UK B.1.1.7 variant exhibits increased respiratory replication and shedding in nonhuman primates.

The continuing emergence of SARS-CoV-2 variants calls for regular assessment to identify differences in viral replication, shedding and associated disease. In this study, African green monkeys were infected intranasally with either a contemporary D614G or the UK B.1.1.7 variant. Both variants caused mild respiratory disease with no significant differences in clinical presentation. Significantly higher levels of viral RNA and infectious virus were found in upper and lower respiratory tract samples and tissues from B.1.1.7 infected animals. Interestingly, D614G infected animals showed significantly higher levels of viral RNA and infectious virus in rectal swabs and gastrointestinal tract tissues. Our results indicate that B.1.1.7 infection in African green monkeys is associated with increased respiratory replication and shedding but no disease enhancement similar to human B.1.1.7 cases. ONE-SENTENCE SUMMARY: UK B.1.1.7 infection of African green monkeys exhibits increased respiratory replication and shedding but no disease enhancement

A single intranasal dose of chimpanzee adenovirus-vectored vaccine protects against SARS-CoV-2 infection in rhesus macaques

The deployment of a vaccine that limits transmission and disease likely will be required to end the coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic. We recently described the protective activity of an intranasally administered chimpanzee adenovirus-vectored vaccine encoding a pre-fusion stabilized spike (S) protein (ChAd-SARS-CoV-2-S [chimpanzee adenovirus-severe acute respiratory syndrome-coronavirus-2-S]) in the upper and lower respiratory tracts of mice expressing the human angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) receptor. Here, we show the immunogenicity and protective efficacy of this vaccine in non-human primates. Rhesus macaques were immunized with ChAd-Control or ChAd-SARS-CoV-2-S and challenged 1 month later by combined intranasal and intrabronchial routes with SARS-CoV-2. A single intranasal dose of ChAd-SARS-CoV-2-S induces neutralizing antibodies and T cell responses and limits or prevents infection in the upper and lower respiratory tracts after SARS-CoV-2 challenge. As ChAd-SARS-CoV-2-S confers protection in non-human primates, it is a promising candidate for limiting SARS-CoV-2 infection and transmission in humans

Hydroxychloroquine prophylaxis and treatment is ineffective in macaque and hamster SARS-CoV-2 disease models

open access articleWe remain largely without effective prophylactic/therapeutic interventions for COVID-19. Although many human COVID-19 clinical trials are ongoing, there remains a deficiency of supportive preclinical drug efficacy studies to help guide decisions. Here we assessed the prophylactic/ therapeutic efficacy of hydroxychloroquine (HCQ), a drug of interest for COVID-19 management, in 2 animal disease models. The standard human malaria HCQ prophylaxis (6.5 mg/kg given weekly) and treatment (6.5 mg/kg given daily) did not significantly benefit clinical outcome, nor did it reduce SARS-CoV-2 replication/shedding in the upper and lower respiratory tract in the rhesus macaque disease model. Similarly, when used for prophylaxis or treatment, neither the standard human malaria dose (6.5 mg/kg) nor a high dose (50 mg/kg) of HCQ had any beneficial effect on clinical disease or SARS-CoV-2 kinetics (replication/shedding) in the Syrian hamster disease model. Results from these 2 preclinical animal models may prove helpful in guiding clinical use of HCQ for prophylaxis/treatment of COVID-19

Human inflammatory dendritic cells use a non-cytosolic pathway for cross-presentation

La présentation d'antigènes exogènes sur les molécules du CMH de classe I, appelée cross- présentation, est essentielle pour l'induction des réponses T CD8 cytotoxiques. La manipulation de la cross-présentation est une stratégie thérapeutique attrayante, mais une meilleure compréhension des mécanismes impliqués est essentielle. Dans les cellules dendritiques (DC) de souris, la cross- présentation se fait par la voie «cytosolique» ou «vacuolaire», en fonction de la localisation intracellulaire de la dégradation de l'antigène. Nous avons déjà montré que la DC résidentes dans les organes lymphoïdes humains présentait par la voie cytosolique. L'importance physiologique de la voie vacuolaire dans la DC humaine qui sont trouvés in vivo reste peu claire. Pour répondre à cette question, nous avons analysé la capacité de la DC dérivées de monocytes générée in vivo à cross- présenter. En utilisant le Single Cell RNA-seq, nous avons d'abord confirmé l'identification des ascites tumorales DC comme des cellules dérivées de monocytes. Nous avons trouvé que les ascites DC et les macrophages cross-présentent efficacement, mais sont incapables de transférer des protéines exogènes dans leur cytosol. De plus, l'inhibition du protéasome n'a pas affecté la cross-présentation. Ces propriétés n'étaient pas dues au microenvironnement tumoral, car les homologues in vitro des ascites DC et des macrophages présentaient les mêmes propriétés. Nous concluons que les cellules humaines dérivées de monocytes cross-présentent exclusivement par la voie vacuolaire. Enfin, nous avons trouvé que les DC dans l’ascite étaient aussi efficaces que les DC des amygdales pour l'induction des cellules T CD8 cytotoxiques effectrices, alors que les macrophages dans l’ascite étaient de mauvais stimulateurs des cellules T CD8. Ces résultats auront des implications importantes pour les stratégies thérapeutiques visant à moduler la cross-présentation.The presentation of exogenous antigens on MHC class I molecules, termed cross-presentation, is essential for the induction of cytotoxic CD8+ T cells. In mouse, dendritic cells (DC) that arise from monocytes (mo-DC) during inflammation play a key role in cytotoxic T cell responses by cross- presenting antigens directly in peripheral tissues. Whether human naturally-occuring mo- DC can cross-present is unknown. To address this question, we have used human mo-DC directly purified from peritoneal tumor ascites. Using single-cell RNA-seq, we first confirm that ascites DC contain exclusively monocyte-derived cells. Both ascites mo-DC and macrophages cross- present efficiently, but are unable to transfer exogenous proteins into their cytosol. Inhibition of cysteine proteases, but not of proteasome, abolishes cross-presentation by mo-DC. We conclude that human monocyte- derived cells cross-present exclusively using a vacuolar pathway. Finally, we demonstrate that only ascites mo-DC, but not macrophages, efficiently induce effector cytotoxic CD8+ T cells. These results will have important implications for harnessing cross-presentation for therapeutic purposes

Les cellules dendritiques inflammatoires humaines utilisent une voie non-cytosolique pour la présentation croisée

The presentation of exogenous antigens on MHC class I molecules, termed cross-presentation, is essential for the induction of cytotoxic CD8+ T cells. In mouse, dendritic cells (DC) that arise from monocytes (mo-DC) during inflammation play a key role in cytotoxic T cell responses by cross- presenting antigens directly in peripheral tissues. Whether human naturally-occuring mo- DC can cross-present is unknown. To address this question, we have used human mo-DC directly purified from peritoneal tumor ascites. Using single-cell RNA-seq, we first confirm that ascites DC contain exclusively monocyte-derived cells. Both ascites mo-DC and macrophages cross- present efficiently, but are unable to transfer exogenous proteins into their cytosol. Inhibition of cysteine proteases, but not of proteasome, abolishes cross-presentation by mo-DC. We conclude that human monocyte- derived cells cross-present exclusively using a vacuolar pathway. Finally, we demonstrate that only ascites mo-DC, but not macrophages, efficiently induce effector cytotoxic CD8+ T cells. These results will have important implications for harnessing cross-presentation for therapeutic purposes.La présentation d'antigènes exogènes sur les molécules du CMH de classe I, appelée cross- présentation, est essentielle pour l'induction des réponses T CD8 cytotoxiques. La manipulation de la cross-présentation est une stratégie thérapeutique attrayante, mais une meilleure compréhension des mécanismes impliqués est essentielle. Dans les cellules dendritiques (DC) de souris, la cross- présentation se fait par la voie «cytosolique» ou «vacuolaire», en fonction de la localisation intracellulaire de la dégradation de l'antigène. Nous avons déjà montré que la DC résidentes dans les organes lymphoïdes humains présentait par la voie cytosolique. L'importance physiologique de la voie vacuolaire dans la DC humaine qui sont trouvés in vivo reste peu claire. Pour répondre à cette question, nous avons analysé la capacité de la DC dérivées de monocytes générée in vivo à cross- présenter. En utilisant le Single Cell RNA-seq, nous avons d'abord confirmé l'identification des ascites tumorales DC comme des cellules dérivées de monocytes. Nous avons trouvé que les ascites DC et les macrophages cross-présentent efficacement, mais sont incapables de transférer des protéines exogènes dans leur cytosol. De plus, l'inhibition du protéasome n'a pas affecté la cross-présentation. Ces propriétés n'étaient pas dues au microenvironnement tumoral, car les homologues in vitro des ascites DC et des macrophages présentaient les mêmes propriétés. Nous concluons que les cellules humaines dérivées de monocytes cross-présentent exclusivement par la voie vacuolaire. Enfin, nous avons trouvé que les DC dans l’ascite étaient aussi efficaces que les DC des amygdales pour l'induction des cellules T CD8 cytotoxiques effectrices, alors que les macrophages dans l’ascite étaient de mauvais stimulateurs des cellules T CD8. Ces résultats auront des implications importantes pour les stratégies thérapeutiques visant à moduler la cross-présentation

Human in vivo-differentiated monocyte-derived dendritic cells

International audienc

Aryl Hydrocarbon Receptor Controls Monocyte Differentiation into Dendritic Cells versus Macrophages

International audienceAfter entering tissues, monocytes differentiate into cells that share functional features with either macrophages or dendritic cells (DCs). How monocyte fate is directed toward monocyte-derived macrophages (mo-Macs) or monocyte-derived DCs (mo-DCs) and which transcription factors control these differentiation pathways remains unknown. Using an in vitro culture model yielding human mo-DCs and mo-Macs closely resembling those found in vivo in ascites, we show that IRF4 and MAFB were critical regulators of monocyte differentiation into mo-DCs and mo-Macs, respectively. Activation of the aryl hydrocarbon receptor (AHR) promoted mo-DC differentiation through the induction of BLIMP-1, while impairing differentiation into mo-Macs. AhR deficiency also impaired the in vivo differentiation of mouse mo-DCs. Finally, AHR activation correlated with mo-DC infiltration in leprosy lesions. These results establish that mo-DCs and mo-Macs are controlled by distinct transcription factors and show that AHR acts as a molecular switch for monocyte fate specification in response to micro-environmental factors