Клинико-генетические характеристики лиcсэнцефалии 3-го типа, обусловленной мутациями в гене TUBA1A (OMIM: 611603)

Background. Lissencephaly (LIS) is a spectrum of malformations of the cerebral cortex that occur as a result of impaired migration of neuronal precursors to the cortical plate and the formation of furrows and convolutions in the post‑migration period of embryonic development. In recent years, a significant role of hereditary factors in the occurrence of LIS has been shown due to the improvement of methods of molecular genetic diagnostics. Today, 13 genetic variants have been identified in the LIS group, six of which are inherited autosomal recessively, five are autosomal dominant, and two are linked to the X chromosome. It is shown that 80 % of cases of hereditary LIS is caused by mutations in two genes: PAFAH1B1, which is responsible for the occurrence of the LIS 1 type with an au‑ tosomal dominant type of inheritance, and in the DCX gene, localized on the X chromosome. The rest of the genetic variants account for from 1 % to 5 % of cases of defects accompanied by dysgenesis of the cerebral cortex. In recent years, the number of works devoted to the analysis of clinical and genetic characteristics of monogenic variants of LIS has increased. The results of such studies will allow us to improve our understanding not only of the pathogenetic mechanisms of this group of diseases, but also of the molecular basis for the formation of brain structures in the normal embryonic period.Objective: to describe the clinical and genetic characteristics of three Russian patients with autosomal dominant LIS type 3 (OMIM: 611603) caused by mutations in the TUBA1A gene.Materials and methods. All patients were under observation in the consultative and diagnostic department of Research Centre for Medical Genetics. The diagnosis was established on the basis of clinical data, genealogical anamnesis, results of brain MRI, EEG night video monitoring and exome sequencing by NGS. The validation of the identified nucleotide substitutions and analysis of the disease segregation were performed using the Sanger direct automatic sequencing method.Results. The clinical and genetic characteristics of three patients with newly identified and previously described mutation in the TUBA1A gene were analyzed. Possible effects of new missense mutations in the gene on the function of the protein product of the gene are discussed.Conclusions. The results of the analysis of the clinical and genetic characteristics of the patients we observed contribute to the study of the polymorphism of clinical manifestations resulting from mutations in the TUBA1A gene. The previously stated assumption about a wide range of malformations of the brain in patients with mutations in this gene was confirmed, which should be taken into account when making a diagnosis.Введение. Лиcсэнцефалия (ЛЭ) – группа пороков развития коры головного мозга, возникающих в результате нарушения миграции предшественников нейронов к кортикальной пластинке, формирования борозд и извилин в постмиграционном периоде эмбрионального развития. В последние годы в связи с совершенствованием методов молекулярно-генетической диагностики показана значимая роль наследственных факторов в возникновении ЛЭ. Сегодня в группе ЛЭ идентифицировано 13 генетических вариантов, 6 из которых наследуются аутосомно-рецессивно, 5 – аутосомно-доминантно и 2 – сцепленно с Х-хромосомой. В 80 % случаев наследственные ЛЭ обусловлены мутациями в 2 генах: PAFAH1B1, ответственном за возникновение ЛЭ 1-го типа с аутосомно-доминантным типом наследования, и в гене DCX, локализованном на Х-хромосоме. На долю остальных генетических вариантов приходится от 1 до 5 % случаев пороков, сопровождающихся дисгенезией коры головного мозга. В последние годы увеличилось число работ по анализу клинико-генетических характеристик моногенных вариантов ЛЭ. Результаты исследований расширяют представления не только о патогенетических механизмах возникновения данной группы болезней, но и о молекулярных основах нормального формирования структур мозга в эмбриональном периоде.Цель работы – описание клинико-генетических характеристик 3 российских больных с аутосомно-доминантной ЛЭ 3-го типа (OMIM: 611603), обусловленной мутациями в гене TUBA1A.Материалы и методы. Все пациенты находились под наблюдением в консультативно-диагностическом отделении ФГБНУ «МГНЦ им. академика Н.П. Бочкова». Диагноз устанавливался на основании клиники, генеалогического анамнеза, результатов магнитно-резонансной томографии головного мозга, ночного видеоэлектроэнцефалографического мониторинга и секвенирования экзома методом NGS. Валидация выявленных нуклеотидных замен и анализ сегрегации заболевания проводились на основании использования метода прямого автоматического секвенирования по Сэнгеру.Результаты. Проведен анализ клинико-генетических характеристик 3 больных с описанной ранее и впервые выявленными мутациями в гене TUBA1A. Обсуждены возможные эффекты новых миссенс-мутаций в гене на функцию белкового продукта гена.Выводы. Результаты анализа клинико-генетических характеристик наблюдаемых нами больных вносят вклад в изучение полиморфизма клинических проявлений, возникающих в результате мутаций в гене TUBA1A. Подтверждено высказанное ранее предположение о широком спектре пороков развития головного мозга у больных с мутациями в этом гене, что должно учитываться при постановке диагноза

Роль кардиоферментов в диагностике инфекционных поражений сердца

Purpose: to evaluate the importance of increasing cardioenzymes in the diagnosis of infectious heart lesions.Object and methods: Under observation were 71 children aged 3 to 17 years (average age – 6.6 ± 0.4 years) who received treatment at the clinic of Pediatric Research and Clinical Center for Infectious Diseases. All children in the acute period of illness and 49 patients with follow-up history were identified with levels of creatine phosphokinase (CPK), MВ fractions of creatine phosphokinase (CPK-MВ), lactate dehydrogenase (LDH), C-reactive protein (CRP), aspartate aminotransferase (AST). Follow-up observation and examination of patients was performed after 1 month and after 1 year. All children were examined for a wide range of pathogens of acute respiratory viral infections, active herpes virus infections (EBV, CMV, HHV-6 type), B19 parvovirus, Chlamydophila pneumoniae, Mycoplasma pneumonia, enteroviruses and bacterial respiratory pathogens. All examined patients underwent electrocardiography and echocardiography.The results of the study. In the examined patients with an increased level of “cardioenzymes” (CPK-MВ, LDH, AST) against the background of acute respiratory infection (ARI), a wide range of diseases was established with damage to both the upper respiratory tract and lower (bronchitis, bronchiolitis, pneumonia), and also other infectious nosologies, including respiratory syndrome (infectious mononucleosis, enterovirus and parvovirus infection). The etiological structure was dominated by a group of herpesvirus (53%) and bacterial infections (25%), as well as their combinations. An analysis of the dynamics of the main biochemical and hematological parameters characterizing the severity of the systemic inflammation syndrome (leukocytes, SRE, CRP, CPK), as well as reflecting myocardial injuries and used in cardiology practice (CPK- MВ, LDH, AST), revealed a long-term (within 1 year observations) the preservation of a moderately elevated level of CPK-MВ, unlike other indicators that returned to normal within 1 month. An increase in CPK-MВ was recorded in 79% of patients with drip infections, while the average level of CPK-MВ in the total sample exceeded the normal values by 1.8-2.4 times.Conclusion. It was found that elevated levels of CPK-MВ and LDH can be used as criteria for the formation of dynamic observation groups and early rehabilitation.Цель: оценить значение повышения кардиоферментов в диагностике инфекционных поражений сердца.Материалы и методы. Под наблюдением находился 71 ребенок в возрасте от 3 до 17 лет, получавший лечение в клинике Детского научно-клинического центра инфекционных болезней. Всем детям в остром периоде заболеваний и 49 пациентам в катамнезе определяли уровни креатинфосфокиназы, МВ-фракции креатинфосфокиназы, лактатдегидрогеназы, С-реактивного белка, аспартатаминотрансферазы. Катамнестическое наблюдение и обследование пациентов проводили через 1 месяц и через 1 год. Все дети обследованы на широкий спектр возбудителей острых респираторных вирусных инфекций, активных герпес-вирусных инфекций (ВЭБ, ЦМВ, ВГЧ-6 типа), парвовирус В19, Chlamydophila pneumoniae, Mycoplasma pneumonia, энтеровирусы, бактериальных респираторных патогенов. Всем обследованным пациентам проводили электрокардиографию и эхокардиографию.Результаты. У обследованных пациентов с повышенным уровнем кардиоферментов (МВ-фракции креатинфосфокиназы, лактатдегидрогеназы, аспартатаминотрансферазы) на фоне острой респираторной инфекции установлен широкий спектр заболеваний с поражением как верхних, так и нижних дыхательных путей (бронхит, бронхиолит, пневмония), а также других инфекционных нозологий, включающих респираторный синдром (инфекционный мононуклеоз, энтеровирусная и парвовирусная инфекция). В этиологической структуре доминировала группа герпес-вирусных (53%) и бактериальных инфекций (25%), а также их сочетаний. Анализ динамики основных биохимических и гематологических показателей, характеризующих выраженность синдрома системного воспаления (лейкоциты, скорость оседания эритроцитов, С-реактивный белок), а также отражающих миокардиальные повреждения и применяющиеся в кардиологической практике (МВ-фракции креатинфосфокиназы, лактатдегидрогеназы, аспартатаминотрансферазы), выявил длительное (в течение 1 года наблюдений) сохранение умеренно повышенного уровня КФК-МВ, в отличие от других, нормализовавшихся в течение 1 месяца показателей. Повышение КФК-МВ регистрировали у 79% больных капельными инфекциями, при этом средний уровень КФК-МВ в общей выборке превышал нормальные значения в 1,8–2,4 раза.Заключение. Установлено, что повышенные уровни КФК-МВ и ЛДГ могут использоваться как критерии для формирования групп динамического наблюдения и ранней реабилитации.

Синдром системного воспаления в патогенезе респираторно-синцитиальной вирусной инфекции

The aim of the study was to obtain new biochemical data on the pathogenesis of respiratory syncytial viral infection (RSVI) in children.Object and methods: 60 children aged 1 month to 5 years, treated in the clinic of Pediatric Research and Clinical Center for Infectious Diseases, from which in 50 patients RNA RSV was isolated in smears from the oropharynx. The comparison group consisted of 10 children who failed to verify RSVI by laboratory methods. All children at admission and before discharge from the hospital (after-7-9 days) underwent a clinical blood test a Sysmex XP-300 hematology analyzer (Japan). Alpha-1-antitrypsin and alpha-2-macroglobulin were determined in blood serum by quantitative immunoturbidimetry on a biochemical analyzer CLIMA-15 (Spain) using Sentinel test systems (Italy). Determination of the amount of total protein, albumin and C-reactive protein in serum was carried out on an automatic analyzer Taurus (Instrumentation Laboratory, Italy) using reagents of the company «Vector-best» (Russia). The study of protein fractions in blood serum was carried out by capillary electrophoresis on the device Minicap company Sebia (France) with the help of test systems «Minicap Protein(e) 6» of the same manufacturer. The levels of cytokines (IL-6, IL-10) in serum were determined by ELISA on ELISA analyzer «INFINITI» (TECAN, Austria) using reagents firm «Vector-best» (Russia).Results: RSVI occurs with lesions of the lower respiratory tract in 42% of cases, with the development of complications in 44% of sick children. The study revealed a prolonged increase in serum alpha-2 fraction of globulins, immunoregulatory cytokines with pro-inflammatory (IL-6) and anti-inflammatory (IL-10) action and, which may indicate the presence of subacute inflammatory process associated with the persistence of RS-virus. Lower levels of gamma-globulin fraction, including the main specific and nonspecific immunoglobulins, in children with PCR-proven RSVI, both in the acute period and in the period of convalescence, probably can cause repeated RSV-diseases, as well as an increase in the risk of atopic diseases.Conclusion. The long-term increase in the level of subacute inflammation markers, established in the course of the study, even against the relieve of clinical picture of the disease, makes the question of developing an etiopathogenetic treatment of respiratory syncytial viral infection with the use of drugs with antiviral and anti-inflammatory action relevant.Цель: получение новых клинико-биохимических данных о патогенезе респираторно-синцитиальной вирусной инфекции у детей.Материалы и методы: 60 детей в возрасте от 1 месяца до 5 лет, получавших лечение в клинике Детского научно-клинического центра инфекционных болезней, из которых у 50 человек в мазках из ротоглотки выделена РНК РСВ. Группу сравнения составили 10 детей, у которых респираторно-синцитиальная вирусная инфекция не верифицирована лабораторными методами. Всем детям при поступлении и перед выпиской из стационара проведен клинический анализ крови на гематологическом анализаторе Sysmex XP-300 (Япония). В сыворотке крови методом количественной иммунотурбидиметрии на биохимическом анализаторе CLIMA-15 (Испания) с использованием тест-систем фирмы Sentinel (Италия) определяли альфа-1антитрипсин и альфа-2-макроглобулин. Определение количества общего белка, альбумина и С-реактивного белка в сыворотке крови проводили на автоматическом анализаторе Taurus (Instrumentation Laboratory, Италия) с применением реагентов фирмы «Вектор-Бест» (Россия). Исследование белковых фракций в сыворотке крови осуществляли методом капиллярного электрофореза на приборе Minicap фирмы Sebia (Франция) с помощью тест-систем «Minicap Protein(е) 6» той же фирмы-изготовителя. Уровень цитокинов (ИЛ-6, ИЛ-10) в сыворотке крови определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа на иммуноферментном анализаторе «INFINITI» (TECAN, Австрия) с использованием реагентов фирмы «Вектор-Бест» (Россия). Результаты: респираторно-синцитиальная вирусная инфекция протекает с поражением нижних дыхательных путей в 42% случаев, с развитием осложнений – у 44% больных детей. Установлено пролонгированное увеличение в сыворотке крови альфа-2 фракции глобулинов, иммунорегуляторных цитокинов, обладающих провоспалительным (ИЛ-6) и противовоспалительным (ИЛ-10) действием, что может свидетельствовать о наличии подострого воспалительного процесса, ассоциированного с персистенцией РС-вируса. Более низкий уровень гамма-глобулиновой фракции, включающей основные специфические и неспецифические иммуноглобулины, у детей с доказанной методом ПЦР респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией, как в остром периоде, так и в периоде реконвалесценции, вероятно, может обусловливать повторные заболевания респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией, а также увеличение риска развития атопических заболеваний. Заключение. Установленное в ходе исследования длительное повышение уровня маркеров подострого воспаления даже на фоне купированной клинической картины заболевания делает актуальным вопрос разработки этипатогенетического лечения респираторно-синцитиальной вирусной инфекции с применением препаратов с противовирусным и противовоспалительным действием.

Клинико-экономический анализ и оценка влияния на бюджет применения имплантируемых кардиовертеров-дефибрилляторов в Российской Федерации

Objective: to evaluate cost-effectiveness and budget impact of using single and dual chamber implantable cardioverter-defibrillators (ICD) adjunctive to the standard drug therapy (DT) compared to the standard DT alone for the primary and secondary prevention of sudden cardiac death (SCD).Material and methods. Original partitioned survival analysis model was developed to assess the cost-effectiveness of using ICD within the modelling horizon of 8 years. The following model outcomes were used: life years and quality-adjusted life years (QALY). Primary prevention model was focused on patients after myocardial infarction with left ventricular ejection fraction (LVEF) ≤30%, whilst secondary prevention model considered cardiac arrest survivors and/or patients diagnosed with ventricular tachycardia or ventricular fibrillation with LVEF ≤35%. The model summarizes treatment effect and costs for ICD and DT specific to the healthcare system of the Russian Federation (RF). The main scenario accounted for ICD implantation cost in accordance with general reimbursement price asserted in the high technology medical care list part 2 (HТMC 2). Additionally, alternative scenario of ICD reimbursement level was developed to account for general tariff split onto singleand dual-chamber ICD implantation reimbursement tariffs which can be financed through high technology medical care list part 1 (HТMC 1). Budget impact analysis compared the costs of using ICD within the current volume of the annual increase in ICD implantations and a threefold increased volume of ICD implantations.Results. By the end of the modelling period, additional 34% of patients survived in the ICD group compared to the DT group. Incremental cost-effectiveness ratio (ICER) per 1 QALY constituted 2.8 and 2.2 million rubles for primary and secondary prevention, respectively. ICER values are slightly above or lower than the willingness-to-pay threshold of 2.5 million rubles per 1 QALY in the RF in the segment of primary and secondary SCD prevention, respectively. Additional HТMC 1 scenario incorporating lower ICD implantation prices resulted in an average ICER drop by 13% compared to HTMC 2. Overall patient population requiring SCD prevention comprised of 7,161 and 3,341 patients in primary and secondary prevention, respectively. Budget impact analysis showed that threefold rise in the ICD implantations rate will require additional 648 million rubles for primary prevention cohort to provide additional 573 patients with ICD, and 230 million rubles for secondary prevention cohort with additional 267 patients covered with ICD. ICD reimbursement price drop within the HТMC 1 scenario will save 133 million rubles and allow to provide additional 143 patients with ICDs for a given budget.Conclusion. ICD is a cost-effective option of secondary prevention of SCD. Additional analysis of ICD reimbursement price drop drives ICER downwards to a considerable extent which in turn increases the accessibility of ICDs to patients. In scenario of ICD implantation financing within HТMC 1, ICD is established to be a cost-effective option for primary and secondary prevention of SCD in the RF.Цель: оценка клинико-экономической эффективности и анализ влияния на бюджет (АВБ) применения одно- и двухкамерных имплантируемых кардиовертеров-дефибрилляторов (ИКД) в сочетании со стандартной лекарственной терапией (ЛТ) по сравнению со стандартной ЛТ для первичной и вторичной профилактики внезапной сердечной смерти (ВСС).Материал и методы. Построена оригинальная модель распределенной выживаемости пациентов с риском ВСС для проведения анализа «затраты–эффективность» с горизонтом моделирования 8 лет. В качестве исходов модели были использованы годы жизни и годы жизни с поправкой на качество (англ. quality-adjusted life year, QALY). Модель первичной профилактики ВСС включала пациентов после инфаркта миокарда с фракцией выброса левого желудочка (ФВЛЖ) 30% и менее, модель вторичной профилактики ВСС – больных после остановки сердца и/или имеющих желудочковую тахикардию или фибрилляцию желудочков с ФВЛЖ 35% и менее. Модель позволяет прогнозировать затраты на лечение и исходы пациентов, использующих ИКД или ЛТ в условиях системы здравоохранения Российской Федерации (РФ). Основной сценарий учитывает стоимость имплантации прибора по единому тарифу для всех типов ИКД в рамках второго перечня высокотехнологичной медицинской помощи (ВМП 2). Дополнительно моделировали сценарий со снижением тарифа на имплантацию ИКД за счет разгруппировки существующего единого тарифа на два: для однои двухкамерных ИКД в отдельности в рамках первого перечня ВМП (ВМП 1). С помощью АВБ сравнивали затраты на использование ИКД в рамках текущего объема ежегодного прироста имплантаций ИКД и повышенного (трехкратного) объема прироста.Результаты. На конец горизонта моделирования дополнительный прирост выживаемости в группе ИКД по сравнению с группой ЛТ составил 34%. Инкрементальный показатель «затраты–эффективность» (англ. incremental cost-effectiveness ratio, ICER) за 1 QALY в основном сценарии составил 2,8 и 2,2 млн руб. в сегментах первичной и вторичной профилактики ВСС соответственно. Полученное значение по первичной профилактике незначительно превышает, а по вторичной профилактике находится ниже референтного значения ICER (порога готовности платить), составляющего в РФ 2,5 млн руб. за 1 QALY. Моделируемое снижение стоимости тарифа на установку ИКД в рамках перечня ВМП 1 улучшает затратную эффективность (снижает ICER) в среднем на 13% от сценария ВМП 2. Суммарная популяция пациентов, нуждающихся в первичной и вторичной профилактике ВСС, составляет около 7161 и 3341 человека соответственно. Моделирование трехкратного прироста числа ИКД по отношению к текущим объемам обеспеченности в АВБ позволяет дополнительно обеспечить 573 пациента в рамках первичной профилактики ВСС, затратив дополнительно 638 млн руб., и 267 пациентов в рамках вторичной профилактики ВСС при размере дополнительных затрат 230 млн руб. Снижение стоимости имплантации ИКД в сценарии ВМП 1 способствует повышению доступности данной технологии за счет высвобождения дополнительных средств в размере 133 млн руб., позволяющих выполнить дополнительные операции по установке приборов ИКД 143 пациентам при первичной и вторичной профилактике ВСС суммарно.Заключение. ИКД является затратно-эффективной технологией в сегменте вторичной профилактики ВСС. Снижение стоимости ИКД в результате разгруппировки тарифа ВМП 2 значительно повышает клинико-экономическую эффективность данной технологии и способствует ее доступности для пациентов. Таким образом, при финансировании имплантаций по разгруппированным тарифам в рамках перечня ВМП 1 ИКД является затратно-эффективной опцией первичной и вторичной профилактики ВСС в РФ

Фенотипическая вариабельность TRPV4-ассоциированных нейропатий и нейронопатий: серия клинических наблюдений

TRPV4‑associated neuromuscular diseases represent a clinical spectrum of neuropathies and motor neuron disorders. To date, 3 phenotypic forms are distinguished. There are Charcot–Marie–Tooth disease type 2C, distal hereditary motor neuropathy type 8 (DHMN8), scapulo‑peroneal spinal muscular atrophy (SPSMA). Here we report 3 families with DNMN8 and one family with SPSMA. In all cases, DNA‑analysis revealed single nucleotide variants in the TRPV4 gene previously reported as pathogenic. In 3 probands, a combination of signs of both motor and motor‑sensory neuropathies led to difficulties in the establishment of the clinical diagnosis. Patients had mild sensory disturbances in the feet, but in all of these cases nerve conduction study revealed normal sensory nerve action potentials. Considering the prevailing signs of motor neuropathy, these patients were diagnosed with DNMN8. Clinical signs of sensory disturbances are regarded as not  contradicting  the  diagnosis,  since  they  can  be  observed  in  various  forms  of  distal  motor  neuropathies. The clinical features of SPSMA in one patient corresponded to those previously described in the literature. The involvement of the shoulder girdle muscles and the peroneal muscles and neurogenic changes in needle electromyography allow suspecting SPSMA clinically. A distinctive features of TRPV4‑associated neuromuscular diseases are the vocal cords paresis, sensorineural hearing loss and respiratory failure, however they are not obligatory according to our clinical reports.TRPV4‑ассоциированные нервно‑мышечные болезни представляют собой клинический спектр состояний, в котором выделяют 3 фенотипические формы: болезнь Шарко–Мари–Тута 2С, дистальную наследственную моторную нейропатию 8‑го типа (ДНМН8), скапуло‑перонеальную спинальную мышечную атрофию (СПСМА). В настоящей публикации приводится описание 3 семей с ДНМН8 и 1 семьи с СПСМА, у которых ДНК‑диагностика выявила варианты нуклеотидной последовательности в гене TRPV4, ранее описанные как патогенные. У осмотренных нами 3 пробандов установление клинической формы заболевания вызвало затруднения в связи с сочетанием признаков как моторной, так и моторно‑сенсорной нейропатии. У больных отмечались легкие чувствительные нарушения в стопах, но при этом ни в одном из этих случаев не выявлено признаков вовлечения сенсорных волокон нервов рук и ног при электромиографии. С учетом преобладающих признаков вовлечения моторной порции периферической нервной системы по клиническим и электрофизиологическим данным этим больным установлен диагноз ДНМН8. Клинические признаки нарушения чувствительности расценены как не противоречащие диагнозу, так как известно, что легкие сенсорные нарушения могут отмечаться при разных формах дистальных моторных нейропатий. Клинические признаки СПСМА одной больной соответствовали ранее описанным в литературе. Сочетание поражения мышц плечевого пояса и перонеальной группы при наличии нейрогенного процесса по данным игольчатой электромиографии позволяет заподозрить данную форму болезни на клиническом этапе. Отличительными особенностями TRPV4‑ассоциированных нервно‑мышечных болезней являются парез голосовых связок, нейросенсорная тугоухость и дыхательная недостаточность. Однако, как показали наши наблюдения, эти нарушения не являются облигатными

THE FAMILY ECONOMY AND «THE MOTHER’S CAPITAL» AS FACTORS OF REPRODUCTIVE BEHAVIOR OF THE POPULATION IN THE URAL

In article concepts of «the family economy» and «the mother’s labor», their place in the system of division of public reproductive labor reveals. On the basis of the data of some concrete sociological researches, authors analyze social and economic motives of demographic behavior of young mothers in the Ural. Their attitude to «the mother’s capital» as to the factor of the decision of demographic problems in region is shown