GERMINAÇÃO IN VITRO DE SEMENTES DE NONI (Morinda citrifolia L.)

A espécie Morinda citrifolia L. comumente conhecida por noni pertence à família Rubiacea, originaria do Sudeste Asiático. O fruto tem forma ovalada é bastante utilizada na medicina tradicional para o tratamento de alergia, artrite, asma, câncer, hipertensão, insônia, depressão, digestão e também para o aumento da capacidade física. Tendo em vista seu alto valor comercial, e medicinal a fruta é composta principalmente por Proxeronina precursora do alcalóide xeronina. O presente trabalho teve como objetivo testar índice de germinação in vitro de sementes Morinda citrifolia. As sementes foram retiradas de frutos maduros, sementes na ausência do tegumento foram imersas em álcool 70% por 1’, posteriormente em hipoclorito de sódio a 2,5% com duas gotas de TWEEN-20º por 10’ e submetidas a 3 enxágues em água destilada e autoclavada. O meio de cultivo utilizado foi MS: T1) MS; T2) MS + 0,5 mg L–1 de GA3; T3) MS + 1,0 mg L–1 de GA3; T4) ½MS; T5) ½ MS + 0,5 mg L–1 de GA3; T6) ½ MS + 1,0 mg L–1 de GA3, em condições de luminosidade e na sua ausência. O delineamento experimental foi inteiramente casualisado, dados submetidos à análise de variância, as médias foram comparadas pele teste t ao nível de probabilidade de 5%. A desinfestação foi eficaz não apresentando contaminação por microrganismos. A porcentagem de germinação foi maior em T5 e T6 (A), sob condições de luminosidade onde T6 apresentou 100% de germinação demonstrando a eficácia do ácido giberélico associado à metade da concentração de sais básicos do meio MS em condições de luminosidade. As plântulas foram aclimatizadas em copos plásticos contendo terra e esterco bovino

Selection gain in the intrapopulation genetic breeding of yellow passion fruit

O objetivo deste trabalho foi estimar o ganho de seleção associado a características agronômicas de importância no melhoramento intrapopulacional do aracujazeiro‑amarelo. O experimento foi realizado em campo, no Município de Terra Nova do Norte, MT, com a avaliação de 111 famílias de irmãos completos (FIC) e seis cultivares comerciais, utilizadas como testemunhas. Utilizou-se o delineamento de blocos ao acaso, com três repetições e quatro plantas por parcela. Foram avaliadas as seguintes características: produtividade, comprimento, diâmetro e peso médio dos frutos, percentagem e peso de polpa, espessura de casca e teor de sólidos solúveis. Para verificar a existência de variabilidade genética entre os genótipos, estimaram-se os parâmetros genéticos da população com base na média das famílias. Os 30 genótipos com o menor valor da soma de postos, de acordo com o índice de seleção de Mulamba & Mock, foram selecionados para estimar os ganhos genéticos. Observaram-se altos valores médios para as características e parâmetros genéticos avaliados nas 26 FIC e nas quatro testemunhas selecionadas. O uso do índice de seleção proporciona ganhos genéticos positivos em produtividade, percentagem e peso de polpa, comprimento, diâmetro e peso de frutos, e espessura de casca.The objective of this work was to estimate the selection gain associated to traits of agronomic importance, in the intrapopulation genetic breeding of yellow passion fruit. The experiment was carried out in the field, in Terra Nova do Norte, MT, Brazil, by evaluating 111 full‑sib families (FSF) and six commercial cultivars, used as controls. The experimental design was a randomized complete block, with three replicates and four plants per plot. The following traits were evaluated: productivity, fruit length, diameter and weight, pulp percentage and weight, skin thickness, and soluble solid content. In order to determine the genetic variability between genotypes, the population’s genetic parameters were estimated based on the means of the families. The 30 genotypes with the lowest sum of ranks, according to Mulamba & Mock’s selection index, were selected to estimate genetic gains. High mean values were observed for the evaluated characteristics and genetic parameters in the 26 FSF and in the four controls selected. The selection index provides positive genetic gains as to: productivity, pulp percentage and weight, fruit length, diameter and weight, and skin thickness

Produção de sementes sintéticas de maracujazeiro silvestre com potencial ornamental

Passiflora cincinnata Mast. é uma espécie silvestre de maracujazeiro de ampla distribuição. Possui hábito trepador e crescimento vigoroso, com flores muito vistosas e perfumadas. O trabalho teve como objetivo a produção de sementes sintéticas da espécie P. cincinnata, utilizando-se de embriões somáticos e zigóticos em diferentes formas de cultivo. Os embriões somáticos em estágio de desenvolvimento pré cotiledonar e cotiledonar foram obtidos a partir de embriões zigóticos cultivados em meio de MS na presença de 18,1 μM de 2,4-Ácido-dichlorophenoxiacetico (2,4-D) e 4,5 μM Benziladenine (BA). Embriões zigóticos e embriões somáticos foram encapsulados em matriz de alginato de sódio a 2,5% (p v -1 ) e complexados em solução estéril de CaCl 2 .2H 2 O a 0,1M. Embriões somáticos e zigóticos foram encapsulados na Matriz (I) com alginato de sódio, Matriz (II) com alginato de sódio + endosperma artificial e Matriz (III) - alginato de sódio + endosperma artificial e suplementado com 0,15% (p v -1 ) de carvão ativado. Embriões zigóticos cultivados em frascos encapsulados na Matriz (I) 79% germinaram, 76% Matriz (II) e na Matriz (III) 86%. Os embriões somáticos cotiledonares encapsulados nos três tipos de matrizes responderam com maior percentual de germinação quando cultivados em plugs de celulose com mais de 50% de embriões convertidos. Os embriões somáticos pre cotiledonares encapsulados nos três tipos de matrizes e nas diferentes formas de cultivo não responderam. No cultivo ex vitro nos dois tipos de substratos PlantMax e Florialite o número de embriões convertidos foi baixo, sendo o melhor resultado com 12,67 % no Florialite e encapsulados na Matriz (I). Palavras-Chave: Passiflora cincinnata, alginato de sódio, sementes artificiais, cultivo in vitroPassiflora cincinnata is a wild species of passion fruit with a wide geographical distribution. It has vigorous growth, climbing habit and very showy and fragrant flowers. The aim of the present investigation was to obtain synthetic seeds from encapsulated zygotic and somatic embryos of P. cincinnata, cultivated under different conditions. Precotyledonary and cotyledonary stage embryos were obtained from zygotic embryos cultivated on MS medium supplemented with 18.1 μM of 2,4-Acid-dichlorophenoxyacetic (2,4-D) and 4.5 μM of Benzyladenine (BA). Zygotic embryos and somatic embryos stages were encapsulated using sodium alginate (2.5% w v-1) and CaCl2.2H2O (1 mM) as complexing agent. The zygotic and somatic embryos were encapsulated in a matrix containing (I) sodium alginate, (II) sodium alginate + artificial endosperm and (III) sodium alginate + artificial endosperm supplemented with activated charcoal (0.15% w/v). Zygotic embryos encapsulated in the matrix (I), matrix (II) and matrix (III) and cultivated in flasks, germinated at rates of 79%, 76% and 86% respectively. The cotyledonary somatic embryos encapsulated in the 3 different matrices showed better germination rates when cultivated on cellulose plugs, with more than 50% of embryos converted into plants. Precotyledonary somatic embryos did not germinated regardless the matrix and cultivation. When cultivating the alginate beads ex vitro, both substrate Plantmax and Florialite showed low number of germinated embryos, and the best result (12.67%) were obtained using Florialite and embryos encapsulated in the matrix (I)

In vitro germination ontogeny of the root adventitious buds and adventitious shoots of the Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes - Rubiaceae

Psychotria ipecacuanha (Rubiaceae) é uma espécie medicinal conhecida como poaia ou ipeca, cujo uso está relacionado à presença dos alcalóides encontrados em suas raízes, sendo os principais emetina, cefalina e psicotrina, que são freqüentemente utilizados no combate da hepatite e disenteria amebiana. Os objetivos do trabalho foram: estabelecer um protocolo para a germinação in vitro de sementes; caracterizar a reprodução vegetativa e os aspectos morfogênicos na produção de gemas adventícias; e regenerar plantas a partir de hipocótilo de P. ipecacuanha. Fragmentos radiculares foram cultivados em meio hidropônico, em solução de Hoagland e em água destilada, com presença ou ausência de 2 mg L -1 de 6-benzilaminopurina. Verificou-se nestes tratamentos que a maior produção de gemas ocorreu em solução de Hoagland. A adição de BAP ao meio (2 mg L -1 ) resultou no decréscimo do número de gemas. In vivo, a produção de gemas adventícias na raiz está associada com injúrias mecânicas e perda parcial da parte aérea. Na análise anatômica do caule de P. ipecacuanha destaca-se um felogênio originando a partir de células epidérmicas e subepidérmicas. As raízes adventícias não apresentam medula e se originam na porção dos entre-nós caulinares prostados ao solo. As gemas adventícias radiculares, formam-se a partir dos meristemóides resultantes da divisão, em vários planos, das células do felogênio. As gemas radiculares em P. ipecacuanha foram classificadas como reparativas e desenvolveram-se assincronicamente. Uma alta taxa de germinação (84,17 %) foi obtida pelo cultivo in vitro de sementes de P. ipecacuanha, com ausência de tegumento, em meio de MS na metade da concentração de sais (MS 1⁄2) com ausência de reguladores de crescimento. A obtenção desses valores pode ser atribuída à remoção da barreira para a embebição representada pelo tegumento, ao potencial osmótico do meio de cultura e as condições ambientais adequadas . As plântulas obtidas foram submetidas a tratamentos com ácido giberélico (GA 3 ) em dois estádios de desenvolvimento. A concentração de 3 mg L -1 GA 3 não influenciou efetivamente o crescimento das plântulas. Hipocótilos com polaridade invertida e segmentos de hipocótilos foram inoculados em meio MS, suplementado com concentrações de BAP (0, 1, 2 e 3 mg L -1 ). A utilização de concentrações mais baixas do regulador induziu maior produção de brotos adventícios. A organogênese nos hipocótilos ocorreu de forma direta. Os brotos adventícios produzidos em hipocótilos com polaridade invertida apresentaram-se mais vigorosos, quando diferenciados fora do meio de cultivo. A indução da rizogênese nas brotações foi eficiente nas concentrações de 1,5 e 3,0 mg L -1 de AIB.Psychotria ipecacuanha (Rubiaceae) is a medicinal species known as poaia or ipeca, which use is related with alkaloids found in its roots, mainly emetin, cephaelin and psychotrin, and frequently used in the treatment of hepatitis and amoebiasis. The species undergoes slow growth and low seed germination, which rendered the vegetative reproduction the main propagation strategy. The goals of this work were: to characterize P. ipecacuanha vegetative reproduction and morphogenic aspects of adventitious bud production; analyze in vitro seed germination and to regenerate plants from hypocotyl explants. Root segments were cultured in Hoagland solution, in which higher number of adventitious buds was observed. The addition of 2 mg L -1 BAP to this solution resulted in a decrease in the number of buds. In vivo, adventitious bud production in the root system is associated with mechanical injuries and to the partial loss of the aerial part. On stem anatomical analysis, attention is drawn to a phellogen originated from epidermical and sub-epidermical cells in the region of adventitious roots emission. The adventitious roots did not display pith and were localized in the stem internodes prostrated in the soil surface. The root adventitious buds formation began with the division in several planes of the phellogen cells, resulting in the meristemoids formation. The buds in the P. ipecacuanha roots are classified as reparative and arise assynchronically. A high germination index (84.17%) was obtained by culturing seeds without the tegument on half- strength MS medium and no growth regulator added. Seedlings were submitted to giberellic acid (GA 3 ) treatment in two developmental stages. GA 3 3 mg L - did not influence the seedling growth. Subsequently, hypocotyls with inverted polarity were transferred to MS medium, supplemented with different BAP concentrations (0, 1, 2 and 3 mg L -1 ). The use of lower concentrations of this regulator led to higher production of adventitious shoots. Direct organogenesis was observed in the hypocotyl explants. This was validated by anatomical analysis, which also permitted the description of the main morphogenic events in the adventitious shoot ontogenesis in P. ipecacuanha hypocotyls. The shoots, from inverted polarity hypocotyl, were more vigorous when they were differentiated out the culture medium. Nevertheless, higher production of adventitious shoots was observed in the hypocotyl segments than in the inverted polarity hypocotyls. Additionally, rooting induction was efficient at 1.5 and 3.0 mg L -1 IBA

Overcoming dormancy in seeds of Dietes bicolor (Steud.) Sweet ex Klatt

Seminiferous propagation of Dietes bicolor is hindered by the probable physical and/or morphophysiological dormancy. The objective was to analyze the efficacy of different methods of overcoming dormancy in D. bicolor seeds to determine a possible pre-germination treatment for the species. Two experiments were conducted: (I) Evaluation of the breaking of physical dormancy, in which the treatments of mechanical scarification were carried using sandpaper #100; chemical scarification with sulfuric acid (H2SO4) for 5 and 10 minutes and immersion in hot water (70 ºC), also, for 5 and 10 minutes, were evaluated. The intact seed was considered a control. (II) Evaluation of morphophysiological dormancy, in which the seeds were submitted to combined treatments of stratification of hot temperature (20-35 °C) and/or cold temperature (9 ºC), distributed in periods of 0, 1, and 2 weeks, totalizing 9 treatments. In both experiments, germination percentage (G), germination speed index (GSI), and first count (FC) were determined, using a randomized block design, and evaluated by the Scott-Knott test at 1% and Dunnett’s test at 5%. The use of H2SO4 10 minutes induced 42% germination, 0.52 GSI, and 18% FC, but only FC was significantly different from the control. In the second trial, the treatment that spent only two weeks in hot temperatures (20-35 ºC) showed the highest germination (30%), compared to the control (G = 22%). These results provide relevant information for understanding the physiology of D. bicolor germination, in addition to contributing to the optimization of pre-germination practices for this important ornamental species. 

QUALIDADE BACTERIOLÓGICA DE ÁGUA MINERAL COMERCIALIZADA EM TANGARÁ DA SERRA-MT

Diante da constante preocupação com a qualidade de água distribuída para a população, a água mineral se tornou o alvo de pessoas que procuram um estilo de vida saudável, tornando-se então um interessante objeto de pesquisa. Nestas condições, para uma verificação da qualidade da água mineral comercializada na cidade de Tangará da Serra - MT, foi realizada a quantificação de coliformes totais, termotolerantes e bactérias aeróbias mesófilas, além da medição do pH e temperatura de três marcas de água mineral. Para tanto, foram coletadas e analisadas 14 amostras de cada marca de água mineral selecionada, totalizando 42 amostras. A contagem de coliformes totais e termotolerantes foram realizadas de acordo com a técnica de fermentação em tubos múltiplos, assim como o método de dilui- ção seriada e plaqueamento pela técnica de spread-plate em Plate Count Agar (PCA) para a contagem de bactérias aeróbias mesófilas. Para a medição do pH e temperatura das amostras foi utilizado um medidor de pH (Tecnopon mPA. 210 versão 6,0). Das 42 amostras analisadas, duas (4,8%) amostras obtiveram contagem de coliformes totais, estando uma amostra (2,4%) em desacordo com a legislação vigente. A presença de bactérias aeróbias mesófilas também foi observada em 40,5% (n=17) das amostras, com um índice variando entre 2,3x102 4,3 x 105 UFC/mL. Desta forma, ressalta-se a importância da verificação da qualidade da água mineral comercializada, tendo em vista o seu amplo consumo entre a população, elevando este estudo a interesse de saúde pública

In vitro regeneration of Passiflora miniata Mast

Passiflora miniata is a wild species native to the Southern Amazon, with ornamental potential due to the beauty of its flowers of intense red coloration. Reports in the literature about the species are still insipid. The aim of the present study was to induce the regeneration of P. miniata by the de novo organogenesis from mature zygotic embryos. The zygotic embryos were isolated and cultivated into the MS medium with the addition of 6-Benzyladenine (BA), Thidiazuron (TDZ) and Kinetin (KIN) growth regulators. The de novo regeneration from the zygotic embryos occurred directly and indirectly. A percentage of 80% of the explants cultivated in the presence of BA had direct organogenesis and 20% by the indirect way, with TDZ 60% were regenerated by the direct and 40% by the indirect way. Regarding the treatments with KIN, 58% of the explants had regeneration by direct and 42% by the indirect organogenesis. The development of shoot primordia initiated with the formation of organogenic structures that later differentiated into multi-shoots. The highest mean number of shoots (40.0 shoots per explants) was obtained on 0.75 mg L-1BA. Conversely, using 0.50 mg L-1 TDZ or KIN, the highest number of shoots were 7.2 and 3.6, respectively

Cytogenetic characterization of Encyclia caximboensis cultivated in vitro (Orchidaceae)

Encyclia caximboensis is an Amazonian species endemic to the Serra do Cachimbo, which is located between the northern of the Mato Grosso state and the southern part of Para state. Studies reporting in vitro cultivation and cytogenetic characterization of this species are still scarce. Therefore, the objective of this work was to determine the cytogenetic characteristics and to identify the nucleolar organizer regions (NORs) of the species E. Caximboensis, cultivated in vitro. Seeds of E. caximboensis were disinfected using a syringe and subsequently cultivated in MS medium without growth regulators. The germination started after 20 days of culture, with the development of protocorm and 40,500 seedlings were obtained after 90 days of culture. To perform the cytogenetic characterization, root tips of 180-day-old seedlings were submitted to blocking treatment using 3 µM trifiuralin and then fixed in methanol-acetic acid solution, 3:1 (v/v). The meristems were submitted to enzymatic digestion, fixed in methanol-acetic acid solution, 3:1 (v/v) and the slides were stained using 5% Giemsa solution. Ag-NOR banding was carried out on 20-day-old slides by incubation in 50% silver nitrate solution (AgNO3) for 19 hours. The results indicated that E. caximboensis has 2n=2x=24 with all metacentric type chromosomes, ranging from 1.88 to 0.66 pm in length, with simple NORs in small blocks localized in the proximal region of the third chromosome pair

GENETIC DIVERGENCE AMONG Passiflora cristalina Vanderpl & Zappi. GENOTYPES BASED ON FLOWER AND FRUIT CHARACTERISTICS

ABSTRACT This study aimed to evaluate the genetic divergence among Passiflora cristalina genotypes and quantify the relative contribution of 30 flower and fruit characteristics, seeking to support the preservation and characterization of genetic resources of the species for preservation and use in future breeding programs. We evaluated 150 fruit and 150 flowers collected in 15 genotypes with naturally occurring in the municipality of Alta Floresta, MT. The characterization of genotypes was performed through 30 morphological characteristics of flowers and fruits, 21 of these for flower and 9 for fruit. Data were evaluated using the principal components and cluster methods obtained by UPGMA method from the similarity matrix (Euclidian mean distance), using the Genes software. By principal component analysis, it has been found that the first three components have absorbed 52.11% of the accumulated variation. The characteristics that most contributed to the discrimination of genotypes were fresh fruit weight, stigma length, length of corona filaments, fruit width, petal width and pulp weight, which are more responsive for the selection of P.cristalina genotypes. Smaller contributions to diversity were obtained from anther width, bract width and fruit length. The smallest contributions for diversity were obtained from the following characteristics: anther width, bract width and fruit length. Through UPGMA clustering method, it was found that there is a large genetic divergence among genotypes analyzed because all genotypes were grouped with over 50% of dissimilarity. This study identified genotypes 4, 5 and 9 as the most divergent and therefore the most suitable for breeding in future breeding programs and genetic conservation of the species

A novel regeneration system for a wild passion fruit species (Passiflora cincinnata Mast.) based on somatic embryogenesis from mature zygotic embryos

The objective of the present work was to induce somatic embryogenesis from zygotic embryos of Passiflora cincinnata Masters. Zygotic embryos formed calli on media with different concentrations of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 4.5 mu M benzyladenine (BA) after 30 days of in vitro culture. A concentration of 18.1 mu M 2,4-D resulted in the largest number of somatic embryos. Embryogenic calli were yellowish and friable, forming whitish proembryogenic masses. Morphologically, embryogenic cells were small and had large nuclei and dense cytoplasm, whereas non-embryogenic cells were elongated, with small nuclei and less dense cytoplasm. Calli cultured under white light on basal Murashige and Skoog`s medium with activated charcoal produced embryos in all developmental stages. There were differences among the treatments, with some leading to the production of calli with embryos and some only to callus formation. Some abnormalities were associated with somatic embryos, including fused axes, fused cotyledons and polycotyledonary embryos. Production of secondary somatic embryos occurred in the first cycle of primary embryo development. Secondary embryos differentiated from the surface of the protodermal layer of primary embryos with intense cell proliferation, successive mitotic divisions in the initial phase of embryoid development, and a vascular system formed with no connection to the parental tissue. This secondary embryogenic system of P. cincinnata is characterized by intense proliferation and maintenance of embryogenic competence after successive subcultures. This reproducible protocol opens new prospects for massive propagation and is an alternative to the current organogenesis-based transformation protocol.FAPEMIG[CAG 1527/2005]Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)CAPESConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)CNP