Contrôle de la signalisation oncogénique du mutant L858R de l'EGFR par la protéine suppresseur de tumeur p14ARF dans les adénocarcinomes pulmonaires

Contrôle de la signalisation oncogénique du mutant L858R de l'EGFR par la protéine suppresseur de tumeur p14ARF dans les adénocarcinomes pulmonaires. Le récepteur à l'EGF (EGFR) est un oncogène puissant impliqué dans le développement des cancers du poumon. Dans ces cancers, la présence de mutations activatrices de l'EGFR (majoritairement L858R et Del19) est un facteur prédictif de réponse aux agents pharmacologiques qui ciblent spécifiquement ce récepteur (EGFR-TKI). Cependant, l'association entre réponse thérapeutique et mutation est plus complexe que prévue, soulignant la nécessité d'approfondir la compréhension des mécanismes moléculaires impliqués dans développement de ces cancers. Nous avons précédemment montré que la quasi-totalité des tumeurs pulmonaires avec des mutations activatrices de l'EGFR présente une expression faible ou indétectable de la protéine suppressive de tumeur p14ARF. Ces résultats nous ont conduites à émettre l'hypothèse que l'expression de p14ARF était un frein essentiel à l'expansion clonale de ces cellules. Nous décrivons pour la première fois une relation fonctionnelle entre p14ARF et du mutant L858R de l'EGFR dans laquelle p14ARF inhibe la croissance de cellules exprimant ce mutant en induisant leur apoptose. Les effets suppresseurs de tumeur de p14ARF impliquent une fonction pro-apoptotique originale de STAT3 qui conduit à l'inhibition de l'expression de la protéine anti-apoptotique Bcl-2. De plus, nous montrons que les cellules EGFR-L858R maintiennent leur avantage de croissance en inhibant l'expression de p14ARF et la signalisation pro-apoptotique STAT3/Bcl-2 qui en découle. Nos résultats identifient également p14ARF comme une nouvelle cible transcriptionnelle de STAT3, mettant ainsi en évidence une boucle de rétrocontrôle positif entre ces deux protéines qui pourrait entretenir la signalisation pro-apoptotique médiée par STAT3. Sur la base de ces résultats, nous suggérons que la réactivation de la voie p14ARF/STAT3/Bcl-2 pourrait être une nouvelle stratégie thérapeutique dans le traitement de ces cancers.Control of EGFR-L858R oncogenic signaling pathway by the p14ARF tumor suppressor in lung adenocarcinoma. The EGF receptor (EGFR) is a strong oncogene involved in lung carcinogenesis. In these cancers, sensitivity to inhibitors of the EGFR tyrosine kinase activity (EGFR-TKI) has been shown to be related to the presence of activating mutations in the TK domain of EGFR (mainly L858R and Del19). However, the association between mutations and responsiveness to EGFR-TKI based treatment is more complex than previously envisioned, underlying the pressing need to study thoroughly the molecular mechanisms of lung cancer growth. We previously showed that almost all lung cancer with EGFR activated mutations has very low or undetectable levels of the p14ARF tumor suppressor protein. These results led us to postulate that expression of p14ARF is an efficient break against clonal proliferation of these cells. We report for the first time a relationship between p14ARF and mutant EGFR-L858R in which p14ARF inhibits the growth of EGFR-L858R expressing cells by inducing apoptosis. The p14ARF tumor suppressor effects involve an original STAT3 pro-apoptotic function that drives the inhibition of the anti-apoptotic Bcl-2 protein. Moreover, we show that the EGFR-L858R mutant maintains their survival and proliferation characteristics by inhibiting p14ARF expression and consequently the STAT3/Bcl-2 pro-apoptotic pathway. Our results also identify p14ARF as a new transcriptional target of STAT3, therefore providing evidence of a positive feed-back loop that could maintain STAT3 pro-apoptotic pathway. Based on these data, we suggest that manipulation of this pathway could be a therapeutic strategy for lung cancer treatment.SAVOIE-SCD - Bib.électronique (730659901) / SudocGRENOBLE1/INP-Bib.électronique (384210012) / SudocGRENOBLE2/3-Bib.électronique (384219901) / SudocSudocFranceF

The ARF ru mor suppressor: structure, functions ans status in cancer

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P14 ARF inhibits the growth of lung adenocarcinoma cells harboring an EGFR L858R mutation by activating a STAT3-dependent pro-apoptotic signalling pathway

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Nuclear trafficking of EGFR by Vps34 represses Arf expression to promote lung tumor cell survival

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p14 ARF activates a Tip60-dependent ATM/ATR/CHK pathway in response to genotoxic stresses 2 Running title: ARF activates a Tip60-dependent DNA damage checkpoint 3

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A transcriptomic analysis of human centromeric and pericentric sequences in normal and tumor cells

Although there is now evidence that the expression of centromeric (CT) and pericentric (PCT) sequences are key players in major genomic functions, their transcriptional status in human cells is still poorly known. The main reason for this lack of data is the complexity and high level of polymorphism of these repeated sequences, which hampers straightforward analyses by available transcriptomic approaches. Here a transcriptomic macro-array dedicated to the analysis of CT and PCT expression is developed and validated in heat-shocked (HS) HeLa cells. For the first time, the expression status of CT and PCT sequences is analyzed in a series of normal and cancer human cells and tissues demonstrating that they are repressed in all normal tissues except in the testis, where PCT transcripts are found. Moreover, PCT sequences are specifically expressed in HS cells in a Heat-Shock Factor 1 (HSF1)-dependent fashion, and we show here that another independent pathway, involving DNA hypo-methylation, can also trigger their expression. Interestingly, CT and PCT were found illegitimately expressed in somatic cancer samples, whereas PCT were repressed in testis cancer, suggesting that the expression of CT and PCT sequences may represent a good indicator of epigenetic deregulations occurring in response to environmental changes or in cell transformation

L’EGFR nucléaire : un nouveau mode de signalisation dans les cancers

L’EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) est l’une des molécules les plus étudiées en biologie. Depuis son identification précoce et son clonage jusqu’à la découverte de son rôle dans le cancer, ces analyses ont été à la pointe de notre compréhension des récepteurs à activité tyrosine kinase et des signaux cellulaires qui médient l’homéostasie, mais qui, une fois surexprimés, facilitent la tumorigenèse. Si les fonctions biologiques de l’EGFR impliquent traditionnellement l’activation d’un réseau de signalisation à partir de la membrane plasmique, un autre mode de signalisation de l’EGFR a été mis en évidence dans lequel l’EGFR est transporté après endocytose de la surface cellulaire vers le noyau, où il agit comme régulateur transcriptionnel, transmet des signaux et intervient dans de multiples fonctions biologiques, notamment la prolifération cellulaire, la progression tumorale, la réparation et la réplication de l’ADN et la résistance aux thérapies anti-cancéreuses. Dans cette revue nous résumerons les connaissances actuelles sur le réseau de signalisation nucléaire de l’EGFR, en nous attachant à son acheminement au noyau, ses fonctions dans le noyau et à l’influence de celles-ci sur la progression du cancer, la survie et la réponse au traitement

Etude de l'interaction de la minaprine, un nouvel antidepresseur, avec le fonctionnement moleculaire du recepteur serotonergique 5-HT1

SIGLECNRS T Bordereau / INIST-CNRS - Institut de l'Information Scientifique et TechniqueFRFranc

Fonctions anti-prolifératives de la protéine suppressive de tumeur p14ARF dans les cancers broncho-pulmonaires (contribution de la protéine du rétinoblastome Rb)

Il est clairement établi que p14ARF fait 'partie d'un réseau linéaire p14ARF/MDM2Ip53 capable d'inhiber la croissance cellulaire en réponse aux activations oncogéniques. Cependant, son inactivation est fréquemment retrouvée dans les cancers broncho-pulmonaires exprimant une protéine p53 mutée ce qui nous a conduit à émettre l'hypothèse que p14ARF pouvait présenter des fonctions biologiques indépendantes de p53. Dans cette étude, nous avons montré que p14ARF est capable d'inhiber la croissance de lignées tumorales pulmonaires humaines nulles pour p53 en induisant un arrêt du cycle cellulaire en phase G2 précédant la survenue d'une apoptose, et conduisant à la régression de tumeurs in vivo chez la souris nude. Différents travaux nous ayant conduit à envisager la protéine du rétinoblastome (Rb) comme un médiateur de l'activité anti-proliférative de p14ARF indépendante de p53, nous avons recherché l'existence de relations directes entre ces deux protéines. Dans ce cadre, nous avons montré que l'acétylation de Rb médiée par l'histone acétyltransférase TipOO conduit à sa dégradation par le protéasome et avons mis en évidence qu'en inhibant ce processus, p14ARF stabilise la protéine Rb dans les cellules. Enfin, nous avons montré que le traitement de cellules tumorales bronchiques humaines avec des agents alkylants induit l'accumulation de Rb sous une forme hypoacétylée de façon dépendante de p14ARF. L'ensemble de ces travaux situe donc p14ARF comme un régulateur majeur de la croissance cellulaire quelque soit le statut de p53, et identifie donc un nouveau mécanisme par lequel p14ARF contrôle la voie Rb pour médier son activité anti-proliferative.GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / SudocSudocFranceF