Ligand-Independent Activation of the EGFR by Lipid Raft Disruption

Normal and immortalized keratinocytes demonstrate large aggregates of lipid rafts, detectable by membrane staining with fluorescently tagged cholera toxin (CTx). As lipid rafts are known to regulate the function of many surface receptors, we wished to investigate their impact on the EGFR in HaCaT cells. When rafts were disrupted by cholesterol sequestration with methyl-β-cyclodextrin (MβCD) or filipin III, EGFR rearranged into approximately micrometer large clusters outside the CTxbright raft aggregates. These clusters contained high concentrations of activated, tyrosine-phosphorylated EGFR exhibiting greatly reduced mobility in the fluorescence recovery after photobleaching experiments. EGFR activation led to the stimulation of extracellular signal-regulated kinase 2, the phosphorylated form of which translocated to the nucleus and stimulated growth of the MβCD-treated cells. Experiments with the specific antagonistic antibody proved that the activation of EGFR by lipid raft disruption occurred without the participation of the ligand. We hypothesize that cholesterol depletion leads to the release of EGFR from the damaged rafts into the small confined areas of the membrane, where the receptor molecules are likely to be spontaneously activated owing to a very high density and/or separation from the inhibitory factors remaining in the surrounding portions of the membrane

A new model of Time Expressions Detection and Annotation in Vietnamese : The hôm case.

International audienceWe describe our approach to build a new model of Time Expressions Recognition in Vietnamese, including a temporal reasoning tool in order to provide an automatic supervised learning system based on a socio-cultural linguistic approach. The Vietnamese morpheme hôm is taken for examplification of the impediments to be solved

Etude du récepteur de l'EGF dans les kératinocytes épidermiques en réponse au stress induit par la méthyl-bêta-cyclodextrine

L’épiderme constitue une des protections les plus importantes de l’organisme face à l’environnement extérieur. L’homéostasie de cette couche, constituée essentiellement de kératinocytes et localisée en surface de la peau, est maintenue par la balance entre la prolifération des kératinocytes de la couche basale et la desquamation des cellules mortes de la couche cornée. Parmi les éléments régulant cette homéostasie, le récepteur de l’EGF active de nombreuses voies de signalisation induisant tant la survie cellulaire que la prolifération ou encore la migration des cellules. Sa régulation par des régions membranaires particulièrement denses et riches en cholestérol nommées lipid rafts, en font un sujet d’étude crucial dans la physiologie du kératinocyte épidermique. En effet, la séquestration du cholestérol membranaire par la molécule heptasaccharidique méthyl-β-cyclodextrine induit l’activation du récepteur de l’EGF. Nos résultats indiquent que le retrait du cholestérol suite à un traitement d’une heure en présence de MβCD résulte en l’activation/désactivation de nombreuses voies de signalisation (EGFR, p38, Akt). La récupération des signalisations normales est cependant possible si les cellules peuvent re-synthétiser cet élément essentiel de la membrane plasmique lors de périodes de récupération. Nous nous sommes également intéressés aux évènements régulant l’activation du récepteur de l’EGF lors de la déplétion du cholestérol membranaire ainsi qu’à son processing suivant son activation. Nos résultats indiquent que l’activation de ce récepteur de l’EGF dépend du clivage et de la libération de l’amphiréguline dans le milieu extracellulaire mais également de processus indépendant de ligand. De plus, la sécrétion d’amphiréguline, plus importante suite au retrait du cholestérol membranaire, pourrait être due à l’activation successive d’une Src kinase et d’une métallo-protéase encore non-identifiées. Une fois le récepteur de l’EGF activé dans ces conditions, il forme des dimères et est internalisé suivant une cinétique relativement lente lors de la récupération qui suit la déplétion du cholestérol. Cette internalisation semble de plus être dépendante de l’activation de la MAPK p38 et se produit également lorsque les kératinocytes sont soumis à des stress relevant d’un point de vue physiologique pour l’épiderme comme des scratch ou une incubation en présence de DNFB, une molécule sensibilisante. Nos résultats suggèrent donc un double processus d’activation du récepteur de l’EGF en réponse à la déplétion du cholestérol (indépendant ou dépendant d’un ligand) ainsi qu’une éventuelle participation de ces régions membranaires dans la mise en place des réponses développées par les kératinocytes en situation de stress résultant notamment en l’internalisation du récepteur de l’EGF.(DOCMED02) -- FUNDP, 200

Toward Time Universals Identification in NooJ : A New Model of Time Recognition in Vietnamese

International audienceObjectives : • The semantic annotation of temporal expressions with Automatic processing of temporality for vietnamese component APTVC V 0.2.0 • The establishment of Universal Temporal Classes (UTC) • The implementation of this system in NOOJ to compute temporal relations between processe