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Nanopart铆culas magn茅ticas funcionalizadas y modificadas con entrecruzamiento para mejorar la inmovilizaci贸n de la invertasa
Procedures of immobilization invertase have been developed using different supports. However, disadvantages such as use of smallparticles for invertase immobilizations in packed-bed reactors are being solved using magnetic particles. In this study, compositescontaining Fe3O4 were prepared by incorporation of a polysiloxane layer required for the physical adsorption of the invertase.Besides, the functionalized magnetite was activated with glutaraldehyde and polyethylenimine (PEI) with the aim of performinga covalent immobilization. The effect of different conditions such as enzyme: support ratio, pH, and temperature were analyzedin the preservation of invertase. The results demonstrated that the optimum enzyme:support ratio is higher for covalent bondingthan for physical adsorption. The ideal pH for the immobilized enzyme is 5.0, and the enzymatic activity is retained until 70 鈼.The values of km are similar in both immobilization methods. The analysis of the effect of pH and thermostability showed thatthe catalytic activity of invertase is not affected in comparison with the free enzyme. The covalent immobilization displays higherefficiency in the immobilization process (F蔚), less inhibition and twice as much stability. The enzymes immobilized by physicaland covalent methods can be reused for up to four cycles and can be removed from the reaction medium by applying an externalmagnetic field.Keywords: invertase, Fe3O4, immobilization, compositesSe han desarrollado procedimientos de inmovilizaci贸n con invertasa utilizando diferentes soportes. Sin embargo, las desventajas como el uso de part铆culas peque帽as para inmovilizaciones de invertasa en reactores de lecho compacto se est谩n resolviendo utilizando part铆culas magn茅ticas. En este estudio, los compuestos que contienen Fe3O4se prepararon mediante la incorporaci贸n de una capa de polisiloxano necesaria para la adsorci贸n f铆sica de la invertasa. Adem谩s, la magnetita funcionalizada se activ贸 conglutaraldeh铆do y polietilenimina (PEI) con el objetivo de realizar una inmovilizaci贸n covalente. Se analiz贸 el efecto de diferentescondiciones como la relaci贸n enzima: soporte, pH y temperatura en la conservaci贸n de la invertasa. Los resultados demostraron que la relaci贸n enzima: soporte 贸ptima es mayor para la uni贸n covalente que para la adsorci贸n f铆sica. El pH ideal para la enzimainmovilizada es 5,0 y la actividad enzim谩tica se mantiene hasta 70鈼. Los valores dekmson similares en ambos m茅todos de inmovilizaci贸n. El an谩lisis del efecto del pH y la termoestabilidad mostr贸 que la actividad catal铆tica de la invertasa no se ve afectada en comparaci贸n con la enzima libre. La inmovilizaci贸n covalente muestra una mayor eficacia en el proceso de inmovilizaci贸n (F蔚),menos inhibici贸n y el doble de estabilidad. Las enzimas inmovilizadas por m茅todos f铆sicos y covalentes se pueden reutilizar hasta por cuatro ciclos y se pueden eliminar del medio de reacci贸n aplicando un campo magn茅tico externo.Fil: Vargas Lizarazo, Annie Yojaira. Universidad Pedag贸gica y Tecnol贸gica de Colombia; ColombiaFil: Romanelli, Gustavo Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Cient铆ficas y T茅cnicas. Centro Cient铆fico Tecnol贸gico Conicet - La Plata. Centro de Investigaci贸n y Desarrollo en Ciencias Aplicadas "Dr. Jorge J. Ronco". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigaci贸n y Desarrollo en Ciencias Aplicadas; ArgentinaFil: Mart铆nez, Jos茅 J.. Universidad Pedag贸gica y Tecnol贸gica de Colombia; Colombi