarosa) showing symptoms using the modified cetyltrimethylammonium bromide method (CTAB) as performed by Chang et al. (2007). Healthy strawberry plants previously tested by grafting to indicator plants (Fragaria virginiana clone UC-12, F. vesca clone UC-6 and cv. Alpine) were used as negative controls.Fil: Perotto, Maria Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Luciani, Carlos. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Fondo para la Investigación Científica y Tecnológica; ArgentinaFil: Celli, Marcos Giovani. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Torrico Ramallo, Ada Karina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; ArgentinaFil: Conci, Vilma Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Detection and identification of a novel 16SrXIII subgroup phytoplasma associated with strawberry red leaf disease in Argentina

Strawberry red leaf phytoplasma was found in strawberry plants from production fields in Lules (Tucumán province) and Bella Vista (Corrientes province), Argentina. Characteristic strawberry red leaf symptoms were stunting, young leaves with yellowing at the edges, mature leaves which curled and were reddish at the abaxial face, flower and fruit deformation and death. The pathogen was detected with phytoplasma-universal primer pairs P1/P7 followed by R16F2n/R16R2 as nested primers in 13 diseased plants. Based on RFLP and sequence analysis of the amplified 16S rRNA gene, the phytoplasma was related to the 16SrXIII group (Mexican periwinkle virescence). In silico the RFLP profile of all the samples analysed revealed the presence of a unique pattern, showing that the novel phytoplasma is different from all the phytoplasmas currently composing the 16SrXIII group. The phylogenetic analysis was consistent with RFLP analysis as the strawberry red leaf phytoplasma was grouped within the 16SrXIII group, but formed a particular cluster. On this basis, the Strawberry red leaf phytoplasma associated with strawberry red leaf disease was assigned to a new subgroup, 16SrXIII-F.Fil: Fernandez, Franco Daniel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; ArgentinaFil: Meneguzzi, Natalia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Famaillá; ArgentinaFil: Guzman, Fabiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; ArgentinaFil: Kirschbaum, Daniel Santiago. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Famaillá; ArgentinaFil: Conci, Vilma Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Nome Docampo, Claudia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; ArgentinaFil: Conci, Luis Rogelio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Universidad Católica de Córdoba; Argentin

Aphid species (Hemiptera: Aphididae) reported for the first time in Tucumán, Argentina

Aphids (Hemiptera: Aphididae) are considered among the most important pests all around the world. The total number of aphid species recorded in Argentina between 2003 and 2013 has risen from 200 to 237, which demonstrates the continuous introduction and discovery of new species in the territory. Therefore, faunistic studies should be conducted without interruption in areas of interest. The aim of this study was to establish if there were aphid species in Tucuman Province, Argentina that had not been recorded previously in the province. Aphids were collected with modified Moericke yellow water pan traps in potato crops during 2 seasons in 3 regions of Tucumán. Seventeen species, among the 47 species identified, and the genus Illinoia represent new records for the Province.Los pulgones se incluyen entre las plagas más importantes del mundo entero. El número total de especies de áfidos registrados en Argentina entre 2003 y 2013 se incrementó de 200 hasta 237, lo que demuestra la permanente introducción y hallazgo de nuevas especies en el territorio. Por lo tanto, son necesarios constantes estudios faunísticos en las áreas de interés. El objetivo de este estudio fue determinar si existían especies de áfidos en Tucumán, Argentina, que no habían sido citadas anteriormente en la provincia. Los pulgones se recolectaron con trampas amarillas de agua tipo Moericke durante dos temporadas de cultivo de papa, en tres regiones de Tucumán. Entre las 47 especies identificadas, 17 y el género Illinoia, representaron nuevas citas para la provincia.EEA MendozaFil: Avila, Ana Lucía. Gobierno de Tucumán. Ministerio de Desarrollo Productivo. Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto de Tecnología Agroindustrial del Noroeste Argentino; ArgentinaFil: Vera, M. Alejandro. Gobierno de Tucumán. Ministerio de Desarrollo Productivo. Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres; ArgentinaFil: Ortego, Jaime. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Mendoza; ArgentinaFil: Ploper, Leonardo Daniel. Gobierno de Tucumán. Ministerio de Desarrollo Productivo. Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto de Tecnología Agroindustrial del Noroeste Argentino; ArgentinaFil: Conci, Vilma Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Citrullus lanatus: A new natural host of groundnut ringspot orthotospovirus in Argentina

Los orthotospovirus causan graves daños económicos, siendo una limitación importante para la producción y la calidad en distintos cultivos. Los objetivos de este trabajo fueron identificar el agente causal de los síntomas observados en sandía en lotes de producción de Santiago de Estero y analizar su filogenia. Se realizaron muestreos en lotes de producción de sandía (Citrullus lanatus) durante la campaña 2017/2018 en la provincia de Santiago del Estero. Los resultados de este trabajo mostraron en las muestras de sandía la presencia de viriones característicos del género Orthotospovirus, además fueron positivas a pruebas serológicas y moleculares con reactivos específicos (DAS-ELISA y RTPCR) confirmando la presencia del Groundnut ringspot orthotospovirus (GRSV). Los fragmentos genómicos fueron amplificados, secuenciados y depositados en GenBank, acceso Nº MK680832 y MK680833. El análisis filogenético de las secuencias parciales de nucleótidos de la proteína N mostró que los aislamientos de GRSV provenientes de Argentina (hospedante sandía) fueron agrupados con alto valor de confianza. Estas secuencias se ubicaron en un clúster formado por secuencias del continente americano que se separaron de las de origen africano. Este trabajo constituye el primer reporte de la presencia del GRSV en cultivo de sandía (Citrullus lanatus) en Argentina.Orthotospoviruses cause serious economic damage, being a major limitation for production and quality in different crops. The objectives of this work were to detect the presence of orthotospovirus that are infecting cucurbit crops in the country and analyze its phylogeny. Samples were taken in watermelon (Citrullus lanatus) production lots during 2017/2018 in Santiago del Estero province. The results of this work showed in the watermelon samples showed the presence of characteristic virions of the Orthotospovirus genus, and were positive to serological and molecular tests with specific reagents (DAS-ELISA and RT-PCR) confirming the presence of groundnut ringspot orthotospovirus (GRSV). Genomic fragments were amplified, sequenced and deposited in GenBank, access nº MK680832 and MK680833. Phylogenetic analysis of N-protein nucleotide partial sequences showed that GRSV isolates from Argentina (watermelon host) were grouped into a new group with high bootstrap value. These sequences were placed in a cluster formed by sequences from the American continent that were separated from those that conformed the group of sequences of African origin. This work is the first report of the presence of the GRSV in watermelon (Citrullus lanatus) cultivation in Argentina.Fil: Pozzi, Elizabeth Alicia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Agropecuarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola; ArgentinaFil: Luciani, Cecilia Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola; ArgentinaFil: Giovani Celli, Marcos Giovani. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola; ArgentinaFil: Conci, Vilma Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola; ArgentinaFil: Perotto, Maria Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Fitopatología y Modelización Agrícola; Argentin

Aphid (Hemiptera: Aphididae) Diversity in Potato Production Areas in Tucumán, Argentina

Aphids are recognized as important plant pests worldwide and they are major vectors of viruses. It is necessary to identify the aphid species in an agroecosystem in order to develop appropriate pest management strategies. The aim of this work was to determine the taxonomic diversity of aphid species present in potato crops in different agroecological regions of Tucumán, Argentina. Monitoring was done by 2 methods: modified Moericke yellow water traps were used for the alatae, while the apterae were collected directly from the plants. A total of 15,169 winged aphids were caught and 7,455 apterae colonizing the crop were collected. Fifty-six species were identified, 27 of which were present in all regions surveyed. Differences in species diversity between regions are discussed.Los pulgones se incluyen entre las plagas más importantes del mundo entero. El número total de especies de áfidos registrados en Argentina entre 2003 y 2013 se incrementó de 200 hasta 237, lo que demuestra la permanente introducción y hallazgo de nuevas especies en el territorio. Por lo tanto, son necesarios constantes estudios faunísticos en las áreas de interés. El objetivo de este estudio fue determinar si existían especies de áfidos en Tucumán, Argentina, que no habían sido citadas anteriormente en la provincia. Los pulgones se recolectaron con trampas amarillas de agua tipo Moericke durante dos temporadas de cultivo de papa, en tres regiones de Tucumán. Entre las 47 especies identificadas, 17 y el género Illinoia, representaron nuevas citas para la provincia.EEA JunínInstituto de Patología VegetalFil: Avila, Ana Lucía. Gobierno de Tucumán. Ministerio de Desarrollo Productivo. Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto de Tecnología Agroindustrial del Noroeste Argentino; ArgentinaFil: Vera, M. Alejandro. Gobierno de Tucumán. Ministerio de Desarrollo Productivo. Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres; ArgentinaFil: Ortego, Jaime. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Junín; ArgentinaFil: Willink, Eduardo. Gobierno de Tucumán. Ministerio de Desarrollo Productivo. Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres; ArgentinaFil: Ploper, Leonardo Daniel. Gobierno de Tucumán. Ministerio de Desarrollo Productivo. Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto de Tecnología Agroindustrial del Noroeste Argentino; ArgentinaFil: Conci, Vilma Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Implementación de RT-LAMP para la detección de Strawberrymottle virus en Argentina

Strawberrymottle virus (SMoV) es uno de los virus más importantes a nivel mundial enel cultivo de frutilla. La técnica de detección utilizada en Argentina para el diagnósticode SMoV es la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción reversa (RT-PCR). El diagnóstico del virus mediante esta técnica presenta dificultades, ya que escompleja y costosa. Recientemente, en China, SMoV fue detectado por amplificaciónisotérmica mediada por bucles (loop-mediatedisothermalamplificationassay, LAMP),cuyas principales ventajas son la alta sensibilidad, detección rápida y fácilfuncionamiento. El objetivo de este trabajo fue implementar la RT-LAMP para eldiagnóstico de SMoV en el cultivo de frutilla en Argentina. Se extrajeron los ácidosnucleicos totales por el método CTAB con modificaciones de dos plantas negativas yocho plantas positivas por RT-PCR a SMoV. Se utilizaron cebadores FIP/BIP F3/B3 yapublicados para la detección del virus, Bst DNA polimerasa (NEB) y AMV (Promega)para la transcripción reversa. La reacción se incubó durante una hora a 62oC y se tiñócon 1ul de SYBR Green I (Invitrogen).Además, 5 ul de producto de cada reacción secorrió por electroforesis en un gel de agarosa 1%. Los resultados mostraronfluorescencia en las plantas positivas a SMoV previamente testeadas y amplicones enel gel de agarosa. La RT-LAMP se implementó exitosamente y fue específica paraSMoV, con lo cual se recomienda su utilización como herramienta práctica para elrápido diagnóstico en muestras de campo, y para el control de producción de materiallibre de virus en el país.Fil: Luciani, Cecilia Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola.; ArgentinaFil: Celli, Marcos Giovani. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola.; ArgentinaFil: Brugo, M. F.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola.; ArgentinaFil: Pozzi, E. A.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Conci, Vilma Cecilia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola.; ArgentinaFil: Perotto, Maria Cecilia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Unidad de Fitopatologia y Modelizacion Agricola.; Argentina41º Congreso Argentino de Horticultura y V Simposio de Aromáticas, Medicinales y CondimenticiasLa PlataArgentinaAsociación Argentina de Horticultur