地磷莫斯的免疫抑制效果及机制的研究

目的临床上已应用多种免疫抑制剂,但是因为其价格昂贵,毒副作用强等等原因阻碍了其在临床的应用,雷帕霉素在临床上的应用已得到公认。但是由于雷帕霉素的水溶性小,半衰期长,水溶性较弱,化学稳定性较弱,限制了其在临床的应用。雷帕霉素的的衍生物地磷莫斯具有高溶解性、高稳定性、高生物利用度等优点。地磷莫斯的诸多优点已得到FDA以快速通道方式批准,应用于软组织与骨肉瘤的治疗。关于治疗血液癌(淋巴瘤和白血病)的二期临床试验已经完成,子宫内膜癌的二期临床试验也已展开。为了研究其在免疫抑制方面的作用机制,我们进行一系列体外实验,观察其免疫抑制效果,研究其免疫抑制机制,为地磷莫斯进一步进行体内试验打下基础,为其能顺利扩大临床应用做好铺垫。方法我们首先采用淋巴细胞转化实验来观察地磷莫斯对淋巴细胞与T细胞增殖的抑制作用,确定地磷莫斯的免疫抑制作用及其免疫抑制发挥的浓度,再用凋亡实验、克隆无能实验等探讨地磷莫斯的免疫抑制作用机制。结果我们运用淋巴细胞转化实验确定了地磷莫斯可以抑制淋巴细胞的增殖;我们用流式检测术,发现地磷莫斯不会引起淋巴细胞/T细胞的凋亡;克隆无能实验证明了克隆无能是地磷莫斯诱导免疫耐受的机制之一。结论通过本课题的研究,我们首次证实了地磷莫斯在体外通过抑制淋巴细胞/T细胞增殖,诱导克隆无能等方法发挥免疫抑制作用,为地磷莫斯应用于器官移植领域奠定了基础,促进了地磷莫斯从基础研究向临床器官移植的转化

雷帕霉素衍生物对胰岛的毒性研究

目的探讨雷帕霉素及其衍生物依维莫司、地磷莫司、佐他莫司对胰岛的毒性作用。方法采用小鼠胰岛素瘤细胞(MIN6)作为体外研究胰岛细胞的对象,分别在含有依维莫司、地磷莫司、佐他莫司的培养基中孵育MIN6细胞48小时,通过Brdu检测细胞增殖、CCK8检测细胞活力、PI检测细胞周期、流式细胞术检测细胞凋亡以及ELISA检测细胞分泌胰岛素功能,观察3种雷帕霉素衍生物对MIN6细胞的影响。结果我们发现3种雷帕霉素衍生物均会对MIN6细胞的增殖和活力产生抑制作用。在细胞周期和凋亡实验中,与阴性对照组比较,3种衍生物对MIN6细胞的影响呈现抑制G1期向S期转变的趋势和促进细胞凋亡的趋势,但差异没有统计学意义。另外,3种衍生物与雷帕霉素一样,均可减少MIN6细胞分泌胰岛素,差异具有统计学意义。结论雷帕霉素及其衍生物依维莫司、地磷莫司、佐他莫司均对胰岛产生一定毒性。国家自然科学基金项目(31271038,81302546

Promotion of proliferation of luminal B breast cancer cells by mesenchymal stem cells and its underlying molecular mechanisms

目的分析人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对Luminal B型乳腺癌细胞生长增殖的影响,并初步探讨其可能的分子机理。方法绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶共表达慢病毒感染人Luminal B型乳腺癌细胞BT474,并经嘌呤霉素筛选两周后,于荧光显微镜下观察GFP的表达情况,IVIS Kinetic成像系统拍照以观察和记录慢病毒感染后BT474细胞荧光素酶的表达情况;荧光显微镜下直接观察,结合MTS实验分析hUC-MSCs共培养或其浓缩上清处理对GFP和荧光素酶共表达BT474细胞生长增殖的影响;Western blot法检测hUC-MSCs浓缩上清处理对BT474细胞Akt和MAPK信号通路激活情况以及下游细胞周期调控蛋白Cyclin D1表达的影响;常规RT-PCR法检测hUC-MSCs中NRG-1、NRG-2、IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ和EGF等配体的表达。荧光素酶表达强度与细胞数量的相关性经由Excel软件行统计学分析,MTS实验数据则经由SPSS13.0统计软件行统计学分析。结果荧光显微镜和IVIS Kinetic成像系统的观察结果分别证实,GFP和荧光素酶经慢病毒载体系统的介导可在BT474细胞中成功地共表达,且荧光素酶的表达强度与细胞数量呈直线相关。MSCs共培养或其浓缩上清处理均可显著促进Luminal B型乳腺癌细胞BT474的生长增殖,其细胞存活比例分别为各自对照组的148.06%(P<0.005)和147.99%(P<0.001);MSCs浓缩上清处理同时激活BT474细胞内Akt和MAPK信号通路,并上调细胞周期调控蛋白Cyclin D1表达。此外,RT-PCR结果显示,hUC-MSCs中NRG-1和EGF的mRNAs水平呈高表达,而NRG-2、IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ等配体的mRNAs表达也可见。结论 MSCs可通过表达并分泌NRG-1等配体,从而激活Luminal B型乳腺癌细胞BT474的下游Akt和MAPK信号转导通路以上调细胞周期调控蛋白Cyclin D1的表达,进而促进其生长增殖。Objective To investigate the effect of human umbilical cord mesenchymal stem cells(hUC-MSCs) on proliferation of luminal B breast cancer cells and its underlying molecular mechanisms. Methods Human luminal B breast cancer cells BT474 were infected with GFP and luciferase co-expressing lentiviruses and then subjected for selection with Puromycin for 2 weeks. The expression of GFP and luciferase was detected by fluorescent microscopy and IVIS Kinetic image system, respectively. The effect of coculture or treatment with conditioned medium of hUCMSCs on proliferation of BT474 was analyzed with MTS assay. Western blot was carried out to detect the effect of treatment with conditioned medium of hUC-MSCs on the activation of both Akt and MAPK signalings in BT474, as well as the expression of downstream cell cycle regulator Cyclin D1. Regular RT-PCR was applied to analyze the mRNAs expression of ligands such as NRG-1, NRG-2, IGF-Ⅰ, IGF-Ⅱ, and EGF in hUC-MSCs. The correlation between relative luciferase activity and cell number was analyzed with Excel software, while MTS assay data was statistically analyzed with SPSS 13.0 software. Results The co-expression of GFP and luciferase in BT474 via lentiviral expression system was visualized by fluorescent microscopy and IVIS Kinetic image system. The linear correlation between relative luciferase activity and cell number was determined by curve fitting analysis. Coculture or treatment with conditioned medium of hUC-MSC significantly promoted the proliferation of BT474, with survival rates being 148.06 %(P < 0.005)and 147.99 %(P < 0.001)of control, respectively. In addition, treatment with conditioned medium of hUC-MSC was shown to induce activation of both Akt and MAPK signalings, which further upregulated the expression of Cyclin D1. Moreover, high mRNAs expression levels of both NRG-1 and EGF, as well as moderate mRNAs expression levels NRG-2, IGF-Ⅰ, and IGF-Ⅱ were showed by RT-PCR. Conclusion Our results here demonstrated that MSCs may promote the proliferation of luminal B breast cancer cells through paracrine of ligands such as NRG-1, which in turn results in the activation of both Akt and MAPK signalings and upregulation of the expression of Cyclin D1.国家自然科学基金面上项目(81272922);; 福建省自然科学基金面上项目(2016J01577);; 福州总医院院内课题国际合作研究专项(2015G01

三峡水库香溪河库湾夏季藻类水华的时空动态及其影响因素

2008年6&mdash;8月,三峡水库香溪河库湾相继暴发蓝藻和绿藻水华.依据香溪河库湾夏季的每周监测,对研究区2次水华分别进行聚类和判别分析,研究了2次水华的时空动态及其影响因素.结果表明:研究区2次水华过程均可划分为无水华组、过渡组和水华组;2次水华的暴发对可溶性硅(DSi)、硝态氮与亚硝态氮(NO3--N+NO2--N)和磷酸盐(PO43--P)3种营养盐的吸收程度不同;蓝藻水华暴发期间的DSi、总氮/总磷(TN/TP)、DSi/TN和DSi/TP值均低于绿藻水华;判别蓝藻水华暴发的参数为叶绿素a(Chla)

Reliability and Validity of Social Emotional Health Survey-Elementary in Chinese Children

目的：考察&ldquo;社会情绪健康调查&mdash;初级版&rdquo;在我国学龄儿童中的试用情况及其因素结构与信效度。方法：汉译该问卷,选取河北省1144名四至六年级小学生施测,以学校态度、学业成绩、青少年心理健康素质调查表-适应分量表、同伴提名和友谊质量问卷作为效标工具;间隔2周后,抽取4个班127名小学生重测。结果：探索性因素分析表明,该问卷包括感激、热情、乐观、坚持四个因素,累计解释55.61%方差变异量;验证性因素分析结果,RMESA=0.06,GFI=0.92,CFI=0.92,TLI=0.91,IFI=0.92;多组验证性因素分析表明,在部分条目测量等同的情况下,模型在男女生样本中具有不变性;量表的内部一致性系数与重测信度分别为0.91和0.75,各分量表的内部一致性系数为0.78～0.81,重测信度为0.71～0.81;除热情与学业成绩、乐观与学校回避相关不具有统计学意义外,其它各维度得分及总量表分与学校喜欢、学校回避、学业成绩、学习适应、人际适应、同伴接纳、信任与支持、陪伴与娱乐、肯定价值、亲密袒露与交流均显著相关。结论：社会情绪健康调查&mdash;初级版信效度良好,可以在中国文化背景下应用。</p

三峡水库香溪河库湾蓝藻水华生消过程初步研究

2008年6月三峡水库部分支流库湾第一次暴发大面积蓝藻水华，表明水库支流库湾生态环境已经恶化。以香溪河库湾为例，于2008年6月6日～7月25日，每间隔7天在库湾14个采样点采集水样一次，对蓝藻水华进行监测，研究蓝藻水华生消过程及其影响因素。结果表明，这次水华自2008年6月9日暴发，6月20日达到顶峰，7月11日结束，持续大约1个月；综合营养状态指数（TSI）与叶绿素a（Chl．α）所指示的水体营养状态，将同时满足TSI〉60与Chl．α〉20μg／L两个条件的区域边界视为蓝藻水华暴发的临界状态；整个水华暴发过程大致可分为两个阶段：6月9—25日和7月3—11日。水华暴发区域主要集中在距河口20～30km处相对稳定的库湾中上游区域，适宜的水动力条件是水华暴发的必要条件。此次水华的消落过程主要受到磷含量降低的限制以及氮磷比的影响，当氮磷比显著升高时，蓝藻的生长受到抑制。总氮总磷比在10—25之间比较适宜蓝藻的大量生长，因此限制磷元素的入库通量对于预防和控制库湾水华的暴发具有重要意义

三峡水库香溪河库湾蓝藻水华生消过程初步研究

2008年6月三峡水库部分支流库湾第一次暴发大面积蓝藻水华,表明水库支流库湾生态环境已经恶化。以香溪河库湾为例,于2008年6月6日～7月25日,每间隔7天在库湾14个采样点采集水样一次,对蓝藻水华进行监测,研究蓝藻水华生消过程及其影响因素。结果表明,这次水华自2008年6月9日暴发,6月20日达到顶峰,7月11日结束,持续大约1个月;综合营养状态指数(TSI)与叶绿素a(Chl.a)所指示的水体营养状态,将同时满足TSI&gt;60与Chl.a&gt;20&mu;g/L两个条件的区域边界视为蓝藻水华暴发的临界状态;整个

Response of growth and root biomass of Phragmites australis to water level and salt stress at different growth stages in the Yellow River Delta

Soil water level and salinity are the major factors affecting plant growth in the coastal wetlands. It is important to understand the adaptation mechanism of wetland plants to the interactive effect of water level and salinity for the protection and restoration of the coastal wetland in the Yellow River Delta. We examined the responses of plant growth and the characteristics of root biomass of Phragmites australis to the interaction of different water levels (CK, -30 cm, 0 cm, 30 cm), salt concentrations (0%, 1.5% NaCl) and growth stages (germination stage, seedling stage). The results showed that water level and salinity significantly interacted to affect root biomass. Compared with the CK, root biomass under the combination of 1.5% NaCl and 30 cm water level was significantly lower, but no significant differences were observed under the combination of 0% NaCl and 30 cm water level. This result indicated that soil salinity could change the tolerance threshold of P. australis enduring water stress. With the exception of plant height, ecological traits of P. australis at 0 cm water level showed high adaptation. However, 30 cm water table depth had inhibitory effects on some ecological traits of P. australis. The total root biomass of soil surface layer was not sensitive to water level and salinity gradients. With the increasing soil depth, water level and salinity significantly affected the accumulation of root biomass. The highest fibrous root biomass was （6.76±2.19） g per plant under the condition of 0 cm water level, 0% NaCl treated at seedling stage. The lowest fibrous root biomass was （1.09±0.68） g per plant under the condition of 30 cm water table depth, 1.5% NaCl treated at germination stage

Effect of Flowrate of Pore Water on the Transport of Colloid in Saturated Porous Media

采用室内石英砂柱出流实验和数学模型,研究了流速对自然土壤胶体、蒙脱石胶体和腐殖酸钠胶体在饱和多孔介质中运移的影响。结果表明:孔隙水流速影响着胶体在多孔介质中的运移过程,流速的提高可加速土壤胶体的出流过程,减小蒙脱石胶体和腐殖酸钠胶体的沉积率。胶体的运移过程除受孔隙水流速的影响外,胶体特性的不同亦决定着胶体运移过程的差异,由于胶体表面性质不同,与介质之间的作用力不同,决定了胶体运移过程中的沉积和释放

Mechanism of Bmall Involved in Irritable Bowel Syndrome via TPHl一5一HT Signaling Pathway in Enterochromaffin

背景：肠易激综合征（IBS）的发生与生物钟节律紊乱有关，IBS症状常具有昼夜波动等节律紊乱特征。肠嗜铬细胞（EC细胞）及其色氨酸羟化酶-1(TPH1)-5-羟色胺（5-HT）信号通路是目前公认的参与IBS发生的关键病理生理学机制。目的：探讨生物钟核心基因Bmal1是否通过调控EC细胞及其TPH1-5-HT信号通路参与IBS的发生。方法：采用IBS模型和对照Sprague-Dawley大鼠以及Bmal1肠道特异性敲除（Bmal1~(△IEC)）和野生型（WT）C57BL/6小鼠进行研究。以连续单一刺激方法建立IBS模型。以免疫荧光染色检测结肠Bmal1、EC细胞嗜铬粒蛋白A(Cg A)、TPH1和5-HT表达。结果：大鼠实验：Bmal1主要表达于结肠上皮细胞，在EC细胞中亦有表达。与对照组相比，授时因子时间点（ZT）ZT8:00和ZT24:00时，IBS模型组结肠Bmal1表达明显增高，且模型组ZT8:00的Bmal1表达明显高于ZT16:00和ZT24:00，差异均有统计学意义（P均&lt;0.05）。小鼠实验：与WT组相比，Bmal1~(△IEC)组结肠EC细胞数量明显减少，TPH1、5-HT表达明显降低，差异均有统计学意义（P均&lt;0.05）。结论：IBS模型大鼠结肠生物钟基因Bmal1的表达存在昼夜异常波动，Bmal1表达的昼夜紊乱可通过EC细胞及其TPH1-5-HT信号通路参与IBS的发生。</p