Correlação of enzimas eritrocitárias e seus compostos intermediários de mamíferos selecionados

As there are few comparative studies on mammalian red cell metabolism, it was decided to study the glycolytic enzyme activities as well as related ones, and the metabolites adenosine-5´-triphosphate (ATP) and 2,3-bisphosphoglycerate (2,3-BPG). Mammalia representatives from Primates, Rodentia, Carnivora, Lagomorpha, Artyodactyla, Didelphimorphia and Xenarthra orders, obtained from Fundação Parque Zoológico de São Paulo and Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP, were studied. The blood was collected in EDTA and ACD, the red cells were washed in saline at 4º C, lysed 1:20 in hemolysing solution by freeze-and-thaw, and the following enzymes were assayed according to standard procedures: hexokinase, glucose-6-phosphate isomerase, phosphofructokinase, aldolase, triose phosphate isomerase, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, phosphoglycerate kinase, monophosphoglycerate mutase, enolase, pyruvate kinase, lactate dehydrogenase, as well as 2,3-bisphosphoglycerate mutase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, 6-phosphogluconate dehydrogenase activities at 37ºC , and adenosine-5´-triphosphate and 2,3-bisphophoglycerate concentrations. A remarkable variation among the studied species was observed. However, it was detected a significant positive correlation between the adenosine-5´-triphosphate concentrations and triose phosphate isomerase and 2,3-bisphosphoglycerate mutase activities, as well as significant positive correlation between 2,3-bisphosphoglycerate concentration and 2,3-bisphosphoglycerate mutase activity in all studied species as a whole. Most of studied species exhibited a steady ATP concentration range between 4 and 6 µ moles.g Hb -1 except the Artiodactyla (Cervus elaphus) and Carnivora (Panthera leo, Leopardus pardalis, Canis Lupus and Chrysocyon brachyurus,) which presented values between 2 and 3 µ moles g Hb -1. However, the 2,3-BPG concentration showed remarkable variation among the studied species and among the orders.Como há poucos estudos comparativos sobre o metabolismo eritrócitário dos mamíferos propôs-se estudar as atividades das enzimas glicolíticas, anexas e os metabólitos adenosina-5'-trifosfato e 2,3-difosfoglicerato. Foram estudados mamíferos das ordens Primata, Rodentia, Carnivora, Lagomorpha, Artiodactyla, Didelphimorphia e Xenarthra oriundos da Fundação Parque Zoológico de São Paulo e Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP. O sangue foi colhido em EDTA e ACD, os eritrócitos foram lavados em solução fisiológica a 4º C e hemolisados em solução hemolisante 1:20 por congelamento e descongelamento e as atividades das seguintes enzimas foram determinadas de acordo com procedimentos padronizados: hexoquinase, glicose-6-fosfato isomerase , fosfofrutoquinase, aldolase, triose fosfato isomerase, gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase, fosfoglicerato quinase, 2,3-difosfoglicerato mutase, monofosfogliceromutase, enolase, piruvato quinase, lactato desidrogenase, bem como a glicose-6-fosfato desidrogenase, 6-fosfogluconato desidrogenase a 37ºC e os metabólitos intermediários 2,3-difosfoglicerato e adenosina-5'-trifosfato. As enzimas e os compostos intermediários estudados apresentaram grande variabilidade entre as espécies de mamíferos estudadas. Foi observada correlação positiva entre a atividade da triose fosfato isomerase e a 2,3-difosfoglicerato mutase e os teores de adenosina-5'-trifosfato das espécies, bem como correlação positiva entre a 2,3-difosfoglicerato mutase em relação ao 2,3-difosfoglicerato. Os teores de adenosina-5'-trifosfato mantiveram-se dentro de uma faixa estável, ao redor de 4 a 6 µ moles / gHb, com as exceções das espécies das ordens Carnivora (Panthera leo, Leopardus pardalis, Canis lupus and Chrysocyon brachyurus) e Artiodactyla (Cervus elaphus), que exibiram 2 a 3 µ moles / g Hb. Já os valores da concentração de 2,3-difosfoglicerato apresentaram, por sua vez, variação considerável entre as espécies e as ordens estudadas

Complementary study of glucose-6-phosphate dehydrogenase erythrocyte of brazilian marsupial Didelphis marsupialis

Sabe-se que a atividade da glicose-6-fosfato desidrogenase eritrocitária do marsupial brasileiro Didelphis marsupialis é cerca de 15 a 20 vezes a encontrada nos eritrócitos humanos. Pretendendo-se investigar se esta hiperatividade também se encontra ou não aumentada nas outras enzimas eritrocitárias, levou-se a efeito a dosagem das atividades das enzimas glicolíticas bem de outras enzimas relacionadas ao metabolismo óxido-redutor do eritrócito do marsupial. Alguns dados bioquímicos sorológicos, hematológicos e imunológicos foram também obtidos. Assim sendo, as seguintes enzimas eritrocitárias foram estudadas: hexoquinase, glicose fosfato isomerase, fosfofrutoquinase, aldolase, triose fosfato isomerase, gliceraldeido-3-fosfato desidrogenase, fosfogliceratoquinase, difosfoglicerato mutase, monofosfoglicerato mutase, enolase, piruvato quinase, lactato desidrogenase, glicose-6-fosfato desidrogenase, 6-fosfogliconato desidrogenase, glutationa redutase, glutationa peroxidase, glutationa S-transferase, nicotinamida adenina dinucleotideo fosfato diaforase, nicotinamida adenina dinucleotideo meta-hemoglobina redutase, superóxido dismutase, aspartato aminotransferase, adenilato quinase, adenosina desaminase e acetilcolinesterase. Embora a maioria das enzimas estudadas tenham revelado atividades semelhantes às encontradas nos eritrócitos humanos, foram observados aumentos significativos da hexoquinase, piruvato quinase e glutationa S-transferase. Entretanto, a atividade da glutationa peroxidase apresentou grande aumento de atividade, cerca de dez a doze vezes a encontrada nos eritrócitos humanos, talvez agindo em conjunto com a hiperatividade da glicose-6-fosfato desidrogenase da ordem de dez a quinze vezes já descrita nos eritrócitos humanosIt is known that erythrocyte glucose-6-phosphate dehydrogenase specific activity of Didelphis marsupialis is about 15-20 times higher than human red cells. In order to investigate whether this hyperactivity is extended or not to other red cell enzymes, it was proposed to ascertain the activity of the glycolytic enzymes as well as other related to the redox metabolism of the opossum erythrocyte. Some biochemical, hematological and immunological data were also assayed as well. That being so, the following red cell enzymes were assayed: hexokinase, glucose phosphate isomerase, phosphofructokinase, aldolase, triose phosphate isomerase, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, phosphoglycerate kinase, diphosphoglycerate mutase, monophosphoglycerate mutase, enolase, pyruvate kinase, lactate dehydrogenase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, 6-phosphogluconate dehydrogenase, glutathione reductase, glutathione peroxidase, glutathione S-transferase, nicotinamide adenine dinucleotide phosphate diaphorase, nicotinamide adenine dinucleotide metahemoglobin reductase, superoxide dismutase, aspartate amino-transferase, adenylate kinase, adenosine deaminase and acetylcholinesterase . Although most of the enzymatic activities disclosed to be similar to humans, some enzymes exhibited high activities as the hexokinase, pyruvate kinase and glutathione-S-transferase, about three to four times in relation to human. However the glutathione peroxidase presented overwhelming activity, at the order of ten-twelve times the human enzyme, perhaps working together the glucose-6-phosphate dehydrogenase hyperactivity at the order of ten-fifteen times already described in the marsupial erythrocyte

Correlação of enzimas eritrocitárias e seus compostos intermediários de mamíferos selecionados

Como há poucos estudos comparativos sobre o metabolismo eritrócitário dos mamíferos propôs-se estudar as atividades das enzimas glicolíticas, anexas e os metabólitos adenosina-5'-trifosfato e 2,3-difosfoglicerato. Foram estudados mamíferos das ordens Primata, Rodentia, Carnivora, Lagomorpha, Artiodactyla, Didelphimorphia e Xenarthra oriundos da Fundação Parque Zoológico de São Paulo e Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP. O sangue foi colhido em EDTA e ACD, os eritrócitos foram lavados em solução fisiológica a 4º C e hemolisados em solução hemolisante 1:20 por congelamento e descongelamento e as atividades das seguintes enzimas foram determinadas de acordo com procedimentos padronizados: hexoquinase, glicose-6-fosfato isomerase , fosfofrutoquinase, aldolase, triose fosfato isomerase, gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase, fosfoglicerato quinase, 2,3-difosfoglicerato mutase, monofosfogliceromutase, enolase, piruvato quinase, lactato desidrogenase, bem como a glicose-6-fosfato desidrogenase, 6-fosfogluconato desidrogenase a 37ºC e os metabólitos intermediários 2,3-difosfoglicerato e adenosina-5'-trifosfato. As enzimas e os compostos intermediários estudados apresentaram grande variabilidade entre as espécies de mamíferos estudadas. Foi observada correlação positiva entre a atividade da triose fosfato isomerase e a 2,3-difosfoglicerato mutase e os teores de adenosina-5'-trifosfato das espécies, bem como correlação positiva entre a 2,3-difosfoglicerato mutase em relação ao 2,3-difosfoglicerato. Os teores de adenosina-5'-trifosfato mantiveram-se dentro de uma faixa estável, ao redor de 4 a 6 µ moles / gHb, com as exceções das espécies das ordens Carnivora (Panthera leo, Leopardus pardalis, Canis lupus and Chrysocyon brachyurus) e Artiodactyla (Cervus elaphus), que exibiram 2 a 3 µ moles / g Hb. Já os valores da concentração de 2,3-difosfoglicerato apresentaram, por sua vez, variação considerável entre as espécies e as ordens estudadas