Laminitis equina in vitro inducida por veneno entero y Fosfolipasa A2 de serpiente Bothrops alternatus de Argentina

Bothrops alternatus (yarará grande, víbora de la cruz) is a snake belonging to the Viperidae family and is widely distributed in Argentina. In the northeast, this snake group for the majority of the snakebite accidents. There are reports about envenomation in horses with clinical signs including swelling, hemorrhage, dermo and myonecrosis at the bite sight in addition to systemic effects such as impaired blood coagulation, hemorrhage and damage to vital organs. An additional consequence in the horse is laminitis which reduces the work capacity of the survivor on a long-term basis. This occurs independent of the site where the venom was injected. laminitis induces pain and claudication, and it can evolve to deform the hoof. This study uses explants from freshly slaughtered horses as an in-vitro assay from the limbs of normal horses in order to demonstrate the ability of Bothrops snake venom to cause laminitis. Explants were incubated with whole venom and phospholipases A2 (PLA2). The objective was to reproduce laminitis in vitro to corroborate the clinical data reported in snake venom accidents. Equine laminitis induced by whole venom was characterized by damage to the lamellar dermo-epidermal junction, loosening of the lamellar basement membrane and cytotoxic effects. Epidermal basal cells showed changes in the shape and size of their nuclei and other abnormalities.Bothrops alternatus (yarará grande, víbora de la cruz) es una serpiente perteneciente a la familia Viperidae, y se encuentra ampliamente distribuida en Argentina. En el nordeste de nuestro país, esta serpiente ocasiona el mayor número de accidentes. Existen reportes de envenenamiento en equinos, siendo sus signos y síntomas más importantes: inflamación y hemorragia, dermo y mionecrosis en el área de inoculación del veneno. Por otro lado, la acción sistémica consiste en incoagulabilidad sanguínea, hemorragia y lesiones de órganos que pueden comprometer la salud del animal. Una secuela, debida a la intoxicación por esta serpiente, es la laminitis, que afecta la capacidad de trabajo del equino, independientemente del sitio de inoculación del veneno, debido a la acción sistémica del mismo. Esta patología produce dolor, claudicación, que luego puede progresar con deformación del casco. Se efectuó un estudio in vitro, tomando como modelo  experimental muestras (explantes) de pie equino. Estas fueron incubadas con veneno entero y con Fosfolipasa A2 (PLA2) del mismo veneno con el objeto de reproducir laminitis a los efectos de corroborar datos clínicos reportados en accidentes por yarará como así también proponer una metodología de estudio de laminitis en explantes de pie equino. La laminitis inducida por el veneno entero se caracterizó por la separación de la unión dermo–epidérmica, desprendimiento de membrana basal y citotoxicidad y consecuentemente desprendimiento de unión dermo–epidérmica, permaneciendo las células basales epidérmicas con alteraciones en forma y tamaño de los núcleos, entre otras anormalidades. En contraste, las muestras incubadas con PLA2, las células basales epidérmicas mostraron anomalías citoplasmáticas y nucleares, pero con separación leve de la unión dermoepidérmica y presente solo en algunas áreas de las LES

Estudio epidemiológico y parasitológico de caracoles gigantes africanos (Lissachatina fulica) en Misiones, Argentina

El caracol L.fulica, está incluido en la lista de las 100 especies exóticas invasoras más dañinas del mundo. Siendo hermafrodita, crece y se reproduce a gran velocidad, presentando alta resistencia a variables ambientales, adaptabilidad a diferentes regiones, dieta polífaga y ausencia o desconocimiento de depredadores naturales. También puede producir daños importantes en cultivos agrícolas, hortícolas y ecosistemas nativos, así como actuar de transmisor de parásitos capaz de afectar a la salud pública. Con el fin de conocer y contribuir al estado actual del caracol L.fulica, se planteó evaluar su situación epidemiológica y parasitaria, así como sus implicancias en la salud pública de Misiones, Argentina. El trabajo se realizó entre los meses de diciembre de 2018 y diciembre de 2019, procediendo a la colecta, identificación morfológica y recolección de las conchillas de moluscos de la especie L.fulica y su materia fecal, para el posterior análisis parasitológico. Todos los moluscos colectados eran de Puerto Iguazú, Misiones. De un total de 201 moluscos se identificaron por género y especie tres grupos: Grupo 1 (G1): L.fulica (n=199); Grupo 2: Helix aspera (n=1) y Grupo 3: Bulimus sp (n=1). A todos los individuos del G1 se los clasificó según categorías de tamaños definidas como: Clase 1 (individuos recién eclosionados, hasta 10 mm, n=6); Clase 2 (juveniles de 10 a 40 mm, n=149), Clase 3 (adultos jóvenes de 40 a 70 mm, n=35) y Clase 4 (adultos >70 mm, n= 9). Del análisis parasitológico efectuado a los poo- les de materia fecal de L.fulica, se encontraron taxones parasitarios predominando larvas del orden Strongylida y larvas de vida libre sin especificar, como también se observaron huevos de nematodes del genero Ancylostoma sp. Se observaron protozoos correspondientes a quistes de Ameba sp, Giardia sp y ooquistes de Cystoisospora sp. Por su parte en el análisis de baba de 9 ejemplares adultos de L. fulica se encontraron taxones parasitarios de los órdenes Strongylida y Ascaridea, así como del genero Toxocara sp. También se observaron cristales de oxalato de calcio en muestras de baba. Por otra parte, en once localidades fronterizas de la Provincia Misiones, se realizaron 92 encuestas con el fin de evaluar el grado de conocimiento de la población, constatándose un desconocimiento de la problemática en un 67,4% de los casos encuestados. Teniendo en cuenta que los factores antrópicos son la principal causa de los saltos de dispersión de esta especie, es fundamental realizar trabajos de educación sanitaria para concientizar y prevenir futuras invasiones que conlleven a perjuicios sanitarios al ecosistema y a la agricultura. En ese contexto, a cada encuestado se le entregó material informativo y las recomendaciones brindadas por el parte del Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria de Argentina

Lesiones hepáticas inducidas por componentes volátiles de Senecio grisebachii (margarita del campo o primavera) en ratones

Los terpenos son compuestos volátiles que forman parte del aceite esencial de la planta Senecio grisebachii. Algunos terpenos son utilizados en distintas industrias (alimentos, cosméticos, artículos de limpieza). En este trabajo se estudiaron los efectos que causan los terpenos sobre el hígado de ratones. El extracto acuoso de flores frescas de Senecio grisebachii, que contiene terpenos, fue obtenido por destilación por arrastre con vapor de agua y administrado vía oral a ratones macho (n=10) de 20±2 g de peso a razón de 0,5 ml/ratón/día durante 30 días. Al final los animales fueron anestesiados con éter y sacrificados para obtener muestras de hígado, las que fueron procesadas por las técnicas histológicas clásicas para bloques parafinados, cortadas en 5µm y coloreadas con hematoxilina–eosina. Igual número de animales controles recibieron solo agua. A partir de los 10 días de iniciada la experiencia se presentó disminución en la consistencia de la materia fecal, pelo hirsuto, decaimiento, deshidratación y, hacia los 30 días, letargia y desplazamiento lento y ambaleante. El examen histopatológico mostró degeneración turbia e hidrópica y necrosis de los hepatocitos situados alrededor de la vena central y espacios porta, así como congestión y desorganización trabecular. Los resultados demuestran que los terpenos contenidos en Senecio grisebachii son hepatóxicos

Daño vascular inducido en el pie equino por veneno de la serpiente Bothrops diporus

Con el objeto de avalar la sensibilidad del veneno ofídico sobre la densa red vascular que irriga el pie equino, se analizaron los efectos in vitro de 50 μg de veneno, a través de biopsias de talones de 5 equinos de raza indefinida. Las muestras se incubaron en placas de cultivo celular conteniendo medio DMEM (Dulbecco´s Modified Eagle´s Medium). Un grupo de muestras operó como control y otro fue tratado con veneno, en estufa a 37ºC, con 5% de dióxido de carbono y 95% de humedad durante 24 y 48 h. Concluida la incubación, las muestras se fijaron en formaldehído bufferado y se procesaron con las técnicas clásicas para histopatología, siendo teñidas con HyE y PAS para su observación en microscopio óptico. Las muestras destinadas a microscopía electrónica de transmisión (MET) fueron tratadas por el método clásico. En los cortes coloreados (HyE) las arteriolas presentaron desprendimiento de células endoteliales, los núcleos fueron fuertemente basófilos, aumentados de tamaño y de forma redondeada. Las metaarteriolas presentaron disrupción de la pared vascular y separación de las capas que forman su túnica media, con macrocariosis endotelial. Las vénulas mostraron los mismos daños, manifestándose además la ruptura de la pared vascular. La técnica PAS permitió localizar daños a nivel de la membrana basal de las células endoteliales de todos los vasos sanguíneos estudiados. La MET reveló mitocondrias que resaltaban en puntos determinados del citoplasma, con aumento de la electrodensidad. Las vesículas pinocíticas citoplasmáticas mostraron tamaño variable, con distribución irregular; las uniones intercelulares estaban alteradas. El modelo experimental de biopsia, como cultivo primario, permitió el estudio de alteraciones en la red vascular inducidas por toxinas de veneno de serpiente, constituyendo una herramienta valiosa considerando que no afecta la salud del animal

Restablecimiento de un canino tras mordedura de serpiente “yarará” (Bothrops sp.) en Corrientes, Argentina

Se describen los síntomas y lesiones registradas en un perro mordido por una serpiente del genero Bothrops (“yarará”), en una zona rural cercana a la ciudad de Corrientes, Argentina. El veneno de esta víbora posee proteasas y fosfolipasas que inducen daño local (hemorragia, edema, necrosis), así como hemorragia sistémica por acción de hemorraginas y metaloproteinasas (lesión de paredes capilares), agravada por la incoagulabilidad generada por enzimas semejantes a la trombina, que consumen el fibrinógeno sanguíneo. El canino reveló hemorragia a través de dos orificios contiguos en una mejilla, la cual estaba dolorida, caliente y edematosa. No se registraron signos de hemorragia sistémica. Se administró suero antiofídico bivalente anti-Bothrops y dexametasona, acompañados de fluidoterapia para proteger a los riñones. El tiempo de coagulación activado se mantuvoprolongado hasta las 6 h, normalizándose a las 8 h de iniciado el tratamiento. Se postula que la precocidad de la intervención y el buen estado físico del animal fueron cruciales para su completa recuperación

IgG antibodies against phospholipase A2 from Crotalus durissus terrificus: cross-reaction with venoms from Bothrops species from Argentina

We examined the ability of IgG anti-crotalic PLA2 to cross-react with Bothrops spp. venoms, from snakes found in the northeast of Argentina. Immunoblotting and ELISA tests showed that IgG anti-crotalic PLA2 recognize antigens of bothropic venoms. Indirect hemolytic activity tests showed that the quantity of antibodies that neutralized 50% of Crotalus durissus terrificus venom (ED50: 2.1 mg IgG anti-crotalic PLA2/100 µg of venom) were also able to neutralize venom from other snakes in the following proportion: 34% of B. alternatus, 18% of B. diporus and 12% of B. jararacussu. Likewise, direct PLA2 activity neutralization tests showed a similar cross-neutralization pattern including 56% of B. alternatus, 29% of B. diporus and 30% of B. jararacussu. In addition, in a myotoxic activity neutralization test, measured by plasma activity of creatine kinase, 35% of B. alternatus venom and 26% of B. diporus venom were neutralized, while no neutralization was detected with B. jararacussu venom. This study presents original data concerning cross-reactions between bothropic venoms from Argentina and IgG anti-crotalic PLA2. Our results suggest that anti-crotalic PLA2 antibodies should not be used to neutralize PLA2 activity of B. alternatus, B. diporus and especially B. jararacussu venoms; nor to enrich commercial antivenoms against these Bothrops species

Cambios microscópicos en ganglios linfáticos de ratones inoculados con veneno de Bothrops alternatus

Echeverría, S.M.; Teibler, G.P.; Maruñak, S.L.; Lértora, W.J.; Leiva, L.C.: Cambios microscópicos en ganglios linfáticos de ratones inoculados con veneno de Bothrops alternatus. Rev. vet. 26: 2, 113-119, 201

Suspected natural lysosomal storage disease from ingestion of pink morning glory (Ipomoea carnea) in goats in northern Argentina

This study describes an occurrence of pink morning glory (Ipomoea carnea) intoxication in goats in northern Argentina. The clinical signs displayed by the affected animals were ataxia, lethargy, emaciation, hypertonia of the neck muscles, spastic paresis in the hind legs, abnormal postural reactions and death. The clinico-pathologic examination revealed that the affected animals were anemic and their serum level of aspartate aminotransferase was significantly increased. Cytoplasmic vacuolation in the Purkinje cells and pancreatic acinar cells was observed by histological examination. The neuronal lectin binding pattern showed a strong positive reaction to WGA (Triticum vulgaris), sWGA (succinylated T. vulgaris) and LCA (Lens culinaris). Although I. carnea is common in tropical regions, this is the first report of spontaneous poisoning in goats in Argentina.Facultad de Ciencias Veterinaria

Acción del propóleos sobre una levadura (Malassezia pachydermatis) aislada a partir de otitis externa canina

Malassezia pachydermatis es una levadura capaz de provocar micosisen seres humanos y animales. El propósito de este trabajo fue determinar la acción de extractosalcohólicos y acuosos de propóleos sobre cepas de dicho microrganismo, extraídas delconducto auditivo externo de 5 caninos. La levadura fue sembrada en la superficie de placasde agar Sabouraud que contenían distintas diluciones de propóleos, con sus correspondientescontroles alcohólicos. Los extractos acuosos no demostraron acciones inhibitorias sobre elcrecimiento de la levadura, pero algunos extractos etanólicos de propóleos impidieron su desarrollo,estableciéndose la concentración inhibitoria mínima en 0,30 mg/ml. Los resultadosindican que el producto ensayado puede resultar útil para el tratamiento de la otitis externaproducida por M. pachydermatis