Evaluation of The Effectiveness of Lotus Seed Based Matrix on Skin Aging Resistance

指導教授 王麗芬、林雅菁本研究以蓮子為基質之天然組合物，對於皮膚的安全性及有效性影響進行評估。此天然組合物顯示自由基清除率可達76.98±1.52%，還原力可達145.94±69.47%，比抗氧化劑BHA高出45%以上，證明本天然植物萃取物有極佳的抗老化功能，保水率為50.56±4.21%。 此天然組合物亦經檢驗農藥殘留311項、重金屬、微生物、鄰苯二酸酯類以及化學物質等，無任何農藥、重金屬以及化學物質殘留。實驗測試結果顯示出本天然組合物的安全性與有效性

三明治教學校外實習專題實習公司： 家福股份有限公司

[[abstract]]1987年家樂福在台灣成立台灣家福股份有限公司，目前已經是全台灣最大及分店數最多的連鎖量販，也是首家在台灣完全展店的量販（台灣除了新竹市、基隆市以及離島外，每一縣市皆有家樂福分店）。 截至2014年4月23日，全台灣已經有70家家樂福分店。 　　真正進入職場後，才發現我不能再懈怠下去，在學校只要有犯錯，老師、同學都能原諒，但在職場上，必須小心翼翼不得再犯同樣一次錯，對主管或顧客來說「我不知道」更成了最忌諱的一句話，有些事別人不會主動教你，所以自己必須懂得去偷學，並積極了解各項公文及活動，對自己也對這份工作負責任。 在這一年的實習過程中，從枯燥乏味的收銀人員轉至有業績壓力的推卡員，再調進常常要處裡客人大小事的服務中心人員，這當中接觸了很多不同的工作內容以及服務上加強以及需改善的地方，也讓我對這份工作更有信心和責任

[[alternative]]平均數-變異數CAPM與平均數-半變異數CAPM在臺灣股市之實証研究

碩士[[abstract]]自台灣股市發展至今，歷經了暴漲暴跌與早期投資人理財金融知識不足，呈現市場不效率，本研究欲以兩階段迴歸方法(two-stage regression)來驗證Sharpe(1964)與Lintner(1965)發展而成的「平均數—變異數」資本資產訂價模型，以及Hogan and Warren(1974)研究出的「平均數—半變異數」資本資產訂價模型。以觀察台灣投資人對於風險與報酬之間的關係之了解，與台灣股市對於兩種模型的適用性。 本研究的實證有以下結論： (1) 在傳統的「平均數-變異數」資本資產訂價模型中，截距項大致與理論值不同，即 與研究期間的無風險利率大多呈顯著不同，而在「平均數-半變異數」資本資產訂價模型中，在不同區間， 也大多顯著與理論值不同。 (2) 此外，在「平均數-變異數」資本資產訂價模型中，模型的解釋能力偏低，僅達16.16%~18.68%，顯示除了系統風險以外，尚有其它變數可用以解釋臺灣股市的報酬率；而以半變異數為衡量系統風險的方法時，其模型的解釋能力不增反減，因此可以推論，在本研究期間兩種模型均不適合於臺灣股市。[[abstract]]Since the stock market was built in 1960’s, Taiwan investors have experienced ups and downs in this market. With the empirical researches done by people of former times, we know that Taiwan market is not efficient. There are many individual reasons for market efficiency in Taiwan, such as price limits, exchange cost, and the level of risk recognition for investors etc. This paper would like to observe if investors are more knowledgeable about the relationship between risk and return than those twenty year ago. Through the two-stage regression of E-V CAPM (Mean- Variance CAPM) and E-S CAPM (Mean- Semivarance CAPM), we anticipate seeing the conformity of these two models. The empirical results are as follows： (1) In both models, the intercepts of the second-pass regressions significantly differ from the theoretical value; that is,the intercepts is divergent from our risk-free rate. (2) Moreover, the determination coefficients of the two models are no more than 18%, which means there must be other variables that can explain security prices in Taiwan market.[[tableofcontents]]目錄 I 圖表目錄 II 第一章 緒論 1 第一節 研究動機與目的 1 第二節 研究範圍與對象 3 第三節 研究架構與流程 4 第二章 文獻回顧 6 第一節 資本資產定價理論相關文獻 6 第二節 資本資產定價模型之相關國內外實證 10 第三節 「平均數—半變異數」資本資產訂價理論與實證 16 第三章 研究方法 23 第一節 資料來源與研究期間 23 第二節 迴歸分析 25 第三節 統計檢定 31 第四章 實證結果分析 32 第一節 「平均數—變異數」CAPM模型實證結果 32 第二節 「平均數—半變異數」CAPM模型實證結果 35 第五章 結論與建議 39 第一節 研究結論 39 第二節 後續研究建議 41 參考文獻 42 附錄 45 圖 表 目 錄 圖1-1 本文研究架構與流程圖 4 圖2-1 證券市場線(SML) 9 圖2-2 實證與理論的E(Ri)/βi關係 20 圖3-1 投資組合形成與兩階段迴歸研究方法流程 28 表3-1. 研究區間劃分說明 24 表4-1. 民國83年至93年E-V CAPM檢定結果 32 表4-2. 二分之一區間 E-V CAPM檢定結果 33 表4-3. 四分之一區間 E-V CAPM檢定結果 34 表4-4. 民國83年至93年E-S CAPM檢定結果 36 表4-5. 二分之一區間 E-S CAPM檢定結果 37 表4-6. 四分之一區間 E-S CAPM檢定結果 37 表4-7. 兩模型截距項比較與市場報酬率分配 38[[note]]學號: 692491185, 學年度: 9

How U.S. perceive a rising China:1992~2009

中國的國力及影響力在本世紀以來顯著地上升，使得美中關係成為國際事務中最重要的議題。本研究試圖從決策層次的角度來檢視美中關係，透過對一系列意見調查數據的分析及歸納，分別描繪出「美國公眾」及「美國菁英」兩個團體對中國崛起的認知樣貌，並且說明此種認知之內涵與意義。 本研究發現，美國公眾與美國菁英對於中國崛起的認知皆帶有濃厚的務實主義（pragmatism）色彩：他們雖然對美中之間日益接近的經濟力量、中國的軍事發展及以人權狀況感到憂慮，卻同時也認知到中國日益高漲的國際影響力及其所帶來的經濟利益對美國的重要性，因此支持政府與中國進行經濟上的交往，並在能源及亞太安全等議題上合作，而非與之正面衝突。而這樣的務實看法形塑了美國的中國政策，鼓勵了中國在國際體系中的制度性崛起，將可能的衝突來源轉化為兩國間之共同利益，以降低中國的威脅性。值得注意的是，由於美國公眾與美國菁英對外交事務的思考有著層次之別，使得他們在對中國的貿易政策上抱持差異化的觀點；雖然公眾與菁英皆將貿易視為美中之間最大的共同利益，贊同市場開放，但是前者對開放所造成的工作外移感到威脅，在經濟環境惡化時，容易將這樣的認知轉化為對中國的負面觀感，然而，這樣的情況卻容易為後者所忽略。The power and influence of China have been rising significantly in this era, and made U.S.-China relation the most important issue among international affairs. This study tried to watch the relationship between U.S.-China from decision-making level, drawing the pattern of perception of U.S. public and elite on a rising China separately through summarizing, reasoning and analyzing series of survey of public and elite opinion. This study found that U.S. public and elite both hold a pragmatic perception toward a rising China. Though these two groups feel worried about the narrowing economic strength between U.S. and China, and the development of Chinese military, they also perceive the rising influence of China and the importance of huge economic interest that it brings. Therefore, they both support the government to engage and cooperate with China on trade, energy and security of Asia-Pacific region issues instead of rigid confrontation, which directly formed the China Policy of U.S., encouraged China to develop institutionally in international system. In addition, U.S. public and elite think differently about the trade policy to China due to their basic belief of foreign affairs: The former particularly feels threatened by outsourcing brought by the open market, and this kind of feeling will get stronger when the economy goes down, which easily ignored by the latter

悲憫與救贖——嚴歌苓小說之研究

[[abstract]]嚴歌苓作為北美華文文學界最細膩的女作家，自在遊走於多樣書寫體裁，成果豐碩、質量俱佳外，其雅俗共賞的敘事魅力，更廣受學術界的肯定與矚目。筆者以「悲憫」為題，尋求嚴歌苓悲憫意識的成因，以及作家在悲憫情懷下所呈現的關注與救贖。 本論文藉由回溯嚴歌苓的生平事蹟，探討其生命歷程與創作主題之對應；再經由視角、情節、技巧、文字等面向，探討作家獨特的敘事美學。之後回歸文本，探討嚴歌苓在悲憫情懷下所關注的生命苦難，並思考悲劇所能帶來的美感經驗與生命意義。最後提舉純善寬容、死亡淨化、執著信念等三種方式作為嚴歌苓救贖苦難的途徑，強調作家生命哲學、悲憫意識的遞嬗圓融。文末總論嚴歌苓的創作歷程，並述及作家的書寫定位與未來研究展望。

[[alternative]]The correlation between second language anxiety and autonomy in language learning : case study performed and surveyed from students of the Japanese Department in Tamkang University

碩士[[abstract]]本論文的目的在於探討日語學習者的自律性與第二語言焦慮之間的相關為何，首先設定「越是自律性高的日語學習者，越不易感受到第二語言焦慮，相對地自律性較低的日語學習者，則較容易感受到第二語言焦慮。」此一假說，之後再採用混合研究法來解析自律性與第二語言焦慮之間的關係。 首先在質性研究中，為了查明影響日語學習者自律性的要素為何，以淡江大學日本語文學系4年級的8位日語學習者做為調查對象，並進行了半結構式訪談。之後將訪談記錄轉換為逐字稿，再使用紮根理論研究法進行資料分析。考察結果發現，可從「提高自律性要素」及「降低自律性要素」兩個視點來進行探討，並且得知總共有8個要素會影響日語學習者的自律性高低。透過以上的分析結果，可以掌握影響日語學習者自律性的構成要素。此外，使用相同地資料針對通過日語能力測驗N1的學習者與未通過學習者之間的差異為何也進行了比較分析。 其次在量化研究中，區分成「自律性調查」及「第二語言焦慮調查」後，著手展開了問卷設計。而問卷題目的設計除了質性研究訪談的調查結果外，還各自參考了3份相關文獻的問卷調查表，製作成題目合計45題的問卷後，同樣以淡江大學日本語文學系4年級的日語學習者139人為對象，實施了本研究的問卷調查。量化調查所得到的結果，再由各個角度進行統計分析後，查明了日語學習者的自律性與第二語言焦慮之間的關係以外，也驗證了本研究所設定的假說。[[abstract]]Basing on the hypothesis of “Japanese learners with higher autonomy tend to have less second language anxiety in comparison to those with less autonomy,” this research was carried out through Mixed Methods to analyze the correlation between Japanese learners’ autonomy and second language anxiety. During the qualitative research, in order to pinpoint the key factors influencing learners’ autonomy, semi-structured interviews wereconducted on 8 senior students from Japanese Literature major. Interview records were converted into written documents then analyzed using Grounded Theory Approach. As result, a total of 8 influential factors were drawn out and could be probed with opposite viewpoints such as “autonomy enhancement” and “autonomy diminishment.” Moreover, same interview materials were also used on those Japanese learners who have passed the Japanese-Language Proficiency Test N1 and those who failed in comparison. As for quantitative research, after it was differentiated into “autonomy research” and “second language anxiety research,” a survey was performed. The survey was designed based on previous qualitative research and referenced from 3 relative survey documents to originate with 45 survey questions; A total of 139 senior Japanese Literature students participated in the survey. Resulting statistics from the survey was then analyzed from all angles to determine the correlation between learners’ autonomy and second language anxiety, proofing the prior hypothesis set for this research.[[abstract]]本研究は、まず「自律性が高い学習者ほど第二言語不安が下がり、その反面、自律性が低ければ第二言語不安は高くなる。」と仮定し、混合研究法を用い、日本語学習者の自律性と第二言語不安との関係を解明した。 まず、自律性に影響を与える要素を明らかにするために、日本語学科4年次に在籍する8人の学習者を調査対象として半構造化インタビューを行い、文字化したデータをグラウンデッド・セオリー・アプローチの手法を用いて分析した。その結果、日本語学習者の自律性は、「自律性を高める要素」・「自律性を低める要素」に分けることができ、合計8つのカテゴリーが見出された。分析した結果、自律性に影響を与える構成要素が把握できた。さらに、N1合格者とN1不合格者のデータを用いてどのような差異があるのかについても比較した。 アンケート調査は、自律性調査と第二言語不安調査に分けて行った。質問項目はインタビューの分析結果以外に、それぞれ3つの先行研究の調査票を参考にしながら、合計45問の質問項目を設定し、アンケートを作成した。その後、同じく日本語学科4年次に在籍する学習者139人を対象に、アンケート調査を実施した。得られた結果を様々な視点から統計処理し、本研究の主題となった学習者の自律性と第二言語不安との関係について究明し、仮説を検証した。[[tableofcontents]]目次 第1章　研究概要 1 1.1　研究動機 1 1.2　本研究の仮説 3 1.3　研究対象と方法 5 1.4　研究手順 6 1.5　研究の概観と論文の構成 7 第2章　先行研究の概観 9 2.1　本研究における自律性 9 2.2　自律性に関する研究 10 2.2.1　自己調整学習理論 10 2.2.2　自己調整学習のプロセス 11 2.2.3　初歩と上達した自己調整学習者の差異 14 2.3　言語学習における自律性が重要視されてきた理由 16 2.3.1　言語教育への取り込み 16 2.4　本研究の仮説に関する研究 18 2.4.1　自律性と内発的動機づけとの関係 18 2.4.2　自律性と自己効力感との関係 20 2.4.3　達成動機と自己効力感との関係 22 2.4.4　自己効力感と第二言語不安との関係 24 2.4.5　第二言語不安と達成動機との関係 25 2.5　本研究における第二言語不安 27 2.6　第二言語不安に関する研究 28 2.6.1　第二言語不安の概念 28 2.6.1.1　認知的妨害作用の観点 28 2.6.1.2　状況と特定的不安の観点 30 2.6.1.3　対人不安の観点 31 第3章　自律性に影響を及ぼす要素（調査1）33 3.1　調査の目的 33 3.2　調査について 33 3.2.1　調査対象 33 3.2.2　調査時期と方法 34 3.2.3　調査の質問項目 35 3.2.4　データの分析方法と手順 36 3.3　分析と考察 38 3.3.1　自律性を高める要素 39 3.3.2　自律性を低める要素 45 3.3.3　データの比較 50 3.3.3.1　第二言語不安感情に対する自己評価 50 3.3.3.2　カテゴリーによる比較 52 3.3.4　本調査のストーリーライン 56 3.4　まとめ 60 第4章　自律性と第二言語不安との関係（調査2）63 4.1　調査の目的 63 4.2　調査について 63 4.2.1　調査方法と対象 63 4.2.2　アンケート作成 64 4.2.3　分析データ 67 4.2.4　データの分析方法と手順 67 4.3　分析と考察 68 4.3.1　調査回答者の内訳 68 4.3.2　尺度の作成 74 4.3.2.1　自律性の因子抽出 74 4.3.2.2　第二言語不安の因子抽出 76 4.3.3　各因子の関連 78 4.3.3.1　自律性因子間の関連 79 4.3.3.2　第二言語不安因子間の関連 79 4.3.4　項目別による比較分析 81 4.3.5　調査回答者のグループ分け 86 4.3.5.1　自律性因子による分類 86 4.3.5.2　第二言語不安因子による分類 89 4.3.6　自律性と第二言語不安との関連 91 4.3.6.1　自律性グループによる第二言語不安因子の特徴 91 4.3.6.2　自律性因子と第二言語不安因子との関係 95 4.4　まとめ 99 第5章　結論 102 引用・参考文献 109 付録1 113 付録2 114 表目次 表2-1　自己調整学習のサイクル段階と下位過程 13 表2-2　初歩と上達した自己調整学習者の下位過程の比較 14 表3-1　インフォーマント一覧 34 表3-2　質問項目一覧 35 表3-3　切片化の例 37 表3-4　カテゴリー生成の例 37 表3-5　切片数合計 38 表3-6　自律性を高める要素のカテゴリー一覧 39 表3-7　自律性を高める要素のプロパティとディメンション 40 表3-8　自律性を低める要素のカテゴリー一覧 46 表3-9　自律性を低める要素のプロパティとディメンション 47 表3-10　不安感情に対する自己評価 51 表3-11　カテゴリーによる比較一覧（自律性を高める要素）52 表3-12　カテゴリーによる比較一覧（自律性を低める要素）55 表4-1　自律性調査票の質問項目整理 64 表4-2　分析結果からの自律性に関する質問項目 65 表4-3　第二言語不安調査票の質問項目整理 66 表4-4　分析結果からの第二言語不安に関する質問項目 67 表4-5　性別による統計人数 69 表4-6　N1合否による統計人数 70 表4-7　留学経験による統計人数 71 表4-8　勉強時間数による統計人数 72 表4-9　日本語に触れる頻度による統計人数 73 表4-10　自律性の因子分析結果（プロマックス回転後の因子パターン）75 表4-11　第二言語不安の因子分析結果（プロマックス回転後の因子パターン）77 表4-12　自律性の因子間相関と平均、標準偏差 79 表4-13　第二言語不安の因子間相関と平均、標準偏差 80 表4-14　男女別の平均値とSDおよびt検定の結果 82 表4-15　留学経験別の平均値とSDおよびt検定の結果 83 表4-16　勉強時間別の平均値とSDおよび分散分析結果（自律性）84 表4-17　勉強時間別の平均値とSDおよび分散分析結果（第二言語不安）84 表4-18　触れる頻度別の平均値とSDおよび分散分析結果（自律性）85 表4-19　触れる頻度別の平均値とSDおよび分散分析結果（第二言語不安）86 表4-20　自律性グループの平均値 92 表4-21　自律性因子を中心に考察した重回帰分析結果 95 表4-22　第二言語不安因子を中心に考察した重回帰分析結果 98 図目次 図1-1　仮説としたモデル図 4 図1-2　研究手順 6 図1-3　論文構成 7 図2-1　自己調整学習サイクル 12 図2-2　自律的動機づけのプロセス 19 図2-3　自己効力感と自己調整学習方略との関係 21 図2-4　達成動機と自己効力感の関連図 23 図2-5　自己効力感と第二言語不安の関連図 25 図2-6　第二言語不安の概念図 28 図2-7　情意フィルターの作動 29 図3-1　各カテゴリーの関連図 57 図4-1　性別の割合 69 図4-2　N1合否別の割合 70 図4-3　留学経験別の割合 71 図4-4　勉強時間数別の割合 72 図4-5　日本語に触れる頻度別の割合 73 図4-6　3群の自律性得点 88 図4-7　3群の第二言語不安得点 90 図4-8　自律性タイプと四つの第二言語不安 92 図4-9　自律性因子を中心に考察したパス図 96 図4-10　第二言語不安因子を中心に考察したパス図 98[[note]]學號: 600100365, 學年度: 10

Printable High Robust Image Embedding Method

影像嵌入方法(image embedding method)主要以各種形式將一份重要資訊(a piece of critical information)嵌入於一原始影像(Host image)中，我們稱該份重要資訊(a piece of critical information)為重要資料(Critical data)，並稱此已嵌入重要資料後的Host image為Embedded image。在拍攝一張Embedded image時，常會因相機設定的解析度、相機放置之位置，以及相機鏡頭對焦至該Embedded image內之區域的不同等因素的影響，所攝取出的影像也會有天壤之別。傳統的影像隱藏方法通常都無法精確地從這些被產生的變異影像中，攫取出被嵌入其中的重要資料。本論文因此提出一可列印式高強韌性影像嵌入方法(Printable High Robust Image Embedding method, PHRIE method)。實驗結果顯示PHRIE methods能精確的攫取出被嵌入於上述變異影像之重要資料。The concept of data embedding is to embed a piece of critical information in a Host image. We call the critical information Critical data and the Host image after embedding the Critical data an embedded image. For taking photos from an embedded image, various images with very high distortion may be created since various resolutions of camera, different positions the camera located at, distinct regions the zoom focuses on may be employed. The traditional image hiding methods usually cannot precisely derive the Critical data from the created variation images. This paper hence proposes a printable high robust image embedding (PHRIE) method. The experimental results show that the PHRIE can precisely extract the Critical data from the variation image mentioned above第一章 緒論 1 1.1 研究背景與動機 1 1.2 研究目的 2 1.3 論文架構 3 第二章 相關研究 4 2.1 資訊隱藏簡介 4 2.1.1 浮水印的特性 5 2.1.2 浮水印的分類 6 2.1.3 人類的視覺系統特性 6 2.2 RSA加密法 7 2.3 影像尖峰訊號對雜訊比值(PSNR) 7 2.4 Otsu二值化 8 2.5 影像膨脹 9 第三章 可列印式高強韌性影像嵌入方法 11 3.1 資料隱藏程序 11 3.2 資料擷取程序 13 第四章 實驗結果 16 第五章 結論與未來展望 22 參考文獻 2

Determination of 17 illicit drugs in oral fluid using isotope dilution ultra-high performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry with three atmospheric pressure ionizations

The collection of oral fluid for drug testing is easy and non-invasive. This study developed a drug testing method using ultra-high performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS) in selected-reaction monitoring (SRM) mode. We tested the method on the analysis of four opiates and their metabolites, five amphetamines, flunitrazepam and its two metabolites, and cocaine and its four metabolites in oral fluid. 100-mu L samples of oral fluid were diluted with twice the amount of water then spiked with isotope-labeled internal standards. After the samples had undergone high-speed centrifugation for 20 min, we analyzed the supernatant. The recovery of the sample preparation ranged from 81 to 108%. We compared the performance of electrospray ionization (ESI), atmospheric pressure chemical ionization (APCI) and atmospheric pressure photoionization (APPI). The ion suppression of most analytes on ESI (28-78%) was lower than that of APCI and APPI. A post-column flow split (5:1) did not reduce the matrix effect on ESI. Direct APPI performed better than dopant-assisted APPI using toluene. ESI, APCI and APPI limits of quantitation mostly ranged from 0.11 to 1.9 ng/mL, 0.02 to 2.2 ng/mL and 0.02 to 2.1 ng/mL, respectively, but were much higher on amphetamine and ecgonine methyl ester ( about 2.7-4.7 ng/mL, 8.7-14 ng/mL, and 10-19 ng/mL, respectively). Most of the bias percentages (accuracy) and relative standard deviations (precision) on spiked samples were below 15%. This method greatly simplifies the process of sample preparation and shortens the chromatographic time to only 7.5 min per run and is able to detect analytes at sub-ppb levels

以電化學阻抗法檢測沙門氏菌之免標定式核酸感測器的研發

In Taiwan, Salmonella is one of common sitotoxism-inducing microbes, causing diseases such as septicemia and gastroenteritis. Therefore, it is a very important issue to quickly detect the existence of Salmonella. This study attempts to develop a chip-type nucleic acid sensor for the detection of Salmonella by using electrochemical impedence spectroscopy (EIS) and cyclic voltammetry (CV) to measure the variation of impedence and current when performing the DNA hybridization. However, the initial cleanness states of chip-type electrodes would affect results such as the sensing reproducibility and the probe-DNA modification. Therefore, three kinds of cleaning procedures including (1) acetone, (2) oxygen plasma, and (3) piranha and aqua regia are compared for the electrode cleanness. The results show that the treatment of soaking in piranha for 2 min and in aqua regia for 1 min gives the best cleanness for the electrodes which obtains the smallest electron-transfer resistance and the best reproducibility. In addition, the effect of structures and charges of different buffering molecules on the sensing characteristics was compared. The results reveal that use of TES buffer can obtain the largest response of electron-transfer resistance to the MUA-modified or dsDNA- hybridized electrode-solution interfaces. The linear range and the detection limit for Target-DNA measured in TES buffer was 10-10~10-15 M and 10-15 M, respectively, which is better than the linear range (10-10~10-13 M) and the detection limit (10-13 M) measured in PBS buffer. Moreover, this nucleic acid sensor using EIS measurements can identity the signal difference between the single basepair mismatch and the 40-mer target-DNA and the complete complementary hybridization. The miniaturzied nucleic acid chip is beneficial for the integration of micro-fluidic system and has the advantages of portability and mass production.沙門氏菌(Salmonella)為台灣常見導致食物性中毒病菌之一，易引發菌血症或急性腸胃炎，因此快速檢測出沙門氏菌是項重要議題。本研究利用電化學阻抗頻譜(electrochemical impedence spectroscopy, EIS)技術與循環伏安法(cyclic voltammetry, CV)量測DNA雜交前後電極介面電性響應的變化，開發一可檢測沙門氏菌特異性基因片斷的晶片式核酸感測晶片(chip)。 由於電極表面初始狀態的潔淨度，會影響電極的檢測再現性與DNA探針固定的結果，所以實驗初步先探討三種清潔方式(1) acetone, (2) oxygen plasma, (3) piranha /王水(aqua regia) 對電極表面清潔度的影響，結果顯示：piranha 2 min/aqua regia 1 min浸泡的清潔程序，可使電極表面具有最低的電子轉移阻抗與最佳的再現性。此外，也比較不同緩衝溶液分子的結構與電性對檢測特性的影響，結果顯示在相同MUA修飾或dsDNA雜交的介面，TES溶質分子可得最大的電子轉移阻抗量響應。在TES對target-DNA檢測的線性範圍為10-10~10-15 M，最低檢測極限可達10-15 M，皆較優於PBS中的線性範圍(10-10~10-13 M)與檢測極限值(10-13 M)。此外，此晶片藉由EIS量測可成功分辨出單鹼基配位錯誤和40 mer的target-DNA之檢測訊號與完全互補雜交後訊號間的差異。此微小化晶片的開發有利於微流體系統的整合並具有可攜式、大量生產等優勢。摘要 I Abstract II 目錄 IV 圖目錄 VII 表目錄 X 第一章 序論 1 1.1 前言 1 1.2 沙門氏桿桿菌 2 1.2.1 沙門氏桿菌簡介 2 1.2.2 沙門氏桿菌感染機制與臨床表現 4 1.2.3 沙門氏菌特異性探針 5 1.2.4 沙門氏桿菌檢測方式 5 1.3 核酸感測器發展 12 1.3.1 DNA結構與特性 12 1.3.2 生物感測器 15 1.3.3 電化學法DNA感測器原理與應用 16 1.3.3.1 循環伏安法原理與應用 16 1.3.3.2 電化學阻抗分析原理與應用 20 1.4 電極表面清潔程序 25 1.4.1 Oxygen plasma清潔機制 27 1.4.2 piranha清潔機制 28 1.4.3 王水蝕刻效率 29 1.5 表面覆蓋率量測原理特性 30 1.6 研究動機目的 32 1.7 研究架構圖 34 第二章 材料與實驗方法 35 2.1 實驗試劑與設備 35 2.1.1 實驗試劑 35 2.1.2 實驗設備 37 2.2 金薄膜電極製備 39 2.2.1 玻片清潔 39 2.2.2 光微影蝕刻製程 39 2.3 電極表面清潔與評估 42 2.3.1 清潔方式 43 2.3.2 MUA修飾模型對不同清潔程序的探討 44 2.4 沙門氏桿菌檢測流程 45 2.5 不同電解質溶液對電極介面阻抗量測的影響 47 2.6 電化學量測 48 2.6.1 CV量測 48 2.6.2 EIS量測 48 2.6.3 EIS等效電路設計 48 2.7 化學分析電子能譜分析 49 2.8 原子力顯微鏡分析 54 第三章 結果與討論 55 3.1 不同清潔程序對晶片式電極表面特性的影響 55 3.1.1 不同清潔程序處理時間的影響 55 3.1.2 不同清潔程序對表面潔淨度的影響 63 3.1.3 以XPS檢測表面官能基變化 64 3.1.3.1 全譜分析 64 3.1.3.2 各元素微區分析 67 3.1.4 金硫鍵結在經不同清潔程序處理後之表面覆蓋率的變化 76 3.2 緩衝溶液組成對EIS量測訊號的影響 79 3.2.1 電解液組成對MUA分子EIS量測訊號的影響 80 3.2.2 電解液組成對DNA雙股螺旋構型EIS檢測訊號的影響 83 3.3 核酸感測器檢測特性探討 85 3.3.1 CV檢測結果 85 3.3.2 以EIS進行DNA固定過程的探討 87 3.3.3 沙門氏桿菌最佳化雜交時間探討 90 3.3.4 沙門氏桿菌核酸感測晶片檢測特性探討 92 3.3.5 沙門氏桿菌核酸感測晶片再現性探討 93 3.3.6 配位錯誤與不對稱型DNA在EIS量測阻抗差異探討 95 第四章 結論 98 參考文獻 99 附錄 11