Fast and slow releasing sulphide donors engender distinct transcriptomic alterations in Atlantic salmon hepatocytes

publishedVersio

Effect of black elderberry (Sambucus nigra) and its chemical constituents on in vitro moulation of NF-kappaB activity

Bær av svarthyll (Sambucus nigra) er vist å ha en immunologisk effekt, og det er antatt at et høyt innhold av polyfenoler er årsaken til dette. Det er funnet stor variasjon i innhold av polyfenoler mellom ulike sorter svarthyll, men lite er gjort på immunologisk effekt av ulike sorter. I denne oppgaven ble saft og metanolekstrakt fra bær av de norskdyrkede sortene Samidan, Samyl, Samidal, Sampo, Sambu og Samnor undersøkt med hensyn på immunologisk effekt og innholdsstoffer. Effekt av prosessering på innholdsstoffer og evne til å modulere immunresponsen ble også testet, da svarthyllbær som oftest prosesseres før konsumering. Immunologisk effekt ble testet ved bruk av den humane monocytiske cellelinjen U937 3xB-LUC som er stabilt transfektert med et luciferase-gen med tre NF-B-bindingsseter. Dette gjør det mulig å måle modulering av basal og LPS-indusert NF-B-aktivitet. NF-B er et genregulatorisk protein som styrer mange av de immunologiske responsene i en celle. Måling av endring i NF-B-aktivitet i cellene etter stimulering med et stoff vil derfor si mye om stoffets immunologiske effekt. Det ble funnet signifikant forskjell mellom både sort, år og dyrkested både for evne til å modulere NF-κB-aktivitet og for innhold av totale fenoler (TP) og totale monomere antocyaniner (TMA). Sampo og Sambu hadde best evne til å hemme LPS-indusert NF-κB-aktivitet både for saftene og ekstraktene, og saft fra Sambu hadde høyest innhold av TP og TMA. Det ble også funnet negativ korrelasjon mellom LPS-indusert NF-κB-aktivitet og innhold av TP og TMA. Ekstraktene hadde en negativ korrelasjon mellom basal NF-κB-aktivitet og innhold av TP og TMA, mens det ikke ble funnet korrelasjon mellom saftenes basale NF-κB-aktivitet og innhold av TP og TMA. Varmebehandling av bær før pressing til saft ga enten ingen eller en reduserende effekt på modulering av NF-κB-aktivitet sammenliknet med effekt av saft fra bær som ikke var varmebehandlet før pressing. I tillegg var det et høyere innhold av TP og TMA i saft av bær som ble varmebehandlet før pressing enn saft fra bær som ikke ble varmebehandlet før pressing. Innhold av lipopolysakkarider (LPS) i saftene kan ha påvirket resultatene for modulering av NF-κB-aktivitet. Det usikkert i hvilken grad norskdyrket svarthyll kan stimulere basal NF-κB-aktivitet, men de har en potensiell hemmende effekt på LPS-indusert NF-κB-aktivitet. Det er grunn til å tro at høyt innhold av polyfenoler, og antocyaniner spesielt, i bærene er årsaken til den hemmende effekten. Produkter av svarthyllbær dyrket i Norge kan derfor ha en dempende effekt ved sykdom og lidelser forårsaket av forhøyede nivåer av NF-κB-aktivitet, noe som er interessant å undersøke nærmere.M-BIOTE

Temporal control of responses to chemically induced oxidative stress in the gill mucosa of Atlantic salmon (Salmo salar)

Molecular clocks are known to mediate cellular responses during oxidative stress. This important interplay is less understood in fish, particularly at mucosal surfaces. Here we report the coordinated modulation of the molecular clocks and antioxidant defence following chemically induced oxidative stress in the gill mucosa of Atlantic salmon (Salmo salar). A short-term gill explant (GE) culture was used as a model in a series of experiments aiming to demonstrate how photoperiod during culture, levels of environmental reactive oxygen species (ROS), time of oxidative stress induction, and the daily light-dark cycle affect the expression of molecular clocks and antioxidant genes in the gills. Photoperiod (either 12 light:12 dark cycle, LD or 0 light:24 dark cycle, DD) during explant culture affected the transcription of two clock genes, circadian locomotor output cycles kaput (clk) and period 1 (per1), as well as one antioxidant gene, glutathione peroxidase (gpx). When the GEs were exposed to two ROS-generating oxidants (i.e., peracetic acid, PAA and hydrogen peroxide, H2O2), photoperiod condition was demonstrated to have a significant impact on the transcription of the core genes. PAA significantly downregulated the expression of reverb alpha (reverbα) under LD, while per1 and per2 expression were significantly upregulated under DD. Nevertheless, there was no distinct pattern in the oxidant-induced expression of clock genes. On the other hand, photoperiod was shown to influence the antioxidant defence under increased ROS level, where significant transcriptional upregulation was a hallmark response under LD. Interestingly, no changes were identified under DD. Induction of oxidative stress either at ZT2 (2 h after lights on) or at ZT14 (2 h after lights off) revealed striking differences that highlighted the temporal sensitivity of the oxidative defence repertoire. Per1 was significantly modulated following time-dependent induction of oxidative stress amongst the clock genes. Inducing oxidative stress at ZT2 resulted in a significant upregulation of antioxidant genes; but when the same stimuli were given at ZT14, all antioxidant genes exhibited downregulation. It was further revealed that neither of the genes demonstrated daily rhythmicity in their expression in the GE cultures. Collectively, the study revealed the coordinated expression of the core elements in the molecular clock and antioxidant systems in the gill mucosa following oxidative stress. Furthermore, the results reveal that the time of day plays a crucial influence on how defences are mobilised during oxidative stress, adding new insights into the rhythms of oxidative stress response in mucosal tissues in fish.submittedVersio

Ellagic acid and urolithin A modulate the immune response in LPS-stimulated U937 monocytic cells and THP-1 differentiated macrophages

acceptedVersio

Oxidative chemical stressors alter the physiological state of the nasal olfactory mucosa of atlantic salmon

publishedVersio