Cultura de apices caulinares de Musa sp. var. Maçã: estabelecimento, micropropagação e enraizamento in vitro

Através de vários experimentos objetivou-se estudar as melhores respostas da variedade de banana " Maçã" às técnicas de cultura de tecidos no que se refere ao tipo e dimensões dos explantes e ao meio de cultura para obtenção de uma maior taxa de multiplicação in vitro. Os ápices caulinares utilizados como explantes foram obtidos em cinco diferentes maneiras. Observou-se que os ápices caulinares com 0,7 cm de diâmetro basal por 1 cm de comprimento, dos quais foram retiradas as bainhas foliares, apresentaram maior número de brotos. O meio liquido com agitação foi o em que se observou um maior estímulo na brotação, superando o meio semi-sólido e o meio liquido sem agitação. A concentração de BAP testada que permitiu a obtenção de um maior número de brotos foi de 5.0 mg.l-1. Para o enraizamento, a concentração de 0,1 mg.l-1de ANA e AIB foi a mais adequada.The response of banana shoot tips var. "Maçã", were accessed for different micropropagation conditions such as media composition and explant type. Shoot tip apices were extracted in five different ways. Shoot tips without immature leaves with 0.7 cm in diameter and 1.0 cm in lenght, tended to produce a larger number of developing buds. The number of buds developed was higher in shoot tips grown in liquid media with agitation than in semi solid media. Shoot tips grown in static liquid media had the lowest number of buds developed. The lowest concentration of the growth regulator BAP to produce a higher number of buds was 5.0 mg.l-1. For rooting, the best concentration of NAA and IBA was 0.1 mg.l-1. This concentration rooted plants hi two weeks

Determinação de metodologia para oisolamento de protoplastos de tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort.)

A hibridação somática via fusão de protoplastos vem sendo utilizada no melhoramento de porta-enxertos de citros em diversos países. Nos Estados Unidos, vários estudos demonstram a eficiência de procedimentos no isolamento e cultivo de protoplastos dessa frutífera. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito do meio de cultivo de calos embriogênicos do porta-enxerto tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort.) sobre o isolamento de protoplastos, bem como sugerir alterações de procedimento. Os resultados mostram a possibilidade do isolamento de 1.4 x 10(6) a 4.7 x 10(6) protoplastos por grama de calos da espécie estudada. Verificou-se que, o subcultivo dos calos de tangerina Cleópatra em meio de cultura, sem reguladores 1 hora, sob condições de escuro a 120 rpm, proporcionou maior eficiência de isolamento de protoplastos (4.7 x 10(6) protoplastos/g de calo).Somatic hybridization has been used for citrus rootstock breeding in many countries. In USA, many reports had proved the efficiency of procedures for the isolation and culture of citrus protoplasts. This research was conducted to evaluate the efficiency of procedures of protoplast isolation using embryogenic callus of the Cleópatra mandarin rootstock. Alterations were proposed to increase protoplast isolation and culture method. Results show the possibility of a protoplast yield of 1.4 to 4.7 x 10(6) pps/g.f.w. for Cleópatra tangerine rootstock callus. Protoplast yield can be raised to 4.7 x 10(6) pps/g.f.w. if the embryogenic callus are grown in a medium supplemented only with 4% sucrose and pre-treated with 1% w/v macerozyme for 1 hour, at 120 rpm, in dark, is applied before protoplast isolation

Indução de mutação visando a redução de altura de planta e resistência às doenças no cultivar de trigo (Triticum aestivum L.) IAC-17

The objective of the present research was to obtain mutants with reduced plant height and resistance to diseases in wheat (Triticum aestivum L.), variety IAC-17, through gamma-irradiation. Seeds were irradiated with gamma-rays (35 krad) and the selection was started in the M2 generation. Three selected lines were compared to the control IAC-17 during three years, in seven trials carried out in several localities under or without irrigation. One mutant line showed significant reduction in plant height, less lodging and increased resistance to powdery mildew (Erysiphe graminis f. sp. tritici) This mutant also showed the same yield, yield components, tolerance to aluminium, cycle and reaction to Helminthosporium sativum, Puccinia graminis f. sp. tritici, P. recondita as the original variety. The results indicated the usefulness of the mutation breeding method to correct defects of simple inherited characters in oustanding commercial varieties.A redução na altura da planta e obtenção de resistência às doenças foi experimentada através da indução de mutação por raios-gama na variedade de trigo (Triticum aestivum L.) IAC-17. Sementes foram irradiadas com 35 krad e a partir da geração M2 iniciou-se a seleção. Três das linhagens selecionadas foram comparadas com o cultivar original IAC-17, durante três anos, em sete ensaios avançados realizados em vários locais, em condição de sequeiro e irrigação. Os resultados demonstraram a obtenção de um mutante que apresentou redução na altura da planta, tendência de sofrer menos acamamento e maior resistência a oídio (Erysiphe graminis f. sp. tritici). As demais características agronômicas avaliadas, tais como produção de grãos e seus componentes, reação ao Helminthosporium sativum, causador da mancha das folhas, reação a Puccinia graminis f. sp. tritici (ferrugem do colmo) e P. recôndita (ferrugem da folha), tolerância a alumínio e ciclo permaneceram inalteradas em relação a IAC-17. Os resultados indicaram a utilidade da indução de mutações por raios gama para a correção de defeitos de caracteres de herança simples em variedades elites

Isolamento e cultivo de protoplastos de porta-enxertos de citros

Protoplast isolation and growth of Citrus rootstock v. Cravo lime and Cleópatra mandarin were carried out Enzyme mixture was used to digest cell suspensions 7-10 times, following criterious purification. Protoplast culture was carried out in doplets of semi-solid (agarose 0.6% p/v) KM8p medium, in the dark, at 28 ± 1°C following density adjustment to 2 x 10(5) ppts/ml. Osmotic pressure reduction was acomplished for each growth every 10 days with a mixture in equal volumes of KM8p and KM8 medium in ratios of 2:1; 1:1; 1:2 e 0:3. Isolation produced 0.7 x 10(6) ppts/ml for Cleópatra mandarin and 0.5 x 10(6) ppts/ml for Cravo lime, with a viability between 86 to 92% and 73 to 80%, respectively. First cell divisions were recorded at the 8th. day of growth, with an inicial platting efficiency of 9% for Cleópatra mandarin and 5% for Cravo lime. Callus development was achived in 50 days upon transfer of microcalus to semi-solid MT medium.Realizou-se o isolamento e cultivo de protolastos de porta-enxertos de citros das variedades limoeiro Cravo e tangerina Cleópatra. Utilizou-se solução enzimática para a digestão da parede celular de células em suspensão (7 a 10 subcultivos em meio de cultura MT) e procedeu-se a purificação criteriosa. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado em meio de cultivo KM8p e na molaridade de 0.6 M, sob condições de escuro a 28 ± 1°C, após ajuste para a densidade de 2 x 10s ppts/mL A redução da pressão osmótica do meio de cultivo foi realizada a cada 10 dias na seguinte proporção de meio de cultura KM8p 0.6 M e KM8 (2:1, 1:1, 1:2, 0:3). Com relação aos resultados, obteve-se em média o isolamento de 0.7 x 10(6) ppts / ml de suspensões celulares de tangerina Cleópatra e 0.5 x 1O6 ppts / ml de suspensões de limoeiro Cravo, com uma porcentagem de viabilidade de 86 a 92% para a variedade Cleópatra e de 73 a 80% para o limoeiro Cravo. As divisões celulares começaram a ocorrer por volta do 8° dia após o plaqueamento, sendo obtida uma eficiência inicial de plaqueamento de 9% para a variedade Cleópatra e de 5% para o limoeiro Cravo. Aos 50 dias de cultivo, as colônias foram transferidas para meio semi-sólido MT, onde apresentaram ritmo acelerado de crescimento formando calos

Response of root explants to in vitro cultivation of marketable garlic cultivars

Garlic cultivars are sexually sterile under standard growth conditions, with direct implications for commercial production costs as well as breeding programs. Garlic is propagated commercially via bulblets, which facilitates disease transmission and virus load accumulation over vegetative generations. Tissue culture produces virus-free clones that are more productive, while keeping the desired traits of the cultivar. Consequently, this technique allows studies of garlic genetics as well as guarantees genetic conservation of varieties. We aimed at analyzing the in vitroregeneration of eight marketable cultivars of garlic using root segments as explants. For each genotype, bulblet-derived explants were isolated and introduced into MS medium supplemented with 2,4-D and 2-iP. Calli were transferred to MS medium supplemented with 8.8 mM BAP and 0.1 mM NAA (regeneration medium A), or with 4.6 mM kinetin alone (regeneration medium B). The calli were then evaluated for regeneration frequency after sixty days of in vitro cultivation. The noble cultivar \u27Jonas\u27 presented the highest rates of plant regeneration among the cultivars tested. The medium A, which contained auxin and cytokinin, induced the highest regeneration rates of all cultivars. The process described herein is simple, reproducible and can potentially be used as a tool in molecular breeding strategies for other marketable cultivars and genotypes of garlic

Avaliação de genótipos de trigo oriundos de cruzamento interespecífico e radiação gama no estado de São Paulo

Twenty three inbred HEXAPLOID wheat lines were evaluated. They were originated by selections made in populations submited to gamma radiation (27.5 krad), in the F4 generation, from the interespecific hybrid between BH-1146 (Triticum aestivum L.) and Anhinga "S" x Winged "S" (Triticum durum L.) and the cultivars BH-1146 and Yavaros "S" (T. durum L.). Nine trials were carried out with irrigation and in upland conditions. Several agronomic characteristics were assessed. Under laboratory conditions the genotypes were evaluated with respect to Al toxicity using nutrient solutions. Semidwarf lines 11 and 19, with moderate lodging resistance, medium cycle from emergence to flowering, tolerance to aluminum toxicity, were the most productive. Seven lines showed resistance to the causal agent of mildew, but all genotypes were susceptible to the causal agents of leaf spots. Some of the genotypes could be used in cross breeding as genetic sources for short plant, long head, large number of spikelets per head, large number of grains per head and per spikelet and for heavy grains. BH-1146 and seven from the 23 lines were considered the most tolerant to aluminum toxicity, presenting good regrowth after treatment in nutrient solutions with 10 nig/liter of Al+3.Foram comparadas entre si e com dois controles vinte e três linhagens hexaplóides originárias de seleções realizadas em população submetida à radiação gama (27,5 krad), em geração F4, do cruzamento interespecífico entre BH-1146 (Triticum aestivum L.) e Anhinga "S" x Winged "S" (T. durum L.). Em nove ensaios em condições de irrigação e de sequeiro, analisou-se uma série de características agronômicas. Em laboratório efetuaram-se estudos da tolerância ao alumínio. As linhagens 11 e 19 de porte médio, com moderada resistência ao acamamento, tolerantes à toxicidade de alumínio destacaram-se quanto à produção de grãos. Sete linhagens apresentaram moderada resistência ao agente causai do oídio. Todos os genótipos foram suscetíveis aos agentes causais das manchas foliares. Alguns dos genótipos poderiam ser utilizados em programas de cruzamento como fontes genéticas para plantas de porte baixo, de espiga comprida, de grande numero de espiguetas por espiga, maior número de grãos por espiga, e maior número de grãos por espigueta e de grãos mais pesados. BH-1146 e sete das linhagens foram considerados os genótipos mais tolerantes à toxicidade de alumínio por por exibirem crescimento radicular após serem cultivados em soluções nutritivas contendo 10 mg/litro de Al+3