Uso da bioengenharia para produzir substitutos cutâneos, por meio do cultivo de células-tronco e queratinócitos em matrizes nanoestruturadas produzidas por eletrospinning

A engenharia de tecidos (ET) é uma ferramenta importante para a regeneração da pele. Os tratamentos disponíveis não são suficientes para evitar a formação de cicatriz e promover a cura do paciente. Portanto, o presente estudo teve por objetivo produzir um substituto cutâneo usando o polímero Poli-D,L-ácido láctico (PDLLA) para produzir o biomaterial. Para esta proposta, biomateriais foram construídos pela técnica de electrospinning e divididos em 3 grupos: 1) PDLLA, 2) PDLLA/NaOH (scaffolds de PDLLA cuja superfície foi hidrolisada com uma solução de NaOH a 0,75 M) e 3) PDLLA/Lam (scaffolds também hidrolisados com NaOH e com a ligação covalente da proteína laminina). Os biomateriais foram construídos com dois diâmetros diferentes de fibras, com a menor na parte superior das matrizes. Esses biomateriais foram caracterizados quanto à morfologia, o diâmetro da fibra, o tamanho dos poros, à degradabilidade e às suas características de hidrofilicidade. A ligação da laminina também foi investigada. Para as análises biológicas, as células-tronco mesenquimais (CTMs) foram então semeadas na parte inferior do scaffold e, após 24 horas, os queratinócitos da pele foram semeados na superfície oposta. Os grupos foram avaliados quanto à adesão de células no dia da semeadura e nos dias 7, 14 e 21 para análise da viabilidade celular. A partir do dia 7, os scaffolds foram submetidos a um sistema de cultura ar/líquido. Por fim, experimentos in vivo também foram realizados utilizando camundongos nude como modelo animal de queimadura. Seis grupos foram testados: (1) grupo lesão, onde os animais foram lesionados e uma gaze foi utilizada como cobertura (n=4); (2) PDLLA/Lam, scaffold hidrolisado com a ligação da laminina, sem células; (3) PDLLA sem células, (4) PDLLA/Lam com células; (5) PDLLA com células (n=6/grupo) e (6) animais saudáveis (n=4). Todos os animais receberam o mesmo padrão de defeito de 1cm2 , realizado no dorso dos animais, com exceção do grupo 6. Após a cirurgia, os animais foram acompanhados por um período de 9 dias. As fotografias foram obtidas no dia da cirurgia e no dia da eutanásia. Após esse período, metade da lesão foi utilizada para análise de histologia e a outra metade para a análise de expressão gênica. Como resultados, os scaffolds apresentaram-se com fibras bem formadas e aleatoriamente distribuídas. A hidrólise não afetou substancialmente a estrutura das fibras, mas foi suficiente para a ligação da laminina. O diâmetro das fibras grossas variou de acordo com o scaffold, ficando entre 3,197 a 4,622 µm. O tamanho dos poros também variou de acordo com o biomaterial, ficando de 19,182 a 27,732 µm. As fibras finas apresentaram diâmetro médio de 574 nm e tamanho médio de poro de 3,444 µm. O biomaterial de PDLLA/Lam mostrou as características mais hidrofílicas entre os três grupos analisados. Matrizes de PDLLA apresentaram peso molecular de 105-87 Da no 14º dia de análise. As matrizes de PDLLA/NaOH e PDLLA/Lam apresentaram peso molecular de cerca de 40-50 Da, resultante do processo de hidrólise. A ligação da laminina foi confirmada por ensaio de imunofluorescência. Em geral, em termos de análise biológica, o grupo de PDLLA/Lam apresentou os melhores resultados para a adesão e viabilidade celular. A presença de ambos os tipos de células foi observada por meio da análise histológica em todos os grupos de scaffolds (ou biomateriais), até 21 dias de cultivo. Além disso, observou-se claramente que as células ocuparam toda a estrutura das matrizes, em todos os grupos estudados. Após 9 dias de experimentos in vivo, não houve diferença estatística no tamanho do defeito entre os grupos, embora os grupos com o biomaterial PDLLA/Lam tenham tido uma tendência ao menor tamanho de lesão, assim como o grupo PDLLA/Lam apresentou o melhor aspecto visual da ferida. A análise da expressão gênica para os grupos de biomateriais mostrou aumento considerável da expressão de TGFβ1, aumento de VEGF e balanço (ou equilíbrio) da razão BAX/Bcl-2, quando comparado ao grupo controle lesão. A análise histológica mostrou tecidos bem formados nos grupos onde biomateriais e biomateriais com células foram utilizados. Em alguns animais do grupo biomateriais com células, a epiderme foi formada em toda a extensão da ferida. Não houve formação de anexos de pele em nenhum dos animais testados. Em conclusão, os biomateriais, principalmente os grupos PDLLA e PDLLA/Lam, mostraram bons resultados para a co-cultura das células, com boa adesão celular e a presença de células viáveis. Esses biomateriais foram capazes de proporcionar o suporte para o crescimento das células, o que indica que eles podem ser biomateriais adequados para utilização na engenharia de tecidos.Tissue engineering (TE) is an important tool for skin regeneration. Currently available treatments are insufficient for preventing scar formation and promoting healing of the patient. Therefore, the current study has aimed to produce a cutaneous substitute using Poly- D,Llactic acid (PDLLA) polymer to produce the biomaterial. For this proposal, scaffolds were constructed by the electrospinning technique and divided into 3 groups: 1) PDLLA, 2) PDLLA/NaOH (PDLLA scaffolds hydrolyzed with a solution of NaOH 0.75M) and 3) PDLLA/Lam (also hydrolyzed with NaOH and in which the protein laminin was linked by covalent binding). They were constructed with 2 different fiber diameters, with the smallest at the top of the scaffold. These scaffolds were characterized by morphology, fiber diameter, pore size, degradability and their hydrophilicity features. Laminin linkage was also investigated. For biological analyses, mesenchymal stem cells were then seeded onto the bottom of the scaffolds and, after 24 hours, skin keratinocytes were seeded on the other side. The groups were evaluated for cell adhesion on the day of the seeding and on days 7, 14 and 21 for cell viability analysis. From day 7, the scaffolds were submitted to an air/liquid system culture. Finally, in vivo experiments were performed using nude mice as burn animal models. Six groups were tested: (1) animals injured without scaffolds (lesion group) in which gauze was used as a cover (n=4); (2) PDLLA/Lam, a hydrolyzed scaffold with the binding of laminin, without cells; (3) PDLLA without cells, (4) PDLLA/Lam with cells (n=6/group); (5) PDLLA with cells and (6) healthy animals (n=4). All the animals had a 1 cm2 defect performed on their backs, removing all the skin, with the exception of group 6. The scaffolds (or biomaterials) were implanted in the mice with burn imitation skin defects for up to 9 days. Photos were taken on the day of surgery and on the day of euthanasia. Two parts of the defect were taken for histology and gene expression analyses. The results showed scaffolds presenting well formed and randomly distributed fibers. The hydrolysis did not substantially affect the structure of the fibers but it was sufficient for laminin linkage. The fiber diameter varied for each biomaterial, being from 3.197 to 4.622 µm for the largest fibers. The pore size also varied accordind to the scaffold, being from 19.182 to 27.732 µm. The smallest fibers showed a diameter of 574 nm and a pore size of 3.444 µm. The PDLLA/Lam scaffolds demonstrated the greatest hydrophilic characteristics of the three groups. The molecular weight of the PDLLA matrices was approximately 105-87 Da on the 14th day of analysis. The PDLLA/NaOH and PDLLA/Lam scaffolds had a molecular weight of approximately 40-50 Da, as a result of the hydrolysis process. The linkage of the laminin was confirmed by immunofluorescence assay. In general, in terms of the biological analysis, the PDLLA/Lam group showed the best results for cell adhesion and viability tests. The presence of both types of cells was observed through histological analysis in the evaluation of all the groups up to 21 days of cultivation. Moreover, it was clearly observed that the cells occupied all the structure of the scaffolds in all the groups. After 9 days of in vivo experiments, defect size did not show statistical difference among the groups, although the groups with the PDLLA/Lam biomaterial had the lowest lesion size and the PDLLA/Lam group presented the best visual aspect of the wound. Gene expression analysis showed considerable increase of TGFβ1 expression, increased VEGF and balance of the BAX/Bcl-2 ratio, when compared to the lesion group. Histological analysis showed well-formed tissue in the groups where the biomaterials and biomaterials plus cells were used. In some animals in which biomaterials and cells were used, the epidermis was formed throughout the length of the wound. There was no formation of skin annexus in any of the animals tested. In conclusion, the PDLLA scaffolds, mainly the PDLLA/Lam groups, showed good results for the co-cultivation of the cells, with good cell adhesion and presence of viable cells. These biomaterials were capable of providing support for the growth of the cells, indicating that they can be suitable biomaterials for use in tissue engineering

Eventos marcadores associados à adesão ao tratamento para HIV/aids em um estudo de coorte

OBJETIVO: Analisar como eventos clínicos e sociais podem impactar na adesão ao tratamento antirretroviral para o HIV. MÉTODOS: Trata-se de um estudo de coorte histórica com 528 pacientes que realizaram o tratamento para o HIV em um serviço de assistência especializada em Alvorada, RS. Foram analisadas 3429 consultas executadas entre os anos de 2004 e 2017. Para cada consulta, foram coletados dados de características do tratamento e do quadro clínico dos pacientes. A adesão, aferida pelo autorrelato dos pacientes, foi o desfecho do estudo. O modelo de regressão logística via equações de estimação generalizadas foi utilizado para estimação das associações. RESULTADOS: 67,8% dos pacientes analisados possuem até 8 anos de estudos e 24,8% têm histórico de uso de crack e/ou cocaína. Entre os homens, estar assintomático [razão de chances (RC) = 1,43; IC95% 1,05–1,93], possuir mais de 8 anos de estudo (RC = 2,32; IC95% 1,27–4,23) e nunca ter usado crack (RC = 2,35; IC95% 1,20–4,57) estiveram associados à adesão. Para as mulheres, possuir mais de 24 anos (RC = 1,82; IC95% 1,09–3,02), nunca ter usado cocaína (RC = 2,54; IC95% 1,32–4,88) e estar em gestação (RC = 3,28; IC95% 1,83–5,89) aumentaram as chances de adesão. CONCLUSÕES: Além de características sociodemográficas definidas, eventos pontuais que podem ocorrer na trajetória de pacientes em tratamentos longos, como início de uma nova gestação e não apresentar sintomas, podem impactar nas chances de adesão dos pacientes ao tratamento.OBJECTIVE: To analyze how clinical and social events may impact adherence to antiretroviral treatment for HIV. METHODS: This is a historical cohort study with 528 patients who underwent treatment for HIV in a specialized care service in Alvorada, RS. A total of 3429 queries executed between the years 2004 and 2017 were analyzed. For each visit, data on treatment characteristics and the patients' clinical picture were collected. Adherence, as measured by patients' self-report, was the endpoint of the study. The logistic regression model via generalized estimating equations was used for estimating the associations. RESULTS: 67.8% of the patients analyzed have up to 8 years of education and 24.8% have a history of crack and/or cocaine use. Among men, being asymptomatic [odds ratio (OR) = 1.43; 95%CI 1.05-1.93], having more than 8 years of education (OR= 2.32; 95%CI 1.27-4.23), and never having used crack (RC = 2.35; 95%CI 1.20-4.57) were associated with adherence. For women, being older than 24 years (CR = 1.82; 95%CI 1.09-3.02), never having used cocaine (CR = 2.54; 95%CI 1.32-4.88) and being pregnant (RC = 3.28; 95%CI 1.83-5.89) increased the odds of adherence. CONCLUSIONS: In addition to defined sociodemographic characteristics, one-off events that may occur in the trajectory of patients on long treatment, such as starting a new pregnancy and not having symptoms, can impact patients' chances of treatment adherence

ATIVIDADES MOTORAS E JOGOS GIGANTES: RELATO DE EXPERIÊNCIA EM RUA DE LAZER

O estágio multidisciplinar I, do curso de educação física da Universidade do Oeste de Santa Catarina, foi realizado com crianças e pré-adolescentes no projeto de Rua de Lazer, desenvolvido pela Secretaria Municipal de Juventude Esporte e Lazer de Chapecó.  As ruas de lazer são realizadas nos sábados e domingos em diferentes bairros e locais, onde os participantes tem a oportunidade de se divertir com os brinquedos montados. Através da observação do estágio, percebeu-se a necessidade de atividades diferenciadas nas ruas de lazer. Buscou-se  um projeto de intervenção com o objetivo de desenvolver atividades motoras  e cognitivas nas crianças participantes. Na intervenção, as atividades foram aplicadas em dois locais diferentes, e os conteúdos desenvolvidos foram às atividades motoras e os jogos gigantes. A metodologia utilizada foram atividades em forma de circuito e ficavam a disposição para quem quisesse participar. A aplicação foi uma experiência interessante, pois verificou-se a importância das brincadeiras, o aprendizado e as emoções das crianças enquanto se divertem. Os participantes tiveram interesse em aprender, interagiram nas atividades, sentiram-se motivados e concentrados. A maioria das crianças conseguiam realizar sozinhas as atividades e outras sentiam mais dificuldade. Já os pré-adolescentes não tinham muita paciência nos jogos cognitivos para terminar a atividade. O estágio possibilitou vivenciar experiências, desenvolver atitudes, posturas e condutas profissionais, com estímulo ao senso crítico e à criatividade

HA-hybrid matrix composite coating on Ti-Cp for biomedical application

Calcium phosphate coatings have been applied to titanium metal substrates and their alloys as a synergistic alternative capable of combining the mechanical properties of metals and the excellent bioactive properties provided by ceramic materials. However, the unsatisfactory adhesion of hydroxyapatite coatings on metallic substrates, as well as their limitation when subjected to mechanical stresses have been reported as a limitation. Biofunctional coatings have been proposed as an alternative to single ceramic coatings, aiming at optimizing the long-term clinical success of biomaterials such as Ti. This work aims at evaluating the morphological properties and biological behavior of Ti-cp coated with matrix composite coating hydroxyapatite-containing hybrid. The hybrid matrix was obtained from TEOS and MTES silicon precursors, with dispersed hydroxyapatite suspended by dip coating. For the morphological characterization FTIR, SEM/FEG, AFM and contact angle measurement were used. Biological behavior was evaluated for toxicity, cell viability and the osteogenic differentiation capacity of mesenchymal stem cells. The composite coatings obtained showed regular dispersion of hydroxyapatite particles in the hybrid matrix, with uniform coating adhering to the Ti-Cp substrate. Nevertheless, although they provided similar viability behavior of mesenchymal stem cells to the Ti-Cp substrate, the evaluated coatings did not present osteoinductive properties. This result is probably due to the pronounced hydrophobic behavior caused by the incorporation of HA

INTERVENÇÃO DO LABORATÓRIO DE AVALIAÇÃO ANTROPOMÉTRICA NO WORKSHOP ESTRATÉGIAS DE ATENÇÃO AO IDOSO

O laboratório de avaliação antropométrica (LABAAN) do Curso de Educação Física da UNOESC Campus Chapecó participou do WorkShop Estratégias de atenção ao idoso com intuito de avaliar e orientar os idosos sobre a importância da prática de exercício físico.   O objetivo desse estudo é avaliar o índice de massa corporal (IMC) e flexibilidade dos idosos participantes do WorkShop Estratégias de atenção ao idoso. Participaram 24 idosos com idade média de 70,6 ± 7,2 que frequentaram o WorkShop. Para avaliar a massa corporal, a estatura e a flexibilidade foram utilizados respectivamente: 1) balança digital Toledo (São Paulo, Brasil); 2) estadiômetro Cescorf (Porto Alegre, Brasil); e 3) Banco de Wells Sanny (São Paulo, Brasil) para avaliar massa corporal, estatura e flexibilidade. Para analisar a composição corporal foi utilizado IMC, e a flexibilidade através do teste de sentar e alcançar. Todos os idosos realizam atividade física ao menos três vezes na semana. Os sujeitos apresentam estatura de 1,6 ± 0,1 metros, massa corporal, 70,3 ± 17,5 Kg, IMC, 27,8 ± 4,6 Kg/m² e flexibilidade 21,5 ± 9,8 cm. Os idosos estão classificados com sobrepeso de acordo com a IMC proposto pela Organização Mundial da Saúde e flexibilidade como bom.  Esses dados possibilitam orientar os idosos sobre riscos do excesso de peso, além de enfatizar a importância do exercício físico para melhorar essas capacidades físicas avaliadas, e subsequentemente, melhorar a sua qualidade de vida

INTERVENÇÃO DO CURSO DE EDUCAÇÃO FÍSICA DA UNOESC CHAPECÓ NO EVENTO DOMINGO NA PRAÇA

O Curso de Educação Física da UNOESC Chapecó-SC, participou do evento Domingo na Praça, promovido pela Prefeitura Municipal de Chapecó, no período vespertino do dia 02 de abril de 2017, com o intuito de avaliar e orientar as pessoas sobre a relevância da prática de exercício físico e cuidado com a saúde. Dessa forma, o objetivo do estudo é avaliar a flexibilidade, pressão arterial (PA), glicemia e índice de massa corporal (IMC) dos sujeitos.  Para tanto, foi utilizado o Banco de Wells Sanny (São Paulo, Brasil), com o teste de sentar e alcançar; o esfigmomanômetro Premium (China); medidor de glicose no sangue G-Tech Free (Rio de Janeiro, Brasil); balança digital Wiso (China) e estadiômetro Cescorf (Porto Alegre, Brasil) para a composição corporal, IMC. Na análise da flexibilidade, participaram 47 pessoas com idade média 44,44 ± 17,50 anos e flexibilidade 24,99 ± 9,22 cm. A aferição de PA contou com 74 sujeitos, idade média 46,49 ± 15,69 anos, cuja PA foi 119,86/78,97 ± 8,20/7,45 mmHg, considerada normal. Para o teste de glicemia casual, participaram 37 sujeitos com idade média 48,23 ± 14,93 anos, apresentando a glicose em valores 124,57 ± 26,02 mg/dL, classificada como normal. E, para o IMC, n=46, apresentaram a média de idade 43,74 ± 17,01 anos, estatura 1,61 ± 0,1 metros, massa corporal 72,02 ± 16,62 Kg e IMC 27,57 ± 5,24 Kg/m², sendo classificados com sobrepeso. Os dados apresentados possibilitam orientar as pessoas quanto aos riscos do excesso de peso e ressaltar a importância do exercício físico para melhorar a qualidade de vida, prevenindo doenças

TNFR2 maintains adequate IL-12 production by dendritic cells in inflammatory responses by regulating endogenous TNF levels

Sepsis-induced immune reactions are reduced in TNF receptor 2 (TNFR2)-deficient mice as previously shown. In order to elucidate the underlying mechanisms, the functional integrity of myeloid cells of TNFR2-deficient mice was analyzed and compared to wild type (WT) mice. The capacity of dendritic cells to produce IL-12 was strongly impaired in TNF-deficient mice, mirroring impaired production of IL-12 by WT dendritic cells in sepsis or after LPS or TNF pre-treatment. In addition, TNFR2-deficient mice were refractory to LPS pre-treatment and also to hyper-sensitization by inactivated Propionibacterium acnes, indicating habituation to inflammatory stimuli by the immune response when TNFR2 is lacking. Constitutive expression of TNF mRNA in kidney, liver, spleen, colon and lung tissue, and the presence of soluble TNFR2 in urine of healthy WT mice supported the conclusion that TNF is continuously present in naïve mice and controlled by soluble TNFR2. In TNFR2-deficient mice endogenous TNF levels cannot be balanced and the continuous exposure to enhanced TNF levels impairs dendritic cell function. In conclusion, TNF pre-exposure suppresses secondary inflammatory reactions of myeloid cells; therefore, continuous control of endogenous TNF by soluble TNFR2 seems to be essential for the maintenance of adequate sensitivity to inflammatory stimuli