Avaliação da atividade de inibição de alfa-amilase e padronização do extrato aquoso da folha de Eugenia dysenterica

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2014.O Diabetes Mellitus é uma doença metabólica crônica, de etiologia múltipla, caracterizada por hiperglicemia resultando na deficiência da secreção ou incapacidade da insulina exercer seus efeitos adequadamente, provocando alterações no metabolismo de carboidrados, lipídios e proteínas. A procura por substância ativa presente em plantas que possa inibir a enzima α-amilase, chave neste processo metabólico, com ação mais seletiva e menos efeitos indesejáveis, tem sido o alvo de pesquisas. O Brasil ocupa o topo dos países mais ricos em biodiversidade do mundo, possui cerca de 20% do total das espécies do planeta e pelo menos metade destas espécies possuem alguma propriedade terapêutica. No entanto, menos de 1% desta diversidade tem sido alvo de estudos apropriados, principalmente como inibidores enzimáticos, o que inclui as espécies vegetais do Cerrado, segundo maior bioma brasileiro. Assim, este projeto propôs avaliar a espécie vegetal Eugenia dysenterica, presente no bioma Cerrado, quanto à atividade de inibição da enzima α-amilase, padronizar e caracterizar o extrato bruto aquoso das folhas desta planta. Para atingir o objetivo proposto, o extrato aquoso bruto foi padronizado de acordo com a presença do marcador químico catequina, fracionado e avaliado quanto a sua ação inibitória sobre a atividade da α-amilase. O extrato aquoso bruto apresentou 47,51 mg de catequina por grama de extrato. As frações com potencial atividade de inibição sobre a α-amilase foram as frações isopropanólica e suas subfrações I8, I16, I17, I20 e I21, além do extrato aquoso bruto. Foi identificado a presença de ácido elágico na subfração com maior potencial inibitório (I8). Os valores de IC50 do extrato bruto e da fração isopropanólica (14,92, e 8,06 μg/mL), respectivamente, foram próximos ao IC50 do controle positivo de inibição Acarbose (5,58 μg/mL). As subfrações apresentaram valores de IC50 maiores que o controle. Não foi observada citotoxicidade para o extrato aquoso bruto e fração isopropanólica em concentrações próximas aos valores de IC50 para α- amilase. Foi desenvolvido um método cromatográfico rápido e confiável para determinação do flavonóide catequina no extrato bruto, pois foi observada ampla faixa de linearidade e excelente precisão. Além disso, o método foi robusto e exato informando corretamente seu limite de detecção e quantificação. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACTDiabetes Mellitus is a chronic metabolic disorder of multiple aetiology characterized by hyperglycemia resulting in deficiency of insulin secretion or inability to exert its effects properly, causing changes in the metabolism of carbohydrates, lipids and proteins. The search for active substance in plants that can inhibit the enzyme α- amylase, key in this metabolic process, with more selective action and less side effects, has been the target of research. Brazil topped the richest countries in biodiversity in the world, has about 20% of the planet's species and at least half of these species have some therapeutic properties. However, less than 1% of this diversity has been the subject of appropriate studies, primarily as enzyme inhibitors, which includes the plant species of the Savanna, second largest brazilian biome. This project proposed to evaluate the plant species Eugenia dysenterica, present in the Savanna biome, as for the inhibitory activity of the enzyme α-amylase, standardize and characterize the crude aqueous extract of the leaves of this plant. To achieve the proposed goal, the crude aqueous extract was standardized according to the presence of the chemical marker catechin, fractionated and evaluated for its inhibitory effect on the activity of α-amylase. The crude aqueous extract showed 47.51 mg of catechin per gram of extract. The fractions with potential inhibitory activity on α-amylase were isopropanolic fractions and its subfractions I8 , I16 , I17 , I20 and I21, besides the crude aqueous extract. The presence of ellagic acid in the subfraction with highest inhibitory potential (I8) was identified. The IC50 values of crude extract and isopropanolic fraction (14.92 and 8.06 μg/mL, respectively), were close to the IC50 inhibition positive control acarbose (5.58 μg/mL). The subfractions showed IC50 values greater than control. No cytotoxicity was observed for the crude aqueous extract and isopropanolic fraction in concentrations near the IC50 values for α-amylase. A fast and reliable chromatographic method for determination of flavonoid catechin in the crude extract was developed because wide range of linearity and excellent accuracy were observed. Moreover, the method was robust and accurate, properly informing its limit of detection and quantification

Análise da qualidade da água do Ribeirão Sobradinho – contaminação ambiental e qualidade de vida, Distrito Federal, 2011

Colaboração editorial da Faculdade de Ciência da Informação (FCI) da Universidade de BrasíliaO objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade da água do Ribeirão Sobradinho por meio de análises físico-químicas e microbiológicas, para subsidiar ações do poder público e sociedade. Foram coletadas amostras de água de quatro diferentes pontos: próximo à nascente, próximo à saída de esgoto da Companhia de Saneamento Ambiental do Distrito Federal - CAESB (B), no Parque Jequitibá (C) e próximo à saída de Sobradinho, na BR-020 (D). Para a avaliação físico-química, utilizou-se os parâmetros temperatura, oxigênio, pH, turbidez, sólidos totais, teor de nitrogênio e amônia e demanda bioquímica de oxigênio. Já para a análise microbiológica, contou-se Coliformes totais e Escherichia coli (E. coli). O ponto B apresentou os maiores valores de nitrato (2,43 mg/L), nitrito (0,033 mg/L), fósforo (2,69 mg/L), sólidos totais (0,01470g) e amônia (2,497 mg/L). O ponto D apresentou os maiores níveis de amônia (2,900 mg/L) e turbidez (54,13) e foi o segundo ponto com maior índice de nitrato (0,97 mg/L), nitrito (0,015 mg/L) e fósforo (0,24 mg/L). Também foram encontrados valores acima da normalidade para Coliformes e E. coli nos pontos B (993.150,0 e 130.150,0 NMP/100mL) e D (306.550,0 e 73.500,0 NMP/100mL). O ponto A apresentou, em geral, os melhores parâmetros. Os valores encontrados mostraram que a qualidade da água do ribeirão apresenta-se insatisfatória para sua classificação (Classe 2 – CONAMA), principalmente nos pontos B e D, o que certamente impacta na qualidade de vida dos moradores, que perderam uma fonte de lazer e se expõem a um ambiente de poluição e risco de doenças. _________________________________________________________________________________ ABSTRACTThe aim of this study was to evaluate the water quality of Sobradinho river through physical-chemical and microbiological tests, to support initiatives from civil society and government. We collected water samples from four different points: near the nascent (A) near the Environmental Sanitation Company of Federal District-CAESB (B), Jequitibá Park(C) and near the exit of Sobradinho City(D). We tested the parameters of temperature, oxygen, pH, turbidity, total solids, total nitrogen and ammonia and biochemical oxygen demand for the physico-chemical evaluation. The microbiological analysis included counting of Total coliform and Escherichia coli ( E. coli ). Point B had the higher levels of nitrate (2.43 mg / L), nitrite (0.033 mg / L), phosphorus (2.69 mg / L), total solids (0.01470 g) and ammonia (2.497 mg / L). Point D had the highest levels of ammonia (2.900 mg / L) and turbidity (54.13) and was the second with the highest levels of nitrate (0.97 mg / L), nitrite (0.015 mg / L) and phosphorus (0.24 mg / L). Values were above the normal range for coliforms and E. coli in point B (NMP/100mL 993150.0 and 130150.0) and D (NMP/100mL 73500.0 and 306550.0). Point A had, in general, the best parameters. The results found showed that the water quality of the river has to be unsatisfactory for their classification (Class 2 - CONAMA), mainly in points B and D, which impacts the quality of life of residents, who lost a source of recreation and are exposed to an environment of pollution and disease risk. _________________________________________________________________________________ RESUMENEl objetivo de este estudio fue evaluar la calidad del agua del arroyo Sobradinho a través de análisis fisicoquímico y microbiológicos para apoyar las acciones del gobierno y de la sociedad. Se recogieron muestras de água desde cuatro puntos diferentes: cerca de la naciente (A), cerca de la salida de alcantarillado de la Companhia de Saneamento Ambiental do Distrito Federal- CAESB (B), Parque Jequitibá (C) y cerca de la salida de Sobradinho, BR- 020 (D). Para la evaluación físicoquímica, se utilizó los parámetros: temperatura, oxígeno, pH, turbidez, sólidos totales, nitrógeno total, amoníaco y la demanda bioquímica de oxígeno. En cuanto a los análisis microbiológicos, se contó Coliformes totales y Escherichia coli ( E. coli ). En el Punto B había los más altos valores de nitratos (2,43 mg/L), nitritos (0,033 mg/L), fósforo (2,69 mg/L) sólidos totales (0,01470 g) y amoníaco (2,497 mg/L). El punto D tenía los más altos niveles de amoníaco (2,900 mg/L) y la turbidez (54,13) y fue el segundo punto más alto de nitrato (0,97 mg/L), nitritos (0,015 mg/L) y fósforo (0,24 mg/L). También se encontraron por encima de los valores normales para Coliformes y E. coli em los puntos B (993,150.0 y 130,150.0 NMP/100mL) y D (73.500,0 y 306.550,0 NMP/100mL). El punto A tiene, por lo general, los mejores parámetros. Los valores encontrados muestran que la calidad del água del arroyo no es satisfactoria para su clasificación (Clase 2 – CONAMA), principalmiente em los puntos B y D, lo que sin duda afecta la calidad de vida de los residentes, que han perdido una fuente de recreación y están expuestos a un ambiente de contaminación y riesgo de enfermedad