Global tests evaluating the functional condition of hemostasis

Control of effectiveness of global tests evaluation of the functional state regulation of blood aggregation provided an opportunity to obtain timely information about the I-II and III phases of hemostasis while using native substrate - whole blood. Ex vivo, registered during hemocoagulation of changing the viscous characteristics of whole blood, allowed to formulate the concept of fibrinogenesis permanence as in vivo existing process, defining proper hemostatic potential – integrative characteristic of the entire cycle of hemocoagulation, ensuring necessary blood fluidity and restricting extravasation of its components in case of defecting its permeability or damaging its vascular wall

Нейропротективные свойства ингибитора C-Jun N-terminal kinase (JNK) при гипоксической гипоксии

The aim of the study was to reveal the influence of the JNK inhibitor on the induction of disturbances in the psychoneurological status of experimental animals in the modeling of posthypoxic encephalopathy and to reveal the mechanisms of its action related to the functioning of the neural stem cells of the brain. Materials and methods. The experiments were performed on 64 male outbred mice. Posthypoxic encephalopathy was modeled in non-native mice with hypoxia of the hermetic volume. The JNK inhibitor was administered to mice subcutaneously at a dose of 15 mg/kg once before hypoxic exposure. We studied the neuropsychiatric status, the content of neuronal stem cells in the subventricular zone of the brain of experimental animals, and the direct effect of the JNK inhibitor on intact neural stem cells in vitro. Results. The expressed cerebroprotective action of the pharmacological agent was revealed, which consisted of normalizing the indices of orientation and exploratory behavior and conditioned activity in experimental animals. These effects developed against a background of a significant increase in the content of neural stem cells in the subventricular zone of the brain. In the experiments in vitro, a direct stimulating effect of the JNK inhibitor on neural stem cells was found. Conclusions. The obtained results showed a neuroprotective action of the JNK inhibitor. At the same time, the prevention and compensation of the development of disturbances in the activity of the central nervous system is based on the preservation of the ability of the nerve tissue to repair andassociated with the functioning of resident neural stem cells.Цель исследования – выявить влияние ингибитора JNK на формирование нарушений психоневрологического статуса экспериментальных животных при моделировании постгипоксической энцефалопатии и вскрыть механизмы его действия, связанные с функционированием нейральных стволовых клеток (СК) головного мозга.Материалы и методы. Эксперименты проведены на 96 аутбредных самцахмышей. Постгипоксическая энцефалопатия моделировалась у беспородных мышей с помощью гипоксии гермообъема. Ингибитор JNK вводили мышам однократно перед гипоксическим воздействием подкожно в дозе 15 мг/кг.Изучали психоневрологический статус, содержание нейральных СК в субвентрикулярной зоне головного мозга экспериментальных животных и прямое влияние ингибитора JNK на интактные нейральные СК в условиях in vitro. Результаты. Выявили выраженное церебропротекторное действие фармакологического агента, заключающееся в нормализации показателей ориентировочно-исследовательского поведения и условно-рефлекторной деятельности у экспериментальных животных. Указанные эффекты развивались на фоне значительного увеличения содержания нейральных СК в субвентрикулярной зоне головного мозга. При этом в экспериментах in vitro обнаружено прямое стимулирующее влияние ингибитора JNK на нейральные СК. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о выраженном нейропротекторном действии ингибитора JNK. При этом в основе предупреждения развития нарушений деятельности ЦНС и их компенсации, очевидно, лежит сохранность способности нервной ткани к репарации, связанной с функционированием резидентных нейральных СК

Оптимизация метода исследования маммосферообразования для оценки il-6 индуцированной стволовой пластичности дифференцированных клеток рака молочной железы

The aim of the study was mammosphere assay optimization for quantifcation of IL6-induced stemness in differentiated (СD44– ) T47D breast cancer cells.Material and Methods. The effect of three commonly used cell-detaching methods (TrypLE, accutase, cell scrapper) at various confuence (40–50 % and 70–80 %) on cell viability, phenotypic profle and mammosphere formation was tested. The cell viability was examined using AnnexinV/propidium iodide assay. The phenotypic profle was analyzed by fow cytometry with fuorescent markers CD24 and CD44.Results. Detachment of the cells using scrapper led to substantial increase in early apoptotic and late apoptotic cells in comparison with TrypLE and accutase. Dissociation with TrypLE reduced the percentage of detected CD44+ positive cells, whereas accutase saved the surface marker. The number of mammosphere and their diameter did not differ between groups. Incubation of differentiated (CD44– CD24+) T47D cells with IL-6 for 24 hours resulted in an appearance of CD44+CD24+ and CD44+CD24–/low subpopulation. Furthermore, the differentiated cells after 24 hours of IL6 exposure formed 3 times more mammospheres compared to the control.Conclusion. Usage of cells with confuence of no more than 80 % and accutase for detachment of cells is recommended for mammosphere assay. Incubation of CD44– CD24+ T47D cells with IL6 for 24 hours is suffcient for stimulation of stemness plasticity. Цель исследования – оптимизация метода оценки образования маммосфер после индуцированной интерлейкином 6 (IL6) стволовой пластичности у дифференцированных (CD44– ) опухолевых клеток линии рака молочной железы человека T47D.Материал и методы. Проведена оценка жизнеспособности, цитофлуориметрического профиля клеток и их способности к маммосферообразованию при различной исходной конфлюентности (40–50 % и 70–80 %) и методах снятия с поверхности пластика (использование TrypLE, аккутазы, скребка для клеток). Жизнеспособность клеток оценивали методом проточной цитометрии с использованием флуоресцентно-меченного АннексинV и йодистого пропидия. Динамику изменения экспрессии поверхностных маркеров клеток оценивали методом проточной цитометрии с флуоресцентно-меченными антителами к CD24 и CD44.Результаты. Применение скребка для снятия клеток приводило к существенному повышению количества клеток с цитофлуориметрическими признаками раннего и позднего апоптоза по сравнению с использованием TrypLE и аккутазы. Использование TrypLE приводило к снижению количества CD44+ клеток, тогда как аккутаза не влияла на представленность данного маркера. Количество маммосфер и их средний диаметр не отличались между исследуемыми группами. Стимуляция дифференцированных (CD44– CD24+) клеток линии T47D IL6 уже через 24 ч приводила к появлению популяций CD44+CD24+ прогениторных и CD44+CD24–/low опухолевых стволовых клеток. Дифференцированные клетки после стимуляции IL6 в течение 24 ч образовывали в 3 раза больше маммосфер по сравнению с контролем.Заключение. Для оценки маммосферообразования целесообразно использовать клетки с конфлюентностью до 80 % и применять аккутазу для снятия с поверхности пластика. Для стимуляции стволовой пластичности у дифференцированных клеток линии T47D достаточной является их инкубация с IL6 в течение 24 ч.

Динамика тиреоидного гормонального статуса как критерий эффективности предоперационной подготовки пациентов с тиреопатиями

On a thyroid disease conservative correction background, preoperative period is accompanied by the upcoming surgery risk and its optimal level assessment, as well as assessment of specific complications development possibilities. Typically, the thyreopathies pathogenesis is accompanied by the thyroid gland functional activity disorder, which provides variety and, in some cases, the clinical picture similarity. Also, due to metabolic processes endocrine regulation fail in the whole organism, it causes disorders development in various organs and systems. Each thyreopathy is characterized by the relevant homeostasis indicators and clinical finding, in the development of which, the role of thyroid gland hormone production variant (hypothyroidism, hyperthyroidism, euthyroidism) and the deviation intensity level are not significant only as a pathological process marker, but also determine the compensation of an adaptive disorder tactics in pre- and postoperative period.В предоперационном периоде, на фоне проводимой консервативной коррекции тиреопатий необходима оценка хирургического риска оперативного вмешательства, его оптимального объема и вероятности развития специфических осложнений. Как правило, развитие тиреопатий сопровождается нарушением функциональной активности щитовидной железы, обеспечивая разнообразие и в некоторых случаях схожесть клинической картины, и лежит в основе развития дисадаптивных срывов, ведущих к повреждениям различных органах и систем за счет сбоя эндокринной регуляции метаболических процессов. При этом тиреопатии, различающиеся морфофункциональными характеристиками, имеют соответствующие показатели гомеостаза и клиническую картину, в формировании которых велика роль гормонопродукции (гипотиреоз, гипертиреоз, эутиреоз), а степень выраженности гомеостатических девиаций существенна не только в качестве маркера патологического процесса, но и определяет тактику компенсации дисадаптоза в пред- и послеоперационном периоде

Specific features of gastroesophageal reflux disease in patients with overweight (basis for personalized treatment)

А cross-sectional study was performed on a continuous sample of patients (N=52) with the gastroesophageal reflux disease. Specific features of this disease in patients with overweight were revealed. Regurgitation predominated in the structure of complaints. Fibrogastroduodenoscopy revealed endoscopically negative form of the diseases in 38% of cases. According to 24-h pH monitoring results, alkaline reflux pH>7 took more than 25% time in supine position at high DeMeester score, which limits the usage of aggressive acid-lowering therapy