Caracterización del epítope sulfatado presente en el dominio C-Terminal de la cruzipaína, cisteína proteasa mayoritaria de trypanosoma cruzi y su participación en la infección y en la inmunopatogénesis de la enfermedad de Chagas

Fil: Soprano, Luciana Lía. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, ArgentinaPara llevar a cabo este estudio, se purificaron los antígenos a homogeneidad, se sometieron a\ntratamientos de desulfatación y se inmunizaron conejos y ratones con las moléculas tal cual y desulfatadas. La cruzipaína, cisteína proteinasa principal de Trypanosoma cruzi, contiene oligosacáridos sulfatados de alta manosa como componentes de esta glicoproteína. Hemos\ndeterminado previamente que estos grupos sulfato son blancos de respuestas inmunes específicas.\nCon el fin de evaluar los requerimientos estructurales para el reconocimiento inmune y teniendo en cuenta que el epitope de Cz sulfatado aislado no esta disponible en cantidades suficientes para desarrollar estudios sistemáticos de estructura-actividad, llevamos a cabo un análisis indirecto de las\ncaracterísticas químicas necesarias para la unión de los anticuerpos al epítope sulfatado de la Cz\nmediante inmunoensayos. Con este objetivo, diferentes moléculas sintéticas fueron acopladas a la/las proteínas BSA y aprotinina y confrontadas con: i) sueros de ratones específicos para Cz y C-T, ii) anticuerpos producidos en conejos inmunizados con Cz y C-T , y iii) IgGs purificadas a partir de\nsueros de pacientes con Enfermedad de Chagas crónica. Nuestros resultados indicaron que una glucosamina conteniendo un grupo sulfato esterificado en posición O-6 y un grupo N-acetilo fue el epítope preferido para el reconocimiento inmune del suero específico para Cz y su dominio Cterminal.\nSi bien en menor grado, otros compuestos que contienen diferentes grupos aniónicos cargados fueron también reconocidos. Finalmente, nuestros hallazgos mostraron que la afinidad del C-T por los anticuerpos IgGs purificados de suero de ratón específico para este dominio, así como\ntambién de sueros de pacientes con Enfermedad de Chagas es inhibida por el azúcar sintético aniónico\nNAcGlc6SO3, evidenciando que estos motivos carbohidrato sulfatados juegan un rol central en la\nunión de este antígeno mayoritario a sus anticuerpos específicos, imitando al epitope sulfatado de la Cz ubicado en los N-glicanos de la extensión C-terminal de la molécula de Cz. La caracterización del\nepítope sulfatado de la cruzipaína hizo posible el estudio de una serie de inmunizaciones con el\ndominio C-T, el epítope sulfatado y con IgGs sulfato-específicos. Se inmunizaron ratones BALB/c con C-T y C-Td. Los inmunizados con C-T mostraron relación IgG2a/IgG1<1, bajos niveles de IL-4 y elevada concentración de IFN-?.por ELISA de captura usando C-T como estímulo y un perfil de citoquinas compatible con una respuesta mixta con tendencia Th2 con niveles excesivamente\nelevados de IFN? e IL-17. Los inmunizados con C-Td presentaron una IgG2a/IgG1<1; IL-4\nindetectable, bajo nivel de IFN-? y un perfil de citoquinas similar al control con IL-10\nsignificativamente elevado. Se observaron alteraciones ultraestrucurales cardíacas y mayor inmunoreconocimiento\nde fibrillas y mitocondrias en inmunizados con C-T con suero policonal anti-Cz y anti-Cz/d ads con miosina. Luego del desafío subletal se observaron parasitemias elevadas. La\nmortalidad fue del 20% en inmunizados con C-T y 80% en inmunizados con C-Td, observando\nseveras alteraciones musculares en los sobrevivientes del grupo C-Td. Se acopló a BSA NAcGlc6SO3\ny NAcGlc. Los inmunizados con BSA-NAcGlc6SO3 montaron una respuesta inmune con predominio de IgG1 e IgG2b seguido de IgG2a, y respuesta celular T de memoria, mientras en el grupo BSANAcGlc\npredominó IgG2a. Luego de la infección subletal, los inmunizados con el epítope sulfatado desarrollaron parasitemias excesivamente elevadas y niveles similares de IFN-? que el grupo BSANAcGlc\nque presentó ~70 % de mortalidad. Se purificaron IgGs a partir del suero de los inmunizados\ncon BSA-NAcGlc6SO3 y de ratón pre-inmune y se hizo tratamiento por tranferencia pasiva de\nanticuerpos. Los ratones que recibieron IgGs sulfato-específicos presentaron alteraciones\nultraestructurales en tejido cardíaco. Luego del desafío, los que recibieron IgGs sulfato-específicos\npresentaron mayores parasitemias que los controles. Se determinó la variación de los nivesles de IgG2 sulfato específicos en pacientes con enfermedad de Chagas crónica durante la progresíon de la\nenfermedad cardíaca. Los ensayos realizados permitieron evaluar el rol de los epítopes sulfatados\npresentes en glicoconjugados de T. cruzi en la infección y patogenia de la enfermedad de Chagas

Efficacy of subcutaneous immunotherapy achieved with a whole-body extract of Pseudomyrmex ant. A case reported in a young woman, in Argentina

The aim of this work is to report for the first time a patient case with anaphylaxis by Pseudomyrmex acanthobius /favidulus ant sting, prepare an extract with the wholeant-body, to study their biochemical and immunological properties and to validate the efficacy of the subcutaneous immunotherapy with this non-commercial extract. An argentine woman patient, 19 years old, with background of allergic rhinitis and bronchial asthma in the childhood, suffered repeated episodes of anaphylaxis by non-identified insect’s stings and previous immunotherapies treatment. The entomologic analysis revealed that the aggressor insect was an ant belonging to Pseudomyrmex genera and acanthobius or favidulus species. High serum total levels of IgE (202 UI/ml) were measured by ELISA and a positive 6-mm wheal and flare reaction (extract dilution 1/100000) was revealed by in vivo intradermal test. A sample of the extract proteins fraction was analysed by SDS⁄PAGE. The silver stained protein bands ranged since 20 to 220 kDa. The patient serum immune-recognized allergenic extract proteins at approximately 160, 90, and a double band at 42/46 kDa prior to desensitization treatment by electro-blotting. Interestingly, post-specific-subcutaneous-immunotherapy the mentioned double band almost disappeared. After a 6-years-treatment, the total IgE serum values strongly decreased and the specific intradermal test was negative up to 1/10 extract dilution. The tolerance to the treatment was good. Altogether, our findings revealed that the immunotherapy performed with the whole-body-Pseudomyrmex ant allergenic extract was highly effective and the IgE specific-double protein allergenic extract bands (42/46 kDa) that disappeared after immunotherapy were responsible for the anaphylactic shock.Fil: Rodríguez Rodríguez, Raquel Milagros. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Irañeta, Silvia G.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Olgiati, María Laura. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soprano, Luciana Lía. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mouchian, Krikor. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Alonso, Angel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Duschak, Vilma Gladys. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Input of NAcGlc6SO3 epitopes (sulfotopes) present in Trypanosoma cruzi glycoproteins, and their specific antibodies, in the infection and immune pathogenesis of experimental Chagas disease

Background: Trypanosoma cruzi, the causative agent of Chagas disease contains a major antigen, cruzipain (Cz). The C-terminal domain (C-T) of this glycoprotein bears N-linked high mannose type sulfated oligosaccharide chains and is responsible for most antibodiesinnaturalandexperimentalinfections.Miceimmunization with C-T has shown that sulfate moieties of Cz molecule are targets for specific immune responses and responsible for cardiac ultrastructural abnormalities in absence of infection. Methods & Materials: After the molecular characterization of these sufotopes, BALB/c mice were immunized with Cz/C-T, prior and after desulfation treatment, and with NAcGlc6SO3-BSA, to be furthersublethallychallengedwithtrypomastigotestoinvestigate whether they are involved in immunepathogenesis and/or infection of experimental Chagas disease. Results: C-T-immunized mice showed low IL-4 levels and elevated IFN- concentration by capture ELISA using C-T as stimulus and a cytokines profile compatible with a mixed response showing: Th2 tendency with excessively high IFN and raised IL-17 levels. By contrast, dC-T-immunized-mice presented undetectable IL-4 levels, low IFN- level and a cytokines profile like that of control but with a significantly elevated IL-10 value. In addition, ultrastructuralcardiacalterationsandmainimmunorecognitionof fibrils and mitochondria were observed in C-T-immunized mice bothconfrontedwithpolyclonalanti-CzandmyosinadsorbedantiCz sera. After sublethal challenge, elevated parasitaemias were observed. Mortality was 20 and 80% in C-T and dC-T immunized mice, respectively and mice from dC-T group that survived presentedseveremusclealterations.BSA-NAcGlc6SO3-immunized mice mounted a predominant IgG1and IgG2b immune response followed by IgG2a, demonstrating the immunodominance of the sulfotope and a vigorous mice memory T cells response, similarly toC-T-immunizedmice.Aftersublethalinfection,miceimmunized with the sulfotope displayed excessively elevated parasitemias, similarIFN-levelsandsignificantlowermortalitypercentagethan those from BSA-NAcGlc control group. Furthermore, mice treated by passive transference of sulfate-specific IgGs purified from sera of BSA-NAcGlc6SO3-immunized mice, exhibited ultrastructural alterations in cardiac tissue. After challenge, those treated with sulfate-specific IgGs presented higher parasitemias than controls Conclusion:Altogether,thesefindingshavedemonstratedthat sulfotopes and their specific antibodies display a dual role, participating in the host-tissue immunopathogenicity of experimental Chagas disease and favoring the infection by T. cruziFil: Soprano, Luciana Lía. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ferrero, Maximiliano Ruben. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Olgiati, María Laura. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Landoni, Malena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Garcia, Gabriela Andrea. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Esteva, Mónica Inés. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; ArgentinaFil: Couto, Alicia Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Duschak, Vilma Gladys. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina18th International Congress of Infectious diseasesBuenos AiresArgentinaInternational Society of Infectious Disease

Trypanosoma cruzi serinecarboxipeptidase is a sulfated glycoprotein and a minor antigen in human Chagas disease infection

In this work, the presence of sulfated N-glycans was studied in a high-mannose-type glycoprotein of Trypanosoma cruzi with serinecarboxipeptidase (TcSCP) activity. The immune cross-reactivity between purified SCP and Cruzipain (Cz) was evidenced using rabbit sera specific for both glycoproteins. Taking advantage that SCP co-purifies with Cz from Concanavalin-A affinity columns, the Cz–SCP mixture was desulfated, ascribing the cross-reactivity to the presence of sulfate groups in both molecules. Therefore, knowing that Cz is a sulfated glycoprotein, with antigenic sulfated epitopes (sulfotopes), SCP was excised from SDS-PAGE and the N-glycosydic chains were analyzed by UV–MALDI–TOF-MS, confirming the presence of short-sulfated high-mannose-type oligosaccharidic chains. Besides, the presence of sulfotopes was analyzed in lysates of the different parasite stages demonstrating that a band with apparent molecular weight similar to SCP was highly recognized in trypomastigotes. In addition, SCP was confronted with sera of infected people with different degrees of cardiac dysfunction. Although most sera recognized it in different groups, no statistical association was found between sera antibodies specific for SCP and the severity of the disease. In summary, our findings demonstrate (1) the presence of sulfate groups in the N-glycosidic short chains of native TcSCP, (2) the existence of immune cross-reactivity between Cz and SCP, purified from epimastigotes, (3) the presence of common sulfotopes between both parasite glycoproteins, and (4) the enhanced presence of sulfotopes in trypomastigotes, probably involved in parasite–host relationship and/or infection. Interestingly, we show for the first time that SCP is a minor antigen recognized by most of chronic Chagas disease patient’s sera.Fil: Soprano, Luciana Lía. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; ArgentinaFil: Parente, Juliana Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Landoni, Malena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Couto, Alicia Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Duschak, Vilma Gladys. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentin

Hallmarks of the relationship between host and Trypanosoma cruzi sulfated glycoconjugates along the course of Chagas disease

American Trypanosomiasis or Chagas disease (ChD), a major problem that is still endemic in large areas of Latin America, is caused by Trypanosoma cruzi. This agent holds a major antigen, cruzipain (Cz). Its C-terminal domain (C-T) is retained in the glycoprotein mature form and bears several post-translational modifications. Glycoproteins containing sulfated N-linked oligosaccharides have been mostly implicated in numerous specific procedures of molecular recognition. The presence of sulfated oligosaccharides was demonstrated in Cz, also in a minor abundant antigen with serine-carboxypeptidase (SCP) activity, as well as in parasite sulfatides. Sulfate-bearing glycoproteins in Trypanosomatids are targets of specific immune responses. T. cruzi chronically infected subjects mount specific humoral immune responses to sulfated Cz. Unexpectedly, in the absence of infection, mice immunized with C-T, but not with sulfate-depleted C-T, showed ultrastructural heart anomalous pathological effects. Moreover, the synthetic anionic sugar conjugate GlcNAc6SO3-BSA showed to mimic the N-glycan-linked sulfated epitope (sulfotope) humoral responses that natural Cz elicits. Furthermore, it has been reported that sulfotopes participate via the binding of sialic acid Ig-like-specific lectins (Siglecs) to sulfosialylated glycoproteins in the immunomodulation by host–parasite interaction as well as in the parasite infection process. Strikingly, recent evidence involved Cz-sulfotope-specific antibodies in the immunopathogenesis and infection processes during the experimental ChD. Remarkably, sera from chronically T. cruzi-infected individuals with mild disease displayed higher levels of IgG2 antibodies specific for sulfated glycoproteins and sulfatides than those with more severe forms of the disease, evidencing that T. cruzi sulfotopes are antigenic independently of the sulfated glycoconjugate type. Ongoing assays indicate that antibodies specific for sulfotopes might be considered biomarkers of human cardiac ChD progression, playing a role as predictors of stability from the early mild stages of chronic ChD.Fil: Soprano, Luciana Lía. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ferrero, Maximiliano Ruben. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación en Biomedicina de Buenos Aires - Instituto Partner de la Sociedad Max Planck; ArgentinaFil: Jacobs, Thomas. Bernhard Nocht Institute For Tropical Medicine.; AlemaniaFil: Couto, Alicia Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Duschak, Vilma Gladys. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentin

Tripanosomiasis en caninos de Sudamérica: clínica, diagnóstico y tratamiento en el perro y el gato

La tripanosomiasis canina en Sudamérica, que es causada por protozoos del género Trypanosoma, tiene como agentes principales al T. cruzi y al T. evansi. La transmisión es, principalmente, producida por insectos picadores. Estas enfermedades son enzoóticas en gran parte del continente y afectan además a animales salvajes, que sirven como reservorios. Los perros están fuertemente involucrados en la transmisión y mantenimiento de estos parásitos, porque son los principales animales domésticos en contacto con el hombre y los reservorios naturales. La tripanosomiasis americana producida por T. cruzi afecta, no solo a los caninos, sino a los humanos y se estima que aproximadamente 8 millones de personas se encuentran infectadas constituyendo un importante problema de salud pública. T. evansi constituye una enfermedad transmitida por vectores emergente en perros que puede generar una diversidad de signos clínicos siendo, en ocasiones, fatal. Este artículo tiene como objetivo presentar una breve revisión sobre la etiología, signos clínicos, métodos diagnósticos y tratamiento más relevante en la clínica diaria de la tripanosomiasis canina en América del Sur.Fil: Borrás, Pablo Jesús. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud. Centro Nacional de Diagnóstico e Investigaciones Endemo-epidémicas; ArgentinaFil: Soprano, Luciana Lía. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: de Salvo, María Nazarena. Instituto de Zoonosis Luis Pasteur; ArgentinaFil: Díaz, Paula. Instituto de Zoonosis Luis Pasteur; ArgentinaFil: Dubois, Eugenio Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Formosa. Provincia de Formosa. Centro de Investigaciones y Transferencia de Formosa. Universidad Nacional de Formosa. Centro de Investigaciones y Transferencia de Formosa; Argentin

Tamoxifen acts on Trypanosoma cruzi sphingolipid pathway triggering an apoptotic death process

This study shows the effects of tamoxifen, a known estrogen receptor antagonist used in the treatment of breast cancer, on the sphingolipid pathway of Trypanosoma cruzi, searching for potential chemotherapeutic targets. A dose-dependent epimastigote growth inhibition at increasing concentration of tamoxifen was determined. In blood trypomastigotes, treatment with 10 μM showed 90% lysis, while 86% inhibition of intracellular amastigote development was obtained using 50 μM. Lipid extracts from treated and non-treated metabolically labelled epimastigotes evidenced by thin layer chromatography different levels of sphingolipids and MALDI-TOF mass spectrometry analysis assured the identity of the labelled species. Comparison by HPLC-ESI mass spectrometry of lipids, notably exhibited a dramatic increase in the level of ceramide in tamoxifen-treated parasites and a restrained increase of ceramide-1P and sphingosine, indicating that the drug is acting on the enzymes involved in the final breakdown of ceramide. The ultrastructural analysis of treated parasites revealed characteristic morphology of cells undergoing an apoptotic-like death process. Flow cytometry confirmed cell death by an apoptotic-like machinery indicating that tamoxifen triggers this process by acting on the parasitic sphingolipid pathway.Fil: Landoni, Malena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Piñero, Tamara Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; ArgentinaFil: Soprano, Luciana Lía. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Garcia Bournissen, Facundo. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Niños "Ricardo Gutiérrez"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fichera, Laura Edith. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Esteva, Mónica Inés. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Duschak, Vilma Gladys. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Couto, Alicia Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; Argentin

IgE antibodies against Trypanosoma cruzi arginine kinase in patients with chronic Chagas disease

Arginine kinase (AK) is an enzyme present in various invertebrates, as well as in some trypanosomatids such as T. cruzi, the etiological agent that causes Chagas disease. In invertebrates, this protein acts as an allergen inducing an IgE-type humoral immune response. Since AK is a highly conserved protein, we decided to study whether patients with chronic Chagas disease (CCD) produce specific antibodies against T. cruzi AK (TcAK). Plasma from patients with CCD, with and without cardiac alterations and non-infected individuals were evaluated for the presence of anti-TcAK IgG and IgE antibodies by ELISA, including detection of specific IgG subclasses. Our results showed that the levels of specific anti-TcAK IgG and IgE were different between infected and non-infected individuals, but comparable between those with different clinical manifestations. Interestingly, anti-TcAK IgG4 antibodies associated with IgE-mediated allergenic processes were also increased in CCD patients. Finally, we found that several of the predicted B cell epitopes in TcAK matched allergenic peptides previously described for its homologues in other organisms. Our results revealed for the first time a parasite's specific IgE antibody target and suggest that TcAK could contribute to delineate an inefficient B cell response by prompting a bias towards a Th2 profile. These findings also shed light on a potential allergenic response in the context of T. cruzi infection.Fil: Valera Vera, Edward Augusto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Concepción, Juan Luis. Universidad de Los Andes; VenezuelaFil: Cáceres, Ana Judith. Universidad de Los Andes; VenezuelaFil: Acevedo, Gonzalo Raúl. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Fernández, Marisa. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán". Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben"; ArgentinaFil: Hernández, Yolanda. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán". Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben"; ArgentinaFil: Digirolamo, Fabio Augusto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Duschak, Vilma Gladys. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; ArgentinaFil: Soprano, Luciana Lía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”. Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben”; ArgentinaFil: Pereira, Claudio Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Miranda, Mariana Reneé. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Gomez, Karina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentin