Paratuberculosis ovina: factores de riesgo asociados al manejo del pie de cría y de las heces en unidades de producción pecuárias: Ovine paratuberculosis: prevalence and risks associated with animal breeding stock and management of feces in livestock production units

El objetivo del estudio fue determinar la prevalencia y los factores de riesgo asociados a paratuberculosis con relación al pie de cría y manejo de las heces en los corrales. Se llevó a cabo un estudio epidemiológico de tipo transversal. Se trabajo en  66 Unidades de Producción Pecuaria (UPP) de ovinos en el estado de Guanajuato, México. Se tomó una muestra de sangre por animal (n=1387) para llevar a cabo el diagnóstico serológico de Map con la prueba de Inmuno difusión en agar gel, y se aplicó un cuestionario por UPP. Todos los resultados fueron integrados en una base de datos para su análisis epidemiológico con el  programa estadístico STATA® 7. Las UPP que compran sementales  tienen una prevalencia de 42.4% y de hembras del 40% con una OR de 4 y 3. Las UPP que prestan a los sementales tienen una prevalencia del 42.3% y OR de 3. Las UPP que limpian los corrales en un periodo de tiempo que va de los dos meses al año, presentaron un 45% y OR 4.3. En las UPP donde las heces permanecen acumuladas, presentaron una prevalencia del 66.6% y una OR de 30. El manejo sanitario debe estar enfocado en tratar de disminuir la presencia de enfermedades crónico infecciosas como lo es la paratuberculosis, ya que su propagación lenta y su curso crónico en los rebaños, ponen en riesgo al pie de cría y su capacidad productiva y reproductiva

Development of an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the diagnosis of bovine paratuberculosis

Los objetivos del trabajo fueron estandarizar y desarrollar un ELISA con antígeno protoplasmático obtenido de una cepa de Mycobacterium avium paratuberculosis (Map) 3065 de origen ovino, para el diagnóstico de paratuberculosis en bovinos. El antígeno se fijó en las placas a concentraciones de 10, 5, 2.5 y 1.25 µg/100 µl y se probaron diluciones de los sueros control positivo y negativo de 1:20,1:40, 1:80 y 1:160. El punto de corte se estableció con un intervalo de confianza del 95 % y dos desviaciones estándar. Para determinar la sensibilidad y especificidad del ELISA se trabajó con 491 sueros de bovinos, así como también, se colectaron muestras de heces para efectuar el aislamiento bacteriológico, y la prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) anidada para la detección de Map. Los resultados de las tres pruebas fueron analizadas para determinar la asociación o concordancia por medio de una prueba de Kappa La concentración de antígeno y suero que dieron mejor diferencia entre los controles fue de 1.25 µg/100 µl antígeno y la dilución del suero 1:160, el punto de corte se estableció a una densidad óptica de 0.16, la sensibilidad que se obtuvo fue 79.31 %, la especificidad 82.25 % y el índice de concordancia de 0.2763 del ELISA con respecto al cultivo. Los resultados obtenidos permiten recomendar el ELISA con antígeno protoplasmático de la cepa de Map 3065, como una alternativa para el diagnóstico de la paratuberculosis en bovinos.The objective of this study was to standardize and develop an ELISA with protoplasmatic antigen from a Mycobacterium avium paratuberculosis (Map) 3065 strain obtained from sheep, to be used for the diagnosis of bovine paratuberculosis. The antigen was set on plates at 10, 5, 2.5 and 1.25 µg/100 µl concentrations and 1:20, 1:40, 1:80 and 1:160 dilutions of positive and negative control sera were tested. The cutoff point was established with a confidence interval of 95% and two standard deviations. Four-hundred and ninety-one bovine sera were used to establish sensitivity and specificity of the ELISA, likewise feces samples were collected for bacteriological isolation and the nested polymerase chain reaction test (PCR) was applied for Map detection. Results of the three tests were analyzed by kappa test to determine association or concordance. Antigen and sera concentration that gave the best difference between controls was 1.5 µg/100 µl antigen and 1:160 serum dilution,cutoff point was established at an optic density of 0.196, obtained sensitivity was 79.31 %, while specificity was 82.25 % and concordance index of the ELISA was 0.2763 as compared to the culture. Results obtained by ELISA with protoplasmatic antigen of the Map 3065 strain make the recommendation of this assay appropriate as an alternative for the diagnosis of bovine paratuberculosis