인체 유방암 세포에서 Caveolin-1 감소에 의한 암줄기세포 특성 발현 촉진

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 약학대학 약학과, 2019. 2. 徐榮俊.암줄기세포 (Cancer stem cell)는 종양의 개시 (initiation), 전이 (metastasis), 그리고 재발 (recurrence)에 있어 중요한 역할을 한다. 최근 연구 동향을 살펴보면, 암의 진행에 있어서 암줄기세포의 복잡한 생리학적 기능을 이해하고, 이들의 발생 기전을 조절하는 치료법 개발이 강조되고 있다. 본 연구에서는 그 발생 기전을 조절하는 조절인자 (modulator)로서 Caveolin-1 (Cav-1)을 선정하였다. Cav-1은 세포막 단백질인 Caveolae를 구성하는 주요 단백질로써, 세포내 콜레스테롤 항상성 유지 (cholesterol homeostasis), 분자 수송 (vesicle trafficking), 암의 진행 (tumor progression) 및 신호 전달 (signal transduction) 등 다양한 기능에 관여한다. 그러나 Cav-1의 암줄기세포에 대한 분자기전에 대한 연구는 미흡한 실정이다. 이에 본 연구에서는 암줄기세포의 발생기전에 있어서 Cav-1의 역할에 대해 알아 보고자 하였다. 먼저, 줄기세포 배양방법으로 잘 알려진 sphere-forming culture system을 통해 배양된 유방암 줄기세포 (tumorsphere MDA-MB-231)에서 Cav-1의 발현이 낮아지는 것을 확인하였다. 유방암세포 MDA-MB-231에 small interfering RNA (siRNA) 기법을 통해 Cav-1을 억제하였을 때, 줄기세포에서 많이 나타나는 특성인 자가재생 (self-renewal)과 epithelial-mesenchymal transition (EMT)의 표현형 (phenotype)이 증가하고, 더불어 구체형성능 (tumorsphere forming capacity)이 증가하는 것을 확인하였다. 구체형성 세포 (tumorsphere cell)에서 Cav-1의 발현이 낮아지는 것은 유비퀴틴화에 의한 단백질 분해 조절 기전임을 확인하였다. Cav-1의 활성에는 tyrosine 14번 잔기가 주로 역할을 하고 있다는 문헌 정보를 토대로, 특정 부위 돌연변이 (site-directed mutagenesis)를 통해 tyrosine 14번을 phenylalanine으로 치환하였을 경우, 자가재생능과 EMT 표현형이 감소되는 것을 통해, 줄기세포능을 유지하는데 있어서 Cav-1의 tyrosine 14 잔기가 매우 중요한 역할을 하는 것을 확인하였다. 또한 Cav-1이 다른 분자와 상호간의 직접적인 결합을 통해 신호 전달에 기여한다는 보고를 바탕으로 그 후보물질로서 Nrf2를 선정하여, 실제 이들이 유방암 세포에서 결합을 이루고 있음을 확인하였고, tumorsphere cell에서 Cav-1의 단백질 안정화가 감소되면서 Cav-1과 결합되어 있던 Nrf2가 핵 안으로 이동되어 줄기세포능을 증가시키는 것을 관찰하였다. 최근 암줄기세포를 타겟으로 하는 암의 치료 및 예방을 위해 비교적 독성이 약한 식물 유래 화합물 (phytochemicals)을 이용한 연구가 많이 이루어 지고 있다. Resveratrol은 그 가운데 대표적인 물질 중 하나로, 포도, 건과류 및 장과류 (berries) 등에 다량 함유되어 있는 폴리페놀 성분 물질로 항산화 효과, 심혈관계질환 예방효과, 항암효과, 염증관련 질환 예방 효과를 가진 것으로 보고되고 있다. Resveratrol을 처리하였을 때, 유방암세포의 구체형성능과 자가재생, EMT 표현형이 감소하고, Cav-1의 발현은 증가하는 것을 확인하였다. 이때 증가한 Cav-1을 siRNA를 이용하여 억제시키면, 감소하였던 줄기세포능이 다시 증가함을 확인하였다. 이와 같은 결과를 바탕으로 resveratrol이 Cav-1을 매개로 한 경로 조절을 통해 암줄기세포적 성격을 억제하여, 향후 암줄기세포를 타겟으로 하는 새로운 치료법의 접근이 가능할 것으로 사료된다.Cancer stem cells (CSCs), a subset of cancer cells characterized by the property of self-renewal and differentiation, initiate tumor growth and promote chemo-/radiotherapy resistance, which are considered to be responsible for progression, recurrence and metastasis. Several intrinsic and extrinsic signaling pathways maintaining CSCs population have been explored. A prominent property of CSCs is the ability to undergo self-renewal division. The dysregulation of self-renewal signaling may account for the regeneration of the tumor. Hence, understanding the signaling pathways for maintaining features of CSCs is likely to be important for developing targeted anticancer therapies. Caveolin-1 (Cav-1) is a major protein of caveolae, which is flask-shaped invagination at cell membranes. Caveolae participate in various cellular functions, such as vesicle trafficking, cholesterol homeostasis, and tumor progression. Cav-1 is thought to regulate the activity of proteins, such as Src family kinases, H-Ras, protein kinase C, epidermal growth factor tyrosine kinase, extracellular signal-regulated kinase, and endothelial nitric oxide synthase involved in oncogenic signaling pathways. In this context, Cav-1 has been proposed as a potential therapeutic target for disrupting tumor progression and metastasis. In the present study, I investigated a role for Cav-1 in regulating the stemness of human breast cancer (MDA-MB-231) cells. To investigate whether Cav-1 could be involved in modulating the stemness of breast cancer cells, tumorspheres were generated from adherent cells. Cav-1 expression was significantly lower in tumorspheres than in adherent cells. Further, the proportion of breast stem-like CD44high and CD24low cells was increased in Cav-1 knocked down MDA-MB-231 cells. Mechanistically, the silencing of Cav-1 resulted in the elevated expression of the well-known stemness-related genes, Nanog, Oct 3/4, and Sox2 with concomitant upregulation of Bmi-1, a representative self-renewal regulator. In line with above findings, the Cav-1 knock down increased the size and the number of spheres derived from MDA-MB-231 cells. In a CSC-like state, the reduced Cav-1 levels were attributable to its destabilization through ubiquitin-proteasome degradation. Src-mediated phosphorylation of Cav-1 at the Tyr 14 residue is essential for its degradation. The expression of p-Cav-1 (Tyr14) and p-Src (Tyr416) was markedly elevated in tumorsphere cells, compared to adherent cells. Y14F Cav-1 mutation by replacing Tyr14 with phenylalanine was sufficient to abolish phosphorylation and ubiquitination of Cav-1 protein. To verify that Cav-1 suppresses the breast cancer cell stemness, we overexpressed Cav-1 in MDA-MB-231 tumorspheres. As a result, the MDA-MB-231 tumorspheres overexpressing WT-Cav-1 exhibited the reduced ability of spheroid formation compared with Mock treated control cells. Notably, the tumorsphere-forming ability of cells expressing Y14F mutant Cav-1 was weaker than that of cells expressing WT-Cav-1. Likewise, the Y14F Cav-1 mutation significantly mitigated the inhibitory effects of Cav-1 on the expression of Bmi-1 and EMT markers. Taken together, these findings suggest that Cav-1destabilization by Src-mediated phosphorylation may play a pivotal role in manifestation and maintenance of stemness in breast cancer cells. However, a question that still needs to be addressed is how Cav-1 destabilization promotes stemness properties. The Nuclear erythroid 2 p45-related factor-2 (Nrf2) is a key transcription factor that regulates the antioxidant and detoxification enzymes. Recently, it has been reported that Nrf2 signaling is involved in CSC-like properties of several types of cancer cells. Notably, Nrf2 has been reported to directly interact with Cav-1. In breast cancer, Cav-1 binds to Nrf2 and enhances its degradation in cytosol through ubiquitination. The reduction of the intracellular accumulation of Nrf2 by Cav-1 led to a decrease in stemness-related gene expression. When degradation of Cav-1 occurs through ubiquitin-proteasomal degradation, Nrf2 is dissociated from the Cav-1 complex. The liberated Nrf2 accumulates in the nucleus and enhances the expression of stemness-related genes, which promote the manifestation of CSC-like phenotypes. Thus, Cav-1 interact with Nrf2 in breast cancer and inhibits the Nrf2 signaling, thereby suppressing the manifestation of CSC-like properties. Recently, natural products have attracted much attention for prevention and treatment of cancer. Resveratrol (trans-3,4,5-triydroxystilbene), a phytoalexin found in grapes and other food products, has been investigated with regard to its chemopreventive and chemotherapeutic activities in various cancer cells as well as in animal models. Nonetheless, the underlying mechanism by which resveratrol regulates the signal transduction pathway involved in maintenance of CSCs and manifestation of their characteristics still remains to be largely unclear. Therefore, I investigated the effects of the resveratrol on breast cancer stem-like properties in the context of its modulation of Cav-1-mediated signaling. In this study, I found the inhibitory effect of resveratrol on the viability and migration capacity of tumorsphere MDA-MB-231 cells. Further, resveratrol significantly decreased the number and the size of MDA-MB-231 tumorspheres and also the proportion of CD44high/CD24low cell population Mechanically, the expression of self-renewal signaling molecules and EMT markers was reduced by treatment of resveratrol. Notably, resveratrol treatment decreased expression of self-renewal and EMT markers, which was elevated by knockdown of Cav-1. In conclusion, reduced Cav-1 accumulation depends on its destabilization through ubiquitin-proteasome degradation. After degradation of Cav-1, Nrf2 is dissociated from the Cav-1 complex and enhances the expression of stemness-related genes.. Resveratrol has an inhibitory effects on manifestation of Cav-1-mediated CSC-like properties. This study herein indicates that Cav-1 acts as a pivotal regulator in manifestation and maintenance of stemness in breast cancer cells and can be an important therapeutic target for breast cancer therapy.Chapter Ⅰ Role of Caveolin-1 in cancer progression and metastasis 1 1. Introduction 2 2. The role of Cav-1 expression in human cancer 4 2.1 Expression of Cav-1 in human cancer cells 4 2.2 Dual role of Cav-1 in cancer - 6 2.2.1 Tumor suppressor 6 2.2.2 (Transformation) suppressor 6 2.2.3 Oncogene 7 2.3 Implication of Cav-1 expression in pathogenesis of human cancer - 7 3. The role of Cav-1 in invasion, migration and metastasis 8 3.1 Cav-1 and EMT 9 3.2 Cav-1 and Rho-GTPases 10 3.3 Cav-1 and matrix metalloproteinase (MMP) 10 4. Conclusion - 11 5. References 16 Statement of purpose - 28 Chapter Ⅱ Src-mediated phosphorylation, ubiquitination and degradation of Caveolin- 1 promotes breast cancer stemness and progression 29 1. Abstract 30 2. Introduction - 31 3. Materials and Methods 34 4. Results - 45 5. Discussion - 71 6. References - 76 Chapter Ⅲ Caveolin-1 inhibits stem-like traits of breast cancer cells through direct interaction with Nrf2 86 1. Abstract 87 2. Introduction 88 3. Materials and Methods - 90 4. Results 98 5. Discussion - 110 6. References - 113 Chapter Ⅳ Effects of resveratrol on Caveolin-1-mediated manifestation of breast cancer stem-like properties 120 1. Abstract 121 2. Introduction - 122 3. Materials and Methods 124 4. Results - 130 5. Discussion - 140 6. References - 143 Conclusion - 152 Abstract in Korean 154Docto

토픽 모델링을 이용한 자동 인터넷 응용 프로그램 시그니쳐 추출

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 전기·컴퓨터공학부, 2013. 2. 김종권.Classifying network traffic according to the application that generated it has attracted significant interests among Internet researchers and operators, as it is an essential task for understanding, operating, optimizing, planning, and financing the Internet. Although content-analysis based Deep Packet (Payload) Inspection technique has been found very accurate once given a set of known payload signature strings for corresponding applications, it is very time consuming and challenging to manually derive and construct the signatures. In this paper, we propose a new, automatic payload content-analysis based traffic classification method called TASTE(Topic-model based Automatic Signature Extraction). TASTE adopts the Latent Dirichlet Allocation (LDA) topic model, which is one of the most popular probabilistic text modeling techniques for extracting latent semantic information from text corpa. Our evaluation with a broad range of data sets demonstrates that TASTE can automatically detect and identify signatures for a range of applications without any prior knowledge, with 96-98% of overall accuracy.Chapter 1 Introduction 1 1.1 Background 1 1.2 Main Idea and Contributions 2 1.3 Thesis Organization 3 Chapter 2 Related Work 4 Chapter 3 Topic Model Based Classification 8 3.1 LDA 8 3.2 Applying LDA to Traffic Classification 10 3.2.1 Overview 10 3.2.2 Inputs: Data pre-processing and Parameters 11 3.2.3 Outputs: Topics and their Distributions 12 Chapter 4 METHODOLOGIES 14 4.1. Performance metrics 14 4.2. Data set and reference benchmark 15 4.3. Parameter Setting 17 Chapter 5 RESULTS 23 5.1. Performance Comparison 23 5.2. Classification Quality 24 Chapter 6 DISCUSSION 26 Chapter 7 Conclusion 27Maste

품종별 청고추의 항산화 효과 및 유방암 세포주에서의 세포사멸 연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 식품영양학과, 2012. 8. 황인경.본 연구에서는 국내·외 품종별 green pepper에 있는 비타민 C, 총 폴리페놀, 총 플라보노이드를 비롯하여 고추에 주로 함유된 flavonoids인 quercetin, luteolin, apigenin의 양을 측정하고, 이들로 인한 항산화 효과와 더불어 유방암 세포에서의 apoptosis를 통한 세포 사멸 유도에 관한 연구를 수행하였다. 이에 국내산 green pepper의 flavonoids에 대한 기초 자료를 제공하고, 이들의 항산화 효과 및 유방암 세포에서의 apoptosis를 통하여 암을 비롯한 다양한 질병의 예방에 있어 잠재적인 가치를 알아보고자 하였다. 풋고추, 청양고추, 꽈리고추, 오이고추, 할라피뇨의 5가지 품종의 flavonoids를 분석한 결과, 그 함량에 있어서 luteolin, quercetin, apigenin의 순으로 측정되었으며, 품종 간에는 꽈리고추의 flavonoids가 유의적으로 가장 높게 나타났다. 비타민 C의 함량은 꽈리고추가 가장 높았으며, 그 다음 청양고추, 할라피뇨, 풋고추, 오이고추의 순으로 측정되었다. 또한 총 폴리페놀과 총 플라보노이드 함량은 꽈리고추가 유의적으로 높게 측정되었는데 이는 DPPH, ABTS 자유기 소거 활성능에서도 비슷한 경향을 나타내었다. Green pepper 추출물의 세포 성장에 미치는 영향을 살펴본 결과, human breast cancer cell인 MCF-7과 MDA-MB-231에서 5가지 품종 모두 농도 의존적으로 유의적인 증식 억제능을 갖고 있었다. 특히 꽈리고추에서 IC50 값이 826 μg/mL, 719 μg/mL로 가장 낮게 측정되어 증식 억제 효과가 가장 우수하게 나타났다. Necrosis로 인한 세포 사멸 효과는 꽈리고추 추출물을 처리하였을 때, 농도 의존적으로 LDH가 분비되며, plasma membrane integrity의 감소가 이루어지는 것을 확인하였다. Apoptosis의 확인 인자로 Bax, cleaved caspase-3, PARP를 측정한 결과, 꽈리고추 추출물에서 농도 의존적으로 apoptosis로 인한 세포사멸 효과를 나타내었다. 이상의 결과들을 통하여, green pepper에는 luteolin, quercetin 및 apigenin의 flavonoids를 비롯하여 vitamin C 등 여러 기능성 성분을 함유하고 있으며, 특히 꽈리고추가 5가지 품종 가운데 항산화 및 항암능 측정에서 가장 높은 활성을 갖고 있었으며, 유방암세포에서 apoptosis로 인한 세포 사멸 효과를 나타내고 있는 것을 확인하였다. 이에 국내산 green pepper의 flavonoids의 정성·정량에 있어서 기초자료가 될 것으로 기대되며, 이들의 항산화 효과와 더불어 유방암 예방 및 치료에 있어서 잠재적인 가치를 기대할 수 있다.Pepper (Capsicum annuum. var.) has various phytochemicals including capsaicin and flavonoid. However, studies on flavonoids in pepper are a few, compared to many researches done on capsaicin. So, we investigated total phenol, total flavonoid contents, antioxidant activity and antiproliferative activity though apoptosis on human breast cancer cell line (MCF-7, MDA-MB-231). This study was carried out to determine whether green pepper have a potential to prevent proliferation of human breast cancer. Four varieties of Korean green peppers (PP : Phut Pepper, CP : Cheongyang pepper, KP : Kkuri Pepper, OP : Ohi pepper) and one foreign green pepper (JP : Jalapeno Pepper) were used. Major flavonoids of green pepper were luteolin, quercetin, and apigenin. Content of luteolin was the highest in green pepper, especially in KP. The amounts of vitamin C were the highest in KP, followed by CP, JP, PP, and OP. The contents of total phenol were the highest in KP. KP had highest contents of total flavonoid. For antioxidant activity using DPPH·ABTS radical scavenging activity, KP had the most potent antioxidant activity, indicating the correlation between the content of flavonoid and vitamin C and the antioxidant activity. In the result of antiproliferative activity on human breast cancer cell, KP had the highest antiproliferative effect (IC50 826.07 μg/ml in MCF-7, 719 μg/mL in MDA-MB-231). KP extracts exhibited moderate cytotoxicity caused by necrosis against the cancer cell lines, in a dose-dependent manner, as measured by against the untreated control. To confirm the apoptotic activity, modulations of Bax, cleaved caspase-3, and PARP enzyme expression were evaluated by western blot, and KP showed dose dependent induction of apoptosis on breast cancer cell. These results suggest that green pepper has many functional compounds including flavonoids such as luteolin, quercetin, and apigenin, and vitamin C. Also, KP had the highest antioxidant activity and apoptotic activity among the five tested varieties. In conclusion, green pepper has significant antioxidant activity and can be a possible candidate for treatment of breast cancer.국문초록 목차 표목차 그림목차 Ⅰ. 서론 Ⅱ. 실험재료 및 방법 1. 실험재료 2. 실험방법 2.1. 메탄올 추출 2.2. 기능성 성분 분석 2.2.1. 플라보노이드 분석 2.2.2. 비타민 C 함량 2.2.3. 총 폴리페놀 함량 2.2.4. 총 플라보노이드 함량 2.3 항산화 활성 측정 2.3.1. DPPH 자유기 소거 활성능 2.3.2. ABTS 자유기 소거 활성능 2.4 고추추출물의 세포사멸 효과 측정 2.4.1. 유방암 세포의 증식 억제 효과 2.4.2. Necrosis 측정 2.4.3. Apoptosis 측정 2.4.3.1. Bax, cleaved caspase-3, PARP 측정 3.1 통계처리 Ⅲ. 실험결과 및 고찰 1. 추출 수율 2. 기능성 성분 분석 2.1. 플라보노이드 분석 2.2. 비타민 C 함량 2.3. 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량 3. 항산화 활성 3.1. DPPH 자유기 소거 활성능 3.2. ABTS 자유기 소거 활성능 3.3. Green pepper의 기능성 성분과 항산화 활성 간의 상관관계 4. 고추추출물의 세포사멸 효과 4.1. 유방암 세포의 증식 억제 효과 4.2. Necrosis 4.3. Apoptosis 4.3.1. Bax 4.3.2. cleaved caspase-3, PARP Ⅳ. 요약 및 결론 참고문헌 AbstractMaste

Sprayable nanomicelle hydrogels and inflammatory bowel disease patient cell chips for development of intestinal lesion-specific therapy

All-in-one treatments represent a paradigm shift in future medicine. For example, inflammatory bowel disease (IBD) is mainly diagnosed by endoscopy, which could be applied for not only on-site monitoring but also the intestinal lesion-targeted spray of injectable hydrogels. Furthermore, molecular conjugation to the hydrogels would program both lesion-specific adhesion and drug-free therapy. This study validated this concept of all-in-one treatment by first utilizing a well-known injectable hydrogel that underwent efficient solution-to-gel transition and nanomicelle formation as a translatable component. These properties enabled spraying of the hydrogel onto the intestinal walls during endoscopy. Next, peptide conjugation to the hydrogel guided endoscopic monitoring of IBD progress upon adhesive gelation with subsequent moisturization of inflammatory lesions, specifically by nanomicelles. The peptide was designed to mimic the major component that mediates intestinal interaction with Bacillus subtilis flagellin during IBD initiation. Hence, the peptide-guided efficient adhesion of the hydrogel nanomicelles onto Toll-like receptor 5 (TLR5) as the main target of flagellin binding and Notch-1. The peptide binding potently suppressed inflammatory signaling without drug loading, where TLR5 and Notch-1 operated collaboratively through downstream actions of tumor necrosis factor-alpha. The results were produced using a human colorectal cell line, clinical IBD patient cells, gut-on-a-chip, a mouse IBD model, and pig experiments to validate the translational utility.ope

Cancer Patient Tissueoid with Self-Homing Nano-Targeting of Metabolic Inhibitor

The current paradigm of cancer medicine focuses on patient- and/or cancer-specific treatments, which has led to continuous progress in the development of patient representatives (e.g., organoids) and cancer-targeting carriers for drug screening. As breakthrough concepts, i) living cancer tissues convey intact profiles of patient-specific microenvironmental signatures. ii) The growth mechanisms of cancer mass with intense cell-cell interactions can be harnessed to develop self-homing nano-targeting by using cancer cell-derived nanovesicles (CaNVs). Hence, a tissueoid model of ovarian cancer (OC) is developed by culturing OC patient tissues in a 3D gel chip, whose microchannel networks enable perfusion to maintain tissue viability. A novel model of systemic cancer responses is approached by xenografting OC tissueoids into ischaemic hindlimbs in nude mice. CaNVs are produced to carry general chemotherapeutics or new drugs under pre/clinical studies that target the BRCA mutation or energy metabolism, thereby increasing the test scope. This pioneer study cross-validates drug responses from the OC clinic, tissueoid, and animal model by demonstrating the alignment of results in drug type-specific efficiency, BRCA mutation-dependent drug efficiency, and metabolism inhibition-based anti-cancer effects. Hence, this study provides a directional foundation to accelerate the discovery of patient-specific drugs with CaNV application towards future precision medicine.ope

Hormone autocrination by vascularized hydrogel delivery of ovary spheroids to rescue ovarian dysfunctions

The regeneration potential of implantable organ model hydrogels is applied to treat a loss of ovarian endocrine function in women experiencing menopause and/or cancer therapy. A rat ovariectomy model is used to harvest autologous ovary cells while subsequently producing a layer-by-layer form of follicle spheroids. Implantation of a microchannel network hydrogel with cell spheroids [vascularized hydrogel with ovarian spheroids (VHOS)] into an ischemic hindlimb of ovariectomized rats significantly aids the recovery of endocrine function with hormone release, leading to full endometrium regeneration. The VHOS implantation effectively suppresses the side effects observed with synthetic hormone treatment (i.e., tissue overgrowth, hyperplasia, cancer progression, deep vein thrombosis) to the normal levels, while effectively preventing the representative aftereffects of menopause (i.e., gaining fatty weight, inducing osteoporosis). These results highlight the unprecedented therapeutic potential of an implantable VHOS against menopause and suggest that it may be used as an alternative approach to standard hormone therapy.ope

$UsnJrnl 파일을 이용한 사용자 행위 추적 연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 융합과학기술대학원 수리정보과학과, 2018. 2. 천정희.디지털포렌식 수사관이라면 누구나 범죄의 행위를 규명하기 위해 많은 고민을 하게 된다. 사건의 유형이나 사용자의 행위 패턴, 혹은 사건의 쟁점에 따라 압수의 대상이 달라지고 압수물에 대한 분석 방향이 결정된다. 예컨대, 기술 유출 사건의 경우라면 혐의와 관련된 문건이 특정 기기에 존재 했었는지에 대한 여부, 혹은 기술이 유출된 경로를 확인하는 것으로 분석이 시작되고, 증거 인멸의 사건이라면 혐의와 관련된 문건이 무엇인지, 언제, 어떤 방법으로 삭제가 되었는지, 혹은 삭제된 문건을 어떻게 찾아내고 복구할지에 대한 파악으로 시작된다. 디지털 기술의 보편화, 대중화로 인해 개인의 일상과 밀접한 관계를 맺게 되면서 증거로서의 디지털 정보가 가지는 의미는 점차 증대되고 있다. 반면 이러한 기술이 고도화 되고 새로운 기술 지식에 대한 접근이 용이해짐에 따라 개인들의 디지털 정보에 대한 지식이 지능화 되어 수사기관의 개개인의 디지털 정보에 대한 접근은 어려워지고 있다. 특히, 개인의 프라이버시나 기업의 보안 의식이 강화되면서 안티포렌식 기술 또한 더욱 다양하고 정밀해 짐에 따라 이러한 디지털 증거를 분석하고 그 결과를 현출해야 하는 디지털포렌식 수사관들에게는 더 다양하고 심도있는 기술이나 정보 습득이 요구되어진다. 디지털 증거 분석 요청의 대부분은 사용자의 특정 행위에 대한 시간 정보다. 특히 쟁점이 되는 행위의 실행 시간, 예를 들어 특정 파일이 존재한다면 그 파일을 생성하거나 변경, 삭제한 시간 등에 대한 정보다. 모든 사건에 있어서 시간정보는 범죄 행위를 규명하는 필수적 요소이고, 디지털 증거에 있어서도 예외는 아닐 것이다. 디지털포렌식의 관점에서 이러한 정보들을 확인할 수 있는 요소들은 많지만 그 중 본 연구에서 다루었던 $UsnJrnl 파일은 그 기능의 특성상 사용자 및 시스템의 행위를 비교적 구체적인 시간정보와 함께 기록하고 있다. 하지만 현재 국·내외 적으로 디지털포렌식 수사관들이 활용할 수 있는$UsnJrnl 파일 관련 연구는 부족한 실정이다. 다양한 수사기법에 대한 연구는 실무자들에게 사건을 접근하는 방법을 제시하고 사건을 해결하는데 유용한 자료가 되는 바, 이번 연구를 통해 시간정보를 기반으로 하는 사용자의 행위 추적에 용이한 $UsnJrnl 파일을 활용한 분석 방법을 제안하고자 했다. 본 연구에서는 실제 실무에서$UsnJrnl 파일로부터 탐지된 정보들을 활용한 사례를 보여주었고, 가상의 시나리오를 구성하여 구체적인 분석 방법을 제시했다. 해당 사례 분석을 통해 사건의 쟁점이 되는 파일의 삭제 시간 정보를 확인할 수 있었는데, 특히 완전 삭제 프로그램을 사용하거나 기타 안티포렌식 행위들에 대해서도 그 흔적을 추적해 나갈 수 있음을 보여주었다. $UsnJrnl 파일이 남기는 무수히 많은 정보들 중에서 필요한 정보만을 탐색하는 것이 쉬운 것만은 아니었다. 그러나 단 1퍼센트의 가능성이라도 있다면 쉽게 간과할 수는 없을 것이다. 이번 연구를 통해 더 다양하고 활발한 연구의 필요성을 느끼면서 동시에 본 연구가 우리 디지털포렌식 수사관들에게 유용하게 활용되기를 바란다.제1장 연구의 목적과 방법 1 제2장 관련 연구 3 1. InPrivate 모드 및 CCleaner 사용 흔적 연구 3 2.$UsnJrnl 및 $LogFile의 조합을 통한 MFT Entry 분석 연구 4 제3장 NTFS 파일 시스템의 저널파일 5 1.$UsnJrnl 파일 및 관련 파일 개요 5 (1) MFT Entry 6 (2) $UsnJrnl 7 (3)$LogFile 16 2. 포렌식 관점에서의 두 저널파일 비교 19 3. 세 파일의 연결 원리 21 4. $UsnJrnl 파일을 통한 MFT Entry 정보 분석 23 제4장$UsnJrnl 파일의 수집 근거 및 필요성 26 1. $UsnJrnl 파일의 증거로서의 가치와 증거능력 26 2.$UsnJrnl 파일의 사건 관련성 여부 판단 28 3. $UsnJrnl 파일의 전문법칙 적용 여부 28 4.$UsnJrnl 파일의 수집 필요성 및 방법 30 제5장 실무에서의 $UsnJrnl 파일 활용 사례 31 1. 기술 유출 사례 31 2. 연예인 얼굴을 합성한 음란물 유포 사례 32 제6장 가상 시나리오를 통한 활용 방안 제안 34 1. 증거인멸 사례 35 (1) 분석 환경 및 분석 방법 35 (2) 분석 결과 및 활용 방법 37 2. 기술유출 사례 61 (1) 분석 환경 및 분석 방법 62 (2) 분석 결과 및 활용 방법 64 3. 소결 84 제7장 결론 88Maste

겹선형 사상을 이용한 익명 신용장 시스템과 권한 관리

Thesis(doctoral)--서울대학교 대학원 :수리과학부,2006.Docto

이미다졸륨 기반의 이온성 액체가 고정된 고체상 지지체의 개발과 이를 이용한 다양한 유기합성 반응 : 산화반응, 탈수화반응, 탄소-탄소 결합반응, 탄소-황 결합반응 및 에스테르화 반응

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 화학생물공학부, 2011.2. 이윤식.Docto

Algorithms for Coppersmith`s method and its application

Thesis (master`s)--서울대학교 대학원 :수리과학부,2001.Maste