PCR para detectar leptospiras patógenas en muestras clinicas animales

El Grupo de Investigación del Laboratorio de Leptospirosis (Centro de Referencia OIE) perteneciente al Instituto de Patobiología ubicado en el INTA de Castelar, trabajó en el marco del Proyecto Nacional de Sanidad Animal 1115052, Módulo Zoonosis reemergentes de impacto socio económico, en una PCR de tiempo final para la detección de ADN de leptospiras patógenas a partir de muestras clínicas de animales de producción.Esta PCR utilizó los cebadores modificados (primers): G1 (5'- CTG AATCGCTGTATAAAAGT) y G2 (5'-GGAAAACAAATGGTCGGAAG), éstos amplificaron una banda de 246-285pb a partir del ADN de todas las especies patógenas de Leptospira spp., exceptuando L. kirschneri. Los cebadores B64I (5'-CTGAATTCTCATCTCAACTC) y B64II (5'GCAGAAATCAGATGGACGAT) amplificaron un producto de 542-563 pb a partir de ADN de L. kirschneri. La mix para la reacciones de PCR, de volumen final de 50 μl estaba compuesta de la siguiente manera: 10X buffer: 500mM-KCL, 20mM MgCl2, 100mM-Tris/HCL, pH 9.0, 0.5 μl de una solución de 50μmol de cada primer, 0.5 μl de una mix conteniendo 10mM de cada desoxinucleico dATP, dTTP, dCTP,y dGTP, Taq polimerasa (0.5U) y agua destilada libre de nucleasas. De templado (molde) de ADN se utilizaron entre 2 μl. El programa de ciclado fue de 94ºC durante 5 minutos (desnaturalización), 34 ciclos de 94°C por 1,5 minutos, 55°C durante 1 minuto y 72°C durante 2 minutos, la extensión final fue de 72°C durante 7 minutos.Los productos de amplificación se analizaron por electroforesis en un gel de agarosa 2% teñido con bromuro de etidio y se utilizó un transiluminador de luz UV (Uvi Tec transiluminator BTS-20.M). Los tamaños de las bandas se determinaron con un marcador molecular de 100bp (Embiotech). Se incluyeron controles negativos para asegurar que no haya contaminación ambiental y un control positivo. Se probó esta PCR con muestras de órganos, suero y orina con resultados favorables. Esta herramienta diagnóstica permite discriminar si la leptospira es patógena o no.Fil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología Veterinaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Patobiología Veterinaria; ArgentinaFil: Brihuega, Bibiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentin

Leptospirosis en producciones de subsistencia de pequeños rumiantes

Fil: Brihuega, Bibiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Martinez, Mara Leila. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Romero, Graciela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

The coastal marine mollusks from northern Macanao Peninsula, Margarita Island, Venezuela

En este estudio se analiza la composición y distribución de los moluscos marinos litorales del norte de la península de Macanao, Isla de Margarita, recolectados entre febrero y mayo de 2007 en trece localidades. Las colectas se hicieron manualmente y con equipo ligero de submarinismo. Se estudiaron 2270 ejemplares, distribuidos en 68 familias, 106 géneros y 152 especies, representantes de las clases Bivalvia Linnaeus, 1758, Gastropoda Cuvier, 1797 y Polyplacophora Gray, 1821. Los gasterópodos fueron la clase dominante con 89 especies, siendo las especies con mayor distribución Lottia antillarum (Sowerby, 1831) y Purpura patula (Linnaeus, 1758) con 84,6%. En bivalvos (55) las especies con mayor distribución fueron Isognomom bicolor (C.B. Adams, 1845) con una presencia de 76,9% y Arca zebra (Swainson, 1833) con 69,2%; y en los polyplacophoros Chiton marmoratus Gmelin, 1791 y Chiton tuberculatus Linné, 1758 con 69,2% y Acanthopleura granulata (Gmelin, 1791) con 53,8%. Los valores más altos de diversidad, equidad y riqueza se obtuvieron en la localidad VII de El Faro de Punta Tigre II con un H´ de 3,8 bits/ind, J´ 0,80 y una riqueza específica de 83; y los más bajos en la localidad VIII de La Auyama con un H´ de 2,17 bits/ind J` 0,95 y 10 especies. De los gasterópodos, 40,4% fueron carnívoros y el resto 59,6% herbívoros. En la clase Bivalvia, 49 especies (89,7%) fueron filtradores suspensívoros y solo 6 (11,3%) colectores de materia orgánica depositada. En general esta elevada riqueza es producto de la heterogeneidad de ambientes y sustratos, la elevada productividad de sus aguas y el bajo grado de intervención antrópica en la mayoría de sus localidades.The composition and distribution of littoral marine molluscs from northern Macanao Peninsula, Margarita’s Island are studied. The samples were collected in thirteen sites between February and May 2007. The captures were performed manually and with the aid of snorkeling. Overall, 2270 individuals were studied. They were distributed among 68 families, 106 genera and 152 species, belonging to Bivalvia Linnaeus, 1758, Gastropoda Cuvier, 1797 and Polyplacophora Gray, 1821 classes. The Gastropods were the dominant class with 89 species, being Lottia antillarum (Sowerby,1931) and Purpura patula (Linnaeus,1758 ) the two species with greater distribution, present in 84.6% of the samples. Among the 55 bivalve species identified the ones with higher distribution were Isognomom bicolor (C.B. Adams, 1845) present in 76.9% and Arca zebra in 69.2% of the samples. For the Polyplacophora, Chiton marmoratus Gmelin, 1791 and C. Tuberculatus Linne, 1758 were present in 69.2% of the samples and Acanthopleura granulata (Gmelin, 1791) in 53.8%. The highest value in diversity, evenness and richness were obtained at the locality VII of El Faro de Punta Tigre II with (H`) 3.80 bits/ind, (J`) 0.80 and specific richness of 83. The lowest values were found at the locality VIII of La Auyama with (H`) 2.2 bits/ind (J`) 0, 95 and 10 species. Among the gastropods, 40.4% were carnivores and the rest (59.6%) were herbivores. In the class Bivalvia, 49 species (89.7%) were suspension feeders and only 6 (11.3%) were surface deposit feeders. All the species of Polyplacophora were herbivores. In general, this high specific richness is the result of the heterogeneity of environments and substrates, the richness of macroalgae, the high productivity of the waters and the low degree of anthropic intervention in most of the sites.Fil: Capelo, Juan Carlos. Fundación La Salle de Ciencias Naturales; VenezuelaFil: Rada, Martin. Universidad de Oriente; VenezuelaFil: Sole, Maria. Fundación La Salle de Ciencias Naturales; VenezuelaFil: Buitrago, Joaquin. Fundación La Salle de Ciencias Naturales; VenezuelaFil: Grune Loffler, Sylvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Narvaez, Jose. Fundación La Salle de Ciencias Naturales; Venezuel

Biofilm formation by Aquaspirillum spp. and saprophytic Leptospira spp. isolated from environmental source of Argentine

Leptospirosis is a zoonotic disease of global distribution, caused by bacteria of the genus Leptospira. These spirochetes are living organisms free of mud and water; pathogenic leptospires can survive several days in fresh water when pH and temperature are adequate. During 2016, water samples were collected from Callvú Leovú stream (Azul, Buenos Aires); samples were inoculated in liquid EMJH medium and incubated at 28° C for 90 days. Six isolates of saprophytic leptospires and six of spirils (Aquaspirillum spp.) were obtained. The isolates were inoculated in EMJH (liquid and semi-solid) medium and sterile stream water at 4-10° C and 28-30° C; development was observed periodically using dark field microscopy. Both bacteria (alone or together) grew exponentially in first three weeks in all media incubated at 28-30° C; the semi-solid medium was the most efficient at 28-30° C of incubation, and the bacteria remained viable after 16 weeks. At 4-8° C both bacteria remained undetectable but viable in media incubated at 4-8° C for three weeks until the temperature was optimal (thermal stimulation). Leptospires developed in all media used and remained viable for 112 to 168 days (at 4-8° C incubation) in liquid media. The formation of cellular aggregate between Leptospira spp. and Aquaspirillum spp. was independent at the incubation temperature. These results suggest that Aquaspirillum spp. coexists with the genus Leptospira in surface waters, and their presence may indicate possible circulation of leptospires.Instituto de PatobiologíaFil: Scialfa, Exequiel. Ministerio de Salud. División Zoonosis Rurales; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Agronomía; ArgentinaFil: Videla, Yanina. Ministerio de Salud. División Zoonosis Rurales; Argentina. Comisión de Investigaciones Científicas de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Quintana, Silvina. Instituto de Análisis Fares Taie; ArgentinaFil: Aguirre, Pablo. Ministerio de Salud. División Zoonosis Rurales; ArgentinaFil: Brihuega, Bibiana Felicitas. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentin

Discriminación genotípica de serovariedades del serogrupo Icterohaemorrhagiae pertenecientes a Leptospira interrogans (Spirochaetales: Leptospiraceae) y el análisis de distancias génicas mediante coordenadas principales

La leptospirosis es una zoonosis de amplia distribución mundial y de importancia en salud pública y veterinaria. El serogrupo Icterohaemorrhagiae toma importancia, ya que ha sido aislado con frecuencia en roedores y en casos clínicos de humanos, caninos, bovinos y porcinos; y se ha logrado aislar a partir de agua del rio Reconquista, provincia de Buenos Aires, Argentina. El objetivo de este estudio fue discriminar molecularmente entre las serovariedades Copenhageni e Icterohaemorrhagiae del serogrupo Icterohaemorrhagiae de importancia en Argentina, utilizando la técnica del análisis de repeticiones en tándem en múltiples locus (MLVA) y analizar las distancias génicas entre los genotipos determinados a partir de cepas aisladas de animales. Para ello, geno-tipificamos las 4 cepas referenciales del serogrupo Icterohaemorrhagiae de la especie Leptospira interrogans serovariedad Copenhageni cepa M20 y cepa Ictero I y de la serovariedad Copenhageni cepa RGA y cepa Fiocruz L1-130. Para este estudio se incluyeron 24 cepas aisladas de animales domésticos como silvestres. Logramos mediante esta técnica determinar un código numérico para cada serovariedad y así pudimos discriminar entre las serovariedades de este serogrupo. El análisis de coordenadas principales (PCoA) demostró la variabilidad génica existente entre las 4 cepas referenciales pertenecientes al serogrupo Icterohaemorrhagiae, el genotipo con mayor representación fue el serovar Copenhageni cepa Fiocruz L1-130 con un total de 13 cepas aisladas con ese perfil genético. Discriminar las serovariedades de este importante serogrupo nos permitirá en un futuro investigar si existen diferencias entre la sintomatología clínica y/o respuesta al tratamiento en los casos clínicos producidos por las distintas serovariedades del serogrupo Icterohaemorrhagiae discriminadas en este trabajo.Leptospirosis is the world`s most widely distributed zoonosis and of great importance in animal health and in public health. The relevance of the serogroup Icterohaemorrhagiae relies on the frequent isolation from rodents and from clinical cases of humans, canines, bovines and swine; and this serogroup was also isolated from water samples of the Reconquista river, Buenos Aires province, Argentina. The objective of this study was to discriminate molecularly between serovars Copenhageni and Icterohaemorrhagiae being of importance in Argentina, using Multiple Locus Variable number tandem repeats analysis (MLVA) and analyzing the genetic distances among genotypes obtained from animal isolates in this study. We genotyped the four referential strains of the serogroup Icterohaemorrhagiae belonging to the species Leptospira interrogans serovar Copenhageni strain M20 and strain Ictero I and of the serovar Copenhageni strain RGA and strain Fiocruz L1-130. In this study we included 24 strains isolated from animals domestic and wildlife. Using this technique we could determine numeric codes for each serovar and in this way, discriminate between serovars of this serogroup. The principal coordinates analysis (PCoA) showed the genetic variability of the four referential strains from the serogroup Icterohaemorrhagiae, the genotype with better representation was serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130 with 13 isolated strains with this genetic profile. Discrimination of the serovars from this important serogroup allows to establish differences between clinical signs and/or response to treatment in the clinical cases produced by different serovars of the serogroup Icterohaemorrhagiae successfully distinguished in this study.Instituto de PatobiologíaFil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Martinez, Mara Leila. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Romero, Graciela Noemi. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Brihuega, Bibiana Felicitas. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentin

Biofilm formation by Aquaspirillum spp. and saprophytic Leptospira spp. isolated from environmental source of Argentine

Leptospirosis is a zoonotic disease of global distribution, caused by bacteria of the genus Leptospira. These spirochetes are living organisms free of mud and water; pathogenic leptospires can survive several days in fresh water when pH and temperature are adequate. During 2016, water samples were collected from Callvú Leovú stream (Azul, Buenos Aires); samples were inoculated in liquid EMJH medium and incubated at 28° C for 90 days. Six isolates of saprophytic leptospires and six of spirils (Aquaspirillum spp.) were obtained. The isolates were inoculated in EMJH (liquid and semi-solid) medium and sterile stream water at 4-10° C and 28-30° C; development was observed periodically using dark field microscopy. Both bacteria (alone or together) grew exponentially in first three weeks in all media incubated at 28-30° C; the semi-solid medium was the most efficient at 28-30° C of incubation, and the bacteria remained viable after 16 weeks. At 4-8° C both bacteria remained undetectable but viable in media incubated at 4-8° C for three weeks until the temperature was optimal (thermal stimulation). Leptospires developed in all media used and remained viable for 112 to 168 days (at 4- 8° C incubation) in liquid media. The formation of cellular aggregate between Leptospira spp. and Aquaspirillum spp. was independent at the incubation temperature. These results suggest that Aquaspirillum spp. coexists with the genus Leptospira in surface waters, and their presence may indicate possible circulation of leptospires

Comparison of simple and economic DNA extraction methods for molecular diagnosis of leptospirosis in animals

La leptospirosis bovina es una importante enfermedad zoonótica cuyo diagnóstico molecular está ampliamentedivulgado. Sin embargo, no existe un método único de extracción de ADN para leptospiras patógenas a partir de muestras clínicas. Eneste trabajo se utilizó orina bovina contaminada con cultivo de Leptospira interrogans serovar Pomona Pomona para analizar el mejormétodo comparando: M1.) resina Chelex-100, M2.) papel FTA Whatman y M3.) hervido de la muestra (protocolo casero). De estas trestécnicas, la primera (M1) presentó la mayor sensibilidad al realizar la PCR de diagnóstico, detectándose hasta 2x102leptospiras/mL. Lametodología aquí planteada resultó tener buen rendimiento para la detección de leptospiras en muestras clínicas animales, aunque esnecesario su validación con mayor número y diversidad de muestras.Bovine leptospirosis is an important zoonotic disease whose molecular diagnosis is widely reported. However, there is not a unique method of extraction of DNA for pathogenic leptospires using clinical samples. In this study, bovine urine was contaminated with pure culture of Leptospira interrogans serovar Pomona Pomona in order to compare three of them: M1.) Chelex-100 resin, M2.) FTA Whatman paper and M3.) boiling of the sample (in-house protocol), being the first one the most sensitive when used in diagnostic PCR, detecting up to 2x102 leptospiras/mL. The methodology proposed in this study turned out to have good performance for the detection of leptospires in animal clinical samples, although it should be applied to a greater number of samples and in different stages of the pathology.Fil: Hamer, Micaela. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Saraullo, Vanina Rosa. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Brihuega, Bibiana. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Watanabe, Olivia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Martinez, Mara Leila. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; Argentin

Primer aislamiento de Leptospira borgpetersenii de un feto de jabalí (Sus scrofa)

La leptospirosis es una zoonosis mundial y es endémica en muchos países. Esta enfermedad se mantiene en la naturaleza por la infección renal crónica de los animales portadores; los roedores y otros mamíferos pequeños son los reservorios más importantes. Además, otras fuentes importantes de infección para el humano son los animales domésticos, como el ganado y los perros. El jabalí (Sus scrofa) es una especie introducida de Europa que está muy extendida en América y particularmente en el centro y sur de Argentina. Esta especie es muy valorada por los cazadores de la región y su carne se consume con mayor frecuencia. En muchos países del mundo (Europa, EE. UU. y Australia) se han realizado estudios sobre seroprevalencia, la seroreactividad no significa que el jabalí manifieste síntomas clínicos de leptospirosis o que los jabalíes sean reservorios de este patógeno bacteriano. Sin embargo, estos animales han estado en contacto con leptospiras en su entorno en el pasado. Este estudio tiene el objetivo de tipificar molecularmente la cepa aislada obtenida a partir de 4 fetos de jabalíes (Sus scrofa) provenientes de la Patagonia argentina. Se realizaron necropsias de los 4 fetos y se cultivaron muestras de riñones, hígado, bazo y pulmón en medios Fletcher y EMJH. Además, las muestras de hígado, bazo, pulmón y riñón de los fetos se procesaron y analizaron por inmunofluorescencia directa. Se utilizó el análisis de repeticiones en tándem de número variable de locus múltiple (MLVA) para caracterizar la cepa aislada. El perfil genético de la cepa de leptospira fue idéntica al perfil de Leptospira borgpetersenii serovar Castellonis Castellon 3 perteneciente al serogrupo Ballum. Hasta donde sabemos, este es el primer aislamiento de Leptospira spp. de un feto de jabalí.Leptospirosis is a worldwide zoonose and is endemic in many countries. This disease is maintained in nature by chronic renal infection of carrier animals, being rodents and other small mammals the most important reservoirs. Also, significant sources of human infection are domestic animals, such as livestock and dogs. The wild boar (Sus scrofa) is an introduced species from Europe which is widespread in America and particularly in the Center and South of Argentina. This species is highly valued by hunters in the region and their meat is consumed more often. In many countries of the world (Europe, USA and Australia) studies of seroprevalence have been carried out, the seroreactivity does not mean that the wild boar has clinical symptoms of leptospirosis or that wild boars are maintenance host of this pathogen. However, these animals have been in contact to leptospiras in their environment in the past. This study has the objective to molecularly genotype the pathogenic Leptospira sp. isolated strain obtained from fetuses of wild boars from Patagonia Argentina. Four fetuses were aborted from a wild boar (Sus scrofa) in Patagonia, the southern region of Argentina. Necropsy was performed of the 4 fetuses and samples of kidneys, liver, spleen and lung were cultivated in Fletcher and EMJH mediums. Also, samples of liver, spleen, lung and kidney of fetuses were processed and analyzed by direct immunofluorescence. Multiple Locus Variable number tandem repeats Analysis (MLVA) was used to characterize the isolated strain. The genetic profile of the isolated pathogenic Leptospira sp. strain was identical to the profile of Leptospira borgpetersenii serovar Castellonis Castellon 3, serogroup Ballum. To the best of our knowledge this is the first isolation of Leptospira spp. from a wild boar fetus.Instituto de PatobiologíaFil: Brihuega, Bibiana Felicitas. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Samartino, Luis Ernesto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Romero, Graciela Noemi. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Auteri, Carmelo Domingo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Martinez, Mara Leila. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Grune Loffler, Sylvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Development of a low-cost copro-LAMP assay for simultaneous copro-detection of Toxocara canis and Toxocara cati

Toxocariasis is a zoonotic disease caused mainly by Toxocara canis and Toxocara cati and diagnosis in dogs and cats is an important tool for its control. For this reason, a new coprological loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay was developed for the simultaneous detection of these species. The primer set was designed on a region of the mitochondrial cox-1 gene. Amplification conditions were evaluated using a temperature gradient (52°C to 68°C), different incubation times (15-120 min), and different concentrations of malachite green dye (0.004-0.4% w/v). The analytical sensitivity was evaluated with serial dilutions of genomic DNA from T. canis and T. cati adult worms, and with serial dilutions of DNA extracted from feces using a low-cost in-house method. The specificity was evaluated using genomic DNA from Canis lupus familiaris, Felis catus, Escherichia coli, Toxascaris leonina, Ancylostoma caninum, Echinococcus granulosus sensu stricto and Taenia hydatigena. The LAMP assay applied to environmental fecal samples from an endemic area showed an analytical sensitivity of 10-100 fg of genomic DNA and 10-5 serial dilutions of DNA extracted from feces using the low-cost in-house method; with a specificity of 100%. Additionally, the total development of the assay was carried out in a basic laboratory and per-reaction reagent cost decreased by ~80%. This new, low-cost tool can help identify the most common agents of toxocariasis in endemic areas in order to manage prevention strategies without having to rely on a laboratory with sophisticated equipment.Fil: Avila, Héctor Gabriel. Universidad Católica de Cuyo. Facultad de Ciencias Químicas y Tecnológicas. Laboratorio Provincial de Zoonosis Provincial; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis; ArgentinaFil: Risso, Marikena Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Ruybal, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Repetto, Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Butti, Marcos Javier. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Microbiología. Laboratorio de Parasitosis Humanas y Zoonosis Parasitarias; ArgentinaFil: Trangoni, Marcos David. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología Veterinaria - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Patobiología Veterinaria; ArgentinaFil: Perez, Veronica Mirtha. Gobierno de la Provincia de San Juan. Ministerio de Salud Publica. Direccion de Epidemiologia. Seccion Rabia y Zoonosis.; ArgentinaFil: Periago, Maria Victoria. Fundación Mundo Sano; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

First isolation of Leptospira borgpetersenii serovar Hardjo type Hardjo Bovis from a clinical case in cattle in Argentina

Se describe el primer aislamiento y la tipificación molecular de Leptospira borgpetersenii serovar Hardjo Bovis en Argentina, obtenido a partir de orina de vacas abortadas de un rodeo de cría ubicado en Saladillo, provincia de Buenos Aires. Los abortos coincidieron con un período de importantes inundaciones, en el que varios animales presentaron títulos serológicos sospechosos y posterior seroconversión. El porcentaje de abortos alcanzó el 3,5% del total del rodeo, compuesto por 1700 vacas, y se aisló el microorganismo en 7 de 20 muestras de orina obtenidas.We here describe the first isolation and molecular typing of Leptospira borgpetersenii serovar Hardjo Bovis in Argentina, obtained from urine of aborted cows from a breeding herd located in Saladillo, Buenos Aires Province. The abortions occurred in coincidence with important floods with many cows presenting suspicious serological titers and subsequent seroconversion. The percentage of abortions was 3.5% of a herd of 1700 cows and the microorganism was isolated from 7 of the 20 urine samples obtained.Fil: Koval, Ariel Alejandro. Biogénesis Bagó; ArgentinaFil: Brihuega, Bibiana Felicitas. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires; ArgentinaFil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: López, S.. Biogénesis Bagó; ArgentinaFil: Saint Martin, Marcos. Biogénesis Bagó; ArgentinaFil: Lagioia, Gustavo Germán. Biogénesis Bagó; ArgentinaFil: Insaugarat, Juan Ramón. No especifíca