Study on the Isolation Identification and Antitumor Activity of a Phenol Derivative from Mangrove Fungus BYY-1

[作者简介] 杜希萍( 1978—) ，女，讲师，从事天然产物化学方面的研究． 通讯作者: 苏文金( 1956—) ，男，教授，从事海洋药物与食品方向研究，E-mail: wjsu@ jmu. edu. cn．[中文文摘]采用硅胶柱层析、薄层层析、Sephadex LH-20柱层析从红树内生真菌BYY-1的次级代谢产物中分离到化合物B1.通过乙酰化、NMR、HR ESI-Q-TOF MS等技术鉴定了化合物B1的结构,确定其为首次从红树内生真菌中分离到的化合物.运用MTT法和流式细胞术研究了化合物B1的抗肿瘤活性,结果表明,化合物B1可显著抑制Hela细胞的增殖[英文文摘]Compound B1 was obtained from the secondary metabolites of mangrove fungus BYY －1 using silica gel column chromatography，thin layer chromatography and Sephadex LH － 20 column chromatography．The structure of compound B1 was elucidated by acetylation，NMR and HR ESI －Q －TOF MS analysis，and compound B1 was isolated from mangrove fungi for the first time． The antitumor activity of compound B1 was studied by the methods of MTT and flow cytometric DNA analysis． The results showed compound B1 could significantly inhibit the proliferation of Hela cells with IC50 3. 3 μg /mL，and induce evident Hela cells apoptosis when compound B1 was 4 μg /mL．中央高校基本业务费资助项目(2010121092); 福建省科技计划重点项目(2011N1008);; 集美大学博士启动基金资助项目(ZQ2011004

Biorefinery of asparagus (Asparagus officinalis L.) waste

芦笋（Asparagus officinalis L.）是一种药食同源的名贵蔬菜，我国年产鲜笋≥140万吨。芦笋的初加工产品主要有罐头、速冻食品、芦笋干以及芦笋粉等。在芦笋加工过程中约有占原料总量30～40%的笋皮、老茎等下脚料产生，这些下脚料除了极少一部分作为动物饲料，大部分被丢弃任其自然腐败，既污染了环境，又造成了资源的极大浪费。据测定，这些下脚料中含有丰富的营养物质和活性成分，有些成分的含量甚至高于蔬菜笋，而现有的单一组分利用技术存在能耗高、经济性差、固体废弃物处理等问题。为了解决芦笋废弃资源利用过程中急需解决的上述问题，本研究以生物炼制为思路，首先分级提取芦笋叶绿素、芦笋多糖、芦笋皂苷和β-胡萝卜素等，并进一步合成了绿色食用色素－叶绿素铜钠盐，分离纯化了芦笋多糖，研究了其单糖组成、理化性质及生物活性；将提取芦笋皂苷产生的残渣固态发酵、鲜芦笋下脚料液态发酵制备Bt生物农药，为实现芦笋废弃资源的高值化全利用奠定了基础。本论文得到的主要研究结果如下： 1、在单因素实验的基础上，优化了芦笋叶绿素的超声强化提取工艺，在提取溶剂为80%丙酮: 95%乙醇= 1:4，提取时间60 min，提取温度70℃，料液比1:10，超声功率160 W条件之下，芦笋鲜叶中叶绿素提取率为0.287%。得到了叶绿素铜钠盐合成的最佳皂化条件为：pH 11，皂化时间60 min，皂化温度60℃，浓缩5倍。采用100 W超声处理30秒，或200 W超声20秒，可显著促进叶绿素酮酸的聚集，使之易于采用抽滤或离心的方式回收。优化的酸化、铜代的条件为pH 3，时间2 h，硫酸铜实际用量为理论用量的1.5倍，温度70℃，以鲜叶计产品得率为0.18%（鲜叶含水量62.2%），经检测产品质量符合国家标准GB 3262-1982。叶绿素铜钠盐合成过程所产生的废液经Al2O3柱层析可分离回收β-胡萝卜素，β-胡萝卜素总含量（以鲜叶计）为0.0161%，柱层析后回收率为49.3%，纯度为90%。干燥后的芦笋残渣制备芦笋粗多糖得率为13.3%，其中多糖含量为20.1%；沉淀多糖的乙醇溶液通过蒸馏回收，浓缩膏干燥后得粗芦笋皂苷，皂苷得率为12.3%，含量为14.23%。 2、在单因素实验的基础上，采用Box Benhnken设计和响应面分析法，设计3因素3水平实验，得到芦笋粗多糖提取的优化工艺条件为：超声功率700 W，占空比1.5:1，提取时间45 min，料液比1:35。以纯多糖的得率为响应值，获得了芦笋多糖得率对编码自变量超声功率（X1）、提取时间（X2）、料液比（X3）的二次多项回归方程： Y=3.04 + 0.23X1 + 0.19X2 + 0.16X3 + 0.057X1X2 – 0.00425X1X3 – 0.06 X2X3 – 0.74 – 0.14 – 0.21 并按照模型给出的最优提取条件：超声功率 600 W，占空比1.5:1，提取时间 46 min，液固比 35 mL/g，验证实验的多糖得率为3.134%，与预测值接近，验证了模型的正确性。与热水提取法相比，超声循环提取法具有时间短、得率高、低能耗的优点。超声强化提取对多糖的分子量没有影响，而热水提取的芦笋多糖有明显的降解，表现为其电泳迁移率较大。对芦笋多糖进行了脱色、脱蛋白、分级沉淀等处理，测定了芦笋多糖分子量，分析了芦笋多糖的组分及理化特性。芦笋粗多糖经纯化，纯度提高到72%。采用40%、60%、80%乙醇沉淀所得的芦笋多糖，分子量分别为57539、52296和51061。芦笋多糖由葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、果糖、鼠李糖（2.18: 1.86: 1.50: 0.98: 1.53）组成。芦笋多糖的红外图谱显示的吸收峰均为多糖特有的吸收峰，芦笋多糖具有β-型糖苷键。芦笋多糖对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基以及超氧阴离子自由基( )都有一定的清除效果，其中40%乙醇沉淀得到的芦笋多糖对羟基自由基的消除作用接近Vc。芦笋多糖对Hela和BEL-7404细胞有显著的抑制作用，并且具有明显的剂量依赖性。1%浓度的芦笋粗多糖，72小时对Hela细胞和BEL-7404细胞的抑制率分别为54.64%、57.31%。初步纯化后的芦笋多糖对Hela细胞和BEL-7404细胞的抑制率分别为67.86%，57.73%，其中40%乙醇沉淀的芦笋多糖对Hela细胞的抑制率达83.96%，60%乙醇沉淀的芦笋多糖对BEL-7404细胞的抑制率达64.18%。因此，芦笋多糖可作为保健品及抗癌辅助药物的原料药来开发。 3、芦笋提取皂苷产生的残渣固态发酵Bt生物农药的最佳条件为：发酵温度30℃，湿度85%，培养基初始pH值7.4，通气量1～1.2 vvm，干发酵产物芽孢数为1.55×1011 cfu/gDW，蛋白含量为8.83 mg/gDW。鲜芦笋下脚料在10 L发酵罐液态发酵Bt生物农药的最优条件为初始pH 8.4，固液比为1:2.2，接种量7%，装液量7 L，发酵时间为50 h，发酵液最高芽孢数达到1.5×109 cfu/mL，最高蛋白质浓度0.69 mg/mL

肉苁蓉超声真空干燥的动力学研究

以新鲜肉苁蓉为原料,研究了20、30、40℃条件下肉苁蓉的超声真空干燥特性。选取了6种经典薄层干燥模型并进行非线性拟合。结果表明,肉苁蓉的超声真空干燥过程一直处于降速干燥阶段,无明显恒速干燥阶段。在20℃~40℃内,温度升高可提高肉苁蓉的超声真空干燥速率,提高内部有效水分扩散系数,水分有效扩散系数在2.66&times;10-10 m2/s~3.65&times;10-10m2/s;Midilli et al.模型(R2&gt;0.999)能较好地描述肉苁蓉超声真空干燥过程水分的变化规律,该模型为肉苁蓉超声真空干燥工艺的优化提供了理论基础。</p

超声波应用于食品干燥的研究进展

超声波干燥具有降低干燥温度,缩短干燥总时间,减少干制品质量损失的优点,可与其他干燥方式耦合,用于不同种类食品的干燥。就超声波干燥与其他干燥技术结合应用于食品工业做一综述,探究超声波对食品干燥时间及干燥品质的影响。</p

超声强化法提取蓝莓多糖的工艺研究

以蓝莓为材料,利用超声强化法提取蓝莓多糖。在单因素试验基础上,利用响应面法考察超声功率、提取时间、液固比对蓝莓多糖提取率的影响。得到最优提取工艺条件为：超声功率600 W,超声时间87 min,液固比49 mg/g,在此条件下,蓝莓多糖提取率理论值为4.93%,验证实测值为4.91%,与预测值接近,说明该试验方案可行

超声强化法提取蓝莓多糖的工艺研究

以蓝莓为材料,利用超声强化法提取蓝莓多糖。在单因素试验基础上,利用响应面法考察超声功率、提取时间、液固比对蓝莓多糖提取率的影响。得到最优提取工艺条件为：超声功率600 W,超声时间87 min,液固比49 mg/g,在此条件下,蓝莓多糖提取率理论值为4.93%,验证实测值为4.91%,与预测值接近,说明该试验方案可行

芦笋叶绿素铜钠盐制备过程中提取工艺的研究

采用超声法对芦笋叶进行了叶绿素的提取并合成了叶绿素铜钠盐。结果表明,芦笋叶绿素的最佳提取工艺条件为：提取溶剂为80%丙酮与95%乙醇体积比1：4,提取时间60min,提取温度70℃,液固比10：1,超声功率160W。提取的叶绿素溶液,经过皂化、酸化、铜代、成盐等步骤制成叶绿素铜钠盐,得率（以鲜叶计）为0.18%,产品质量符合国家标准GB3262-1982

芦笋叶绿素铜钠盐制备过程中提取工艺的研究

采用超声法对芦笋叶进行了叶绿素的提取并合成了叶绿素铜钠盐。结果表明,芦笋叶绿素的最佳提取工艺条件为：提取溶剂为80%丙酮与95%乙醇体积比1：4,提取时间60min,提取温度70℃,液固比10：1,超声功率160W。提取的叶绿素溶液,经过皂化、酸化、铜代、成盐等步骤制成叶绿素铜钠盐,得率（以鲜叶计）为0.18%,产品质量符合国家标准GB3262-1982

超声强化法提取蓝莓多糖的工艺研究

以蓝莓为材料,利用超声强化法提取蓝莓多糖。在单因素试验基础上,利用响应面法考察超声功率、提取时间、液固比对蓝莓多糖提取率的影响。得到最优提取工艺条件为：超声功率600 W,超声时间87 min,液固比49 mg/g,在此条件下,蓝莓多糖提取率理论值为4.93%,验证实测值为4.91%,与预测值接近,说明该试验方案可行

玛咖淫羊藿复方对缓解小鼠体力疲劳的作用研究

目的:研究玛咖淫羊藿复方对缓解小鼠体力疲劳的作用。方法:选用昆明种雄性小鼠200只,分组后按照低、中、高剂量分别给予玛咖淫羊藿复方产品、玛咖提取物、淫羊藿提取物,阴性对照组给予等量纯水,连续灌胃30 d后,测定各组小鼠负重游泳时间、血清尿素含量、肝糖原含量和血乳酸面积。结果:与阴性对照组比较,复方组在延长小鼠负重游泳时间,加速小鼠血清尿素清除,促进肝糖原储备量,减少运动后血乳酸增加方面作用显著,且作用优于单一提取物组。结论:玛咖淫羊藿复方具有缓解小鼠体力疲劳的作用且优于单一提取物