La spectrométrie de masse comme outil d’investigation lors des mortalités massives aiguës d’abeilles

International audienceLes activités analytiques de LABÉO autour de la santé des abeilles se sont enrichies d’une nouvelle stratégie permettant de déterminer rapidement l’implication de produits phytosanitaires dans les cas de mortalité massive aiguë d’abeilles. Pour cela, une analyse de dépistage par screening sur LC-Q-Tof est réalisée, suivie d’une confirmation et une quantification par analyse en LC-MS/MS. L’extraction des différents pesticides à partir des abeilles est effectuée selon la méthode normalisée « QuEChERS ». Cette stratégie analytique permet d’élargir à de nouvelles molécules la recherche de pesticides qui ciblent le plus souvent les insecticides pyréthrinoïdes ou néonicotinamides. Le cas d’une intoxication d’abeilles vient illustrer l’efficacité de cette approche analytique

La spectrométrie de masse comme outil d’investigation lors des mortalités massives aiguës d’abeilles

International audienceLes activités analytiques de LABÉO autour de la santé des abeilles se sont enrichies d’une nouvelle stratégie permettant de déterminer rapidement l’implication de produits phytosanitaires dans les cas de mortalité massive aiguë d’abeilles. Pour cela, une analyse de dépistage par screening sur LC-Q-Tof est réalisée, suivie d’une confirmation et une quantification par analyse en LC-MS/MS. L’extraction des différents pesticides à partir des abeilles est effectuée selon la méthode normalisée « QuEChERS ». Cette stratégie analytique permet d’élargir à de nouvelles molécules la recherche de pesticides qui ciblent le plus souvent les insecticides pyréthrinoïdes ou néonicotinamides. Le cas d’une intoxication d’abeilles vient illustrer l’efficacité de cette approche analytique

ERATUS – Suivi environnemental dans le cadre du programme d’élimination du rat de l’archipel de Chausey

International audienceLes îles Chausey sont un archipel normand relevant du programme Natura 2000. L’archipel est connu pour ses colonies d’oiseaux, nichant au sol, tel le cormoran huppé. Ces oiseaux sont mis en danger par la surpopulation du rat surmulot qui empêche les oiseaux de couver mais qui se nourrit également des oeufs. C’est pourquoi en 2020, le conservatoire du littoral décide de mener une campagne de dératisation selon un protocole établi par l’INRA[1], avec l’utilisation d’un rodonticide antivitamine-K, le brodifacoum. La dératisation est menée en deux temps, une phase test avec étude de l’impact du rodonticide utilisé sur l’environnement puis le déploiement sur l’ensemble des 365 îlots. L’archipel de Chausey étant un site de productions conchylicoles (moules, huîtres, palourdes) et de pêche récréative et professionnel très important, un suivi environnemental de la qualité du milieu a été demandé par le préfet et le comité régional de la conchyliculture afin de s’assurer de l’absence de résidu de brodifacoum dans l’eau et les coquillages en élevage. Pour rechercher ce rodonticide sur l’environnement, plusieurs approches ont été utilisées : analyse de résidus dans la faune et déploiement d’échantillonneurs intégratifs passifs capable d’accumuler les molécules sur une période d’une quinzaine de jours. La mise en place de ce suivi pour le brodifacoum permet également de collecter des données pour d’autres polluants comme les pesticides ou les biocides issus des traitements antifouling de bateaux. Cinq prélèvements ont été réalisés chaque année, avant la pose des appâts, 2 pendant la période d’appâtage, deux semaines après la pose et après une période de pluie. La recherche de traces de rodonticide a été effectuée sur les crevettes bouquets, les palourdes et les huîtres et moules en condition de caging. Les suivis environnementaux se font avec 3 types d’échantillonneurs intégratifs passifs adaptés pour les molécules polaires (POCIS PHARM), pour le glyphosate/AMPA (POCIS glyphosate) et pour les composés hydrophobes (SPMD), ce qui permet la détection d’environ 300 molécules avec des méthodes d’analyses déjà développées en LC-MS/MS et GC-MS/MS. L’extraction et l’analyse de 6 rodonticides dont le brodifacoum est mise au point pour les coquillages et crustacés, le développement analytique est fait sur une LC-MS/MS Agilent 6495. L’extraction est réalisée avec un solvant suivi d’une purification en SPE Dispersive de type « QuEChERS ». La validation a été réalisée selon la norme NF V03-110. Les résultats des deux campagnes de traitement ont montré que le rodonticide n’était pas retrouvé dans la faune analysée ni dans l’environnement. L’analyse des échantillonneurs a mis en évidence la présence d’une vingtaine de pesticides dans les eaux de l’archipel. [1] Denis Bredin, Louis Dutouquet, Protocole d’éradication du rat surmulot sur l’île de Tomé (Bretagne), Espaces naturels, octobre 2004, n°8

Recherche de résidus d’antiparasitaires dans le compost de fumier de cheval.

National audienceVAL’FUMIER est un programme de valorisation du fumier de cheval au niveau régional, porté par l’IFCE et le GHN (Groupement Hippique National). Pour un haras de 80 chevaux, la production de fumier est de 600 tonnes par an, celui-ci peut être valorisé via leur traitement biologique ou leur épandage agricole et notamment par le compostage de ce sous-produit. Dans le cadre de l’épandage agricole, il est nécessaire de caractériser le compost de fumier, de déterminer sa valeur agronomique et vérifier sa qualité microbiologique selon la norme NF U44-051. Compte tenu des traitements antiparasitaires réalisés régulièrement chez les chevaux, ce programme s’intéresse également à la présence de résidus de médicaments vétérinaires, qui pourrait avoir un impact dans les sols. Deux techniques sont utilisées pour déterminer la présence de benzimidazoles et d’avermectines dans le compost de fumier de cheval. Pour les benzimidazoles, la méthode est adaptée de la méthode ANSES mise en oeuvre dans le lait et les muscles d’animaux, c’est une extraction dispersive avec ajout de sels puis concentration de l’échantillon et injection de l’extrait en chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse. Pour le dosage des avermectines, c’est une extraction par solvant puis purification sur colonne en phase solide, suivie d’une dérivation et analyse de l’extrait sur chromatographie liquide couplée à un détecteur fluorimétrique. Ces deux méthodes ont été adaptées pour l’analyse de compost. Plusieurs échantillons de composts de fumiers ont été analysés, en provenance de 24 exploitations. Pour chaque échantillon, l’extraction a été faite sur l’échantillon et sur ce même échantillon dopé afin de vérifier des rendements pour chaque matrice. Les rendements obtenus montrent que l’extraction et l’analyse sont adaptées et permettent de quantifier 29 molécules benzimidazoles et 6 avermectines. Au final, aucune avermectine n’a été détectée dans les échantillons, 5 composts de fumiers de cheval comportaient du pyrantel, 3 du fenbendazole, 1 du fenbendazole sulfone et une dernière de l’exfenbendazole. Les molécules ont été mis en lien avec l’utilisation de ces médicaments vétérinaires dans les exploitations. Les résultats de cette étude permettent de conclure sur l’absence d’effet significatifs sur le sol par le compost de chevaux traités avec des produits antiparasitaires

Dosage de la morpholine dans les eaux douces par LC-MS/MS.

National audienceLa morpholine est une molécule utilisée dans l'industrie comme intermédiaire du caoutchouc et comme agentanticorrosion dans les systèmes de refroidissement pharmaceutique. La N-Nitrosomorpholine est un dérivé de lamorpholine, qui se transforme naturellement en présence de nitrites. En 2012, une évaluation des risques sanitaires liésà la présence de N-Nitrosomorpholine dans les eaux destinées à la consommation humaine a été demandée à l'ANSESpar la Direction générale de la santé. Le suivi de ces deux molécules dans les eaux superficielles et destinées à laconsommation humaine sont mis en place par les autorités sanitaires dans les zones potentiellement contaminées. Peude méthodes sont décrites dans la littérature pour doser la morpholine.Le laboratoire LABÉO a donc développé une méthode d'extraction et d'analyse, avec pour objectif d'atteindre une limitede quantification de 0.01μg/L dans l'eau. Cette molécule est très polaire, notre problématique était de trouver unecartouche d'extraction adaptée et une colonne de chromatographie permettant une bonne rétention de ce composé.L'utilisation d'une colonne de type C18 ne permettait pas d'obtenir un temps de rétention correct, nous avons doncutilisé une colonne BEH Amide (Waters) qui fonctionne en mode Hilic. Avec cette colonne, le temps de rétention estspécifique à la molécule et la rétention est conforme aux recommandations de la norme NF XP 90-214.Afin d'atteindre la limite de quantification souhaitée, une extraction puis la concentration de l'échantillon sont réaliséespar extraction sur phase solide, les cartouches Oasis HLB (Waters), ENVICARB (Supelco), les Strata X AW(Phenomenex) et Oasis MCX (Waters) ont été testées ainsi que plusieurs solvants d'élution en fonction du type decartouche.Les extraits obtenus sont analysés sur UPLC Agilent 1290 couplé à un spectromètre de masse en tandem 6495 avecune source AJS ESI. La séparation est effectuée avec une colonne BEH Amide de 1.7μm et de 2.1mm x 100mm, letemps de rétention est de 8.5 minutes.Les échantillons sont quantifiés par une courbe d'étalonnage interne en ayant recours à une dilution isotopique.L'objectif de limite de quantification de 0.01μg/L est atteint.La méthode a été validée selon la norme NF T90-210 et accréditée en portée flexible selon le programme COFRAC LabGTA 05

Dosage de la morpholine dans les eaux douces par LC-MS/MS.

National audienceLa morpholine est une molécule utilisée dans l'industrie comme intermédiaire du caoutchouc et comme agentanticorrosion dans les systèmes de refroidissement pharmaceutique. La N-Nitrosomorpholine est un dérivé de lamorpholine, qui se transforme naturellement en présence de nitrites. En 2012, une évaluation des risques sanitaires liésà la présence de N-Nitrosomorpholine dans les eaux destinées à la consommation humaine a été demandée à l'ANSESpar la Direction générale de la santé. Le suivi de ces deux molécules dans les eaux superficielles et destinées à laconsommation humaine sont mis en place par les autorités sanitaires dans les zones potentiellement contaminées. Peude méthodes sont décrites dans la littérature pour doser la morpholine.Le laboratoire LABÉO a donc développé une méthode d'extraction et d'analyse, avec pour objectif d'atteindre une limitede quantification de 0.01μg/L dans l'eau. Cette molécule est très polaire, notre problématique était de trouver unecartouche d'extraction adaptée et une colonne de chromatographie permettant une bonne rétention de ce composé.L'utilisation d'une colonne de type C18 ne permettait pas d'obtenir un temps de rétention correct, nous avons doncutilisé une colonne BEH Amide (Waters) qui fonctionne en mode Hilic. Avec cette colonne, le temps de rétention estspécifique à la molécule et la rétention est conforme aux recommandations de la norme NF XP 90-214.Afin d'atteindre la limite de quantification souhaitée, une extraction puis la concentration de l'échantillon sont réaliséespar extraction sur phase solide, les cartouches Oasis HLB (Waters), ENVICARB (Supelco), les Strata X AW(Phenomenex) et Oasis MCX (Waters) ont été testées ainsi que plusieurs solvants d'élution en fonction du type decartouche.Les extraits obtenus sont analysés sur UPLC Agilent 1290 couplé à un spectromètre de masse en tandem 6495 avecune source AJS ESI. La séparation est effectuée avec une colonne BEH Amide de 1.7μm et de 2.1mm x 100mm, letemps de rétention est de 8.5 minutes.Les échantillons sont quantifiés par une courbe d'étalonnage interne en ayant recours à une dilution isotopique.L'objectif de limite de quantification de 0.01μg/L est atteint.La méthode a été validée selon la norme NF T90-210 et accréditée en portée flexible selon le programme COFRAC LabGTA 05

Fluorinated alcohols as activators for the solvent-free chemical fixation of carbon dioxide onto epoxides

The addition of fluorinated alcohols to onium salts provides highly efficient organocatalysts for the chemical fixation of CO2 onto epoxides under mild experimental conditions. The combination of online kinetic studies, NMR titrations and DFT calculations allows understanding this synergistic effect that provides an active organocatalyst for CO2/epoxides coupling