Platelet-Activating Factor Induces Th17 Cell Differentiation

Th17 cells have been implicated in a number of inflammatory and autoimmune diseases. The phospholipid mediator platelet-activating factor (PAF) is found in increased concentrations in inflammatory lesions and has been shown to induce IL-6 production. We investigated whether PAF could affect the development of Th17 cells. Picomolar concentrations of PAF induced IL-23, IL-6, and IL-1β expression in monocyte-derived Langerhans cells (LCs) and in keratinocytes. Moreover, when LC were pretreated with PAF and then cocultured with anti-CD3- and anti-CD28-activated T cells, the latter developed a Th17 phenotype, with a significant increase in the expression of the transcriptional regulator RORγt and enhanced expression of IL-17, IL-21, and IL-22. PAF-induced Th17 development was prevented by the PAF receptor antagonist WEB2086 and by neutralizing antibodies to IL-23 and IL-6R. This may constitute a previously unknown stimulus for the development and persistence of inflammatory processes that could be amenable to pharmacologic intervention

Modulation de l'activité cytotoxique des macrophages et des lymphocytes NK pulmonaires par le PAF et le LTB4

Le poumon de par sa fonction et sa localisation représente un environnement propice à l'élaboration de processus inflammatoires et/ou immunitaires. Lors de tels phénomènes, la production et le relâchement de nombreux médiateurs protéiques et lipidiques entraînent plusieurs modifications sur les fonctions immunes des différentes populations cellulaires environnantes. A cet effet, le présent travail portait principalement sur l'étude de la modulation de l'activité NK (natural killer) pulmonaire, chez le rat, par le facteur activateur des plaquettes (PAF) et les mécanismes sous-jacents qui conduisent à cette régulation. Les résultats démontrent que le PAF stimule l'activité NK en agissant directement sur les grands lymphocytes granulaires (LGL), probablement via des récepteurs spécifiques, comme le suggère l'emploi d'antagonistes de récepteurs du PAF et son analogue inactif le lyso-PAF. Dans ce modèle d'étude, l'effet du PAF s'exercerait indépendamment des protéines Gi et Gs, mais impliquerait l'action de la protéine kinase C. De plus, l'étude de la cinétique d'action du PAF démontre que les cellules effectrices peuvent être stimulées dans un court laps de temps (<1h) ou encore après une exposition prolongée (18h) au PAF. Les leucotriènes, dont le LTB4, pourraient également être impliqués dans le processus de stimulation de l'activité NK des LGL pulmonaires. Le LTB4 exogène agit directement sur ces cellules en stimulant leur activité cytotoxique et la participation de leucotriènes endogènes a aussi été proposée par une inhibition de la voie de la 5-lipoxygénase. Notre travail a également porté sur l'étude des effets du PAF et du LTB4 sur la production de cytokines par des macrophages alvéolaires (MA), intertitiels (Ml) et de la rate (MR). Le PAF stimule à la fois la production du facteur de nécrose des tumeurs (TNF) et de l'interleukine 6 (IL-6) par les MA et les Ml alors que les MR ne produisent que de l’IL-6. Toutefois bien qu'une stimulation au LTB4 occasionne le relâchement de TNF par les trois populations de macrophages, seuls les Ml et les MR produisent de l’IL-6 sous ces conditions. L'action cytotoxique des MA et des Ml est augmentée lorsque ces cellules sont mises en présence de PAF ou de LTB4 pour un court laps de temps (1h). Des essais de coculture cellulaire ont permis de mettre en évidence une modulation positive de l'activité NK par la présence de macrophages, lorsque ces derniers sont traités de façon à empêcher leur production de prostaglandines. Globalement ces observations procurent des informations additionnelles sur le mécanisme d'action du PAF sur les LGL pulmonaires. De plus ces observations permettent d'attribuer au PAF et au LTB4 une contribution importante au niveau de la régulation de la réponse immune et aux réactions inflammatoires au sein du poumon

Modulation par le PAF de la production d'interleukine-6 et du facteur de nécrose des tumeurs dans les macrophages alvélaires

Les résultats de cette étude démontrent que le facteur activateur des plaquettes (PAF), un puissant médiateur des réactions inflammatoires peut stimuler les macrophages alvéolaires (MA) de rat à produire de l'interleukine-6 (IL-6) et le facteur de nécrose des tumeurs (TNF). Le processus d'activation nécessite la costimulation avec des produits bactériens, tel le muramyl dipeptide (MDP) ou le lipopolysaccharide (LPS). Comme le suggère l'emploi d'antagonistes de récepteurs et d'analogues inactifs, le PAF agirait de façon spécifique sur ces cellules. Un prétraitement des MA avec des inhibiteurs de la voie de la 5-lipoxygénase (5-LOX) ou de la cyclooxygénase (COX) bloque la production d'IL-6 induite par le PAF, suggérant que ce processus d'activation implique des métabolites endogènes de ces deux voies métaboliques. Sous ces mêmes conditions de culture, les MA stimulés avec le PAF voient leur production de TNF partiellement bloquée par des inhibiteurs de la voie de la 5-LOX. Par ailleurs, une inhibition de la voie de la COX se traduit par une potentiation de la production de cette cytokine. Le PAF induit également la libération des eicosanoïdes LTB4 et PGE2. Ces eicosanoïdes ont eux-mêmes le pouvoir de moduler de façon différente la synthèse d'IL-6 et de TNF. Du point de vue moléculaire, le PAF ne semble augmenter que faiblement l'accumulation en ARNm de ces cytokines, suggérant ainsi que son mécanisme d'action impliquerait plutôt un effet post-transcriptionnel. Finalement, le PAF induirait une accumulation en ARNm de la COX inductible, mais n'affecterait pas les messagers des protéines 5-LOX et FLAP. Globalement, ces observations suggèrent que des métabolites endogènes des voies de la 5-LOX et de la COX induits par le PAF entraînent une régulation différentielle de la production des cytokines IL-6 et TNF. Le PAF pourrait ainsi induire à la fois des boucles de rétrocontrôle positif et négatif lors de son interaction avec les macrophages. Ces travaux mettent donc en évidence le potentiel régulateur du PAF lors de réactions inflammatoires au niveau du poumon et fournissent de nouveaux indices concernant les mécanismes impliqués dans le processus de l'inflammation

Modulation de l'activité cytotoxique des macrophages et des lymphocytes NK pulmonaires par le PAF et le LTB4

Le poumon de par sa fonction et sa localisation représente un environnement propice à l'élaboration de processus inflammatoires et/ou immunitaires. Lors de tels phénomènes, la production et le relâchement de nombreux médiateurs protéiques et lipidiques entraînent plusieurs modifications sur les fonctions immunes des différentes populations cellulaires environnantes. A cet effet, le présent travail portait principalement sur l'étude de la modulation de l'activité NK (natural killer) pulmonaire, chez le rat, par le facteur activateur des plaquettes (PAF) et les mécanismes sous-jacents qui conduisent à cette régulation. Les résultats démontrent que le PAF stimule l'activité NK en agissant directement sur les grands lymphocytes granulaires (LGL), probablement via des récepteurs spécifiques, comme le suggère l'emploi d'antagonistes de récepteurs du PAF et son analogue inactif le lyso-PAF. Dans ce modèle d'étude, l'effet du PAF s'exercerait indépendamment des protéines Gi et Gs, mais impliquerait l'action de la protéine kinase C. De plus, l'étude de la cinétique d'action du PAF démontre que les cellules effectrices peuvent être stimulées dans un court laps de temps (<1h) ou encore après une exposition prolongée (18h) au PAF. Les leucotriènes, dont le LTB4, pourraient également être impliqués dans le processus de stimulation de l'activité NK des LGL pulmonaires. Le LTB4 exogène agit directement sur ces cellules en stimulant leur activité cytotoxique et la participation de leucotriènes endogènes a aussi été proposée par une inhibition de la voie de la 5-lipoxygénase. Notre travail a également porté sur l'étude des effets du PAF et du LTB4 sur la production de cytokines par des macrophages alvéolaires (MA), intertitiels (Ml) et de la rate (MR). Le PAF stimule à la fois la production du facteur de nécrose des tumeurs (TNF) et de l'interleukine 6 (IL-6) par les MA et les Ml alors que les MR ne produisent que de l’IL-6. Toutefois bien qu'une stimulation au LTB4 occasionne le relâchement de TNF par les trois populations de macrophages, seuls les Ml et les MR produisent de l’IL-6 sous ces conditions. L'action cytotoxique des MA et des Ml est augmentée lorsque ces cellules sont mises en présence de PAF ou de LTB4 pour un court laps de temps (1h). Des essais de coculture cellulaire ont permis de mettre en évidence une modulation positive de l'activité NK par la présence de macrophages, lorsque ces derniers sont traités de façon à empêcher leur production de prostaglandines. Globalement ces observations procurent des informations additionnelles sur le mécanisme d'action du PAF sur les LGL pulmonaires. De plus ces observations permettent d'attribuer au PAF et au LTB4 une contribution importante au niveau de la régulation de la réponse immune et aux réactions inflammatoires au sein du poumon

Modulation par le PAF de la production d'interleukine-6 et du facteur de nécrose des tumeurs dans les macrophages alvélaires

Les résultats de cette étude démontrent que le facteur activateur des plaquettes (PAF), un puissant médiateur des réactions inflammatoires peut stimuler les macrophages alvéolaires (MA) de rat à produire de l'interleukine-6 (IL-6) et le facteur de nécrose des tumeurs (TNF). Le processus d'activation nécessite la costimulation avec des produits bactériens, tel le muramyl dipeptide (MDP) ou le lipopolysaccharide (LPS). Comme le suggère l'emploi d'antagonistes de récepteurs et d'analogues inactifs, le PAF agirait de façon spécifique sur ces cellules. Un prétraitement des MA avec des inhibiteurs de la voie de la 5-lipoxygénase (5-LOX) ou de la cyclooxygénase (COX) bloque la production d'IL-6 induite par le PAF, suggérant que ce processus d'activation implique des métabolites endogènes de ces deux voies métaboliques. Sous ces mêmes conditions de culture, les MA stimulés avec le PAF voient leur production de TNF partiellement bloquée par des inhibiteurs de la voie de la 5-LOX. Par ailleurs, une inhibition de la voie de la COX se traduit par une potentiation de la production de cette cytokine. Le PAF induit également la libération des eicosanoïdes LTB4 et PGE2. Ces eicosanoïdes ont eux-mêmes le pouvoir de moduler de façon différente la synthèse d'IL-6 et de TNF. Du point de vue moléculaire, le PAF ne semble augmenter que faiblement l'accumulation en ARNm de ces cytokines, suggérant ainsi que son mécanisme d'action impliquerait plutôt un effet post-transcriptionnel. Finalement, le PAF induirait une accumulation en ARNm de la COX inductible, mais n'affecterait pas les messagers des protéines 5-LOX et FLAP. Globalement, ces observations suggèrent que des métabolites endogènes des voies de la 5-LOX et de la COX induits par le PAF entraînent une régulation différentielle de la production des cytokines IL-6 et TNF. Le PAF pourrait ainsi induire à la fois des boucles de rétrocontrôle positif et négatif lors de son interaction avec les macrophages. Ces travaux mettent donc en évidence le potentiel régulateur du PAF lors de réactions inflammatoires au niveau du poumon et fournissent de nouveaux indices concernant les mécanismes impliqués dans le processus de l'inflammation

Enhanced Cysteinyl-Leukotriene Type 1 Receptor Expression in T Cells from House Dust Mite-Allergic Individuals following Stimulation with Der p

In order to determine the potential for allergen to modulate T cell expression of the CysLT1 receptor and responsiveness to leukotrienes, peripheral blood mononuclear cells from house dust mite-allergic or nonallergic individuals were incubated with D. pteronyssinus allergen (Der p). Baseline CysLT1 expression was similar in both groups of donors, but Der p significantly enhanced CysLT1 expression in CD4+ and CD8+ T cells of only allergic individuals and induced enhanced responsiveness of CD4+ T cells to LTD4 in terms of calcium mobilisation. This effect was prevented by the CysLT1 antagonist MK571. Der p also induced IL-4 and IL-10 production, and neutralizing antibody to IL-4 prevented both the enhanced CysLT1 expression and the enhanced responsiveness of T cells to LTD4 induced by Der p. In allergic individuals, Der p also induced T cell proliferation and a Th2-biased phenotype. Our data suggest that, in allergen-sensitized individuals, exposure to allergen can enhance T cell expression of CysLT1 receptors through a mechanism involving IL-4 production. This, in turn, would induce CD4+ T cell responsiveness to cysteinyl-leukotrienes and Th2 cell activation