Ligations chimiques : synthèse d'inhibiteurs extracellulaires de la signalisation HGF/SF-MET

Use of peptides as biomolecules have been extensively applied to various therapeutic fields (cancer, diabetes, AIDS). The challenge for chemists consists in development of new reliable and efficient strategies. Our work especially focused on the conception of two innovative non native chemical ligations bringing an additionnal asset to the existing state of the art.The first ligation, i.e. thiocarbamate ligation, affords alkylthiocarbamate peptides with remarkable yields. Regarding the second one, the azaGly ligation allows the straightforward synthesis of azaGlypeptides. On the other hand, this thesis deals with the design of new peptides suitable to inhibit the signaling pathway of the tyrosine–kinase MET receptor and its ligand HGF/SF (Hepatocyte Growth factor/Scattor factor). Indeed interfering with MET signaling appears to be a promising therapeutic approach.The thiocarbamate ligation disclosed previously along with a classical thioether ligation have been employed for the chemical library design of sulfonated peptids in order to inhibit extracellular interactions. Binding activities assessment of the chemical libray toward the MET extracellular domain has been achieved using a microarray technology. Biological activities (MTT tests and kinase activity) have also been investigated.Les peptides constituent une famille de biomolécules dont l’utilisation dans différents domaines thérapeutiques (cancer, diabète, sida) s’est fortement développée ces dernières années. Le défi pour les chimistes consiste à y accéder grâce à de nouvelles méthodes fiables et efficaces. La première partie de notre travail a d’abord été orientée vers le développement deux méthodes de ligations non natives efficaces et complémentaires de celles existant. La première méthode, appelée ligation thiocarbamate, permet d’obtenir des peptides alkylthiocarbamate avec de très bons rendements, alors que la seconde, appelée ligation azaGly, aboutit à la formation d’un azaGlypeptide. La seconde partie de cette thèse traite de la conception et synthèse de nouveaux peptides susceptibles d’inhiber la signalisation HGF/SF-MET. Le récepteur à activité tyrosine kinase MET et son ligand, l’HGF/SF (Hepatocyte Growth Factor/Scattor Factor), sont des cibles de choix pour une thérapie anti-cancéreuse. La ligation thiocarbamate, précédemment décrite, et la ligation thioéther plus classique ont été utilisées pour préparer une chimiothèque de peptides sulfonatés d’inhiber cette signalisation de façon extracellulaire. La capacité de liaison des composés de la chimiothèque avec le domaine extracellulaire de MET a été évaluée grâce à la technologie biopuces. L’activité biologique (tests MTT, d’activité kinase) des meilleurs produits a été ensuite évaluée

Chemical Ligation Synthesis of extracellular inhibitors of HGF/SF-MET signalling pathway

Les peptides constituent une famille de biomolécules dont l’utilisation dans différents domaines thérapeutiques (cancer, diabète, sida) s’est fortement développée ces dernières années. Le défi pour les chimistes consiste à y accéder grâce à de nouvelles méthodes fiables et efficaces. La première partie de notre travail a d’abord été orientée vers le développement deux méthodes de ligations non natives efficaces et complémentaires de celles existant. La première méthode, appelée ligation thiocarbamate, permet d’obtenir des peptides alkylthiocarbamate avec de très bons rendements, alors que la seconde, appelée ligation azaGly, aboutit à la formation d’un azaGlypeptide. La seconde partie de cette thèse traite de la conception et synthèse de nouveaux peptides susceptibles d’inhiber la signalisation HGF/SF-MET. Le récepteur à activité tyrosine kinase MET et son ligand, l’HGF/SF (Hepatocyte Growth Factor/Scattor Factor), sont des cibles de choix pour une thérapie anti-cancéreuse. La ligation thiocarbamate, précédemment décrite, et la ligation thioéther plus classique ont été utilisées pour préparer une chimiothèque de peptides sulfonatés d’inhiber cette signalisation de façon extracellulaire. La capacité de liaison des composés de la chimiothèque avec le domaine extracellulaire de MET a été évaluée grâce à la technologie biopuces. L’activité biologique (tests MTT, d’activité kinase) des meilleurs produits a été ensuite évaluée.Use of peptides as biomolecules have been extensively applied to various therapeutic fields (cancer, diabetes, AIDS). The challenge for chemists consists in development of new reliable and efficient strategies. Our work especially focused on the conception of two innovative non native chemical ligations bringing an additionnal asset to the existing state of the art.The first ligation, i.e. thiocarbamate ligation, affords alkylthiocarbamate peptides with remarkable yields. Regarding the second one, the azaGly ligation allows the straightforward synthesis of azaGlypeptides. On the other hand, this thesis deals with the design of new peptides suitable to inhibit the signaling pathway of the tyrosine–kinase MET receptor and its ligand HGF/SF (Hepatocyte Growth factor/Scattor factor). Indeed interfering with MET signaling appears to be a promising therapeutic approach.The thiocarbamate ligation disclosed previously along with a classical thioether ligation have been employed for the chemical library design of sulfonated peptids in order to inhibit extracellular interactions. Binding activities assessment of the chemical libray toward the MET extracellular domain has been achieved using a microarray technology. Biological activities (MTT tests and kinase activity) have also been investigated

Antioxydant activity of β-carboline derivatives in the LDL oxidation model

A series of b-carboline compounds were synthesized, starting from compound GWC22, their antioxidant activity was determined by inhibition of lipid peroxidation. The oxidation of LDL was induced in the presence of CuSO4 or 2,20-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH). The protective actions of these compounds against the cytotoxicity were evaluated with lactate dehydrogenase (LDH) activity in bovine aortic endothelial cells (BAECs) and cellular vitality by measuring mitochondrial activity in the presence of MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). Most of compounds showed an higher antioxidant activity than GWC22 derivative (R = 1.6 for 5 mM CuSO4). The best antioxidant activities are phenolic and benzyloxy derivatives with ratio R = 1.9 to 2.8 for 1 mM CuSO4. These substances have protective actions and increase significantly the cell viability

Thiocarbamate-Linked Polysulfonate–Peptide Conjugates As Selective Hepatocyte Growth Factor Receptor Binders

The capacity of many proteins to interact with natural or synthetic polyanions has been exploited for modulating their biological action. However, the polydispersity of these macromolecular polyanions as well as their poor specificity is a severe limitation to their use as drugs. An emerging trend in this field is the synthesis of homogeneous and well-defined polyanion–peptide conjugates, which act as bivalent ligands, with the peptide part bringing the selectivity of the scaffold. Alternately, this strategy can be used for improving the binding of short peptides to polyanion-binding protein targets. This work describes the design and first synthesis of homogeneous polysulfonate–peptide conjugates using thiocarbamate ligation for binding to the extracellular domain of MET tyrosine kinase receptor for hepatocyte growth factor