Study of the adjuvant properties of preparations containing recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor

The relevance of the search for new vaccine adjuvants is growing along with the increase in the number of current vaccine preparations, especially those developed on the basis of proteins. Some cytokines are known to exert adjuvant properties. The present work is devoted to the study of adjuvant activity of recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (rhGM-CSF) and constructs based on it. Earlier, we developed a technology for isolation and purification of GM-CSF from the E. coli SG20050/p280_2GM producer strain, as well as a technology for conjugating polyglucin:spermidine complexes with rhGM-CSF. Double-stranded RNA was used to obtain molecular constructs on the basis of rhGM-CSF conjugate. To assemble constructs, the ratio of the components was calculated for one dose of the preparation to contain 5-40 mg of rhGM-CSF and 100 mg of double-stranded RNA. The effectiveness of the formation of molecular constructs was evaluated by dsRNA electrophoretic mobility shift in a 1% agarose gel. The effectiveness of the resulting adjuvants was determined in ELISA assays by measuring the titers of specific antibodies in mouse sera against ovalbumin or recombinant receptor-binding domain of the surface S protein of the severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (Delta variant (B.1.617.2). The experiments were carried out in 100 male BALB/c mice weighing 16-18 g. Mice were immunized twice, with a 14-day interval, by intramuscular injection of 200 mL per animal. Recombinant receptor-binding domain of the surface protein of SARS-CoV-2 was administered at a dose of 50 mg/animal, ovalbumin – at two doses – 1 mg or 5 mg/animal. Corresponding antigen was used as a positive control, a saline solution – as a negative control. It was shown that the maximum effect was achieved by immunization with a construct based on double-stranded RNA and rhGM-CSF conjugated to polyglucin-spermidine. The use of a conjugate without double-stranded RNA as an adjuvant also improved humoral response. The use of native rhGM-CSF did not increase the titers of specific antibodies. Thus, it was found that rhGM-CSF being a part of a polysaccharide conjugate or a molecular construct exerted an ability to enhance the humoral immune response to protein antigens

СЕМЕЙНЫЙ ГЕМОФАГОЦИТАРНЫЙ ЛИМФОГИСТИОЦИТОЗ

Family hemophagocytic lymphohistiocytosis (hemophagocytic syndrome) is a rare hereditary disease, which is based on a disturbance of the regulation of the immune response, leading to proliferation and activation of histiocytes, phagocytosis of peripheral blood cells. The most common mutations include – PRF1, UNC13D, STX11. Two cases of familial hemophagocytic lymphogystyocytosis in children of an early age from a single family, features of the course are described.Семейный гемофагоцитарный лимфогистиоцитоз (гемофагоцитарный синдром) – редкое наследственное заболевание, в основе которого лежит нарушение регуляции иммунного ответа, приводящее к пролиферации и активации гистиоцитов, фагоцитозу клеток периферической крови. К наиболее частым мутациям относят PRF1, UNC13D и STX11. Данное заболевание необходимо учитывать в дифференциальной диагностике сложных инфекционных болезней у детей. Представлены два случая семейного гемофагоцитарного лимфогистиоцитоза у детей раннего возраста из одной семьи и обзор литературы

Особенности новой коронавирусной инфекции у детей разного возраста

The new coronavirus infection (COVID-1 9) is a socially significant problem around the world. According to available statistics, complications are less common among children, asymptomatic or mild forms of the disease prevail more often.This article presents the features of the viral landscape of the upper respiratory tract in children with ARVI in a pandemic, the clinical and laboratory features of the course of COVID-1 9 in children of different ages.It was found that SARS-CoV-2 is detected only in a third (32.9%) of hospitalized patients with respiratory symptoms, in 4.3% of cases — in combination with seasonal CoV-OC43 / CoV-229E, in 1 1.6% — with other respiratory viruses. The most frequent source of infection with the SARS-Cov-2 were family members. Children with a moderate form of the disease predominated among the patients. The leading symptoms of COVID-19 were fever, catarrhal symptoms, as well as gastrointestinal manifestations and anosmia. A feature of the new coronavirus infection in newborns and children of the first month of life was the absence of fever and intoxication, the lack of expression of catarrhal manifestations when the colon is involved in the pathological process (colitis, rarely — hemocolitis). In the compete blood test in children under the age of one year, monocytosis prevailed, in children over 7 years old — leukopenia and accelerated ESR. Among the changes in the biochemical analysis of blood, the most common was an increased C-reactive protein.Новая коронавирусная инфекция (COVID-19) является социально-значимой проблемой во всем мире. По имеющейся статистике, среди детей реже встречаются осложнения и чаще преобладают бессимптомные или легкие формы заболевания.В данной статье представлены особенности вирусного пейзажа верхних дыхательных путей у детей с ОРВИ в условиях пандемии, клинико-лабораторные особенности течения COVID-19 у детей разного возраста.Установлено, что SARS-CoV-2 обнаруживается только у трети (32,9%) госпитализированных пациентов с респираторными симптомами, в 4,3% случаях — в сочетании с сезонными CoV-OC43/CoV-229E, в 11,6% — с другими респираторными вирусами. Источником заражения SARS-Cov-2 чаще являлись члены семьи. Среди пациентов преобладали дети со среднетяжелой формой заболевания. Ведущими симптомами COVID-19 являлись лихорадка, катаральные симптомы, а также гастроинтестинальные проявления и аносмия. Особенностью новой коронавирусной инфекции у новорожденных и детей первого месяца жизни являлось отсутствие лихорадки и интоксикации, невыраженность катаральных проявлений при вовлечении в патологический процесс толстой кишки (колит, редко — гемоколит). В гемограмме у детей в возрасте до года преобладал моноцитоз, у детей старше 7 лет — лейкопения и ускорение СОЭ. Среди изменений в биохимическом анализе крови наиболее часто встречалось повышение С-реактивного белка

Результаты 5-летнего мониторинга за циркуляцией сезонных коронавирусов у госпитализированных детей в препандемическом периоде

Coronaviruses can cause damage to various parts of the respiratory system, gastrointestinal tract, and other organs and systems.The aim of the study: to monitor the circulation of seasonal coronaviruses in hospitalized children in the pre-pandemic period.Materials and methods: real-time multiplex PCR was used to test samples of nasopharyngeal mucus from 2188 patients aged 1 monthto 17 years, hospitalized with acute respiratory infection in 2014—2018. The results are presented with the indication of the fractions (%) and the calculation of the 95% confidence interval according to Klopper-Pearson. The differences between the groups were evaluated using the Pearson χ2 test. The differences in the groups were considered statistically significant at the level of the criterion p< 0.05.Results: monitoring of the circulation of pathogens of acute respiratory viral infection (ARVI) during 5 epidemic seasons showed that the appearance of a new subtype of coronavirus in 2019 was preceded by a gradual displacement of influenza, RS-and bocavirus infections from the circulation due to a statistically significant increase in the proportion of seasonal coronaviruses from 3.6% in 2014—2015 to 10.8% in the prepandemic season 2018—2019 (p= 0.007). The circulation of seasonal coronaviruses had a distinct seasonality (november-april)with the peak of registration in february (28.4%) and march (36.7%). Seasonal coronaviruses were detected in 7.3% of hospitalized children with ARVI, with a predominance in the age groups under 2 years (58.2%) and 3—6 years (25.4%). Hospitalization was more often required for patients with lower respiratory tract lesions (58.2%), a fifth of which was pneumonia (21.8%). In most children, ARVI caused by coronaviruses occurred as a monoinfection (79.9%), combined infection with other pathogens was observed in 20.1% of cases with fluctuations from 18.2% to 28.6% in different epidemic seasons. Viral associations are most common in young children (85.2%).Коронавирусы могут вызвать поражение различных отделов дыхательной системы, желудочно-кишечного тракта, а также других органов и систем.Цель исследования: провести мониторинг за циркуляцией сезонных коронавирусов у госпитализированных детей в препандемическом периоде.Материалы и методы: методом мультиплексной ПЦР в реальном времени проведено тестирование образцов носоглоточной слизи 2188 пациентов в возрасте от 1 мес. до 17 лет, госпитализированных с острой респираторной инфекцией в 2014—2018 гг. Результаты представлены с указанием долей (%) и расчетом 95% доверительного интервала по Клопперу-Пирсону. Различия между группами оценивали с помощью критерия χ² Пирсона. Различия в группах считались статистически значимыми при уровне критерия p< 0,05.Результаты: мониторинг за циркуляцией возбудителей острой респираторной вирусной инфекции (ОРВИ) в течение 5-ти эпидемических сезонов показал, что появлению нового подтипа коронавируса в 2019 г. предшествовало постепенное вытеснение из циркуляции возбудителей гриппа, РС- и бокавирусной инфекции за счет статистически значимого увеличения доли сезонных коронавирусов с 3,6% в 2014—2015 гг. до 10,8% в препандемическом сезоне 2018—2019 гг. (р= 0,007). Циркуляция сезонных коронавирусов имела отчетливую сезонность (ноябрь-апрель) с пиком регистрации в феврале (28,4%) и марте (36,7%). Сезонные коронавирусы выявлялись у 7,3% госпитализированных детей с ОРВИ, с преобладанием в возрастных группах до 2 лет (58,2%) и 3—6 лет (25,4%).Госпитализация чаще требовалась пациентам с поражением нижних отделов респираторного тракта (58,2%), пятую часть из которых составляла пневмония (21,8%). У большинства детей ОРВИ, обусловленная коронавирусами, протекала в виде моноинфекции (79,9%), сочетанное инфицирование с другими возбудителями наблюдалось в 20,1% случаев с колебаниями от 18,2% до 28,6% в различные эпидемические сезоны. Вирусные ассоциации наиболее характерны для детей раннего возраста (85,2%

Клинико-иммунологическая оценка эффективности применения рекомбинатного интерферона альфа-2b в терапии детей, больных корью

The aim of the study was to assess the clinical and immunological efficacy of recombinant interferon Alfa-2b. Examined 34 children aged from 1 year to 7 years carrying medium to heavy degree of measles. All patients were not vaccinated against measles. In the treatment of 18 people (Control group) were used only basic therapy (pathogenic, symptomatic). At 16 people (Study group) used a combination therapy (basic + Viferon). As an antiviral agent used and immunotropic preparation of human recombinant interferon alfa-2b in the form of rectal suppositories – Viferon (OOO «Feron», Russia). Immunological patient survey was conducted in the dynamics of the disease – during the height (in 1-6 days the rash) and in convalescence period (10-16 days rash). Indicators of cellular immunity (leukocytes, lymphocytes, CD3 +, CD3 + CD (16 + 56) +, CD3 + CD4 +, CD3 + CD8 +, CD4 + CD8 +, CD3-CD8 +, CD3-CD (16 + 56), CD19 +, CD25 +, CD3 + HLA DR +, CD (16 + 56) + HLA DR +, HLA DR +, CD95 +) were evaluated by flow cytometry. To assess the production of IFN-α and IFN-γ in the samples of peripheral blood were cultured in the CO2 incubator for 18 hours at 37 C and 4% CO2. The supernatants of cell culture were investigated with the purpose of studying spontaneous and induced production of interferon alpha and gamma. The concentrations of interferon α and γ (IFNα, IFNγ) in the blood serum, as well as levels of spontaneous and induced cytokine production data of blood cells of sick children was determined by ELISA. All the children at the peak of the disease found a dramatic inhibition of cellular immunity and the production of cytokines, which is consistent with the concept of «measles anergy» accepted in the scientific literature. The period of convalescence oppression immunity indices remained, but it was less pronounced in the group of children treated with the drug of human recombinant interferon alfa-2b -Viferon. Clinical efficacy of Viferon in the treatment of patients with measles children characterized by rapid positive dynamics of symptoms of acute period (normalization of body temperature, reducing intoxication, catarrhal symptoms and severity of the syndrome exanthema). It was also found reduction in the incidence of complications, reduction in the average bedday and smooth during the period of convalescence later.Цель исследования – оценка клинико-иммунологической эффективности рекомбинантного интерферона альфа-2b. Проведено обследование 34 детей в возрасте от 1 года до 7 лет, переносивших среднетяжелую степень кори. Все пациенты против кори не привитые. В терапии 18 человек (группа сравнения) применяли только базисную терапию (патогенетическая, симптоматическая), у 16 человек (основная группа) применяли комбинированную терапию (базисная + Виферон). В качестве противовирусного и иммунотропного средства использовали препарат человеческого рекомбинантного интерферона альфа-2b в виде ректальных суппозиториев – Виферон (ООО «ФЕРОН», Россия). Иммунологическое обследование пациентов проводили в динамике заболевания – в периоде разгара (на 1–6-е сут высыпания) и в периоде реконвалесценции (на 10–16-е сут высыпания). Показатели клеточного звена иммунитета (лейкоциты, лимфоциты, CD3+, CD3+CD(16+56)+, CD3+CD4+,CD3+CD8+, CD4+CD8+, CD3-CD8+, CD3-CD(16+56), CD19+, CD25+, CD3+HLA DR+, CD(16+56)+ HLA DR+, HLA DR+, CD95+) оценивались методом проточной цитометрии. Для оценки продукции IFN-α и IFN-γ образцы периферической крови культивировали в СО2 инкубаторе в течение 18 ч при 37° С и 4% СО2. Супернатанты клеточной культуры исследовались с целью изучения спонтанной и индуцированной продукции интерферона альфа и гамма. Концентрации IFNα, IFNγ в сыворотке крови, а также уровни спонтанной и индуцированной продукции данных цитокинов клетками крови больных детей определяли иммуноферментным методом. У всех детей в периоде разгара болезни установлено резкое угнетение показателей клеточного иммунитета и продукции цитокинов, что согласуется с принятым в научной литературе понятием «коревая анэргия». В периоде реконвалесценции угнетение показателей иммунитета сохранялось, однако было менее выражено в группе  детей, получавших препарат Виферон. Клиническая эффективность применения Виферона в комплексной терапии больных корью детей характеризовалась быстрой положительной динамикой симптомов острого периода (нормализация температуры тела, снижение интоксикации, выраженности катарального синдрома и синдрома экзантемы). Установлено также снижение частоты развития осложнений, сокращение среднего койко-дня и гладкое течение периода поздней реконвалесценции

ОСТРЫЙ СТЕНОЗИРУЮЩИЙ ЛАРИНГОТРАХЕИТ ПРИ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ МОНОИНФЕКЦИЯХ У ДЕТЕЙ, ГОСПИТАЛИЗИРОВАННЫХ В СТАЦИОНАРЫ САНКТ-ПЕТЕРБУРГА

A comparative analysis of the development of acute stenosing laryngotracheitis (LSLT) in respiratory viral monoinfections in 1050 children, hospitalized in St. Petersburg hospitals. It was established that the clinical manifestations, severity and outcome of OSLT in viral monoinfections depend highly on the etiologic factor, the patient's age and his premorbid background. More often, stenoses of the larynx are provoked by parainfluenza viruses (26,7%), the next most important are the PC virus (22,3%) and adenoviruses (18,8%), but during epidemics the number of lesions of the larynx sharply increases, with influenza viruses as the main pathogen, reaching up to 31,1%. Boys (71,2%) suffer from LSLT more often than girls (28,8%). Burdened premorbid background were 88,1% of children.  Проведен сравнительный анализ развития острого стенозирующего ларинготрахеита (ОСЛТ) при респираторно-вирусных моноинфекциях у 1050 детей, госпитализированных в стационары Санкт-Петербурга. Установлено, что клинические проявления, тяжесть и исход ОСЛТ при вирусных моноинфекциях зависят с высокой долей вероятности от этиологического фактора, возраста пациента и его преморбидного фона. Чаще других стенозы гортани провоцируют вирусы парагриппа (26,7%), следующими по значимости являются РС-вирус (22,3%) и аденовирусы (18,8%), но в периоды эпид. подъема гриппа число поражений гортани возрастает, а основными возбудителями ОСЛТ становятся вирусы гриппа (31,1%). У мальчиков ОСЛТ регистрируется чаще, чем у девочек (71,2 и 28,8%). Отягощенный преморбидный фон был выявлен в 88,1% детей

Сотрудничество кафедр детских инфекций – основа успеха в борьбе за здоровье детей (к 70-летнему юбилею кафедры инфекционных болезней у детей педиатрического факультета РНИМУ имени Н.И. Пирогова Минздрава России)

For about 70 years, the Department of Pediatric Infections of the Pediatric Faculty of the Russian National Research Medical University named after N.I. Pirogov and the Department of Infectious Diseases in Children named after Professor M.G. Danilevich of St. Petersburg State Pediatric Medical University have been closely cooperating. Employees are actively studying clinical and pathogenetic, treatment and diagnostic, organizational and methodological infectious diseases in children. The results of clinical observations and scientific research have been published in monographs, teaching aids, scientific articles, guidelines.В течение 70 лет тесно сотрудничают кафедра инфекционных заболеваний у детей имени профессора М.Г. Данилевича СПбГПМУ и кафедра инфекционных болезней у детей педиатрического факультета РНИМУ имени Н.И. Пирогова. Сотрудниками активно изучаются клинико-патогенетические, лечебно-диагностические и организационно-методические аспекты инфекционных болезней у детей. Результаты клинических наблюдений и научных исследований опубликованы в монографиях, учебно-методических пособиях, научные статьях, методических рекомендациях

ЭТИОТРОПНАЯ ТЕРАПИЯ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ СО СТЕНОЗИРУЮЩИМИ ЛАРИНГОТРАХЕИТАМИ

Clinical-laboratory analysis of the effectiveness of VIFERON® (suppositories rectal) in children from 1 month up to 7 years with acute respiratory viral infections (ARVI), accompanied by acute stenosing laryngotracheitis (ASLT), hospitalized in Children's City Clinical Hospital №5 named after N.F. Filatov. We have found that the drug VIFERON® helps statistically significant reduction in the duration of all major clinical manifestations of the disease as a whole, and also reduces the severity and duration of clinical symptoms ASLT, and significantly contributes to the faster elimination of viral antigens.Проведен клиническо-лабораторный анализ эффективности препарата ВИФЕРОН® (суппозитории ректальные) у детей в возрасте от 1 мес. до 7 лет с острыми респираторными вирусными инфекциями (ОРВИ), сопровождающимися острым стенозирующим ларинготрахеитом (ОСЛТ), госпитализированных в ДГКБ №5 им. Филатова. Нами установлено, что препарат ВИФЕРОН® способствует статистически значимому сокращению продолжительности основных клинических проявлений заболевания, уменьшает выраженность и продолжительность клинических симптомов ОСЛТ, способствует более быстрой элиминации вирусных антигенов

ВЭБ-мононуклеоз у детей в современных условиях

EBV-mononucleosis is a widespread infectious disease, and also it is an urgent problem of the whole world. The purpose of the research was to study the clinical and laboratory features of EBV-mononucleosis in hospitalized children of different ages in modern conditions. Under the supervision were 136 children aged from 1 year to 18 years. All of the patients had typical and mainly (85%) moderate form of the disease, and 15% of them patients had a severe form of the disease. The results: more severe fever and lymphadenopathy were observed in children older than 3 years. Acute tonsillitis was present in all hospitalized children. Adenoiditis and hepatosplenomegaly were greater in the group of patients of a younger age. Hyperfermentemia was determined in more than half of patients, more often in children over 12 years old. In the hemogram leukocytosis and monocytosis were mostly noted. Atypical blood mononuclear cells were detected in 89% of patients. Patients got complex etiopathogenetic therapy.ВЭБ-мононуклеоз является широко распространенным инфекционным заболеванием, а так же актуальной проблемой во всем мире. Цель исследования — изучить клинико-лабораторные особенности ВЭБ-мононуклеоза у госпитализированных детей различного возраста в современных условиях. Под наблюдением находились 136 детей в возрасте от 1 г. до 18 лет. У всех больных диагностирована типичная, преимущественно (85%) среднетяжелая форма заболевания, у 15% пациентов выявлена тяжелая степень болезни. Результаты: более выраженный синдром лихорадки и лимфаденопатии наблюдались у детей в возрасте старше 3 лет. Острый тонзиллит присутствовал у всех госпитализированных. Аденоидит и гепатоспленомегалия были более выраженными у пациентов младшей возрастной группы. Гиперферментемия определялась более чем у половины пациентов, чаще у детей в возрасте старше 12 лет. В гемограмме чаще всего отмечались: лейкоцитоз и моноцитоз. Атипичные мононуклеары в крови были выявлены у 89% пациентов. Пациенты получали комплексную этиопатогенетическую терапию

System analysis within diagnostics of the hotels

Purpose. This article reflects the main problems of the hotel management development. Regularities of indoor and outdoor environment influence on the hotels and lodging properties functioning are set and the algorithm of the system task is developed. Methodology of research. Aggregative approach was realized to the research of hotels as a system defining subsystems and elements in it. Findings. Here is shown an algorithm within hotel diagnostics of the system task decision and analyzed the stage scheme of the hotel system’s research. Practical value. The use of the system analysis with hotels diagnostic at the Poltava region